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Establishment and Preliminary Application of a Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) for Rabies Virus 被引量:11
1
作者 Pengcheng Yu Xinjun Lv +2 位作者 Xinxin Shen Qing Tang Guodong Liang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2013年第4期223-227,共5页
The World Health Organization (WHO) standard assay for determining levels of the rabies virus neutralization antibody (RVNA) is the rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT), which is used to evaluate the immuni... The World Health Organization (WHO) standard assay for determining levels of the rabies virus neutralization antibody (RVNA) is the rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT), which is used to evaluate the immunity effect after vaccination against rabies. For RFFIT, CVS-11 was used as the challenge virus, BSR cells as the adapted cells, and WHO rabies immunoglobulin (WHO STD) as the reference serum in this study. With reference to WHO and Pasteur RFFIT procedures, a micro-RFFIT procedure adapted to our laboratory was produced, and its specificity and reproducibility were tested. We tested levels of RVNA in human serum samples after immunization with different human rabies vaccines (domestic purified Vero cell rabies vaccine (PVRV) and imported purified chick embryo cell vaccine (PCECV)) using different regimens (Zagreb regimen and Essen regimen). We analyzed the levels of RVNA, and compared the immune efficacy of domestic PVRV and imported PCECV using different immunization regimens. The results showed that the immune efficacy of domestic PVRV using the Zagreb regimen was as good as that of the imported PCECV, but virus antibodies were generated more rapidly with the Zagreb regimen than with the Essen regimen. The RFFIT procedure established in our laboratory will enhance the comprehensive detection ability of institutions involved in rabies surveillance in China. 展开更多
关键词 rapid fluorescent focus inhibition test (rffit RVNA RABIES Vaccination regimen
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Comparison of RFFIT Tests with Different Standard Sera and Testing Procedures 被引量:6
2
作者 Peng-cheng Yu Akira Noguchi +3 位作者 Satoshi Inoue Qing Tang Simon Rayner Guo-dong Liang 《Virologica Sinica》 CAS CSCD 2012年第3期187-193,共7页
