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番茄红素通过SIRT1/NF-κB轴抑制肾癌786-O细胞增殖且促进其凋亡 被引量:1
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作者 刘伟 杨树芹 赵序雯 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期789-796,共8页
目的:探讨番茄红素通过沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)轴对肾癌786-O细胞增殖、凋亡的影响。方法:常规培养人正常肾细胞HK-2和人肾癌细胞786-O,实验分为对照组(0.1%DMSO)、顺铂组(40μg/mL)、番茄红素低质量浓度(2.5μg/... 目的:探讨番茄红素通过沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)轴对肾癌786-O细胞增殖、凋亡的影响。方法:常规培养人正常肾细胞HK-2和人肾癌细胞786-O,实验分为对照组(0.1%DMSO)、顺铂组(40μg/mL)、番茄红素低质量浓度(2.5μg/mL)组、番茄红素高质量浓度(5μg/mL)组、番茄红素(5μg/mL)+EX527(SIRT1抑制剂)(3μmol/L)组。CCK-8法、克隆形成实验检测各组HK-2、786-O细胞的增殖能力,流式细胞术检测各组786-O细胞的凋亡,RH123、DCFH-DA染色分别检测各组786-O细胞的线粒体膜电位(MMP)、活性氧(ROS)水平,WB法检测各组786-O细胞中凋亡相关蛋白BAX、Bcl-2、C-casp3和SIRT1/NF-κB轴相关蛋白SIRT1、p-NF-κB蛋白的表达。786-O细胞移植瘤实验检测番茄红素低(5 mg/kg)、高质量浓度(20 mg/Kg)、顺铂(2 mg/kg)、番茄红素(20 mg/kg)+EX527(10 mg/kg)对移植瘤生长的影响,TUNEL法检测各组移植瘤组织中的细胞凋亡。结果:番茄红素呈剂量依赖性地抑制786-O细胞的增殖活性,番茄红素、顺铂均明显抑制786-O细胞的克隆形成能力且促进其凋亡,细胞中MMP损伤率升高而ROS水平降低,凋亡相关蛋白BAX、C-casp3表达均显著升高(均P<0.05)而Bcl-2表达下调(P<0.05),SIRT1表达显著升高(P<0.05)而p-NF-κB的表达显著降低(P<0.05),上述作用均可被EX527逆转;番茄红素、顺铂抑制786-O细胞移植瘤的生长且促进其细胞凋亡,其作用也能被EX527逆转。结论:番茄红素通过上调SIRT1、抑制NF-κB通路的激活进而抑制786-O细胞增殖且诱导其凋亡。 展开更多
关键词 肾癌 786-o细胞 番茄红素 沉默信息调节因子1 核因子-κB 增殖 凋亡
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Translating new data to the daily practice in second line treatment of renal cell carcinoma:The role of tumor growth rate 被引量:1
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作者 Enrique Grande Olga Martínez-Sáez +1 位作者 Pablo Gajate-Borau Teresa Alonso-Gordoa 《World Journal of Clinical Oncology》 CAS 2017年第2期100-105,共6页
The therapeutic options for patients with metastatic renal cell carcinoma(mRCC) have completely changed during the last ten years. With the sequential use of targeted therapies, median overall survival has increased i... The therapeutic options for patients with metastatic renal cell carcinoma(mRCC) have completely changed during the last ten years. With the sequential use of targeted therapies, median overall survival has increased in daily practice and now it is not uncommon to see patients surviving kidney cancer for more than four to five years. Once treatment fails with the first line targeted therapy, head to head comparisons have shown that cabozantinib, nivolumab and the combination of lenvatinib plus everolimus are more effective than everolimus alone and that axitinib is more active than sorafenib. Unfortunately, it is very unlikely that