苦参碱调节RhoA-ROCK信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响

目的探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响。方法建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg^(-1))组、苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))组及苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))+LPA组(10 mg·kg^(-1))。超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心肌梗死情况;TUNEL染色进行心肌组织中细胞凋亡情况检测;试剂盒检测RhoA活性;Western Blot法进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达水平检测。结果与对照组比较,模型组心肌组织有大量蓝色胶原纤维沉积,左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室缩短分数(left ventricular shortening fraction,LVFS)、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,Matrine-L组、苦参碱高剂量组心肌组织蓝色胶原纤维逐渐减少,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平依次明显降低,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平依次明显升高(P<0.05)。与苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+LPA组心肌组织蓝色胶原纤维增多,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05)。结论苦参碱通过抑制RhoAROCK信号通路调节Th17/Treg细胞平衡,改善冠心病大鼠心肌损伤。

支气管肺发育不良小鼠肺组织FOXP3^(+)调节性T细胞(Treg)数量减少且向RORγt^(+)FOXP3^(+)Treg转换

目的 探讨调节性T淋巴细胞(Treg)表型转换在支气管肺发育不良(BPD)小鼠肺组织中的作用。方法 C57BL/6新生小鼠随机分成空气组及高氧组,每组10只,高氧组建立新生小鼠高氧暴露的BPD动物模型。在小鼠生后7 d和14 d,每组各处死5只小鼠,取出新鲜肺组织。HE染色观察肺组织病理变化,Western blot法检测肺表面活性蛋白C(SP-C)表达水平;流式细胞术检测肺组织中叉头盒P3(FOXP3)^(+)Treg及维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)^(+)FOXP3^(+)Treg占CD4^(+)淋巴细胞百分比,ELISA检测肺组织中白细胞介素17A(IL-17A)、 IL-6的含量。采用Spearman相关分析法分析FOXP3^(+)Treg与SP-C相对表达量的相关性以及RORγt^(+)FOXP3^(+)Treg与IL-17A、 IL-6含量的相关性。结果 与同时间点空气组相比,高氧组肺泡结构简单化,放射状肺泡计数与SP-C相对表达水平均明显下降,高氧组FOXP3^(+)Treg占比减少,RORγt^(+)FOXP3^(+)Treg占比增多,肺组织IL-17A、 IL-6含量明显升高。FOXP3^(+)Treg与SP-C相对表达水平呈正相关,RORγt^(+)FOXP3^(+)Treg与IL-17A、 IL-6含量呈正相关。结论 BPD小鼠肺组织FOXP3^(+)Treg数量减少并向RORγt^(+)FOXP3^(+)Treg转换,可能参与高氧所致肺损伤。

Regulatory T cells in skin regeneration and wound healing

As the body’s integumentary system,the skin is vulnerable to injuries.The subsequent wound healing processes aim to restore dermal and epidermal integrity and functionality.To this end,multiple tissue-resident cells and recruited immune cells cooperate to efficiently repair the injured tissue.Such temporally-and spatially-coordinated interplay necessitates tight regulation to prevent collateral damage such as overshooting immune responses and excessive inflammation.In this context,regulatory T cells(Tregs)hold a key role in balancing immune homeostasis and mediating cutaneous wound healing.A comprehensive understanding of Tregs’multifaceted field of activity may help decipher wound pathologies and,ultimately,establish new treatment modalities.Herein,we review the role of Tregs in orchestrating the regeneration of skin adnexa and catalyzing healthy wound repair.Further,we discuss how Tregs operate during fibrosis,keloidosis,and scarring.

