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视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞裸鼠皮下移植瘤的建立 被引量:2
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作者 杨一涛 唐罗生 +5 位作者 曾祥云 董晓光 李学喜 袁思奇 张海清 宋华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期3071-3074,共4页
目的建立视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度HXO-RB44细胞的致瘤效果。方法将90只试验动物随机分成A、B、C3个组,每组裸鼠分别皮下注射浓度为1.0×108/mL、2.0×108/mL和3.0×108/mL的HXO-RB44细... 目的建立视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度HXO-RB44细胞的致瘤效果。方法将90只试验动物随机分成A、B、C3个组,每组裸鼠分别皮下注射浓度为1.0×108/mL、2.0×108/mL和3.0×108/mL的HXO-RB44细胞悬液各0.2mL。观察HXO-RB44细胞的成瘤时间、肿瘤生长情况、肿瘤大小及裸鼠摄食和活动状况。结果观察4周后,A组裸鼠无一成瘤。B组裸鼠仅5只成瘤。C组裸鼠有27只造模成功,成瘤率达90.00%。B组裸鼠的平均成瘤时间为21、34、5d,C组裸鼠的平均成瘤时间为18、32、3d,B、C两组时间之间进行比较,P<0.05,差异有显著性。小鼠成瘤后,出现消瘦、体重减轻、食欲精神不佳等症状。结论HXO-RB44细胞裸鼠皮下移植瘤的致瘤效果与细胞浓度密切相关。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 HXO-rb44细胞 裸鼠 皮下移植瘤
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Effects of salvianolic acid B on in vitro growth inhibition and apoptosis induction of retinoblastoma cells 被引量:6
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作者 Xing-An Liu Department of Radiotherapy, People’s Hospital of Zhengzhou, Zhengzhou 450003, Henan Province, China 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2012年第3期272-276,共5页
AIM: To observe the effects of salvianolic add B (SalB) on in vitro growth inhibition and apoptosis induction of retinoblastoma HXO-RB44 cells. METHODS: The effects of SalB on the HXO-RB44 cells proliferation in vitro... AIM: To observe the effects of salvianolic add B (SalB) on in vitro growth inhibition and apoptosis induction of retinoblastoma HXO-RB44 cells. METHODS: The effects of SalB on the HXO-RB44 cells proliferation in vitro were observed by MTT colorimetric method. The morphological changes of apoptosis before and after the treatment of SalB were observed by Hoechst 33258 fluorescent staining method. Apoptosis rate and cell cycle changes of HXO-RB44 cells were detected by flow cytometer at 48 hours after treated by SalB. The expression changes of Caspase-3 protein in HXO-RB44 cells were detected by Western Blot. RESULTS: SalB significantly inhibited the growth of HXO-RB44 cells, while the inhibition was in a concentration-and time-dependent manner. The results of fluorescent staining method indicated that HXO-RB44 cells showed significant phenomenon of apoptosis including karyorrhexis, fragmentation and the formation of apoptotic bodies, etc. after 24, 48 and 72 hours co-culturing of SalB and HXO-RB44 cells. The results of flow cytometer showed that the apoptosis rate and the proportion of cells in S phase were gradually increased at 48 hours and 72 hours after treated by different concentrations of SalB. Western Blot strip showed that the expression of Caspase-3 protein in HXO-RB44 cells was gradually increased with the increase of the concentration of SalB. CONCLUSION: SalB can significantly affect on HXO-RB44 cells growth inhibition and apoptosis induction which may be achieved through the up-regulation of Caspase-3 expression and the induction of cell cycle arrest. 展开更多