we will ever have prospective data comparing the activity of axitinib, cabozantinib, lenvatinib or nivolumab. It is frustrating to observe the lack of biomarkers that we have in this field, thus there is no firm recommendation about the optimal sequence of treatment in the second line. In the absence of reliable biomarkers, there are several clinical endpoints that can help physicians to make decisions for an individual patient, such as the tumor burden, the expected response rate and the time to achieve the response to each agent, the prior response to the agent administered, the toxicity profile of the different compounds and patient preference. Here, we propose the introduction of the tumor-growth rate(TGR) during first-line treatment as a new tool to be used to select the second line strategy in m RCC. The rapidness of TGR before the onset of the treatment reflects the variability between patients in terms of tumor growth kinetics and it could be a surrogate marker of tumor aggressiveness that may guide treatment decisions. 展开更多
关键词 AXITINIB EVEROLIMUS Cabozantinib Kidney cancer Nivolumab renal cell Sequence Second line SORAFENIB TUMOR-GROWTH rate
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lncRNA LUCAT1通过靶向调控miR-199a-5p/HIF-1α促进肾透明细胞癌786-O细胞的增殖和迁移 被引量:7
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作者 林其玲 陈畅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期273-281,共9页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)786-O细胞的增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法:选取2... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)786-O细胞的增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法:选取2013年6月至2017年6月宜昌市第一人民医院泌尿外科行手术切除的40例ccRCC患者癌组织及相应的癌旁组织样本,组织均经病理检查诊断明确。ccRCC细胞株786-O、ACHN、UM-RC-2及正常肾上皮细胞系KiMA培养完成后,用qPCR法检测cc RCC组织和细胞株中miR-199-a-5p、HIF-1α和LUCAT1T mRNA的表达,用CCK-8实验检测786-O细胞的增殖能力,Transwell法检测786-O细胞的迁移能力,双荧光素酶报告基因实验验证LUCAT1与miR-199a-5p的靶向作用关系,Western blotting实验检测LUCAT1、miR-199a-5p对HIF-1α蛋白表达的影响。结果:LUCAT1在ccRCC组织和细胞系786-O、ACHN和UM-RC-2中呈高表达(均P<0.01),敲低LUCAT1后可明显抑制786-O细胞的增殖和迁移(均P<0.01)。miR-199a-5p在ccRCC组织和细胞系中呈低表达(均P<0.01),StarBase数据库分析结果显示LUCAT1含有miR-199a-5p的保守目标位点,miR-199a-5p对LUCAT1-Wt的报告活性具有明显的抑制作用(P<0.01);敲低LUCAT1可明显降低miR-199a-5p的表达(P<0.01)。LUCAT1在转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中呈低表达,但在LUCAT1+miR-199a-5p模拟物共转染的786-O细胞中出现逆转(P<0.05或P<0.01)。转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平升高,而LUCAT1过表达可逆转该效应(P<0.05或P<0.01)。转染miR-199a-5p模拟物抑制786-O细胞的增殖和迁移,而转染LUCAT1可部分消除转染miR-199a-5p模拟物对786-O细胞增殖和迁移的影响(P<0.05或P<0.01)。结论:lncRNA LUCAT1通过靶向调节miR-199a-5p/HIF-1α的表达从而在ccRCC中发挥促癌效应。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 肺癌相关转录物1 miR-199a-5p HIF-1Α 肾透明细胞癌 786-o细胞 增殖 迁移