清肠化瘀方治疗溃疡性结肠炎疗效及对IDO、Treg/Th17平衡的影响

【目的】观察清肠化瘀方治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的临床疗效,并探讨其治疗机制。【方法】将96例大肠湿热型活动期UC患者随机分为研究组和对照组,每组各48例。2组患者均给予美沙拉嗪肠溶片口服,研究组同时给予口服中药清肠化瘀方治疗,对照组同时给予口服清肠化瘀方低剂量配方颗粒(安慰剂,药物含量为试验药品的2.5%)治疗,2组疗程均为12周。观察2组患者治疗前后中医证候评分、改良Mayo评分、Baron内镜评分、血清吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)、白细胞介素(IL)-10、转化生长因子β(TGF-β)、IL-17、IL-21水平和外周血调节性T淋巴细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)含量的变化情况,并比较2组患者的临床疗效(包括有效率和缓解率)及肠镜疗效(包括内镜应答率和黏膜愈合率)。【结果】(1)治疗12周后,研究组的临床有效率、临床缓解率、内镜应答率、黏膜愈合率分别为95.83%(46/48)、83.33%(40/48)、97.92%(47/48)、91.67%(44/48),对照组分别为75.00%(36/48)、60.42%(29/48)、79.17%(38/48)、70.83%(33/48),组间比较,研究组的临床有效率、临床缓解率、内镜应答率、黏膜愈合率均高于对照组(P<0.05或P<0.01)。(2)治疗后,2组患者的腹痛、腹泻、脓血便、里急后重等各项中医证候评分以及改良Mayo评分和Baron内镜评分均较治疗前明显降低(P<0.01),且研究组的降低作用均明显优于对照组(P<0.01)。(3)治疗后,2组患者的血清IDO、IL-17、IL-21水平和外周血Th17含量均较治疗前明显降低(P<0.01),血清IL-10、TGF-β水平和外周血Treg含量均较治疗前明显升高(P<0.01),且研究组对血清IDO、IL-17、IL-21水平和外周血Th17含量的降低作用以及对血清IL-10、TGF-β水平和外周血Treg含量的升高作用均明显优于对照组(P<0.01)。【结论】清肠化瘀方应用于大肠湿热型活动期UC的治疗,可有效改善患者中医证候,促进肠黏膜的修复和愈合,临床疗效和肠镜疗效更优,其机制可能与通过抑制IDO的高表达而调节Treg/Th17平衡有关。

苦参碱调节IL-6/STAT3/NF-κB信号通路对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model组,低、中、高剂量MT组(MT-L组,50 mg/kg;MT-M组,100 mg/kg;MT-H组,200 mg/kg),美沙拉嗪组(MSLM组,0.42 g/kg)、MT-H+rIL-6(IL-6激活剂)组(200 mg/kg+0.05 mg/kg),每组18只。除CK组外,其余组大鼠均采用50 g/L三硝基苯磺酸(20 mg/kg)缓冲液与500 mL/L乙醇按照1∶1比例混匀后灌肠以构建炎症性肠病大鼠模型,建模成功后,分别进行给药处理,每天1次,持续7周。分别在给药1、3、5、7周时对大鼠进行体质量的测量;比较各组大鼠结肠长度的变化;HE染色检测大鼠结肠组织病理损伤;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17(IL-17)、IL-10水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例;Western blotting检测大鼠结肠组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达。结果与CK组比较,Model组大鼠结肠组织病理损伤严重,体质量(3、5、7周时)、IL-10水平、Treg细胞比例、Foxp3蛋白表达降低,结肠变短,TNF-α、IL-17水平、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、RORγt、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达增高(P<0.05);与Model组比较,MT-L组、MT-M组、MT-H组、MSLM组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);rIL-6减弱了高剂量MT对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的促进作用。结论MT可能通过抑制IL-6/STAT3/NF-κB信号通路,促进炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡。