关键词 salvianolic acid B HXO-rb44 cell APOPTOSIS Caspase-3 protein
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纳米脂质体槲皮素联合8-Br-cAMP对Rb44细胞凋亡的影响
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作者 郭慧丽 张明昌 +2 位作者 郑乃刚 吴景兰 王爱凤 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第3期393-395,共3页
目的:探讨纳米脂质体槲皮素(nLQ)和8-Br-cAMP(Br)对人视网膜母细胞瘤Rb44细胞凋亡和p53、p21waf1mRNA表达及Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响。方法:Rb44细胞分为4组:nLQ组给予终浓度为40μmol/LnLQ;Br组给予终浓度为2×10-5mol... 目的:探讨纳米脂质体槲皮素(nLQ)和8-Br-cAMP(Br)对人视网膜母细胞瘤Rb44细胞凋亡和p53、p21waf1mRNA表达及Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响。方法:Rb44细胞分为4组:nLQ组给予终浓度为40μmol/LnLQ;Br组给予终浓度为2×10-5mol/LBr,联合用药组给予同上浓度的nLQ和Br,对照组不给药。采用TUNEL法检测各组细胞的凋亡率。采用原位杂交技术检测p53、p21waf1mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,单用nLQ或Br均可增高凋亡率,上调p53和p21waf1mRNA的表达及Bax和Caspase-3蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达(P<0.001);nLQ及Br联用呈现协同效应(P<0.001)。结论:nLQ和8-Br-cAMP可能通过上调p53和p21waf1基因的表达,诱导线粒体途径和Caspase-3的最终共同凋亡途径而诱导Rb44细胞趋向凋亡,且两药联用呈现协同效应。 展开更多
关键词 凋亡 纳米脂质体槲皮素 8-BR-CAMP rb44细胞
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8-Br-cAMP诱导人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞系的凋亡效应
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作者 邓新国 吴景兰 +3 位作者 宫璀璀 田小莉 庞广仁 林少春 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第1期55-57,共3页
   目的:探讨 8 -Br- cAMP对人视网膜母细胞瘤HXO Rb44细胞系的凋亡效应。方法:以 8-Br- cAMP体外作用HXO -Rb44细胞,分为 3个实验组和 3个对照组,分别进行 24h, 48h和 72h培养。应用RNA斑点印迹、免疫组化斑点印迹及原位杂交技术,...    目的:探讨 8 -Br- cAMP对人视网膜母细胞瘤HXO Rb44细胞系的凋亡效应。方法:以 8-Br- cAMP体外作用HXO -Rb44细胞,分为 3个实验组和 3个对照组,分别进行 24h, 48h和 72h培养。应用RNA斑点印迹、免疫组化斑点印迹及原位杂交技术,分别对HXO -Rb44细胞的bcl 2杂交信号和PCNA、Fas、FasL表达信号进行检测。采用TUNEL法检测HXO -Rb44细胞的凋亡率。结果:在不同培养时间的实验组中HXO -Rb44细胞的凋亡率明显高于各自的对照组(未经 8- Br- cAMP处理);而PCNA、Fas、bcl- 2杂交信号扫描数值低于对照组,FasL杂交信号扫描数值高于对照组,尤以 48h的作用最显著。结论: 8- Br cAMP可能是通过下调细胞内的bcl -2基因、Fas和PCNA的表达和上调FasL的表达而诱导HXO- Rb44细胞系凋亡。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 凋亡 8-BR-CAMP
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曲古菌素A对视网膜母细胞瘤Hxo-rb44细胞凋亡及Sur-vivin、c-Myc表达的影响
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作者 王国军 胡燕华 +1 位作者 李鹏程 徐茜 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第2期324-326,共3页