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大麻素受体1对肾癌细胞786-O增殖及迁移能力的影响 被引量:1
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作者 王建丰 徐云泽 +1 位作者 黄翼然 张进 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2016年第8期627-631,共5页
目的探索大麻素受体1(CB1)在肾癌组织中表达及对肾癌细胞系786-O相关生物学功能的影响。方法采用免疫组化实验方法检测肾癌组织标本中CB1表达情况;应用CB1拮抗剂AM251处理786-O肾癌细胞株,观察细胞的增殖及迁移能力的改变。结果免疫组... 目的探索大麻素受体1(CB1)在肾癌组织中表达及对肾癌细胞系786-O相关生物学功能的影响。方法采用免疫组化实验方法检测肾癌组织标本中CB1表达情况;应用CB1拮抗剂AM251处理786-O肾癌细胞株,观察细胞的增殖及迁移能力的改变。结果免疫组化结果显示相对于癌旁组织,肾癌组织中CB1表达量较高;通过CB1拮抗剂AM251处理后,786-O肾癌细胞增值能力明显下降:25μmol/L组48h和72h抑制率分别为28.09±2.99和32.83±1.53;50μmol/L组48h和72h抑制率分别为78.59±5.69和88.02±5.34,其IC50在48h和72h分别为(38.20±4.75)μmol/L和(35.30±4.80)μmol/L;经过CB1拮抗剂AM251处理后迁移能力发生显著下降:与对照组细胞迁移数目(184.33±11.06)相比,20μmol/L AM251处理组(114±9.64,P=0.001 7)、30μmol/L AM251处理组(41.67±3.51,P=0.001 5)随着药物浓度的升高迁移细胞呈明显减少趋势。结论 CB1可能参与肾癌发生发展,为寻找潜在的新的治疗靶点提供理论依据。 展开更多
关键词 肾癌 786-o 大麻素受体1 AM251
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腺病毒重组人白细胞介素24对肾癌细胞株786-O细胞生长和凋亡的影响 被引量:1
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作者 范毛川 杨晓亮 +3 位作者 朱峰 余沁楠 郭康 郭会敏 《河南医学研究》 CAS 2019年第4期582-585,共4页
目的探讨腺病毒重组人白细胞介素24(IL-24)对肾癌细胞株786-O细胞的生长和凋亡的影响。方法将培养的肾癌细胞株786-O细胞随机分为空白对照组、阴性对照组(转染腺病毒重组人IL-24对照组)及实验组(转染腺病毒重组人IL-24组)。取对数生长... 目的探讨腺病毒重组人白细胞介素24(IL-24)对肾癌细胞株786-O细胞的生长和凋亡的影响。方法将培养的肾癌细胞株786-O细胞随机分为空白对照组、阴性对照组(转染腺病毒重组人IL-24对照组)及实验组(转染腺病毒重组人IL-24组)。取对数生长期肾癌细胞株786-O,构建腺病毒重组人IL-24及对照并转染至肾癌细胞株786-O实验组细胞及阴性对照组细胞。使用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测肾癌细胞株786-O生长能力;采用流式细胞术检测肾癌细胞株786-O凋亡情况;应用Western Blot检测肾癌细胞株786-O中MMP-9蛋白的表达水平。结果实验组肾癌细胞株786-O细胞增殖能力低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肾癌细胞株786-O细胞表面磷脂酰丝氨酸表达水平高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肾癌细胞株786-O细胞中MMP-9蛋白表达水平低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组与阴性对照组肾癌细胞株786-O细胞增殖能力、细胞膜表面磷脂酰丝氨酸表达水平、MMP-9蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论转染腺病毒重组人IL-24可抑制肾癌细胞株786-O细胞的生长并诱导细胞凋亡,腺病毒重组人IL-24可能通过下调MMP-9诱导肾癌细胞株786-O细胞的凋亡。 展开更多
关键词 肾癌细胞株786-o细胞 腺病毒重组人白细胞介素24 金属基质蛋白酶 细胞凋亡
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肾癌细胞系SN12C和786-O无血清培养的干细胞球特性的比较
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作者 张艳辉 孙保存 +3 位作者 赵秀兰 刘志勇 姚欣 董学易 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期1021-1025,共5页
