rAAV2-ND4基因玻璃体腔注射对Leber遗传性视神经病变的疗效评价

目的评价基因治疗Leber遗传性视神经病变(LHON)的安全性及临床效果。方法采用多中心前瞻性非随机对照临床试验研究设计,于2017年12月至2018年2月在十堰市太和医院眼科中心招募线粒体DNA 11778位点突变的LHON患者40例80眼,以视力较差眼或右眼(双眼视力相等时)行玻璃体腔内注射重组腺相关病毒2-还原型辅酶Ⅰ脱氢酶4(rAAV2-ND4),对侧眼作为未注射眼,并依此分为注射眼组和未注射眼组,每组40眼。分别于术前和术后1、3、6、12个月采用两用对数视力表测量患者最佳矫正视力(BCVA);采用非接触眼压计测量眼压;采用裂隙灯显微镜观察眼前节表现;采用CR-2免扩瞳眼底照相机检查眼底情况。对注射眼组与未注射眼组基因治疗前后视力、眼压变化及并发症发生情况进行比较。评估治疗有效率,以BCVA提高≥0.3 LogMAR为有效。结果40例患者中23例患者视力提高≥0.3 LogMAR,有效率为57.5%,其中注射眼组视力提高6眼,未注射眼组视力提高4眼,双眼同时提高者13例。未注射眼组和注射眼组治疗后12个月BCVA分别为(1.51±0.62)LogMAR和(1.62±0.58)LogMAR,较治疗前的(1.75±0.46)LogMAR和(1.83±0.47)LogMAR明显提高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。2个组BCVA总体比较差异无统计学意义(F组别=0.084,P=0.772);2个组治疗前后眼压总体比较差异均无统计学意义(F组别=0.557,P=0.575;F时间=2.314,P=0.106)。所有患者治疗后及随访期间均未发生严重并发症。结论rAAV2-ND4基因玻璃体腔内注射治疗LHON安全、有效,基因药物的单眼玻璃体腔内注射可以改善患者双眼视力。

HPLC测定重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液中抗氧剂及其降解物

目的 建立HPLC对重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液中11种抗氧剂及其降解物含量测定方法。方法 采用饱和硫酸铵沉淀蛋白,离心后上清液转移至经甲醇活化后的C_(18)固相萃取小柱中,分别用4 mL甲醇、5 mL乙酸乙酯依次洗脱小柱,洗脱液用甲醇-乙酸乙酯(2∶3)混合溶剂定容后过0.22μm PTFE疏水滤膜,经HPLC分析,外标法定量。色谱条件:Kinetex■ XB-C_(18) 100A(100 mm×4.6 mm,2.6μm)色谱柱,检测波长230 nm,柱温箱30℃,进样量5μL,流速0.4 mL·min^(–1),流动相0.1%甲酸-甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B),运行时间45 min。结果 11种目标物在2.5~35μg·mL^(–1)内线性关系良好(R~2≥0.99)。在25,10,5μg·mL^(–1) 3个浓度水平下,平均加样回收率为88.1%~106.5%,RSD为0.10%~9.05%。6份样品重复性RSD为2.01%~4.77%,12份样品中间精密度RSD为2.58%~9.75%,对3批次重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液的0月,25℃加速3月及6月正/倒置样品进行检测,结果显示所有批次样品在不同检测点均未有抗氧剂及其降解物浸出。结论 该方法专属性好、准确度与精密度高、溶液稳定性好、方法耐用性高,能够用于对药品中抗氧剂类物质的含量检测。

重组促胰岛素分泌素对2型糖尿病患者血浆FGF-21水平的影响

目的探讨注射用重组促胰岛素分泌素(recomb inant exend in-4 for in jection,E-4)治疗对2型糖尿病(T2DM)患者血浆成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)水平的影响。方法采用酶联免疫法测定40例健康对照和33例T2DM患者血浆FGF-21水平以及使用E-4治疗前后的变化,探讨血浆FGF-21水平与体重指数(BM I)、腰臀比(WHR)、血脂、血糖及胰岛素等的关系。结果 T2DM患者血浆FGF-21水平明显升高〔(2.16±0.20)vs(1.53±0.36)μg/L,P<0.05〕。多元逐步回归分析表明,HbA1 c及TG是影响血浆FGF-21水平的独立危险因素(YFGF-21=1.370+0.069XHbA1 c+0.056XTG)。E-4治疗后T2DM患者血浆FGF-21水平明显低于用药前〔(2.15±0.21)vs(1.99±0.12)μg/L,P<0.05〕。结论 T2DM患者血浆FGF-21水平改变可能与其代谢紊乱和胰岛素抵抗有关,并可能是E-4作用的生物靶点之一。

重组人血管内皮抑素联合西妥昔单抗和FOLFIRI方案治疗晚期结直肠癌的临床研究

目的探讨重组人血管内皮抑制素注射液联合西妥昔单抗注射液和FOLFIRI方案治疗晚期结直肠癌的临床疗效。方法选取2014年3月—2016年3月天津市公安医院收治的晚期结直肠癌化疗患者的80例,随机分为对照组和治疗组,每组各40例。对照组静脉滴注西妥昔单抗注射液,首次剂量400 mg/m^2,维持剂量250 mg/m^2;并在西妥昔单抗治疗结束后60 min开始进行FOLFIRI方案:治疗第1天静脉滴注盐酸伊立替康注射液,180 mg/m^2加入到生理盐水250 m L中;治疗第1、2天静脉滴注亚叶酸钙注射液,200 mg/m^2加入到生理盐水250 m L中;治疗第1天静脉推注氟尿嘧啶注射液,400 mg/m^2,然后2 400 mg/m^2持续静脉泵入。治疗组在对照组基础上静脉滴注重组人血管内皮抑制素注射液,15 mg加入到生理盐水500m L中,连续治疗10 d。两组患者均以2周为1个疗程,治疗4个疗程。观察两组的临床疗效,比较两组的免疫功能和肿瘤标志物水平情况。结果治疗后,对照组和治疗组的客观反应率(ORR)分别为45.0%、67.5%,疾病控制率(DCR)分别为85.0%、92.5%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组CD^(4+)、CD^(4+)/CD^(8+)均显著升高,而CD^(8+)均显著下降,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组这些观察指标的改善程度明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组这些观察指标的下降程度明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。两组无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)和不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论重组人血管内皮抑制素注射液联合西妥昔单抗注射液和FOLFIRI方案治疗晚期结直肠癌具有较好的临床疗效,可改善免疫功能,降低肿瘤标志物水平,具有一定的临床推广应用价值。