抗肿瘤和乙肝双效IL18-HBVS基因疫苗的构建

目的]探讨IL_18及乙肝病毒S基因(HBVS)的联合功效。[方法]从胎肝组织中抽提总RNA ,RT-PCR扩增IL-18cDNA基因。从载体 pcDNA3.0/S中限制性酶切获取HBVS基因 ,然后 ,将其与IL -18cDNA一并亚克隆到真核表达质粒 pIRES-EGFP中。[结果]构建了具有抗肿瘤及乙肝双重功效的IL18_HBVS乙肝基因疫苗。

pVVP3IL-18HN核酸疫苗的构建及其对喉癌细胞杀伤作用的研究

目的通过构建共表达凋亡素基因、新城疫病毒HN基因和白介素18(interleukin-18,IL-18)基因的核酸疫苗,观察联合应用此三种基因对喉癌细胞的杀伤效应。方法在真核表达质粒pVAX1中的CMV启动子下游插入凋亡素基因和含有IL-18HN嵌合基因并携带IRES启动子的基因片段,构建能同时表达三种基因的真核表达质粒pVVP3IL-18HN,经RT-PCR、间接免疫荧光和Western-blot法检测外源基因的表达。采用脂质体介导法将构建的重组质粒pVVP3IL-18HN体外转染Hep-2细胞,运用MTT法检测不同质粒浓度、不同作用时间,该重组质粒对喉癌细胞Hep-2的杀伤率。结果pVVP3IL-18HN可有效杀伤喉癌细胞,且在作用72h、质粒浓度为20μg/ml时杀伤率最高,达61.9%。结论重组质粒pVVP3IL-18HN能有效杀伤Hep-2细胞,可用于喉癌的治疗和研究。

四价重组人乳头瘤病毒疫苗(6/11/16/18型)(汉逊酵母)Ⅰ期临床研究中的免疫原性观察

目的在Ⅰ期临床研究中初步评价四价重组人乳头瘤病毒疫苗(HPV6/11/16/18型)(汉逊酵母)在18~45岁健康女性人群的免疫原性。方法单中心、随机、双盲、安慰剂对照,采用0、2、6月免疫程序,按照2∶1的比例随机接种实验疫苗和对照疫苗(实验组:60人,安慰剂组:30人)并采集受试者0 d、180 d及210 d血清样本,检测HPV6/11/16/18型中和抗体,观察抗体阳转率和抗体水平。结果完成2剂疫苗免疫后(180 d)和全程免疫后30 d(210 d)的抗体阳转率较为接近,各型抗体阳转率均在85%~100%之间;完成全程免疫后30 d抗体几何平均滴度(GMT)较免疫前显著提高。结论本品Ⅰ期临床研究入组的18~45岁健康女性人群接种实验疫苗后产生良好的免疫应答,可检测到明显高于首剂免疫前和安慰剂对照组的抗体水平。