目的:本研究通过比较SN12C和786-O两株肾癌细胞系中肿瘤干细胞特征的差异性,初步探讨筛选肾癌干细胞更有效的方法。方法:以无血清培养法培养SN12C和786-O细胞,比较其在不同时间形成肿瘤干细胞球的差异;应用流式细胞术分析SN12C和786-O... 目的:本研究通过比较SN12C和786-O两株肾癌细胞系中肿瘤干细胞特征的差异性,初步探讨筛选肾癌干细胞更有效的方法。方法:以无血清培养法培养SN12C和786-O细胞,比较其在不同时间形成肿瘤干细胞球的差异;应用流式细胞术分析SN12C和786-O球体细胞中干细胞标志物的表达情况;利用裸鼠体内成瘤模型检测SN12C和786-O球体细胞成瘤能力。结果:SN12C较786-O更易形成肿瘤干细胞球且所需时间更短,即786-O在无血清培养的第7天开始形成规则的球体,而SN12C则在第5天就已形成规则的球体。SN12C和786-O球体细胞中干细胞指标表达量亦有显著性差异,在SN12C球体细胞中CD133、CD44、Nanog和Oct3/4比例明显高于786-O球体细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。裸鼠体内的成瘤能力实验发现SN12C明显强于786-O球体细胞。结论:SN12C肾癌细胞系通过无血清培养方法富集肿瘤干细胞球明显多于786-O,是获得肿瘤干细胞较好的研究对象。 展开更多
关键词 肾癌 肿瘤干细胞 SN12C细胞 786-o细胞
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索拉非尼对肾癌786-O细胞株体外培养的增殖抑制作用 被引量:3
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作者 孙时华 严富华 +1 位作者 姜建军 毛兴梅 《浙江医学》 CAS 2010年第4期517-518,599,共3页
目的探讨索拉非尼对体外培养的肾癌786-O细胞株细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法体外培养人肾癌786-O细胞株,给予不同浓度(10.0、50、25、1.0、0.5μmol/L)的索拉非尼混合处理,采用MTT法检测细胞增殖的变化,并采用流式细... 目的探讨索拉非尼对体外培养的肾癌786-O细胞株细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法体外培养人肾癌786-O细胞株,给予不同浓度(10.0、50、25、1.0、0.5μmol/L)的索拉非尼混合处理,采用MTT法检测细胞增殖的变化,并采用流式细胞仪检测索拉非尼对786-O细胞凋亡和细胞周期变化的作用。结果经索拉非尼处理后,镜下可见786—O细胞株细胞结构消失,各孔内可见大量紫黑色针状结晶物,但随着药物浓度的升高,针状结晶物逐渐减少。与对照组比较,10.0、5.0和2.5μmol/L组吸光度值均显著下降(均P〈0.01)、细胞抑制率均显著升高(均P〈001),100和5.0umol/L组细胞存活率均显著下降(均P〈0.01)。与对照组比较,5.0、2.5、1.0μmol/L组G0/G1期细胞所占比例均显著升高(均P〈0.01)、S期细胞所占比例均显著下降(均P〈0.01);而GJM期细胞所占比例仅5.0μmol/L组显著升高(P〈0.01)。结论索拉非尼可以抑制人肾癌786-O细胞株的增殖,诱导肾癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 肾细胞癌 索拉非尼 786-o细胞 靶向治疗
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中药千金子对肾癌细胞株786-0增殖作用的影响及对G250蛋白影响研究 被引量:1
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作者 董建设 赵俊峰 +4 位作者 陈瑞廷 张林超 孙继建 潘世杰 杨锦建 《临床研究》 2017年第5期3-6,共4页
目的 探讨中药千金子对肾癌细胞株786-0增殖作用的影响及对G250蛋白的影响研究.方法 选用肾癌细胞株786-0,分为A组(对照)、B组(5 mg/mL)、C组(10 mg/mL)、D组(20 mg/mL),各组分别采用不同浓度千金子水溶液处理786-0细胞株.MTT... 目的 探讨中药千金子对肾癌细胞株786-0增殖作用的影响及对G250蛋白的影响研究.方法 选用肾癌细胞株786-0,分为A组(对照)、B组(5 mg/mL)、C组(10 mg/mL)、D组(20 mg/mL),各组分别采用不同浓度千金子水溶液处理786-0细胞株.MTT比色法检测细胞增殖抑制率,Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期变化,western blot法检测细胞Fas、Caspase3、Caspase7、G250蛋白表达水平,RT-PCR法检测细胞G250 mRNA表达水平.结果 ①各浓度千金子水溶液在24、48、72h对786-0细胞增殖抑制率较高,差异有统计学意义(P〈0.05),且浓度越高、作用时间越长,对细胞增殖的抑制作用越强.②B、C、D组细胞核均有明显的凋亡形态学变化.③与A组比较,C、D组细胞凋亡率较高(P〈0.05),C、D组G1期细胞比例较高(P〈0.05),C、D组S期及G2期细胞比例较低,差异有统计学意义(P〈0.05).④与A组比较,B、C、D组Caspase3、Caspase7蛋白表达水平较高(P〈0.05),C、D组Fas蛋白表达水平较高,差异均有统计学意义(P〈0.05).⑤与A组比较,B、C、D组G250 mRNA及G250蛋白表达水平较高,差异有统计学意义(P〈0.05).结论 中药千金子对肾癌细胞株786-0增殖有明显的抑制作用,其机制为上调G250抗原及Fas、Caspase3、Caspase7蛋白表达,促进细胞发生G1期阻滞,引起786-0细胞凋亡. 展开更多
