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Cell proliferation and apoptosis in optic nerve and brain integration centers of adult trout Oncorhynchus mykiss after optic nerve injury 被引量:1
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作者 Evgeniya V.Pushchina Sachin Shukla +1 位作者 Anatoly A.Varaksin Dmitry K.Obukhov 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期578-590,共13页
Fishes have remarkable ability to effectively rebuild the structure of nerve cells and nerve fibers after central nervous system injury.However,the underlying mechanism is poorly understood.In order to address this is... Fishes have remarkable ability to effectively rebuild the structure of nerve cells and nerve fibers after central nervous system injury.However,the underlying mechanism is poorly understood.In order to address this issue,we investigated the proliferation and apoptosis of cells in contralateral and ipsilateral optic nerves,after stab wound injury to the eye of an adult trout Oncorhynchus mykiss.Heterogenous population of proliferating cells was investigated at 1 week after injury.TUNEL labeling gave a qualitative and quantitative assessment of apoptosis in the cells of optic nerve of trout 2 days after injury.After optic nerve injury,apoptotic response was investigated,and mass patterns of cell migration were found.The maximal concentration of apoptotic bodies was detected in the areas of mass clumps of cells.It is probably indicative of massive cell death in the area of high phagocytic activity of macrophages/microglia.At 1 week after optic nerve injury,we observed nerve cell proliferation in the trout brain integration centers:the cerebellum and the optic tectum.In the optic tectum,proliferating cell nuclear antigen(PCNA)-immunopositive radial glia-like cells were identified.Proliferative activity of nerve cells was detected in the dorsal proliferative(matrix) area of the cerebellum and in parenchymal cells of the molecular and granular layers whereas local clusters of undifferentiated cells which formed neurogenic niches were observed in both the optic tectum and cerebellum after optic nerve injury.In vitro analysis of brain cells of trout showed that suspension cells compared with monolayer cells retain higher proliferative activity,as evidenced by PCNA immunolabeling.Phase contrast observation showed mitosis in individual cells and the formation of neurospheres which gradually increased during 1–4 days of culture.The present findings suggest that trout can be used as a novel model for studying neuronal regeneration. 展开更多
关键词 nerve regeneration proliferation apoptosis optic nerve brain radial glia cells neurogenic niches neurospheres neural regeneration
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切割穹隆海马伞海马提取液促进放射状胶质细胞增殖和向神经元分化 被引量:3
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作者 秦建兵 金国华 +5 位作者 李浩明 施金洪 田美玲 谭雪锋 张新化 邹琳清 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期721-725,共5页