目的探讨曲古菌素A(TSA)对人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株Hxo-rb44细胞凋亡和Survivin、c-Myc表达的影响。方法将人Rb细胞株Hxo-rb44进行培养传代,流式细胞仪检测不同浓度的TSA作用不同时间对Hxo-rb44细胞周期和凋亡的影响,用Westernblot... 目的探讨曲古菌素A(TSA)对人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株Hxo-rb44细胞凋亡和Survivin、c-Myc表达的影响。方法将人Rb细胞株Hxo-rb44进行培养传代,流式细胞仪检测不同浓度的TSA作用不同时间对Hxo-rb44细胞周期和凋亡的影响,用Westernblot法检测凋亡过程中Survivin和c-Myc蛋白表达的变化。结果TSA可明显诱导细胞发生G2期阻滞及细胞凋亡,而且与药物作用时间呈依赖关系(r=0.97,P=0.02);Westernblot法可以观察到Survivin和c-Myc的表达水平随着TSA作用时间的延长而下降(P均<0.01)。结论TSA可以有效诱导人Rb细胞株Hxo-rb44细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制与抑制Survivin和c-Myc表达有关。 展开更多
关键词 曲古菌素A 视网膜母细胞瘤 Hxo—rb44细胞 细胞周期阻滞 凋亡 Survivin、c-Myc
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纳米脂质体槲皮素联合8-Br-cAMP诱导人Rb44细胞恶性逆转化效应
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作者 郭慧丽 张明昌 +2 位作者 李宝华 李金萍 吴景兰 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第7期633-636,643,共5页
目的纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,nLQ)可抑制PI3K/AKt信号途径,8-Br-cAMP为PKAII型激动剂,探讨二者协同诱导人视网膜母细胞瘤(retinoblasto-ma,Rb)44细胞的恶性逆转化效应。方法将培养的Rb44细胞分为4组:(1)加纳米脂质体... 目的纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,nLQ)可抑制PI3K/AKt信号途径,8-Br-cAMP为PKAII型激动剂,探讨二者协同诱导人视网膜母细胞瘤(retinoblasto-ma,Rb)44细胞的恶性逆转化效应。方法将培养的Rb44细胞分为4组:(1)加纳米脂质体槲皮素(终浓度为40μmol.L-1)组(nLQ组);(2)加8-Br-cAMP(终浓度为20μmol.L-1)组(Br组);(3)联合药物组(nLQ+Br组);(4)不加药物培养的对照组。以MTT实验检测培养的各组Rb44细胞生长抑制率,采用免疫细胞化学和蛋白质免疫斑点印迹检测PTEN、cyclinD1、c-myc、p21waf1、MMP9及VEGF的表达,原位杂交技术检测p16、Rb抑癌基因的表达。结果 MTT实验显示联合药物组的细胞生长抑制率显著高于任何单个药物组。与对照组相比,nLQ和8-Br-cAMP组明显抑制培养的Rb44细胞的生长,并呈现协同抑制效应。免疫细胞化学及蛋白质免疫斑点印迹显示:与对照组相比,cyclinD1、c-myc、MMP9、VEGF的表达下调,PTEN、p21waf1表达上调。原位杂交显示:与对照组相比,药物组的p16及Rb抑癌基因的表达上调。结论 nLQ或8-Br-cAMP可诱导人Rb44细胞恶性逆转化,且呈协同效应。 展开更多
关键词 恶性逆转化 纳米脂质体槲皮素 8-BR-CAMP rb44细胞
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褪黑素对裸鼠HXO-RB_(44)细胞皮下移植瘤的抑制作用 被引量:1
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作者 杨一涛 唐罗生 +4 位作者 曾祥云 董晓光 李学喜 袁思奇 刘艳芳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第11期815-820,共6页
目的研究褪黑素(melatonin,MLT)对裸鼠HXO-RB44细胞皮下移植瘤的生长抑制作用及其相关机制。方法50只裸鼠视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组10只:A组为阴性对照组;B组、C组、D组分别为低、中、高浓度ML... 目的研究褪黑素(melatonin,MLT)对裸鼠HXO-RB44细胞皮下移植瘤的生长抑制作用及其相关机制。方法50只裸鼠视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组10只:A组为阴性对照组;B组、C组、D组分别为低、中、高浓度MLT治疗组;E组为阳性对照组。低、中、高浓度MLT治疗组分别按每只每次腹腔注射MLT20 mg.kg-1、40mg.kg-1、60 mg.kg-1各2 mL进行给药,阴性对照组注射等量生理盐水,阳性对照组每只每次腹腔注射等量足叶乙甙(4 mg.kg-1);每天给药1次,共7 d。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体质量的变化。采用组织病理学检查,观察裸鼠移植瘤的形态学特征;采用免疫组织化学、Western blotting检测肿瘤细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达情况。结果E组白细胞、血红蛋白、血小板计数值及谷丙转氨酶、谷草转氨酶、次黄嘌呤核苷值与A组相比,差异均有统计学意义(P均<0.05),MLT各治疗组裸鼠血常规结果及肝、肾功能与A组相比,差异无统计学意义(P>0.05);不同时间点B组、C组、D组裸鼠体质量与A组比较,差异无统计学意义(P>0.05);B组裸鼠皮下移植瘤肿瘤质量与A组相比,差异无统计学意义(P>0.05),表明低剂量的MLT对裸鼠移植瘤的生长无抑制作用,C组、D组与A组进行比较,差异均有显著统计学意义(P均<0.01),表明大剂量的MLT对裸鼠移植瘤的生长有抑制作用;低、中、高浓度MLT治疗组及阳性对照组裸鼠移植瘤抑瘤率分别为12.50%、27.89%、40.72%、44.52%;组织病理学检查发现MLT治疗组及E组肿瘤内出血、坏死的程度明显高于阴性对照组,免疫组织化学及Western blotting检测发现MLT治疗组VEGF、ICAM-1及其蛋白的表达明显低于阴性对照组;MLT的治疗剂量与VEGF、ICAM-1蛋白的表达呈高度负相关。结论MLT对HXO-RB44细胞皮下移植瘤生长有抑制作用;MLT能抑制裸鼠移植瘤内VEGF、ICAM-1蛋白的表达,其浓度与VEGF、ICAM-1蛋白的表达呈高度负相关。 展开更多