关键词 千金子 肾癌细胞株786-0 细胞增殖 细胞周期 G250抗原
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青蒿素对肾癌细胞株786-0细胞的增殖和Fascin表达的影响 被引量:3
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作者 张静 查文清 +2 位作者 陈小鸿 蒋莉 蒋一雄 《中国医学创新》 CAS 2018年第24期29-31,共3页
目的:探讨青蒿素对肾癌细胞株786-0细胞的增殖和Fascin表达的影响。方法:选用786-0肾癌细胞株,分别通过不同浓度的青蒿素作用细胞株,收集不同时间点(0、24、48、72 h)的细胞,运用细胞增殖CCK-8法测定青蒿素对肾癌细胞株786-0细胞的增殖... 目的:探讨青蒿素对肾癌细胞株786-0细胞的增殖和Fascin表达的影响。方法:选用786-0肾癌细胞株,分别通过不同浓度的青蒿素作用细胞株,收集不同时间点(0、24、48、72 h)的细胞,运用细胞增殖CCK-8法测定青蒿素对肾癌细胞株786-0细胞的增殖;通过Western Blot检测青蒿素干预后肾癌细胞株786-0细胞Fascin的表达。结果:随着药物浓度的增加,青蒿素可明显抑制肾癌细胞株786-0细胞的增殖(P<0.01),青蒿素可显著降低肾癌细胞株786-0 Fascin蛋白的表达(P<0.05)。结论:青蒿素通过抑制肾癌细胞增殖和Fascin蛋白的表达,从而抑制肿瘤细胞的恶性增生。 展开更多
关键词 肾癌 青蒿素 肾癌细胞株786-0 增殖 FASCIN
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反义survivin基因对786-O细胞的体外作用及其对表阿霉素诱导细胞凋亡作用的观察 被引量:12
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作者 高晓康 李青 +4 位作者 王禾 杨波 袁建林 邵国兴 康福霞 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期468-470,共3页
目的研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对肾透明细胞癌786O细胞的survivin蛋白表达、细胞凋亡、增殖的影响,及其对表阿霉素诱导细胞凋亡的作用。方法设计并合成特异性靶向survivin的ASODN及正义寡核苷酸(SODN),将其转入786O细胞。设... 目的研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对肾透明细胞癌786O细胞的survivin蛋白表达、细胞凋亡、增殖的影响,及其对表阿霉素诱导细胞凋亡的作用。方法设计并合成特异性靶向survivin的ASODN及正义寡核苷酸(SODN),将其转入786O细胞。设空白对照组、脂质体对照组、SODN组和600nmol/LASODN组,处理24h后收获各组细胞。透射电子显微镜观察细胞形态变化,免疫组化法检测各组细胞survivin表达情况,流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡指数。结果ASODN组的细胞呈典型凋亡的形态学改变,而对照组细胞生长良好;ASODN组细胞survivin表达减弱,凋亡指数明显升高(P<0.05);转染ASODN24h后,表阿霉素诱导786O细胞凋亡的作用明显增强。结论survivinASODN能下调survivin蛋白表达,诱导肾透明细胞癌786O细胞凋亡,抑制786O细胞增殖,并增强表阿霉素诱导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 SURVIVIN蛋白 细胞凋亡 细胞增殖 肾透明细胞癌786-o细胞 表阿霉素 SURVIVIN反义寡核苷酸 SURVIVIN基因 肾透明细胞癌 阿霉素诱导
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SiRNA联合介导Livin和Survivin基因沉默诱导人肾癌细胞786-O化疗敏感性的实验研究 被引量:2
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作者 陈小刚 罗鹏程 +4 位作者 张青汉 袁平成 姜卫东 吴尚君 黄恩应 《临床泌尿外科杂志》 2014年第6期544-548,共5页
目的:观察siRNA联合介导Livin和Survivin基因的沉默诱导人肾癌细胞786-O化疗敏感性的作用。方法:构建Livin和Suvivin联合靶向的小干扰RNA(siRNA)重组表达载体shRNA,然后将目的载体转染于人肾癌细胞株786-O。应用实时荧光定量聚合酶链反... 目的:观察siRNA联合介导Livin和Survivin基因的沉默诱导人肾癌细胞786-O化疗敏感性的作用。方法:构建Livin和Suvivin联合靶向的小干扰RNA(siRNA)重组表达载体shRNA,然后将目的载体转染于人肾癌细胞株786-O。应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot方法分别检测转染前细胞经顺铂、5-FU和丝裂霉素处理后的Livin和Survivin基因的mRNA与蛋白水平的变化。应用CCK-8试验检测转染前后细胞对顺铂、5-氟尿嘧啶(5-FU)和丝裂霉素的半数致死量(IC50)、细胞增殖的变化。结果:CCK-8结果显示,联合介导Livin和Survivin基因沉默组细胞较分别单独介导细胞组化疗的敏感性明显增强(P<0.05),且转染前后细胞对顺铂、5-FU和丝裂霉素的IC50发生显著变化(P<0.05)。结论:SiRNA联合介导Livin和Survivin基因表达下调,发挥协同增强的siRNA作用。 展开更多