The World Health Organization (WHO) standard assay for determining antibody level is the rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT) and is used to determine the degree of immunity after vaccination against ra... The World Health Organization (WHO) standard assay for determining antibody level is the rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT) and is used to determine the degree of immunity after vaccination against rabies. To compare the difference in RFFIT results between the laboratories of The National Institute of Infectious Disease in Japan (NIID) and the Chinese Centre for Disease Control (CCDC) as well the influence of the choice of standard serum (STD) for the detection, the two laboratories detection methods were simultaneously manipulated by RFFIT. The reference serums used in NIID and the WHO standard serum used in CCDC were compared in the same RFFIT detection to determine the titer of four sera samples C1, Sl, S2 and S4 in parallel, and the titers of the detected sera samples were calculated using the standard formula for neutralizing antibody titer. No significant difference was found in RFFIT methods from the two laboratories and the RFFIT testing procedures of the two laboratories have good consistency. However, different titers were obtained with the tentative internal standard serum (TI-STD) produced by adjusting to 2.0 IU of WHO standard serum in NIID and the WHO STD. The titer determined with the TI-STD was higher than that determined with WHO STD, This difference appears to be significant and requires further investigation 展开更多
关键词 rapid fluorescent focus inhibition test (rffit Standard serum Neutralizing antibody TITER
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检测狂犬病病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法的建立 被引量:27
3
作者 严家新 李承平 +4 位作者 朱家鸿 曹瑞瑶 薛红钢 刘碧芬 徐葛林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期93-96,共4页
在制备出抗狂犬病病毒(RV)核蛋白(NP)荧光标记抗体的基础上,建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法。经与小鼠中和试验(MNT)比较,其重复性、特异性和灵敏度差异均无显著意义。该方法在大多数需要检测RV中和抗... 在制备出抗狂犬病病毒(RV)核蛋白(NP)荧光标记抗体的基础上,建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法。经与小鼠中和试验(MNT)比较,其重复性、特异性和灵敏度差异均无显著意义。该方法在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可取代MNT。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 中和抗体 荧光灶抑制试验
