RAD 51C基因rs 112832782多态位点与卵巢癌易感相关性研究

目的:对比两组研究对象外周血RAD 51C外显子区SNPs位点差异,寻找卵巢癌发病风险的遗传标记物。方法:将新发卵巢癌患者107例设为观察组,相应医院定期常规体检的健康妇女213例设为对照组。提取两组研究对象外周血全基因组DNA,选择RAD 51C基因外显子区SNPs位点rs 112832782和rs 35151472,Primer-blast设计引物,PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳检测,达到标准后测序,进行SNP分型,比较两组外周血各型SNP比例是否有显著差异。结果:观察组患者与对照组间rs 112832782差异显著(P<0.01)。结论:RAD 51C基因rs 112832782可以作为卵巢癌易感性的潜在遗传标记物。

RAD51C表达下调对小鼠卵巢癌体内成瘤和VEGF、NRP-2表达的调控

目的探讨RAD51旁系同源基因C(RAD51C)表达下调对小鼠卵巢癌体内成瘤和血管内皮生长因子(VEGF)、神经纤毛蛋白-2(NRP-2)表达调控的影响。方法使用A2780卵巢癌细胞,通过培养检测细胞中RAD51C的表达,构建3种RAD51C干扰载体(SiRNA-47、SiRNA-183和SiRNA-285),并包装成慢病毒,转染细胞,逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证转染效果,进行稳筛,构建稳转细胞株。使用Balb/c雌性裸鼠建立细胞系来源的异体移植肿瘤模型(CDX)模型,将18只建模成功的裸鼠分为3组:A2780细胞组(Control组)、A2780细胞+空载体对照组(NC组)、A2780细胞+RAD51C干扰组(Si-RAD51C组),每组各6只。Control组注射生理盐水,NC组注射空载慢病毒50μL,Si-RAD51C组注射RAD51C干扰慢病毒50μL。观察各组成瘤情况,取肿瘤组织,采用蛋白质印迹法(WB)、免疫组织化学检测RAD51C、VEGF、NRP-2蛋白表达情况。结果RT-qPCR验证RAD51C干扰慢病毒转染效果以SiRAN-285最明显(P<0.05)。Si-RAD51C组与Control组、NC组比较瘤体的体积最小、重量也最轻,且RAD51C、NRP-2及VEGF蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论RAD51C干扰慢病毒可抑制小鼠A2780卵巢癌细胞肿瘤的形成,且对RAD51C、NRP-2及VEGF蛋白的表达均有抑制作用。

RAD51AP1基因表达在三阴性乳腺癌脑转移中的生物信息分析

目的:采用生物信息分析筛选三阴性乳腺癌脑转移相关差异性表达基因(differentially expressed genes,DEG),并探索影响预后的潜在作用机制。方法:在基因表达数据库(Gene Expression Omnibus, GEO)检索获得GSE76250(三阴性乳腺癌组织与正常乳腺组织)和GSE125989(三阴性乳腺癌脑转移病灶组织与三阴性乳腺癌原发灶组织) 2个数据集,筛选DEG。采用GO(Gene Ontology)分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分析寻找潜在的三阴性乳腺癌脑转移相关基因。通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库中的临床组织样本,验证相关基因表达水平与乳腺癌预后间的关系,并使用KEGG的基因集进行基因富集分析,评估DEG可能参与的信号通路。结果:在GSE125989和GSE76250数据集中共筛选出52个DEG,蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction, PPI)分析提示RAD51AP1为三阴性乳腺癌脑转移的重要相关基因。TCGA数据分析显示,相较于癌旁组织RAD51AP1在乳腺癌组织中高表达;不同分子分型中,基底样型中乳腺癌PAD51AP1高表达。以RAD51AP1在癌组织表达中位数[log2(TPM+1)=3.85],将乳腺癌患者分为高表达和低表达组,生存分析显示,高表达患者的中位生存期差于低表达者[3 873 d比3 945 d,P<0.05,HR=1.40(1.01~1.94)]。通过GO、KEGG、基因富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)发现,RAD51AP1在细胞周期、DNA复制、错配修复等信号通路中有富集明显。基于细胞周期和DNA损伤修复信号通路相关蛋白信息构建PPI,筛选与RAD51AP1直接相互作用的蛋白质,其中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)与RAD51AP1的相关性较强(R=0.715,P<0.001)。结论:RAD51AP1在三阴性乳腺癌及其脑转移组织中高表达,可能作为潜在的诊断三阴性乳腺癌及预后不良的生物标志物,且其异常表达介导乳腺癌脑转移进程可能与PCNA相关。