关键词 肾癌 SIRNA LIVIN基因 SURVIVIN基因 786-o细胞
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抑癌基因NPRL2对肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 蒋立 唐伟 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期47-52,共6页
抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator-like 2)在人类许多正常组织中均有明显的表达,而在人类多种肿瘤组织中的表达明显降低。该实验通过构建重组质粒pEGFP-N1-NPRL2并转染肾癌786-O细胞株,应用倒置荧光显微镜、RT-PCR和Western b... 抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator-like 2)在人类许多正常组织中均有明显的表达,而在人类多种肿瘤组织中的表达明显降低。该实验通过构建重组质粒pEGFP-N1-NPRL2并转染肾癌786-O细胞株,应用倒置荧光显微镜、RT-PCR和Western blot检测NPRL2基因的表达情况;MTT法检测786-O细胞增殖的情况;流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡情况。结果显示:肾癌786-O细胞株转染重组质粒pEGFP-N1-NPRL2后,通过荧光显微镜可以观察到绿色荧光;RT-PCR和Western blot检测到NPRL2基因的转录和蛋白质表达水平明显增加(P<0.05);MTT法检测发现72 h时pEGFP-N1-NPRL2组、pEGFP-N1组和空白对照组的细胞D490值分别为0.654±0.030、1.528±0.022和1.572±0.036,pEGFP-N1-NPRL2组细胞的增殖较其他两组受到明显的抑制(P<0.05);流式细胞仪检测显示pEGFP-N1-NPRL2组、pEGFP-N1组和空白对照组的凋亡率分别为18.82%±0.40%、5.65%±0.12%和5.85%±0.07%,而处于G0/G1期的细胞比例分别为69.80%±1.40%、46.24%±1.30%和47.03%±0.45%,与其他两组相比,pEGFP-N1-NPRL2组的凋亡率显著增高而且G0/G1期细胞明显增多,表现出G0/G1期阻滞。提示抑癌基因NPRL2的转染可以抑制786-O细胞的增殖,并诱导其凋亡将细胞周期阻滞于G0/G1期。 展开更多
关键词 NPRL2 786-o细胞 肾癌 增殖 凋亡
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肾癌细胞凋亡的超微结构改变 被引量:2
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作者 周鹤同 苏长青 《实用癌症杂志》 2001年第3期236-238,共3页
目的 观察肾癌细胞凋亡的形态学特征及凋亡过程中线粒体结构的变化 ,揭示线粒体在细胞凋亡过程中的作用。方法 采用 3种化疗药物诱导肾癌细胞株发生凋亡 ,再于光镜和电镜下观察肾癌细胞的形态结构改变。结果  3种药物均可诱导肾癌细... 目的 观察肾癌细胞凋亡的形态学特征及凋亡过程中线粒体结构的变化 ,揭示线粒体在细胞凋亡过程中的作用。方法 采用 3种化疗药物诱导肾癌细胞株发生凋亡 ,再于光镜和电镜下观察肾癌细胞的形态结构改变。结果  3种药物均可诱导肾癌细胞凋亡 ,有典型的细胞凋亡的形态学改变 ,线粒体结构改变早于细胞染色质结构改变。结论 线粒体在细胞凋亡的过程中起着重要的调控作用 。 展开更多
关键词 细胞凋亡 肾癌细胞株 线粒体 超微结构 肾癌
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RNA干扰ezrin基因真核生物表达载体的构建及鉴定
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作者 杨旭凯 王养民 +6 位作者 张斌 周逢海 董永超 景德善 常德辉 李卫平 郑少斌 《中国医药》 2012年第4期467-470,共4页
目的构建用于RNA干扰(RNAi)的小发夹RNAshRNA表达载体并检测其对ezrin基因的沉默效果。方法以ezrin为靶基因,以pGenesil-1质粒为载体,设计和构建重组体,根据GeneBank数据库提供的ezrin核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,设计2条小... 目的构建用于RNA干扰(RNAi)的小发夹RNAshRNA表达载体并检测其对ezrin基因的沉默效果。方法以ezrin为靶基因,以pGenesil-1质粒为载体,设计和构建重组体,根据GeneBank数据库提供的ezrin核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,设计2条小发夹结构的DNA序列,经退火形成互补双链,克隆到空载体pGenesil-1中,转化DH5a菌株,提取质粒,予以酶切和测序鉴定;重组质粒转染786-0肾癌细胞株,运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法进行筛选鉴定。