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新型抗狂犬病病毒核蛋白抗体进行RFFIT检测效果评估 被引量:3
4
作者 吕新军 马学军 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第7期721-722,725,共3页
目的评价自主研发的荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体用于快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的效果。方法将狂犬病病毒核蛋白的一段线性表位肽与KLH耦联后免疫Balb/c小鼠制备的高效价单克隆抗体抗-RVNP-Mcl,经浓缩、纯化、异硫氰酸荧光素(... 目的评价自主研发的荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体用于快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的效果。方法将狂犬病病毒核蛋白的一段线性表位肽与KLH耦联后免疫Balb/c小鼠制备的高效价单克隆抗体抗-RVNP-Mcl,经浓缩、纯化、异硫氰酸荧光素(FITC)标记用于RFFIT检测,以Millipore公司DFA5100为对照试剂,对200例人血清进行平行RFFIT检测,将结果进行统计学分析。结果两种抗体检测结果的线性相关分析显示相关系数(r)=0.980;两种抗体检测定性结果一致率为96.83%,卡方检验显示两种抗体检测定性结果差异无统计学意义(χ2=0.098,P>0.05),发生定性结果不一致的6例(3.00%)血清两种抗体检测结果均小于1 IU/mL;68例两种抗体检测结果均小于或等于1 IU/mL的血清样品中有6例(8.82%)发生结果定性不一致,其余样品均未发生不一致的情况。结论使用荧光标记抗-RVNP-Mcl与DFA5100进行RFFIT检测时结果高度一致,荧光标记抗-RVNP-Mc1可供RFFIT检测使用。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 核蛋白类 抗体 快速荧光灶抑制试验
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肾综合征出血热病毒快速荧光灶抑制试验 被引量:5
5
作者 唐汉英 陆群英 +2 位作者 朱智勇 翁景清 姚苹苹 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1997年第5期367-370,共4页
报道一种新的HFRS病毒中和抗体检测方法──快速荧光灶抑制试验的建立。方法:病毒和细胞同时加入塑料微孔板上,37℃培养24小时后,经固定和荧光染色,即可在荧光显微镜下判定结果。结果:检验的4株病毒能在Vero-E6细胞上形成荧光灶... 报道一种新的HFRS病毒中和抗体检测方法──快速荧光灶抑制试验的建立。方法:病毒和细胞同时加入塑料微孔板上,37℃培养24小时后,经固定和荧光染色,即可在荧光显微镜下判定结果。结果:检验的4株病毒能在Vero-E6细胞上形成荧光灶;接种病毒的浓度与荧光灶里直线关系。用此法检测Z10单价和双价灭活疫苗免疫的20份兔及人血清的中和抗体,与空斑减少中和试验的结果相一致。结果:此法具有快速、简便、敏感、稳定的特点。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 病毒 快速荧光灶 抑制试验
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改良抗体结合试验的建立和在灭活狂犬病疫苗效价检测中的应用 被引量:5
6
作者 李云云 徐文超 +2 位作者 李勇 裴秋玲 吕新军 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第9期923-924,926,共3页
目的对抗体结合试验(ABT)进行改进并将其用于灭活狂犬病疫苗效力的测定。方法将快速荧光灶抑制试验(RFFIT)与ABT方案融合,在疫苗样品稀释、剩余中和抗体检测、结果计算方面进行改进,形成改良抗体结合试验(M-ABT);应用M-ABT对10种灭活狂... 目的对抗体结合试验(ABT)进行改进并将其用于灭活狂犬病疫苗效力的测定。方法将快速荧光灶抑制试验(RFFIT)与ABT方案融合,在疫苗样品稀释、剩余中和抗体检测、结果计算方面进行改进,形成改良抗体结合试验(M-ABT);应用M-ABT对10种灭活狂犬病疫苗随库存时间增加疫苗效力改变的情况进行检测。结果 M-ABT可以在28 h内完成,比ABT节省2 d,检测结果与人用狂犬病疫苗效价测定法(NIH)基本等效;10种疫苗随着库存时间增加疫苗效力下降。结论 M-ABT法能够成功建立,并用于灭活狂犬病疫苗效力检测效果较满意。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 抗体结合试验 快速荧光灶抑制试验 疫苗效力