RAD51连接蛋白1在恶性肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤一直是严重威胁人类健康的医学难题,尽管科学技术在进步,人类生活质量在提高,恶性肿瘤的发病率依然持续上升,其发病机制及治疗也是错综复杂。RAD51连接蛋白1(RAD51AP1)属于RAD51连接蛋白家族的蛋白质,与DNA的同源重组和修复作用有关,其过表达与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,本文就RAD51AP1与多种恶性肿瘤的关系进行综述如下。

FoxM1抑制剂下调Rad51增敏顺铂对骨肉瘤耐药细胞的化疗抑制作用

目的探讨FoxM1是否调控DNA修复基因Rad51参与顺铂(CDP)对骨肉瘤耐药细胞化疗抑制作用。方法采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导骨肉瘤耐药细胞系并分别命名为MG-63/R和HOS-MNNG/R。qRT-PCR、Western blot法检测耐药细胞与亲本细胞FoxM1和Rad51的mRNA及蛋白表达;耐药细胞中4μmol/L Thiostrepton处理后qRT-PCR、Western blot法检测FoxM1和Rad51的mRNA及蛋白表达。细胞计数法检测单独或联合运用4μmol/L Thiostrepton和2μg/m L CDP对骨肉瘤耐药细胞增殖率的影响。结果建立在2μg/mL CDP浓度中稳定生长的耐药细胞系MG-63/R和HOS-MNNG/R,耐药指数分别为30.52和37.87(均重度耐药)。FoxM1和Rad51的mRNA及蛋白水平在耐药细胞中表达较亲本细胞明显增高;在耐药细胞中联合运用4μmol/L Thiostrepton和2μg/mL CDP组较单独应用4μmol/L Thiostrepton组或2μg/mL CDP组细胞增殖率明显降低;耐药细胞4μmol/L Thiostrepton处理后FoxM1及Rad51的mRNA和蛋白表达均明显降低。结论 FoxM1及Rad51高表达可能参与骨肉瘤细胞对CDP耐药,FoxM1抑制剂Thiostrepton可能通过下调Rad51增强CDP对骨肉瘤耐药细胞的抑制作用。

PTEN通过抑制PI3K-AKT信号通路上调Rad51基因的表达

前期研究发现pten缺陷细胞的自发DNA双链断裂损伤水平显著增加.本研究探讨了抑癌基因pten对参与DNA同源重组修复的rad51基因表达的影响和机制.用实时定量PCR技术检测了PTEN野生型和缺陷型细胞rad51的表达水平.结果发现,PTEN缺失会导致rad51的表达降低.PI3K激酶为PTEN的下游负调节靶分子,使用PI3K激酶抑制剂LY294002处理缺陷型细胞后,其rad51表达升高.在PTEN野生型细胞中分别转染Flag-Akt WT(野生型)和Flag-Akt AC(组成型激活),或在PTEN缺陷型细胞中分别转染野生型PTEN和Akt-DN(失去激酶活性的Akt).利用RT-PCR技术检测上述细胞rad51的表达水平,同时利用Western印迹检测上述细胞RAD51蛋白的表达水平.结果发现,转染Flag-Akt WT和Flag-Akt AC后,均能促使PTEN野生型细胞中rad51在mRNA和蛋白水平降低;在PTEN缺陷型细胞中转染野生型PTEN或Akt-DN后,rad51在mRNA和蛋白水平均升高.在PTEN缺陷型细胞中使用siRNA沉默akt后,同样导致RAD51表达升高.结果提示,PTEN可以正向调节RAD51基因表达,PI3K/Akt是其信号通路机制之一.