关键词 褪黑素 HXO-rb44细胞 裸鼠 移植瘤
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HXO-RB_(44)细胞上清液对ARPE-19细胞内VEGF表达的影响
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作者 杨一涛 曾祥云 +1 位作者 唐罗生 李学喜 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第10期878-882,共5页
目的探讨HXO-RB44细胞上清液对人视网膜色素上皮(RPE)细胞系ARPE-19细胞内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其相关机制。方法分别利用含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基及MEM培养基对HXO-RB44细胞及ARPE-19细胞进行培养,在ARPE-19细... 目的探讨HXO-RB44细胞上清液对人视网膜色素上皮(RPE)细胞系ARPE-19细胞内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其相关机制。方法分别利用含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基及MEM培养基对HXO-RB44细胞及ARPE-19细胞进行培养,在ARPE-19细胞内加入100μL HXO-RB44细胞上清液,分别干预0、4、8、12、24 h,利用RT-PCR、免疫荧光细胞化学、Western blot等方法,检测不同浓度的MLT干预后24 h ARPE-19细胞内VEGF mRNA及蛋白的表达情况。结果HXO-RB44细胞上清液加入后的不同时间点,VEGF mRNA的表达差异有统计学意义(F=195.072,P=0.000)。随着HXO-RB44细胞上清液作用时间的延长,ARPE-19细胞内VEGF mRNA表达逐渐增高(P<0.01)。HXO-RB44细胞上清液加入后4、8、12、24 h,ARPE-19细胞内VEGF蛋白表达显著增加(F=160.687,P=0.000),其表达与ARPE-19细胞内VEGF mRNA表达方式相同(P<0.05)。随着HXO-RB44细胞上清液作用时间的延长,ARPE-19细胞内绿荧光蛋白强度逐渐增加。结论HXO-RB44细胞上清液能促进ARPE-19细胞内VEGF的表达。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 血管内皮生长因子 ARPE-19 HXO-rb44细胞
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KAI1对HXO—Rb44细胞同质性黏附、迁移和侵袭能力的影响
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作者 闫慧 季迅达 赵培泉 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS 2012年第4期212-216,共5页
目的研究肿瘤转移抑制基因KAI1对人视网膜母细胞瘤HXO.Rb44细胞黏附力、运动力和侵袭力的影响。方法实验研究。应用脂质体转染法将含KAI1的真核表达质粒pCMV—KAI1转染人HXO—Rb44细胞株,命名为HXO—Rb44-KAI1,使其KAI1蛋白过表达。... 目的研究肿瘤转移抑制基因KAI1对人视网膜母细胞瘤HXO.Rb44细胞黏附力、运动力和侵袭力的影响。方法实验研究。应用脂质体转染法将含KAI1的真核表达质粒pCMV—KAI1转染人HXO—Rb44细胞株,命名为HXO—Rb44-KAI1,使其KAI1蛋白过表达。以转染空载体质粒pcDNA3.1(+)及未转染质粒的HXO—Rb44细胞作为对照,分别命名为HXO—Rb44.KAI1/zero及HXO—Rb44。质粒转染48h后,吹散细胞,显微镜下观察三组细胞的同质性黏附情况;应用Transwell小室及其联合Matrigel分别进行迁移和侵袭实验。100倍光镜下观察进入Transwell下室的细胞并随机选取5个视野进行细胞计数,采单因素方差分析对三组细胞的迁移和侵袭能力进行比较。结果质粒转染48h后,PCR及WesternBlot显示HX0-Rb44-KAI1细胞的KAI1表达明显强于HXO-Rb44-KAI1/zero及HXO—Rb44细胞。HXO—Rb44-KAI1细胞的同质性黏附力明显强于HXO-Rb44-KAI1/zero及HXO—Rb44细胞。Transwell迁移实验显示,100倍镜下下室中平均每视野细胞数,HXO—Rb44-KAI1组为(20.4±4.0)个,HXO-Rb44-KAI1/zero组为(46.0±4.5)个,HXO-Rb44组为(52.1±3.6)个,差异有统计学意义(F=256.71,P〈0.01)。侵袭实验显示100倍镜下下室中平均每视野细胞数,HXO—Rb44-KAI1组为(16.7±3.3)个,HXO—Rb4J4.KAI1/zero组为(42.5±3.7)个,HXO—Rb44组为(47.3±5.2)个,差异有统计学意义(F=235.12.P〈0.01)。结论KAI1可显著增强HXO—Rb44细胞同质性黏附力,抑制其运动力和侵袭力。 展开更多
关键词 KAI1 视网膜母细胞瘤 HXO—rb44 细胞黏附 细胞运动 细胞浸润
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