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采用快速荧光灶抑制试验对一种狂犬病病毒抗体竞争性ELISA检测法的评价 被引量:11
7
作者 吕新军 王伟伟 +2 位作者 李云云 张国强 马学军 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第6期640-641,共2页
目的以快速荧光灶抑制试验(RFFIT)检测结果为标准,确定竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血清样品中狂犬病病毒抗体的能效。方法对100份人血清样品采用RFFIT检测狂犬病病毒中和抗体,采用竞争性ELISA检测狂犬病病毒抗体,分析两种方法... 目的以快速荧光灶抑制试验(RFFIT)检测结果为标准,确定竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血清样品中狂犬病病毒抗体的能效。方法对100份人血清样品采用RFFIT检测狂犬病病毒中和抗体,采用竞争性ELISA检测狂犬病病毒抗体,分析两种方法检测结果的相关性和一致性。结果经回归分析,两方法检测结果之间有线性关系,回归方程Y=2.320+0.333X,相关系数r=0.504;经χ2检验,两种方法阳性检出率差异无统计学意义(χ2=3.70,P>0.05),两种方法有相关性(χ2=16.50,P<0.05);经Scheff啨可信区间法分析,RFFIT不同检测值范围内ELISA阳性检出率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论本组评价的竞争性ELISA与RFFIT检测结果之间有相关性,但一致性较差,还需要进一步改进。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定 快速荧光灶抑制试验 相关性 一致性
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狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒中和抗体水平分析 被引量:3
8
作者 张磊 张玲 +6 位作者 张天喜 苏克文 谈思维 邵吉 叶海朋 曹承建 黄春萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期898-902,共5页
目的通过分析狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒RABV中和抗体特征,为狂犬病防控提供依据。方法收集2019-2020年杭州市职业病防治院犬伤后暴露预防接种门诊抗体检测者信息,经筛选后确定157例RABV中和抗体检测者作为研究对象,采用快速荧光... 目的通过分析狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒RABV中和抗体特征,为狂犬病防控提供依据。方法收集2019-2020年杭州市职业病防治院犬伤后暴露预防接种门诊抗体检测者信息,经筛选后确定157例RABV中和抗体检测者作为研究对象,采用快速荧光灶抑制试验检测狂犬病毒中和抗体,利用横断面研究方法对狂犬病毒中和抗体水平进行人群特征分析。结果研究对象中,初种者98人,复种者59人,复种者中2-1-1程序比5针法产生的抗体水平更高,其余特征均无统计学差异(P>0.05)。除1例初种者中和抗体效价低于0.5 IU/mL,其余检测者中和抗体效价均高于0.5 IU/mL。狂犬病毒中和抗体水平时间趋势分析显示,狂犬病毒中和抗体水平与时间呈负相关,回归方程为(F=4.974,P=0.031),标准化回归系数为-0.322(t=-2.230,P=0.031)。结论复种者狂犬病毒中和抗体水平与免疫程序有关,2-1-1程序对人体再次免疫应答的效果优于5针法。接种疫苗2年后部分个体出现失保护状态,再次暴露有必要全程接种狂犬病疫苗。 展开更多
关键词 狂犬病 中和抗体 快速荧光灶抑制试验 人群特征
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血清稀释条件对快速荧光灶抑制试验结果的影响 被引量:3
9
作者 李幸乐 吕新军 +3 位作者 潘静静 孙建伟 许汴利 黄学勇 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期94-97,共4页