大黄素下调ERCC1和Rad51对非小细胞肺癌增殖的影响及分子机制

目的研究大黄素对非小细胞肺癌的细胞毒性,并观察其对非小细胞肺癌ERCC1和Rad51表达的影响。方法培养肺腺癌细胞株A549和肺鳞癌细胞株SK-MES-1,据MTT法测定结果将细胞分为5组:①对照组;②大黄素处理组;③溶剂处理组;④U0126处理组;⑤大黄素联合U0126处理组。细胞以不同浓度的大黄素处理48 h后分为4组。用RT-PCR和Western blot法测定目的基因RECC1和Rad51的表达情况,透射电镜观察两种细胞在大黄素作用前后的变化。结果 MTT法测定出大黄素作用48 h时A549和SK-MES-1细胞株IC50值分别为(70.18±1.94)μmol/L和(41.95±1.27)μmol/L。大黄素100μmol/L处理A549和SK-MES-1 48 h后抑制率为(60.42±1.37)%和(75.48±0.48)%,明显高于其他组(P<0.05)。RT-PCR和Western blot检测结果显示:大黄素作用A549和SK-MES-1浓度越大,ERCC1和Rad51表达水平越低,且差异具有统计学意义(P<0.05)。大黄素与ERK信号通路阻滞剂U0126联合使用时,ERCC1和Rad51表达明显低于大黄素和U0126单独使用(P<0.05)。大黄素对A549和SK-MES-1细胞均具有生长抑制作用,其细胞毒性呈浓度依赖性。电镜观察可见大黄素处理的A549和SK-MES-1细胞有空泡变性。结论大黄素可降低ERCC1和Rad51的表达,从而引起非小细胞肺癌细胞生长抑制。

BRCA2基因与RAD51基因的常见多态位点与乳腺癌的关系研究

目的研究BRCA2基因的N372H和RAD51基因的135G/C位点的多态性与乳腺癌的关系。方法应用变性高效液相色谱和限制酶片段长度多态分析技术,在71例乳腺癌患者和85例正常女性中,对上述两个多态位点的基因频率和基因型频率进行调查和比较。结果在乳腺癌患者中,BRCA2基因的N372H位点的基因型HH的频率显著高于正常对照组(9.9%vs 2.4%,χ2=4.010,P=0.045),但RAD51基因的135G/C位点的多态分布在两组人群中的差异无统计学意义。结论BRCA2基因的N372H位点的基因型HH与乳腺癌相关,可能是中国人群乳腺癌的风险遗传因子。

芹菜素影响非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的RAD51基因调控机制研究

目的:从RAD51基因途径研究芹菜素对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞顺铂敏感性的影响及其机制。方法:取人肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP,分为对照组(空白培养基)、顺铂组(5 g/L)和芹菜素低、高剂量组(10、20μmol/L),采用MTT法检测A549/DDP细胞生长,采用AnnexinⅤ/PI双染色法结合流式细胞术检测其凋亡情况。取A549/DDP细胞,分为顺铂单用组(1、2、4、8、16μg/mL)和芹菜素联用组(10μmol/L,在顺铂基础上加用),采用MTT法测定并计算细胞增殖抑制率;采用回归分析模型计算药物的半数抑制浓度(IC50),并以此计算芹菜素的逆转指数。将18只裸鼠随机分为对照组、顺铂单用组和芹菜素联用组,每组6只,接种A549/DDP细胞使形成移植瘤后,分别腹腔注射生理盐水、顺铂(2 mg/kg,隔天给药1次)、顺铂(剂量、用法同前)+芹菜素药液(30 mg/kg,每天给药1次),连续给药18 d,测量小鼠的体质量和移植瘤质量并计算抑瘤率。取人肺癌细胞A549和A549/DDP,分为正常组(A549细胞)、对照组(A549/DDP细胞)、顺铂组(5 g/L,A549/DDP细胞)和芹菜素低、高剂量组(10、20μmol/L,A549/DDP细胞),分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting法检测细胞中RAD51的mRNA及其蛋白表达情况。结果:与对照组比较,芹菜素低、高剂量组细胞增长数均显著降低,凋亡率均显著升高且显著高于顺铂组(P<0.05或P<0.01)。联用芹菜素后,A549/DDP细胞的增殖抑制率均较相应质量浓度的顺铂单用组显著升高(P<0.05);芹菜素联用组的IC50为(5.81±0.47)μg/mL,显著低于顺铂单用组的IC50(14.44±0.52)μg/mL(P<0.05);逆转指数为2.49。裸鼠抑瘤实验结果显示,联用芹菜素后,A549/DDP荷瘤裸鼠抑瘤率为68.72%,显著低于顺铂单用组的33.82%(P<0.05)。与正常组A549细胞比较,对照组A549/DDP细胞中RAD51mRNA及其蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05);与对照组A549/DDP细胞比较,芹菜素低、高剂量组A549/DDP细胞中RAD51 m RNA及其蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05);与顺铂组A549/DDP细胞比较,芹菜素低、高剂量组A549/DDP细胞中RAD51 m RNA及其蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论:芹菜素能够有效逆转人肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的耐药性,其机制可能与下调RAD51基因转录及其蛋白表达有关。

同源重组和重组酶Rad51的调控

同源重组是细胞非常重要的生命活动,参与维持基因组的完整性与稳定性,且与人类健康密切相关.同源重组的研究不断取得进步.本文讨论了同源重组的模式,重组酶RecA/Rad51的作用机制以及Rad51调节蛋白对Rad51入核及Rad51参与重组过程中的单链结合、同源配对、入侵及链交换阶段的调控,将有利于我们对同源重组的深入了解.