GATA3+Treg细胞在变应性鼻炎中的表达及意义

目的 研究GATA3+Treg细胞在变应性鼻炎(AR)患者和小鼠中的表达和意义。方法 收集6例对照组患者(Control组)和6例变应性鼻炎患者(AR组)的鼻黏膜,检测其鼻黏膜炎症反应。同期收集12例Control组和12例AR组患者外周血单个核细胞(PBMC),检测其Treg细胞和GATA3+Treg细胞比例。将C57BL/6小鼠分为正常对照组(Control组)和变应性鼻炎组(AR组)。比较两组小鼠AR症状学评分、外周血OVA-sIgE水平、鼻黏膜炎症反应。收集小鼠脾脏,检测两组小鼠体内Treg细胞和GATA3+Treg细胞比例以及Th2细胞因子表达。结果 与Control组相比,AR组患者鼻黏膜中嗜酸性粒细胞浸润和杯状细胞增生明显增多(P<0.01),PBMC中Treg细胞和GATA3+Treg细胞表达下降(P<0.05)。动物实验发现:与Control组相比,AR组小鼠过敏症状评分、外周血OVA-sIgE水平、鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润和杯状细胞增生均明显增加(P<0.01)。与Control组相比,AR小鼠Treg细胞和GATA3+Treg细胞表达下调(P<0.01),并且Th2细胞因子IL-4、IL-6、IL-10表达上升(P<0.05)。结论GATA3+Treg细胞在AR患者和小鼠中表达下降,并可能与Th2细胞免疫应答相关,两者共同参与了AR的发生发展。GATA3+Treg细胞有望成为AR免疫调控的新靶点。

Th17细胞与IL-17在桥本甲状腺炎中的研究进展

桥本甲状腺炎患者血清与甲状腺组织内17型辅助T(Th17)细胞数量增多、白细胞介素17(IL-17)水平显著升高,且Th17细胞与调节性T细胞(Treg)比例失衡。Treg比例下降导致甲状腺内免疫抑制功能降低,而Th17细胞通过分泌IL-17等调节甲状腺内促炎细胞因子表达和介导甲状腺组织纤维化参与桥本甲状腺炎的发生发展。

新风胶囊通过BTLA-HVEM诱导Treg免疫耐受改善膝骨关节炎大鼠心肺功能

目的:观察膝骨关节炎(KOA)大鼠心肺功能的变化及新风胶囊(XFC)对其影响,探讨可能的分子机制。方法:按随机数字表将40只大鼠随机分为正常对照(NC)组,模型对照(MC)组,氨基葡萄糖对照(GS)组,XFC组,每组10只。除NC组外,采用关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸方法复制成KOA大鼠模型,造模后第14天开始给药。NC组及MC组均给予生理盐水,剂量为0.01 g/kg,其余2组分别给予GS、XFC混悬液,剂量分别为0.098 g/kg、0.375 g/kg。采用超声诊断仪检测大鼠心功能,动物肺功能仪检测大鼠肺功能,ELISA法检测BTLA、HVEM、IL-17、IL-4、TGF-β1;流式细胞术检测大鼠外周血CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达。结果:与NC组比较,MC组体质量、E、E/A、FVC、FEV1、FEF25、FEF50、FEF75、MMF、PEF,BTLA、HVEM、IL-4、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg明显降低,TGF-β1、IL-17明显升高(P<0.01或P<0.05)。与MC组比较,各组大鼠体质量,心功能参数E峰、E/A,肺功能参数FEV1、FEF50、FEF75、PEF,BTLA、HVEM、IL-4、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg明显升高,关节软骨Mankin评分、心系数、肺系数、TGF-β1、IL-17明显降低(P<0.01或P<0.05);与GS组相比,XFC组体质量、Treg升高最为明显(P<0.01或P<0.05)。结论:新风胶囊改善KOA大鼠关节软骨Mankin评分,改善其心肺功能,其机制可能是促进BTLA-HVEM负调共刺激信号作用,诱导Treg免疫耐受,上调IL-4表达,下调IL-17、TGF-β1表达,抑制异常免疫炎症反应。