目的:对比不同倍比稀释条件稀释血清对快速荧光灶抑制试验(RFFIT)结果的影响,以指导RFFIT在狂犬病防控中的应用。方法:采集65个健康个体和40个狂犬病暴露后预防处置(PEP)个体的血清标本,分别进行3倍和5倍倍比稀释,采用RFFIT检测... 目的:对比不同倍比稀释条件稀释血清对快速荧光灶抑制试验(RFFIT)结果的影响,以指导RFFIT在狂犬病防控中的应用。方法:采集65个健康个体和40个狂犬病暴露后预防处置(PEP)个体的血清标本,分别进行3倍和5倍倍比稀释,采用RFFIT检测抗狂犬病病毒中和抗体(RVNA)水平。结果:3倍倍比稀释时,RVNA检测结果显示:65个健康个体中,63人〈0.50 IU/m L,2人≥0.50 IU/m L;40个PEP个体均≥0.50 IU/m L。5倍倍比稀释时,RVNA检测结果显示:65个健康个体均〈0.50 IU/m L;40个PEP个体中,34例≥0.50 IU/m L,6例〈0.50 IU/m L,这6例PEP个体在3倍倍比稀释时RVNA呈弱阳性,效价在0.50-1.00 IU/m L。结论:以5倍倍比稀释条件稀释血清进行RFFIT检测时灵敏度降低,但是检测结果更能反映个体实际免疫状态,可能更有利于指导狂犬病PEP措施。 展开更多
关键词 抗狂犬病病毒中和抗体 快速荧光灶抑制试验 暴露后预防处置
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胸腺肽联合狂犬病疫苗接种对机体产生γ-干扰素、白细胞介素-2和中和抗体影响的研究 被引量:5
10
作者 顾小军 沈玲 黄英 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2012年第5期550-554,共5页
目的:观察胸腺肽联合狂犬病疫苗接种对机体γ-干扰素、白细胞介素-2和中和抗体产生的影响。方法:Ⅱ级以下狂犬病暴露人群100例随机分为两组:疫苗组50例,单用狂犬疫苗2.5 U,常规免疫程序接种;胸腺肽组50例,给予50 mg单剂量肌肉注射+狂犬... 目的:观察胸腺肽联合狂犬病疫苗接种对机体γ-干扰素、白细胞介素-2和中和抗体产生的影响。方法:Ⅱ级以下狂犬病暴露人群100例随机分为两组:疫苗组50例,单用狂犬疫苗2.5 U,常规免疫程序接种;胸腺肽组50例,给予50 mg单剂量肌肉注射+狂犬疫苗2.5 U,常规免疫程序接种。在注射前(D0)、注射7 d(D7)、注射6个月(M6)、注射12个月(M12)测定外周血淋巴细胞总数及γ-干扰素、白细胞介素-2水平,注射7 d、注射6个月、注射12个月测定中和抗体水平。结果:外周血淋巴细胞总数两组间无差异;胸腺肽组在注射后7 d白细胞介素-2水平和γ-干扰素水平均高于疫苗组(P<0.05);胸腺肽组在注射后7 d中和抗体产生量高于疫苗组(P<0.05)。结论:加用胸腺肽组注射后7 d中和抗体水平高于单用疫苗组,但6个月和12个月的抗体含量没有差异;两组接种后体内白细胞介素-2和γ-干扰素水平皆增高,白细胞介素-2增加的程度和抗体的产生量呈正相关。 展开更多
关键词 中和抗体 Γ-干扰素 白细胞介素-2 胸腺肽 狂犬疫苗 快速荧光灶抑制试验
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狂犬病毒新型快速荧光斑点抑制实验方法的建立 被引量:1
11
作者 梁红茹 刘晓慧 +2 位作者 陈晶 孙招金 郭霄峰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期619-622,共4页
目的建立一种新型的快速荧光斑点抑制实验用于狂犬病毒抗体的检测。方法本研究以携带绿色荧光蛋白基因的嵌合狂犬病毒HEP-GFP株为基础毒株,建立了一种新型快速荧光斑点抑制实验(RFFIT-GFP);并对多份人、犬、猫的血清进行了检测,还将该... 目的建立一种新型的快速荧光斑点抑制实验用于狂犬病毒抗体的检测。方法本研究以携带绿色荧光蛋白基因的嵌合狂犬病毒HEP-GFP株为基础毒株,建立了一种新型快速荧光斑点抑制实验(RFFIT-GFP);并对多份人、犬、猫的血清进行了检测,还将该检测结果与传统的RFFIT,ELISA相比较。结果与结论RFFIT-GFP和RFFIT,ELISA测定的结果基本相一致,特异性都比较高,而且RFFIT-GFP是一种比它们更为简便、经济的检测方法。 展开更多
关键词 狂犬病毒 绿色荧光蛋白 快速荧光斑点抑制实验
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快速荧光灶抑制试验对我国部分肾综合征出血热毒株及病人血清的分型研究
12
作者 唐汉英 朱智勇 +4 位作者 翁景清 陆群英 姚苹苹 李敏红 刘合宾 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1999年第3期185-187,共3页
目的:探讨肾综合征出血热(HFRS)毒株及病人血清分型方法。方法:快速荧光灶抑制试验(RFFIT)。结果:6株来自黑线姬鼠和病人的毒株,其免疫血清对Ⅰ型标准株76-118的中和效价较Ⅱ型标准株(UR)高4~256倍;... 目的:探讨肾综合征出血热(HFRS)毒株及病人血清分型方法。方法:快速荧光灶抑制试验(RFFIT)。结果:6株来自黑线姬鼠和病人的毒株,其免疫血清对Ⅰ型标准株76-118的中和效价较Ⅱ型标准株(UR)高4~256倍;而另6株来自褐家鼠和大白鼠的毒株,包括Gou3和K24的免疫血清,对Ⅱ型标准株UR的中和效价高于Ⅰ型76-118株8~128倍;被检的所有毒株和病人血清都能准确地分型。结论:RFFIT具有快速、简便、特异和准确灵敏的特点,不仅可检测中和抗体,且适用于HFRS病毒血清学分型。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 血清学分型 rffit