RAD51基因G135C单核苷酸多态性及p53突变在肺癌中的意义

目的探讨RAD51基因G135C多态性与肺癌发病风险、病理特点及p53基因突变的相关性。方法选择80例肺癌患者为病例组,40例非肿瘤肺疾病患者为对照组。以PCR-RFLP技术检测病例组和对照组的RAD51基因型,比较不同基因型与肺癌危险性以及肺癌病理特点的关系;并采用免疫组化法对病例组进行p53突变的检测。结果 (1)RAD51基因型G/G、G/C和C/C在病例组的分布频率分别为77.5%、15.0%和1.3%,在对照组的分布频率分别为92.5%、7.5%和0。与携带G/G的个体相比,携带RAD51变异基因型(G/C和C/C)的个体具有更高的患癌风险(P<0.05);(2)RAD51基因型与肺癌的病理学类型及组织学分级无相关性;(3)RAD51 G135C基因型在不同p53基因突变状态肺癌中的分布频率差异无显著性(P>0.05)。结论 RAD51基因多态性与肺癌发病风险有关,携带RAD51变异基因型(G/C和C/C)的个体易患肺癌。

RNA干扰抑制RAD51基因表达对放射敏感性影响的实验研究

目的:构建针对DNA双链断裂修复基因RAD51的siRNA表达质粒,观察对肝癌细胞株HepG-2放射敏感性的影响。方法:采用基因重组技术,构建针对RAD51基因的干扰质粒pSilencer-1、pSilencer-2、pSilencer-3及对照质粒pSilencer-C,经脂质体转染HepG-2细胞,200μg／mL潮霉素筛选稳定表达的细胞,用Western blot测定RAD51蛋白表达量的改变,用细胞克隆形成实验测定细胞放射敏感性。结果:筛选出稳定转染各组质粒的细胞;转染pSilencer -1、pSilencer-2和pSilencer-3质粒细胞克隆的RAD51蛋白表达量分别为转染pSilencer-C细胞克隆的0．60±0．29、0．36±0．16和0．15±0．09,t值分别为4．101、6．561和8．714,P值分别为0．049、0．003和0．001。pSilencer-C组、pSilencer-2组和pSilencer-3组三组剂量存活曲线的D0值分别为1．55、1．46和1．44,Dq值分别为3．31、3．16和2．82,SF2分别为0．82、0．73和0．67 Gy;与pSilencer-C组相比,pSilencer-2组和pSilencer-3组在2 Gy剂量时的放射增敏比SERSF2分别为1．12和1．23。结论:RNAi抑制RAD51基因的表达,能提高HepG-2细胞的放射敏感性,提示RAD51基因可作为放射增敏治疗的一个潜在靶点。

食管胃结合部腺癌中RAD51蛋白的表达及临床意义

目的探讨RAD51蛋白在食管胃结合部腺癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化和Western blot法检测141例正常胃黏膜、112例胃黏膜上皮内瘤变及141例食管胃结合部腺癌中RAD51蛋白的表达,并分析其表达与食管胃结合部腺癌的临床病理学征特的关系。结果免疫组化检测RAD51蛋白在正常胃黏膜组、低级别瘤变组、高级别瘤变组、食管胃结合部癌组织中的阳性率分别为8.51%、20.45%、44.12%和72.34%(P<0.05);Western blot检测结果分别为1、2.29±0.08、4.97±0.24、8.13±1.03(P<0.05),提示RAD51蛋白表达为逐渐升高的趋势。RAD51蛋白表达与食管胃结合部腺癌的病理分化程度、Lauren分型及有无淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 RAD51在食管胃结合部腺癌的发生、发展过程中起重要作用。

