一种便携快速微流芯片PCR仪性能评价

目的评价一种便携快速微流芯片PCR仪的主要性能指标。方法按照RB/T160-2017《分析化学仪器设备验证与综合评价指南》、SN/T2102.2-2008《食源性病原体PCR检测技术规范第2部分:PCR仪性能试验要求》等相关标准制定的评价指标及要求,选取标准菌株鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、肠炎沙门氏菌ATCC13076和大肠埃希氏菌O157:H7ATCC43895食源性致病菌为检测目标物,对便携快速微流芯片PCR仪的基线噪声、检测低限、线性、精密度、样品检测及重复性进行验证实验。结果检测基线稳定、线性拟合相关系数r>0.98,精密度均小于5%,满足YY/T1173-2010《聚合酶链反应分析仪》的要求。结论基线噪声、检测低限、线性、精密度、样品检测及重复性6个指标可以有效的评价便携快速微流芯片PCR仪。

快速PCR仪与普通PCR仪扩增效果的比较研究

目的比较快速PCR仪与普通PCR仪的扩增效果。方法浓度为0.1、0.05、0.025、0.0125、0.0063ng/μL的9947A标准品各取样100例,采用Identifiler Plus试剂盒构建扩增体系,其中50例在普通PCR仪(9700型扩增仪)上进行扩增,50例在快速PCR仪(Speed cycler2扩增仪)上扩增,3500x L型遗传分析仪检测,对比每种浓度组两种扩增仪的检验结果。结果两种PCR仪的检出率均无差异(P>0.05)。但当9947A的浓度为0.0125、0.0063ng/μL时,普通PCR仪检验样本的STR基因座检出数(13.7±1.0;11.3±1.5)均高于快速PCR仪(13.1±1.3;9.9±1.9),差异有统计学意义(P=0.029;P<0.001);当9947A的浓度为0.1、0.05、0.025 ng/μL时,普通PCR仪检验样本的图谱峰高(18931±4625;13437±3165;5752±1344)均高于快速PCR仪(16929±4034;11815±4120;4865±1401),差异有统计学意义(P=0.023;P=0.030;P=0.002)。结论快速PCR仪可在较短的时间内达到与普通PCR仪相当的检出率,适合于实际案件中的应用;普通PCR仪检验获得的STR分型结果质量可能更高。

4种不同方法检测审核样本中沙门氏菌的比较研究

沙门氏菌是引起食物中毒的最常见食源性肠道致病菌之一,严重危害人畜健康。通过传统培养法、检测机器联用法、快速测试纸片系统及PCR共4种方法检测测量审核样本中的沙门氏菌,结果表明,不同方法均能在供试样品中检出沙门氏菌。在日常检验工作中,推荐使用以PCR或全自动荧光酶免疫分析仪mini-VIDAS完成快速初筛,继而以快速测试片或显色培养基分离可疑培养物,最后依托全自动微生物鉴定仪VITEK 2 Compact对特征性单菌落进行鉴定,以快速获得精准检验结果。