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非标准方法检测狂犬病病毒抗体阴性血清快速荧光灶抑制试验复核结果分析 被引量:2
13
作者 李虎 吕新军 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2019年第3期293-295,共3页
目的揭示非标准方法检测狂犬病病毒抗体阴性血清真实的狂犬病病毒中和抗体状态,指导基层狂犬病门诊正确认识非标准方法检测结果的意义。方法收集狂犬病疫苗免疫个体经酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和胶体... 目的揭示非标准方法检测狂犬病病毒抗体阴性血清真实的狂犬病病毒中和抗体状态,指导基层狂犬病门诊正确认识非标准方法检测结果的意义。方法收集狂犬病疫苗免疫个体经酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和胶体金(colloidal gold, CG)法检测狂犬病病毒抗体阴性血清,采用快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test, RFFIT)进行复核,Excel表统计数据。结果ELISA,CG法检测 1 053、1321 份血清,其中 102(9.69%, 102/1053)、183( 13.86%,183/1321)份血清为阴性,经RFFIT复核确证6(5.88%,6/102)、14(7.65%,14/183)份血清阴性。ELISA、CG法阴性结果的多数样品(88.55%、96.45%)经RFFIT检测狂犬病病毒中和抗体效价0.5-2.0 IU/mL。结论狂犬病病毒抗体非标准检测方法灵敏性有待提高,对其阴性检测结果应谨慎解读。 展开更多
关键词 狂犬病 抗体 酶联免疫吸附试验 胶体金 快速荧光灶抑制试验
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人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的构建及验证 被引量:2
14
作者 房世娣 赵晓瑞 +3 位作者 陈继军 安晨 南建军 毛晓燕 《微生物学免疫学进展》 2019年第4期7-13,共7页
目的利用人源抗狂犬病病毒ScFv噬菌体抗体库,构建单克隆抗体(单抗)轻、重链质粒,瞬时表达,纯化后验证具有高中和活性的单抗。方法以从ScFv噬菌体抗体库中筛选获得特异性抗体为模板,PCR扩增抗体轻、重链可变区序列,构建人源全分子抗体瞬... 目的利用人源抗狂犬病病毒ScFv噬菌体抗体库,构建单克隆抗体(单抗)轻、重链质粒,瞬时表达,纯化后验证具有高中和活性的单抗。方法以从ScFv噬菌体抗体库中筛选获得特异性抗体为模板,PCR扩增抗体轻、重链可变区序列,构建人源全分子抗体瞬时转染质粒;轻、重链质粒混合后转染HEK293 EBNA1细胞,瞬时表达全分子抗体。采用Mabselect SuRe介质手动亲和纯化抗体,Nano Vue超微量分光光度计测定蛋白质的质量浓度,快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test, RFFIT)进行体外中和效价验证。结果成功构建22个轻链质粒,15个重链质粒。通过真核细胞瞬时表达后,经手动亲和纯化后,获得22株单抗。除1株抗体外,其余21株抗体的蛋白质量浓度均>300μg/mL;部分抗体纯度均在90%以上。中和活性结果显示,5株在1 500~1 800 IU/mg之间;8株在800~1 500 IU/mg之间;7株在500~800 IU/mg之间;其余2株在500 IU/mg以下。结论成功构建并验证获得20株中和活性>500 IU/mg的人源抗狂犬病病毒单抗,为单抗混合制剂的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 单克隆抗体 噬菌体抗体库 快速荧光灶抑制试验
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一种人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的瞬时表达及性质分析
15
作者 宋宪铭 安晨 +3 位作者 张超 熊颖 张祺 陈继军 《微生物学免疫学进展》 2019年第2期17-21,共5页