^(18)氟-氟代脱氧葡萄糖对HepG2肝癌细胞凋亡及rad51基因表达的影响

目的研究18F-FDG对HepG2肝癌细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法将处于对数生长期的肝癌细胞分为实验组和对照组,以不同浓度18F-FDG处理HepG2肝癌细胞,用MTT法、流式细胞术和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别检测细胞增殖与凋亡、活性氧含量、rad51及p53基因表达的情况。结果 18F-FDG能诱导HepG2肝癌细胞凋亡,抑制其增殖,且随着18F-FDG浓度增大,凋亡细胞增加,活性氧产量增加,p53基因与rad51基因表达增强。结论 18F-FDG能诱导HepG2肝癌细胞凋亡,且凋亡率随药物活度浓度增大而增大。

ERCC2、RAD51和BAG-1基因多态性与晚期非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的研究

目的:研究着色性干皮病基因(ERCC2/XPD)、DNA修复基因RAD51 codon 135以及Bcl-2结合抗凋亡基因1(Bcl-2 associated athanogene 1,BAG-1)codon 324多态性与晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)以铂类药物为基础的化疗敏感性的关联。方法:选取100例晚期NSCLC患者,使用PCR-RFLP方法检测ERCC2/XPD Lys 751 Gln、RAD51 codon 135以及BAG-1 codon 324基因多态性,应用非条件Logistic回归计算OR值及95%CI,分析不同基因型与化疗敏感性的关系。结果:100例晚期NSCLC患者中,ERCC2/XPD 751基因Lys/Lys、Lys/Gln、Gln/Gln基因型的分布频率分别为69例(69%)、26例(26%)和5例(5%);RAD51 codon 135的基因型频率分布为G/G型占67%(67/100)、G/C型33%(33/100)、未发现C/C型;BAG-1 codon 324基因型频率分布C/C型占81%(81/100)、C/T型占19%(19/100),未发现T/T型。100例NSCLC患者化疗后,其中完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)和进展(PD)患者分别为0、31、41和28例。ERCC2/XPD C/A基因型多态性与化疗敏感性具有相关性(OR=3.53,95%CI=1.58-11.46,P<0.01);BAG-1 codon 324 C/C型患者与C/T型患者的化疗有效率差异有统计学意义(P=0.036),携带C/C基因型患者比C/T基因型患者化疗敏感(OR=2.67,95%CI=1.16-8.23,P<0.05);RAD51 codon 135G/C基因型患者是G/G基因型患者化疗敏感性的2.12倍(OR=2.12,95%CI=1.08-7.41,P<0.05)。结论:ERCC2/XPD、BAG-1 codon 324以及RAD 51 codon 135基因多态性可能与晚期NSCLC铂类药物化疗敏感性有关。

非小细胞肺癌RAD51、ERCC2和BAG-1基因多态性的表达

目的:研究DNA修复基因RAD51和着色性干皮病基因(ERCC2/XPD)以及Bcl-2结合抗凋亡基因1(Bcl-2 associated athanogene 1,BAG-1)基因多态性与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)遗传易感性的关系。方法:采用病例对照研究设计,选取100例非小细胞肺癌病例和80例正常对照。以ERCC2/XPD Lys751Gln和RAD51 codon 135以及BAG-1codon 324基因多态性为研究位点,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对多态性进行检测。应用Logistic回归计算OR值及95%CI,比较不同基因型与NSCLC发病风险的关系。结果:ERCC2/XPD 751基因型在病例组的分布频率为C/C型69例(69%)、C/A型26例(30%)和A/A型5例(5%)。与野生基因型C/C型相比,携带ERCC2/XPD C/A基因型和A/A基因型者患NSCLC的危险度比值比(odds ratio,OR)分别是1.53(95%CI:1.15-3.32)和0.58(95%CI:0.15-2.39)。BAG-1 codon 324基因型的分布频率为C/C型81%(81/100)、C/T型19%(19/100)以及T/T型0%(0例)。与野生基因型C/C型相比,携带BAG-1 C/T基因型者患NSCLC的OR是1.28(95%CI:1.08-2.74)。RAD51 codon 135基因型的分布频率为G/G型67%(67/100)、G/C型33%(33/100)、未现C/C型。与野生基因型G/G型相比,RAD51 G/C基因型者患NSCLC的OR是1.03(95%CI:1.06-2.29)。分析结果提示吸烟、环境危险因素与XPD Lys751Gln基因多态存在交互作用,交互效应OR值分别为2.24(95%CI:1.18-2.87)和2.53(95%CI:1.71-3.46),携带XPD Ly s751Gln突变基因者若同时暴露于吸烟、环境危险因素下,则患NSCLC的危险显著增加,相较未暴露于上述因素者,OR值均增大。结论:BAG-1和ERCC2/XPD以及RAD51基因多态性可能与当地居民NSCLC遗传易感性有关,ERCC2/XPD与吸烟、饮酒、环境危险因素存在交互作用。