目的探讨海马微环境的变化对体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化的影响。方法本实验在成功制备正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液的基础上,分别使用正常侧和切割侧海马提取液,观察其在体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化过程中所起... 目的探讨海马微环境的变化对体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化的影响。方法本实验在成功制备正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液的基础上,分别使用正常侧和切割侧海马提取液,观察其在体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化过程中所起的作用。结果在放射状胶质细胞增殖阶段,切割组与正常组及对照组相比,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的增殖细胞比例明显提高(P<0.05);在放射状胶质细胞分化阶段,切割组与正常组及对照组相比,Tuj1阳性神经元数量明显增多(P<0.05)。结论切割穹隆海马伞侧海马提取液对大鼠放射状胶质细胞的增殖和向神经元的分化有明显促进作用,提示海马微环境对海马放射状胶质细胞的增殖和分化有重要影响。 展开更多
关键词 放射状胶质细胞 神经元 海马 海马提取液 海马微环境 细胞培养 免疫荧光 大鼠
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海马放射状胶质细胞激活后Rest和Runx1t1基因的表达变化 被引量:2
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作者 施金洪 金国华 +4 位作者 李浩明 张新化 朱蕙霞 田美玲 秦建兵 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期7-12,共6页
目的探讨经切割穹隆海马伞侧海马提取液诱导而激活的海马放射状胶质细胞的基因表达变化。方法将分离、纯化后的海马放射状胶质细胞分别加入正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液,7d后利用免疫荧光法检测两组细胞的数量和生长情况;利用基... 目的探讨经切割穹隆海马伞侧海马提取液诱导而激活的海马放射状胶质细胞的基因表达变化。方法将分离、纯化后的海马放射状胶质细胞分别加入正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液,7d后利用免疫荧光法检测两组细胞的数量和生长情况;利用基因芯片分析细胞内基因表达情况;利用实时定量PCR分析神经干细胞向神经元分化的相关基因Rest和Runx1t1的转录情况。结果与正常组相比,切割组放射状胶质细胞的数量明显增多,胞体增大,突起增粗变长。基因芯片结果显示,在所检测的709个基因中,切割组中10个基因表达明显上调,10个基因明显下调;实时定量PCR结果表明,切割组Rest和Runx1t1的转录水平均显著高于正常组(P<0.05)。结论切割穹隆海马伞海马提取液可诱导海马放射状胶质细胞的激活,提高Rest和Runx1t1基因转录水平。 展开更多
关键词 海马 放射状胶质细胞 REST Runx1t1 免疫荧光 实时定量聚合酶链式反应 大鼠
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切割穹窿海马伞后海马齿状回内Lhx8的表达变化及其对RGCs向胆碱能神经元分化的影响
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作者 田美玲 李浩明 +4 位作者 金国华 朱培培 施金洪 邹琳清 秦建兵 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期447-451,共5页
目的:明确Lhx8在SD大鼠切割穹窿海马伞后海马齿状回颗粒下层和门区中的表达变化。方法:切割SD大鼠穹窿海马伞,成功制备海马去神经支配动物模型后,通过Western Blot的方法检测切割后第1、3、7、14、21、28 d海马中Lhx8蛋白的表达变化;通... 目的:明确Lhx8在SD大鼠切割穹窿海马伞后海马齿状回颗粒下层和门区中的表达变化。方法:切割SD大鼠穹窿海马伞,成功制备海马去神经支配动物模型后,通过Western Blot的方法检测切割后第1、3、7、14、21、28 d海马中Lhx8蛋白的表达变化;通过免疫组织化学方法检测切割后第7天海马齿状回颗粒下层和门区中Lhx8阳性细胞的表达定位,并通过免疫荧光化学方法检测Lhx8/ChAT双标阳性细胞的共定位情况;切割SD大鼠穹窿海马伞并制备海马提取液,将其加入至细胞培养液中,模拟体内海马神经再生微环境,检测培养的海马放射状胶质细胞(radial slia cells,RGCs)向胆碱能神经元分化的情况。结果:切割穹窿海马伞后第7 d,Lhx8蛋白表达量较其他各时相点明显增高;海马齿状回颗粒下层和门区中Lhx8阳性细胞数目和光密度也明显高于正常侧,Lhx8/ChAT双标阳性细胞数目也较正常侧增多;体外细胞培养,切割穹窿海马伞侧海马提取液也较正常侧海马提取液更能促进海马放射状胶质细胞向胆碱能神经元的分化。结论:切割穹窿海马伞后,Lhx8表达明显上调,与海马齿状回的胆碱能神经再生有关。 展开更多
关键词 Lhx8 穹窿海马伞 放射状胶质细胞 胆碱能神经元 海马
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大鼠创伤性脑损伤后海马齿状回中脑脂结合蛋白的表达变化
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作者 毛伟峰 金国华 +2 位作者 衣昕 秦建兵 田美玲 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期746-750,共5页
目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点海马结构齿状回中脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法将72只SD大鼠随机分为脑损伤组、假手术组和空白对照组,制备大鼠颅脑液压损伤模型,伤后1、3、7、14d分别行海马组织Western blotting和B... 目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点海马结构齿状回中脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法将72只SD大鼠随机分为脑损伤组、假手术组和空白对照组,制备大鼠颅脑液压损伤模型,伤后1、3、7、14d分别行海马组织Western blotting和BLBP、波形蛋白(Vimentin)免疫荧光双标检测。结果 Western blotting结果显示,伤后1d BLBP蛋白含量相对于空白对照组下降(P<0.01),后逐渐上升,至伤后7d BLBP蛋白含量与其他各组比较达到高峰(P<0.01),伤后14d又下降低于空白对照组水平(P<0.01)。BLBP和Vimentin双标阳性细胞数量变化趋势基本与Western blotting结果相一致。损伤侧海马BLBP和Vimentin双标阳性细胞主要分布于海马齿状回颗粒下层,多数呈放射状胶质细胞(RGCs)形态;伤后7d,齿状回门区也出现BLBP和Vimentin双标阳性细胞,大多为反应性星形胶质细胞形态。结论大鼠创伤性脑损伤后,损伤侧海马齿状回中BLBP的表达呈现先下降后上升,至伤后7d达到高峰,后又急剧下降的规律,BLBP的表达变化可能与海马神经再生和神经功能恢复有关。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 齿状回 放射状胶质细胞 脑脂结合蛋白 波形蛋白 免疫印迹法 免疫荧光 大鼠