目的瞬时表达人源重组抗狂犬病病毒单克隆抗体,并对抗体性质进行分析。方法 PCR法扩增抗体轻、重链可变区并分别构建真核表达质粒;瞬时转染HEK293 EBNA1细胞;抗体经亲和纯化后,CE-SDS法分析纯化后抗体单体比例,用快速荧光灶抑制试验(RFF... 目的瞬时表达人源重组抗狂犬病病毒单克隆抗体,并对抗体性质进行分析。方法 PCR法扩增抗体轻、重链可变区并分别构建真核表达质粒;瞬时转染HEK293 EBNA1细胞;抗体经亲和纯化后,CE-SDS法分析纯化后抗体单体比例,用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)分析抗体体外抗狂犬病病毒中和活性,ELISA分析抗体与3aG、CTN、PV及CVS株的结合。结果提取瞬时表达质粒的A260/280 nm比值在2.0~2.1之间纯化后抗体非还原CE-SDS单体纯度为74.4%;还原CE-SDS抗体轻、重链峰合计占比超过95%;抗体RFFIT体外中和活性为293.37 IU/mL,比活达628.21 IU/mg,抗体与3aG、CTN、PV及CVS株交叉反应均为阳性。结论该株抗体具有较高体外抗狂犬病病毒中和活性,与主要疫苗株均有较强结合。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 单克隆抗体 快速荧光灶抑制试验(rffit) 瞬时表达
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抗狂犬病病毒中和抗体效价快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的建立及应用 被引量:19
16
作者 吴小红 李加 +5 位作者 唐建蓉 Hervé Bourhy 刘景华 曲效民 曹守春 董关木 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第11期1145-1148,共4页
目的建立抗狂犬病病毒中和抗体效价的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),验证其与小鼠脑内中和法(MNT)的相关性,并用于马抗狂犬病病毒血清(ERIG)和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG)及狂犬病疫苗免疫后血清中和抗体效价的测定。方法待测血清或免疫球蛋... 目的建立抗狂犬病病毒中和抗体效价的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),验证其与小鼠脑内中和法(MNT)的相关性,并用于马抗狂犬病病毒血清(ERIG)和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG)及狂犬病疫苗免疫后血清中和抗体效价的测定。方法待测血清或免疫球蛋白在96孔板中作3倍系列稀释,与能感染80%~95%细胞量的攻击病毒混合后,37℃体外中和1h,接种BSR细胞,培养24h后荧光染色,荧光显微镜下读取结果。用建立的RFFIT法与MNT法同时标定狂犬病免疫球蛋白国家标准品,并检测ERIG和HRIG以及疫苗免疫后血清样品的抗狂犬病病毒中和抗体效价,以比较两种方法的精密度和相关性。结果采用MNT法和RFFIT法检测我国抗狂犬病免疫球蛋白国家标准品的GMT分别为21.4和23.8IU/ml,两种方法的变异系数分别为62.3%和13.3%;两个实验室用RFFIT法测定我国国家标准品的结果分别为21.71和23.81IU/ml。两种方法测定ERIG和HRIG及疫苗免疫后血清中和抗体效价的结果差异无统计学意义,相关系数为0.976,两种方法的检测结果之间呈良好的正相关性。结论RFFIT法可替代MNT法检测抗狂犬病病毒中和抗体效价。 展开更多
关键词 狂犬病 中和抗体 快速荧光灶抑制试验 小鼠脑内中和法
原文传递
狂犬病抗血清WHO标准品和国家标准品用于RFFIT方法的比较 被引量:2
17
作者 于鹏程 申辛欣 +2 位作者 吕新军 单虎 唐青 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期91-93,共3页
目的比较狂犬病快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法中狂犬病免疫球蛋白WHO标准品和狂犬患者免疫球蛋白国家标准品为参照所得结果的差异。方法在同一次RFFIT试验中同时设置WHO标准品参照和国家标准品参照,同时测定12份待测人血清,比较两... 目的比较狂犬病快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法中狂犬病免疫球蛋白WHO标准品和狂犬患者免疫球蛋白国家标准品为参照所得结果的差异。方法在同一次RFFIT试验中同时设置WHO标准品参照和国家标准品参照,同时测定12份待测人血清,比较两种标准品所产生荧光灶的百分比;按照中和抗体滴度计算公式计算不同标准品参照所得12份待测血清抗体滴度,比较其差异。结果结果显示WHO标准品和国家标准品的50%感染量均出现在第5孔和第6孔之间,但国家标准品荧光灶百分比低于WHO标准品;以WHO标准品做参照所得到的同一份血清滴度略高于国家标准品。结论WHO标准品和国家标准品在RFFIT方法中存在差异,但不影响结果判定。 展开更多
关键词 参考标准 狂犬病快速荧光灶抑制试验 中和试验
原文传递
一例狂犬病病例的实验室诊断及其启示 被引量:9
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作者 李幸乐 黄学勇 +1 位作者 孙建伟 吕新军 《疾病监测》 CAS 2014年第3期186-190,共5页