结果酶切及测序鉴定表明成功地构建重组质粒shRNA—ezrin1、shRNA—ezrin2;荧光实时定量PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,肾癌细胞中shRNA—ezrin1、shRNA—ezrin2mRNA相对表达量分别为(0.3376±0.0166)及(0.4661±0.0266),shRNA—ezrin1与shRNA-ezrin2相对表达量差异有统计学意义(P〈0.01),根据基相对表达量算出shRNA—ezrin1,shRNA—ezrin2ezrin—mRNA的表达量抑制率分别为66.33%及53.29%。转染重组质粒后显著抑制786-0细胞中ezrinmRNA和蛋白表达,其中shRNA—ezrin1的抑制效率最高。结论成功构建ezrin基因的shRNA表达载体,并筛选出抑制率较高的重组质粒载体shRNA-ezrin1,为进一步研究ezrin基因沉默对肾癌786-0细胞株生物学行为的影响奠定基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 重组质粒 人肾癌786-0细胞株
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华蟾素对肾癌细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 兰勇 程帆 《实用临床医药杂志》 CAS 2015年第7期83-86,共4页
目的探讨华蟾素对人肾癌786-0细胞的影响及机制。方法用不同浓度的华蟾素(浓度分别为1、10、100、1 000μg/m L)作用于人肾癌786-0细胞株,采用CCK-8法检测华蟾素对肾癌786-0细胞增殖效应的影响,采用流式细胞术(FCM)检测华蟾素对肾癌786-... 目的探讨华蟾素对人肾癌786-0细胞的影响及机制。方法用不同浓度的华蟾素(浓度分别为1、10、100、1 000μg/m L)作用于人肾癌786-0细胞株,采用CCK-8法检测华蟾素对肾癌786-0细胞增殖效应的影响,采用流式细胞术(FCM)检测华蟾素对肾癌786-0细胞周期的影响,采用蛋白印迹法检测华蟾素对Survivin蛋白表达水平的影响。结果CCK-8法结果提示,不同浓度的华蟾素均可显著抑制肾癌786-0细胞的增殖,且抑制率呈时间、剂量依赖关系。FCM检测发现华蟾素可使肾癌786-0细胞周期中的G0/G1期比例增加,S期缩短。蛋白印迹法显示,华蟾素可使肾癌786-0细胞中Survivin蛋白表达水平降低。结论华蟾素能够抑制人肾癌786-0细胞的增殖,并阻滞细胞周期在G0/G1期,其机制可能与影响蛋白Survivin的表达相关。 展开更多
关键词 华蟾素 人肾癌786-0细胞 细胞增殖 SURVIVIN
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Wnt/β-catenin/TCF-4信号通路调节livin表达在肾癌细胞增殖凋亡中的研究 被引量:1
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作者 雷雨声 张俊勇 +2 位作者 田官强 胡自力 刘川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期716-721,共6页
目的:研究人肾癌细胞系786-0中Wnt/β-catenin/TCF-4通路与livin的关系,探索Wnt/β-catenin/TCF-4通路在肾癌细胞中的凋亡调节机制。方法:不同浓度吲哚美辛处理肾癌786-0细胞,CCK-8法检测各组细胞活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡改变;... 目的:研究人肾癌细胞系786-0中Wnt/β-catenin/TCF-4通路与livin的关系,探索Wnt/β-catenin/TCF-4通路在肾癌细胞中的凋亡调节机制。方法:不同浓度吲哚美辛处理肾癌786-0细胞,CCK-8法检测各组细胞活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡改变;荧光定量PCR检测β-catenin、TCF-4、caspase-3及livin转录水平变化;Western blot检测β-catenin、caspase-3及livin蛋白表达水平变化。结果:随吲哚美辛浓度增加,细胞活力降低,呈剂量-效应关系(P=0.000)。流式结果显示伴随吲哚美辛浓度升高,细胞凋亡逐渐增加,25μmol/L组、50μmol/L组和100μmol/L组凋亡率分别为(32.07±1.01)%、(40.03±1.95)%和(72.33±0.02)%,与对照组比较差异存在统计学意义(P=0.000,P=0.002,P=0.000)。Real-time PCR结果显示,β-catenin、TCF-4和livin相对表达水平均呈下降趋势(P=0.002,P=0.000,P=0.000),而caspase-3相对表达呈明显上升趋势(P=0.001)。Western blot分析显示在25μmol/L组、50μmol/L组和100μmol/L组中β-catenin相对表达量分别为0.568±0.020(P=0.001)、0.396±0.030(P=0.000)、0.142±0.038(P=0.000);livin相对表达量分别为0.139±0.016(P=0.005)、0.050±0.006(P=0.000)、0.011±0.001(P=0.000);而caspase-3相对表达量分别为0.278±0.035(P=0.046)、0.396±0.071(P=0.000)、0.518±0.015(P=0.000)。结论:吲哚美辛介导的肾癌细胞中β-catenin/TCF-4降解可能导致livin的转录抑制和caspase-3表达水平的上调,进而诱导肾癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 Wnt/β-catenin/TCF-4通路 LIVIN 786-0细胞 细胞凋亡 吲哚美辛 肾癌