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鸡胚发育过程四种放射状胶质细胞标记物的对比分析
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作者 杜蕊 杨慈清 +4 位作者 李玲玲 段明慧 卢习 陈树林 赵善廷 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1207-1212,1215,共7页
目的:比较脑脂结合蛋白(Brain lipid binding protein,BLBP)、放射状胶质细胞标记物2(Radial glial cell marker-2,RC2)、巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)在鸡胚不同发育时期视顶盖胶质细胞(Gl... 目的:比较脑脂结合蛋白(Brain lipid binding protein,BLBP)、放射状胶质细胞标记物2(Radial glial cell marker-2,RC2)、巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)在鸡胚不同发育时期视顶盖胶质细胞(Glial cell,GC)中表达的差异。方法:从鸡胚发育的第8天(E8)开始到E18,分别进行取材、固定、包埋,振荡切片,采用免疫荧光技术对不同发育时期的鸡胚视顶盖的胶质细胞进行标记,同时采用活体原位电转的方法对E8、E10和E12的放射状胶质细胞(Radial glial cells,RGCs)进行标记。结果:从E8开始,BLBP、RC2、Nestin和GFAP均开始表达。BLBP和GFAP抗体标记GC从E8到E18均可表达,BLBP标记的细胞从E14开始出现变化,呈现迁移中神经元的特点,GFAP标记的细胞在E18开始出现变化,呈现星形胶质细胞形态。自E8-E16,RC2和Nestin标记RGCs,但E18时标记RGCs已不明显。结论:4种抗体均可标记E8-E18的GC,在E12之前4种抗体标记RGCs效果相似,而在E12后RC2,Nestin与BLBP标记RGCs开始出现差异,从E18开始GFAP开始标记星形胶质细胞(Astrocyte)。 展开更多
关键词 鸡胚胎 视顶盖 放射状胶质细胞 星形胶质细胞 免疫荧光技术
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海马放射状胶质细胞体外诱导激活后PEBP蛋白的表达变化
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作者 秦建兵 李浩明 +5 位作者 金国华 赵荷艳 杨伟伟 田美玲 朱蕙霞 邹琳清 《南通大学学报(医学版)》 2010年第6期420-422,F0002,共4页
目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组... 目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液。培养7 d后,通过免疫荧光标记法观察PEBP在放射状胶质细胞中的表达,并提取总蛋白,采用Western blot的方法观察对照组及诱导组中PEBP蛋白的表达变化。结果:PEBP蛋白在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:PEBP的表达增加可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向神经元分化有关。 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 放射状胶质细胞 切割穹窿海马伞 免疫印迹 免疫荧光
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星形胶质细胞低温去分化条件
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作者 余涛 刘秋菊 +1 位作者 金璐 文铁桥 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期651-655,共5页
体外纯化培养的成熟星形胶质细胞经冷冻复苏方法处理后,诱导转化为放射状胶质细胞的类似细胞(RGLCs细胞).星形胶质细胞的诱导转化率与其冷冻过程的温度、时间有关.冷冻保护液中的DMSO对星形胶质细胞的诱导转化过程无关.这些结果显示冷... 体外纯化培养的成熟星形胶质细胞经冷冻复苏方法处理后,诱导转化为放射状胶质细胞的类似细胞(RGLCs细胞).星形胶质细胞的诱导转化率与其冷冻过程的温度、时间有关.冷冻保护液中的DMSO对星形胶质细胞的诱导转化过程无关.这些结果显示冷冻复苏方法诱导星形胶质细胞的转化是由物理刺激诱导的. 展开更多
关键词 放射状胶质细胞 放射状胶质细胞样细胞 冷冻复苏过程
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大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围脑组织脑脂结合蛋白的表达变化 被引量:1
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作者 毛伟峰 金国华 +2 位作者 衣昕 秦建兵 田美玲 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第5期718-722,共5页
目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点脑损伤区周围脑组织脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法采用大鼠颅脑液压损伤模型,在伤后1、3、7、14 d用Western blot检测损伤区周围脑组织BLBP的表达,用免疫荧光双标法检测BLBP和波形蛋白... 目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点脑损伤区周围脑组织脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法采用大鼠颅脑液压损伤模型,在伤后1、3、7、14 d用Western blot检测损伤区周围脑组织BLBP的表达,用免疫荧光双标法检测BLBP和波形蛋白。结果 TBI后1 d,BLBP含量显著下降,后逐渐上升,至伤后7 d达到高峰,伤后14 d又急剧下降(均P<0.01)。BLBP和波形蛋白双标阳性细胞主要分布在损伤区周围皮质及损伤侧胼胝体,损伤侧皮质阳性细胞大多为反应性星形胶质细胞形态;损伤侧胼胝体阳性细胞基本呈放射状胶质细胞(RGCs)形态。结论 TBI后损伤区周围脑组织RGCs样细胞可能与皮质神经再生和神经功能恢复有关。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 脑脂结合蛋白 波形蛋白 皮质 胼胝体 放射状胶质细胞 大鼠
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