同源重组修复基因RAD51可提高PTEN缺失细胞基因组稳定性

目的:研究同源重组修复基因RAD51对PTEN缺失小鼠胚胎成纤维细胞基因组稳定性的影响。方法:应用免疫荧光和中性单细胞电泳技术观察PTEN缺失后自发性和辐射诱导DNA双链断裂情况;并构建PTEN缺失细胞稳定转染RAD51的细胞系,γ射线照射后检测细胞存活率。结果:PTEN缺失导致细胞自发性和辐射诱导DNA双链断裂增多;转染RAD51后细胞存活率增高,辐射诱导的DNA双链断裂减少。结论:同源重组修复基因RAD51可以提高PTEN缺失细胞基因组稳定性。

RAD51和BRCA1在结直肠癌中的表达及临床意义

目的观察结直肠癌中RAD51和BRCA1基因的表达,探讨二者与结直肠癌发生发展及治疗的关系。方法收集结直肠癌癌灶及癌旁正常组织各42例,采用免疫组织化学法及逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测标本组织中RAD51、BRCA1蛋白和mRNA的表达水平。分析RAD51、BRCA1在结直肠癌中的表达水平与临床病理特征的关系以及二者之间的相互关系。结果在结直肠癌组织中RAD51(33例,78.6%)、BRCA1(30例,71.4%)的表达较癌旁正常组织RAD51(7例,16.7%)、BRCA1(18例,42.9%)高(P<0.05);结直肠癌中RAD51mRNA(0.51±0.26)和BRCA1mRNA(0.70±0.96)的值较两者在正常组织中mRNA(0.10±0.22)高(P<0.01);两者蛋白及mRNA的表达水平与性别、年龄、分化程度、TNM分期等均无统计学差异(P>0.05);BRCA1与RAD51在结直肠癌中的表达水平成明显正相关(蛋白:r=0.731,P<0.01mRNA:r=0.572,P<0.01)。结论 BRCA1与RAD51在结直肠癌组织中高表达,且二者的表达水平呈明显正相关;BRCA1与RAD51的表达异常可能与结直肠癌的发生发展有关。

Rad51与肿瘤关系的研究进展

Rad51基因作为DNA修复基因,对维持基因的稳定性起着关键性的作用。Rad51基因的突变在多种肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用。肿瘤对放疗和化疗药物的耐药性也与Rad51基因的突变相关。另外,Rad51基因可能与其它基因相互作用,共同影响肿瘤的发生、发展。该文对近年来该领域的研究进展作一综述。

DNA修复相关蛋白RAD51在宫颈癌细胞增殖中的作用

目的研究DNA修复相关蛋白RAD51对人宫颈癌细胞He La和Si Ha增殖能力的影响及其可能的机制。方法应用免疫组化检测RAD51蛋白在43例人正常宫颈,64例宫颈鳞状细胞癌组织中的表达情况;采用细胞计数法、MTT实验分析RAD51抑制剂RI-1处理(实验组1)和DMSO处理(对照组1)的人宫颈癌细胞He La和Si Ha细胞体外增殖的变化;用RI-1(实验组2)和等体积生理盐水(对照组2)腹腔灌注于成功移植He La或Si Ha细胞的裸鼠,分析裸鼠移植瘤瘤体生长、体积及质量的变化。采用流式细胞术检测各组细胞周期分布。Western blot检测抑制RAD51蛋白对细胞周期蛋白cyclin D1与P21水平的影响。结果 RAD51蛋白在宫颈癌组织中的表达水平[73.44%(47/64)]明显高于正常宫颈组织[13.95%(6/43)]。与对照组1相比,实验组1 He La及Si Ha细胞中RAD51表达明显抑制,其细胞生长速度及活性也明显降低(均P<0.01),且具有时间依赖效应;实验组2裸鼠移植瘤的生长明显减慢,且所成瘤体的平均质量均显著减小(P<0.01)。流式细胞术提示RAD51抑制剂处理后阻断细胞周期的转换。Western blot检测证实RI-1处理后降低了细胞周期蛋白cyclin D1和增加了P21的表达,进而阻断细胞周期的转换。结论 RAD51通过调节cyclin D1与P21蛋白表达水平引起细胞周期进展停滞,改变宫颈癌细胞及移植瘤体的生长。