目的通过1例人狂犬病病例的实验室确诊探讨人狂犬病病例实验室诊断的可行性及其对狂犬病防控的意义。方法对存活疑似人狂犬病病例的唾液、脑脊液、血清标本采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT... 目的通过1例人狂犬病病例的实验室确诊探讨人狂犬病病例实验室诊断的可行性及其对狂犬病防控的意义。方法对存活疑似人狂犬病病例的唾液、脑脊液、血清标本采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)进行实验室确诊;通过RFFIT对密切接触个例血清抗狂犬病病毒中和抗体进行检测。结果病例唾液标本用RT-PCR方法检测获得狂犬病病毒核蛋白、RNA聚合酶基因预期扩增片段,序列测定和分析进一步证实为狂犬病病毒。病例血清标本经RFFIT检测抗狂犬病病毒中和抗体阳性。1名病例密切接触者按照狂犬病暴露进行暴露后预防处置,血清抗狂犬病病毒中和抗体检测为阳性。结论 1例疑似人狂犬病病例经实验室诊断确诊为狂犬病病例,实验室检测结果对指导个案处置有现实意义。 展开更多
关键词 狂犬病 反转录-聚合酶链反应 快速荧光灶抑制试验 实验室诊断
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快速荧光灶抑制试验检测暴露后人群接种狂犬病疫苗的免疫学效果 被引量:3
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作者 陆菁 杨玉颖 +9 位作者 钱晓华 李晓军 杨佳平 吕新军 黄卓英 谭顺荣 朱江 王丽 李崇山 孙晓冬 《中国疫苗和免疫》 CAS 2013年第4期345-348,374,共5页
目的调查暴露后人群接种狂犬病疫苗(Rabies Vaccine for Human Use,RabV)的免疫学效果。方法 122例暴露后,病例接种RabV后应用快速荧光灶抑制试验检测抗体产生情况。结果 3剂免疫后抗体阳性率达99.1%,5剂免疫后抗体阳性率为100%;不同性... 目的调查暴露后人群接种狂犬病疫苗(Rabies Vaccine for Human Use,RabV)的免疫学效果。方法 122例暴露后,病例接种RabV后应用快速荧光灶抑制试验检测抗体产生情况。结果 3剂免疫后抗体阳性率达99.1%,5剂免疫后抗体阳性率为100%;不同性别病例抗体几何平均滴度差异无统计学意义。青少年接种RabV的应答较快,中老年接种RabV的应答较慢。结论对要确定是否需要接受RabV加强接种以建立一个可接受的暴露前免疫状态,对有免疫缺陷等身体状况特殊者,有必要检测接种RabV后的中和抗体,对未产生抗体者应及时补充免疫,确保免疫学效果。 展开更多
关键词 暴露后人群 人用狂犬病疫苗 中和抗体 快速荧光灶抑制试验
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狂犬病疫苗和人狂犬病免疫球蛋白联合应用早期免疫效果分析 被引量:4
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作者 朱泽荣 鲁莎 +3 位作者 朱政纲 张曼 郑熠 胡权 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期228-232,共5页
目的揭示狂犬病疫苗和人狂犬病免疫球蛋白(human rabies immunoglobulin,HRIG)联合应用早期免疫效果。方法采用快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)检测观察对象血清狂犬病病毒中和抗体(rabies v... 目的揭示狂犬病疫苗和人狂犬病免疫球蛋白(human rabies immunoglobulin,HRIG)联合应用早期免疫效果。方法采用快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)检测观察对象血清狂犬病病毒中和抗体(rabies virus neutralizing antibodies,RVNA),比较狂犬病Ⅲ级暴露人群联合使用狂犬病疫苗和HRIG后第0、1、7、14、45天的RVNA水平,进一步分析不同性刖、年龄组、接种方案免疫效果的差异和变化趋势。结果在免疫后的相同时间,不同性别、年龄绀、接种方案之间比较,各组血清阳转率(seroeonversion rate,SCR)差异无统计学意义,在第14天均能达到100%阳转率;前14天的RVNA效价波动曲线存在多种方式,既有逐步上升,也有快速上升和快速下降的不同现象。结论狂犬病疫苗和HRIG联合应用后,前14天的RVNA动态曲线呈现多样性,在此期间不能从RVNA水平证实全部观察对象得到有效保护。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 人狂犬病免疫球蛋白 狂犬病病毒中和抗体 快速荧光灶抑制试验
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