HIV感染者Th17和Treg细胞的变化及意义

目的 观察人免疫缺陷病毒（HIV）感染者辅助性T细胞（Thelpcell，Th）17和调节性T细胞（regula—toryTcell，Treg）的数量、平衡状态变化及其意义。方法选取确诊的106例HIV感染者和30例健康体检者（健康对照组），采集静脉血，以流式细胞术检测CD4＋T细胞及Th17细胞与Treg细胞百分比，RT-PCR检测HWRNA病毒载量。结果HIV感染者CD4＋T细胞为13～702个／μL，分为4组，即A组：≤200个／μL，19例；B组：201-350个／μL，32例；C组：351～500个／止，26例；D组：500个／uL，29例；上述各组均明显低于健康对照组（798-1130个／μL）（P〈（）．05）。A、B、C、D组Th17细胞在CD4＋T细胞中的百分比分别为（0．73±0．21）％、（1．52±0．33）％、（2．92±0．46）％、（3．74±0．58）％，均低于健康对照组的（4．90±1．43）％（P〈0．05）；A、B、C、D组及健康对照组Treg细胞在CD4＋T细胞中的百分比分别为（9．78±2．15）％、（7．23±1．72）％、（5．69±1．67）％、（4．62±0．97）％、（4．43±0．97）％，除D组与健康对照组之差异无统计学意义（P〉0．05），其余组均高于健康对照组（P〈（0.05）。HIV感染者病毒载量水平为（0～5．36）×10^7拷贝／mL，平均（5．36±1．21）x106拷贝／mL；A、B、C、D组的病毒载量分别为（6．24±1．36）×10^7，拷贝／mL、（4．36±1．02）×10^6拷贝／mL、（5．78±1．67）×10^4拷贝／mL、（3．54±1．25）×10^3拷贝／mL，各组间比较，差异有统计学意义（P〈0．05），且与CD4＋T细胞计数呈负相关。结论HIV感染导致The7和CD4十T细胞下降、Th17和Treg细胞矢衡，与HIVRNA载量负相关；与疾病进展密切相关。

双阴性调节性T细胞(DN Tregs)在系统性红斑狼疮患者外周血中的变化及意义

目的研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血中TCRαβ^+CD3^+CD4^-CD8^-T细胞即双阴性调节性T细胞(double negative regulatory T cells,DN Tregs)的表达水平及功能,并探讨DN Tregs在SLE疾病进程中的作用。方法通过流式细胞术检测20例SLE患者及20例健康对照者外周血CD3^+TCRαβ^+细胞中DN Tregs细胞的比例;采用ELISA的方法检测SILE患者及健康对照者血浆中IFN-γ,TNF-α,IL-6和IL-17A的表达水平,并分析DN Tregs与各细胞因子的相关性。结果与健康对照组相比,SLE患者组DN Tregs占TCRαβ^+细胞的比例升高,两组之间差异有统计学意义(t=3.54,P<0.01),SLE患者血浆中IFN-γ,TNF-α和L-6水平高于对照组,两组之间差异均具有统计学意义(t=2.824,2.085,2.304,均P<0.05)。DN Tregs的水平与IFN-γ的含量呈正相关(r=0.52,P=0.02),而与TNF-α,IL-6的含量无相关性(r值分别为0.17和0.16,P值分别为0.47和0.49)。结论 SLE患者外周血DN Tregs细胞比例显著上升,DN Tregs细胞可能在SLE发病及进展中发挥重要作用。

肝癌组织中TGF-β1表达与Treg浸润的关系及其临床意义

背景与目的:调节性T细胞(Treg)在肿瘤组织局部浸润增多,而对其来源报道较少。体外研究表明转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)能诱导Treg的产生,而肝癌组织中TGF-β1表达与Treg浸润的关系尚未阐明。本研究旨在检测肝癌组织中TGF-β1表达,并分析其与Treg浸润的关系,探讨TGF-β1表达,Treg浸润的临床意义。方法:采用免疫组织化学染色的方法检测102例肝癌组织、癌旁肝组织中TGF-β1和Foxp3表达(Foxp3+)。结果:肝癌组织中TGF-β1低表达组41例,高表达组61例,高表达阳性率为59.8%;癌旁组织中TGF-β1低表达组22例,高表达组80例,高表达阳性率为78.4%,癌组织和癌旁高表达率差异有统计学意义(P=0.001)。肝癌组织中Foxp3+细胞平均密度为2.98个/HP,癌旁极少见或未见。肝癌组织中TGF-β1与Foxp3表达呈正相关(r=0.228,P=0.021)。肝癌组织中TGF-β1表达在术前血浆AFP浓度高水平组高于低水平组(P=0.023),而与肿瘤直径、肿瘤包膜、肝硬化等临床病理资料无关;肝癌组织中Foxp3表达与肿瘤直径、肿瘤包膜、肝硬化等临床病理资料无关。肝癌组织中TGF-β1表达高低水平组患者5年生存率差异无统计学意义(P=0.790);肝癌组织中Treg高水平组患者的5年生存率低于低水平组(25%vs.44%,P<0.005)。多因素Cox回归模型分析显示Foxp3+细胞数量、肿瘤包膜是影响肝癌患者预后的独立危险因素(P值分别为0.021、0.001)。结论:肝癌组织中Treg浸润可能与TGF-β1表达有关,两者的关系需进一步研究;肝癌组织中Treg数量可作为预测患者术后预后的免疫学指标。

