平喘宁对哮喘大鼠肺组织Raf mRNA、ERK1 mRNA表达的影响

目的:观察平喘宁对哮喘大鼠Raf mRNA、ERK1 mRNA表达及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)含量的影响,探讨其治疗哮喘的相关作用机制。方法:雄性Wistar大鼠70只,随机分为正常组、模型组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组以及平喘宁高、中、低剂量组,每组10只。以卵蛋白致敏及寒冷刺激复制大鼠哮喘模型,造模21d后,正常组、模型组每天给予蒸馏水灌服,其它各组给予相应药物灌服,4周后解剖大鼠并取出肺组织。用SP免疫组化法观察TIMP-1、MMP-9含量,用RT-PCR法观察Raf mRNA、ERK1mRNA在平喘宁治疗哮喘前后的变化。结果:与正常组比较,模型组肺组织MMP-9、TIMP-1、Raf mRNA、ERK1mRNA显著性上调(P<0.01);与模型组比较,各治疗组以上指标均有不同程度的下调(P<0.05,P<0.01);平喘宁中、高剂量组和地塞米松组比较,无显著性差异。结论:平喘宁可通过下调MMP-9和TIMP-1的表达,并调节MMP-9/TIMP-1之间的平衡,显著降低哮喘大鼠肺组织ERK信号通路Raf mRNA、ERK1 mRNA的表达而治疗哮喘。

镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠Raf-1mRNA和蛋白表达的影响

目的研究不同剂量镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠(SHR)心血管组织Raf-1蛋白和Raf-1 mRNA表达的影响。方法将50只24周龄SHR随机分为模型对照组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组、阳性对照组,每组10只,同源雄性魏-凯二氏大鼠(WKY)10只作为正常对照组。灌胃给药5周后,Western Blot法测定心血管组织Raf-1蛋白表达,实时聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定大鼠Raf-1 mRNA基因表达。结果与模型对照组比较,其他各组大鼠Raf-1蛋白和Raf-1 mRNA表达均明显升高(F=1 139.282,sig=0.000,P<0.01)。结论镇肝熄风汤可促进SHR心血管细胞Raf-1蛋白和Raf-1 mRNA表达,刺激细胞增殖和分化,抑制细胞凋亡。

食管鳞状细胞癌Raf激酶抑制蛋白基因甲基化及mRNA表达

目的研究食管鳞状细胞癌(ESCC)中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因启动子甲基化及mRNA表达情况。探讨其与食管鳞状细胞癌发生的关系及可能机制。方法采用改进的甲基化特异性PCR(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ESCC组织及相应癌旁正常组织中RKIP基因的DNA甲基化和mRNA表达情况。结果 ESCC组织中RKIP基因启动子的甲基化发生率(75%)显著高于癌旁正常组织(27%)(P<0.01);77例ESCC组织中RKIP基因mRNA阳性表达率(36%)显著低于相应癌旁正常组织的RKIP基因mRNA阳性表达率(77%)(P<0.01);食管鳞状细胞癌组织中RKIP基因甲基化者mRNA阳性表达率为(26%)与非甲基化者mRNA阳性表达率(68%)比较明显相关(P<0.01);RKIP基因甲基化与肿瘤的淋巴转移和分化程度相关(P<0.01)。结论食管鳞状细胞癌RKIP基因启动子区甲基化导致的该基因的mRAN表达缺失可能是ESCC发生的机制之一,RKIP基因的高甲基化率可作为食管鳞状细胞癌恶性程度评估和判断预后的指标。

环孢A处理对脊髓损伤大鼠后肢骨骼肌RAF-1表达的影响

目的探讨环孢霉素A处理对脊髓损伤大鼠后肢骨骼肌RAF-1 mRNA表达的影响.方法成年SD大鼠分SCT组(T9横断),和SCT后给予环孢霉素A处理组.脊髓横断组用环孢霉素A处理(1 mg/200 g)7 d后处死动物.取后肢骨骼肌用免疫组化染色(n=5)确定RAF-1 mRNA在后肢骨骼肌的定位分布.RT-PCR技术检测RAF-1 mRNA在损伤脊髓大鼠后肢骨骼肌的表达变化(n=8).结果与手术组比较(0.95±0.13),环孢霉素A处理(0.75±0.14)导致RAF-1 mRNA在损伤脊髓大鼠后肢骨骼肌的表达明显下调(P<0.05);RAF-1蛋白产物主要分布在细胞浆.结论环孢霉素A处理能有效下调脊髓损伤大鼠后肢骨骼肌RAF-1 mRNA表达水平.