结核性胸膜炎患者胸水和外周血Treg细胞及DC细胞亚群的检测

目的:探讨CD4+CD25+CD127-调节性T细胞及DC细胞亚群在结核性胸膜炎患者外周血及胸腔积液中的表达变化及其临床意义。方法:采集30例健康正常者的外周血以及30例结核性胸膜炎患者的外周血和胸水,应用流式细胞术检测各标本中DC1、DC2亚群、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞数量的变化。结果:患者外周血的DC1/PBMC、DC2/PBMC明显低于健康正常外周血(P<0.05);患者胸水中检测到DC细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.503及0.437,P<0.05);患者PBMC中的Treg细胞值明显高于健康正常PBMC(P<0.05);患者胸水中检测到Treg细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.672,P<0.05)。结论:结核性胸膜炎患者外周血中树突状细胞数量比正常对照组低,而Treg的数量较正常对照组高,与正常对照组相比存在显著性差异,表明CD4+CD25+CD127-调节性T细胞和DC细胞亚群可能在结核性胸膜炎中发挥着重要的作用。

Th17/Treg细胞失衡与乙肝病毒感染相关性肝病的关系

HBV感染相关性肝病是我国乃至全世界的一种常见性传染性疾病、发病率高、病程长、预后差,目前乙肝相关性肝病发病机制并不完全明确,HBV持续感染与机体免疫应答紧密相关,同时HBV的持续感染是引起宿主免疫调节紊乱,导致不能有效清除病毒、病情迁延不愈的原因之一,加之Th17/Treg细胞失衡可能参与了乙肝相关性肝病异常免疫反应,从而导致乙肝相关性肝病炎症慢性化、肝组织纤维化、肝硬化和癌变的形成。本文就Th17/Treg细胞失衡与乙肝相关性肝病的相互关系进行了综述和展望。

红景天提取物对Lewis肺癌小鼠移植瘤中CD4^+CD25^+Treg的抑制作用

目的:观察红景天提取物(sachalin rhodiola rhizome extract,SRR)对Lewis肺癌小鼠移植瘤中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的抑制作用,初步探讨其抑制肿瘤生长的机制。方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为3组:SRR组,紫杉醇(paclitaxel,PTX)阳性对照组和PBS组,记录各组小鼠移植瘤体积变化,计算抑瘤率并观察小鼠生存期。流式细胞术检测移植瘤组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例,荧光定量PCR检测移植瘤组织中Foxp3和TGF-βmRNA的表达水平。结果:在建模第20天,SRR组小鼠移植瘤体积明显小于PBS组[(719.6±2.4)vs(1030.5±3.1)mm3,P<0.05],但与阳性对照PTX组无显著差异(P>0.05)。SRR组小鼠生存期较PBS组显著延长[(36.0±1.0)vs(22.0±2.0)d,P<0.01],而与PTX组无显著差异(P>0.05)。SRR治疗组小鼠移植瘤组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的比例显著低于PBS组[(8.5±0.3)%vs(11.2±0.2)%,P<0.01],但与PTX组无显著差异(P>0.05)。SRR组小鼠移植瘤组织中Foxp3 mRNA[(1.2±0.2)vs(2.1±0.2),P<0.05]、TGF-βmRNA[(1.2±0.1)vs(2.1±0.2),P<0.05]表达均明显低于PBS组,而与PTX组无显著差异(P>0.05)。结论:SRR可能通过下调肿瘤组织中CD4+CD25+Treg比例、Foxp3和TGF-βmRNA的表达,增强机体的抗肿瘤免疫应答。

Foxp3在小鼠肺发育中的动态表达及意义

目的:通过分析叉头样转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)在小鼠肺发育过程中的表达及其与肺发育相关标志物之间的关系,探讨Foxp3在肺发育中的可能作用。方法:根据小鼠肺发育的进程,选取胎鼠及新生鼠分为6组,分别于孕17.5 d及出生后1、4、7、14、21 d留取肺组织,HE染色观察肺组织形态,免疫组织化学染色检测CD31含量并观察肺微血管密度。qRT-PCR检测Foxp3及肺表面活性蛋白C(surfactant protein C,SP-C)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)、血管生成素-1(angiopoietin 1,Ang-1)mRNA表达,蛋白质印迹法检测Foxp3及SP-C、VEGF-A、Ang-1蛋白表达。结果:肺组织内Foxp3 mRNA在孕17.5 d小管期表达最高,后呈现不断减少趋势。SP-C mRNA在小鼠出生后1 d表达最高,随后逐渐减弱,直至肺泡化晚期。VEGF-A、Ang-1 mRNA在孕17.5 d表达最高,之后呈现不断减少趋势,最终趋于稳定。Foxp3蛋白在小管期已有表达,且在小管期及囊泡期表达最高,其后逐渐趋于平稳,VEGF-A及Ang-1在小管期及囊泡期表达亦最高,后逐渐减少;SP-C表达于出生后1 d达到最高,随后逐渐减少,并于肺泡化中晚期趋于平稳。相关性分析显示,Foxp3与SP-C、VEGF-A及Ang-1存在相关性(r分别为0.661、0.630和0.738)。结论:Foxp3在胎肺期及出生后早期呈现动态表达,Foxp3在小管期及囊泡早中期的高表达与SP-C、VEGF-A及Ang-1呈正相关,提示Foxp3可能促进肺泡上皮细胞及肺血管内皮细胞的增殖,参与肺发育过程。

大细胞肺癌中VEGF的表达与DCs Treg分布的相关性研究

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大细胞肺癌(large cell lung cancer,LCLC)肿瘤组织中的表达及树突状细胞(dendritic cells,DCs)、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在肿瘤组织和癌旁正常组织中的分布情况,探讨VEGF的表达情况、DCs与Treg的分布情况之间的相关性,及DCs、Treg分布与患者临床特征间的关系。方法:收集天津医科大学附属肿瘤医院自2000年5月至2010年10月手术切除的原发性LCLC标本75例,其中27例癌旁正常组织作为对照。采用免疫组织化学法检测LCLC标本中VEGF的表达、未成熟DC细胞(CD1a^+DC)、成熟DC细胞(CD83^+DC)及Treg细胞(Foxp3^+T细胞)的分布,并分析它们之间的相关性及与患者临床特征的关系。结果:75例癌组织中VEGF的阳性率为94.7%(71/75);CD1a^+DC、CD83^+DC在癌组织中的分布均显著低于癌旁正常组织(P=0.005、P<0.001);Foxp3^+T在癌组织中的分布显著高于癌旁正常组织(P<0.001)。CD83^+DC的分布在VEGF阳性组明显低于VEGF阴性组(χ~2=7.802,P=0.020);CD1a^+DC与Foxp3^+T的分布呈正相关(r_s=0.246,P=0.033)。CD83^+DC的分布在不同T分期间存在差异,随着T分期增高其数量降低(χ~2=11.043,P=0.011)。结论:LCLC组织中VEGF高表达与成熟DC数量的减少相关,而未成熟DC的分布与Treg细胞的分布呈正相关。

Th17和Treg细胞及其平衡对甲状腺相关眼病的影响

甲状腺相关性眼病(TAO)是一种器官特异性自身免疫性疾病,其引起的一系列症状使患者的健康水平、生活质量明显下降。TAO的发病机制尚未完全阐明,目前缺乏统一、成熟的治疗方案。辅助性T17(Th17)细胞、调节性T(Treg)细胞及其失衡与TAO的免疫学发病机制密切相关。目前认为Th17细胞所分泌的细胞因子可促进TAO的炎症反应和眼眶结缔组织的纤维化,抑制TAO眼眶结缔组织的成脂分化。而Treg细胞对TAO的影响以发挥免疫抑制作用、延缓疾病进展为主。Th17、Treg细胞之间存在动态平衡关系,Th17/Treg细胞的失衡能够推动TAO的发生发展。本文主要阐述Th17、Treg细胞及其平衡对TAO的影响机制,并对不同研究结果间的差异原因进行分析,以期为TAO发病机制的研究及临床对因治疗提供一定参考。

Th17/Treg失衡在2型糖尿病伴慢性牙周炎患者中的临床意义

目的:观察2型糖尿病(T2DM)伴慢性牙周炎(CP)患者外周血中T辅助细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)及细胞因子水平及与牙周状态的关系。方法:流式细胞术检测健康人(Ⅰ组)21例,单纯T2DM(Ⅱ组)25例,T2DM伴轻度CP(Ⅲ组)22例以及T2DM伴中重度CP(Ⅳ组)20例患者外周血中Th17、Treg细胞比例,ELISA法检测血清中白介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)浓度,牙周检查记录牙周袋深度(PD)、出血指数(BI)。结果:Ⅳ组Th17、Th17/Treg以及IL-17水平较Ⅰ组和Ⅱ组更高(P<0.05),Th17、Th17/Treg、IL-17与PD、BI均呈正相关(P<0.05)。结论:Th17/Treg失衡可能在T2DM伴CP的发生发展中发挥重要作用。

急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)的动态变化研究

目的动态观察急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的变化,探讨其临床意义。方法收集2012年2月-2012年12月在吉林大学中日联谊医院神经内科住院的发病7天内的急性动脉粥样硬化性脑梗死患者(即梗死组)48例,同期住院健康体检者(即对照组)30例。其中,梗死组按照时间(第1、2、3、5、7天)进行分组,采用流式细胞仪法测定全部人群外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)水平,分别比较各组外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)水平,并分析其在梗死不同时间水平的变化,进行统计分析。常规检测血常规。结果梗死组患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)百分比在第1天、第2天低于对照组,第5天、第7天高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),第3天略低于对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。梗死组第1-2天血常规中白细胞及中性粒细胞较正常值显著异常升高,且中性粒细胞与Treg细胞百分比呈负性相关(相关系数r为-0.664,P<0.01)。结论外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平变化可以成为评估急性动脉粥样硬化性脑梗死患者早期脑缺血的非侵入性指标;Treg细胞可作为急性动脉粥样硬化性脑梗死患者免疫稳态失衡和炎症反应的标志物之一。

非小细胞肺癌组织中Treg与PET／CT SUVmax的相关性及其对预后的影响

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)组织中Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)与18F-脱氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose,FDG)PET/CT原发灶最大标准摄取值(maximum standardized uptake value,SUVmax)的相关性及其对临床预后的影响。方法:收集2008年3月至2014年10月天津医科大学肿瘤医院收治的122例原发性NSCLC患者的临床、影像、病理、组织标本及随访资料。采用免疫组化法检测肺癌组织中Treg浸润情况。采用Kaplan-Meier法分析患者生存情况,并分析Treg浸润情况与原发灶SUVmax的相关性,及与各临床病理因素的关系。结果:Treg浸润情况与原发灶SUVmax呈正相关(r=0.291,P=0.001)。Treg及SUVmax均以临界值(cut off)值分高低两组,单因素分析显示Treg、SUVmax是影响患者预后的危险因素;临床资料分析显示,肿瘤越大、肿瘤分期越高,Treg浸润越严重(P<0.05)。Cox多因素分析显示肿瘤TNM分期(HR=7.537,95%CI:1.191-2.855,P=0.006)为患者生存的独立预后影响因子。结论:NSCLC组织中Treg浸润与PET/CT SUVmax正相关,PET/CT SUVmax可提示NSCLC患者肿瘤微环境中Treg浸润情况,对判断患者临床预后及临床用药有一定的指导作用。