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氧化锌纳米颗粒诱导促死亡自噬杀伤肾癌细胞的实验研究 被引量:1
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作者 张鹏飞 张力 +2 位作者 王辉 杨荷宇 梁朝朝 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第3期321-326,共6页
目的探讨氧化锌纳米颗粒(ZnO NPs)对肾透明细胞癌细胞Caki-1的杀伤效应及其与自噬的相关性。方法于96孔板内制备Caki-1单层细胞(2×10^3/孔),用不同浓度(1、5、10、15、20、25μg/ml)的ZnO NPs处理后或用15μg/ml ZnO NPs处理不同时... 目的探讨氧化锌纳米颗粒(ZnO NPs)对肾透明细胞癌细胞Caki-1的杀伤效应及其与自噬的相关性。方法于96孔板内制备Caki-1单层细胞(2×10^3/孔),用不同浓度(1、5、10、15、20、25μg/ml)的ZnO NPs处理后或用15μg/ml ZnO NPs处理不同时间(6、12、24 h)后,噻唑兰(MTT)法检测ZnO NPs对Caki-1细胞的生长抑制作用。随后,用Western blot法检测不同处理组细胞自噬效应的变化,最后再次利用MTT法及Hoechst33342/PI染色法测定ZnO NPs与自噬抑制剂或增强剂共处理后细胞活力的改变。结果ZnO NPs对Caki-1细胞具有剂量及时间依赖性的杀伤效应。且ZnO NPs亦可诱导剂量及时间依赖性的自噬效应。将ZnO NPs与自噬抑制剂渥曼青霉素(Wort)共处理后,微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ型(LC3-Ⅱ)蛋白的积累减少。ZnO NPs与自噬诱导剂海藻糖(Trehalose)共处理后,LC3-Ⅱ蛋白的积累增多。同时,将ZnO NPs与Wort或氯喹共处理后,细胞活力相较于ZnO NPs单独处理组有所回升;而将ZnO NPs与Trehalose联合处理细胞后,细胞活力进一步降低。结论ZnO NPs对Caki-1细胞具有剂量及时间依赖性的杀伤效应;在Caki-1细胞中可诱导促死亡自噬效应,抑制自噬可降低ZnO NPs对细胞的杀伤作用,增强自噬可促进ZnO NPs对细胞的杀伤作用;ZnO NPs可促进自噬体的形成,而非抑制自噬底物的降解。 展开更多
关键词 肾癌 Caki-1细胞株 氧化锌纳米颗粒 自噬
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虫草素联合阿霉素调控肾癌ACHN细胞系凋亡迁移的机制探讨 被引量:1
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作者 张明 陈志云 +6 位作者 霍玉杰 王沙凝 李再巧 王宣军 盛军 桂明英 马啸 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第1期9-15,共7页
目的:探究肾癌ACHN细胞系经阿霉素组、阿霉素与虫草素联用组以及虫草素组刺激后,对细胞凋亡及迁移的影响及其相关机制探讨。方法:体外培养肾癌ACHN细胞系,采用MTT法检验不同浓度阿霉素组、阿霉素与虫草素联用组、虫草素组处理肾癌ACHN... 目的:探究肾癌ACHN细胞系经阿霉素组、阿霉素与虫草素联用组以及虫草素组刺激后,对细胞凋亡及迁移的影响及其相关机制探讨。方法:体外培养肾癌ACHN细胞系,采用MTT法检验不同浓度阿霉素组、阿霉素与虫草素联用组、虫草素组处理肾癌ACHN细胞系后细胞存活率;通过细胞划痕实验观察不同处理组肾癌ACHN细胞系的细胞迁移情况,形态学观察细胞外部形态,用HE染色和DAPI染色察看细胞内部变化和细胞核数量;并采用Western blot方法检测细胞内Bcl-2、Bax、MMP-2、MMP-9蛋白的表达情况。结果:与阿霉素高剂量组相比,联用组能够显著抑制肾癌ACHN细胞迁移,促进凋亡;并且发现减少细胞形态出现异常,HE和DAPI染色观察发现癌细胞数量明显减少,细胞核体积变大比率明显增加,细胞质中荧光强度减弱;Bax、Bcl-2、MMP-2蛋白表达差异显著。结论:虫草素与阿霉素联用组能够与阿霉素高剂量组达到同样抑制肾癌ACHN细胞迁移,并且显著促进凋亡蛋白基因表达的作用。本结果为天然植物有效成分与化学合成类药物联用治疗癌症提供了参考,为降低抗癌药物长时间耐药性提供了新途径。 展开更多
关键词 虫草素 阿霉素 肾癌ACHN细胞系 凋亡 迁移 机制
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干扰素γ对肾癌786-0细胞增殖的抑制作用及其机制 被引量:1
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作者 陈雄 吴小候 +3 位作者 罗春丽 张龙 石军辉 陶佳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期197-201,206,共6页
目的探讨干扰素γ(interferonγ,IFNγ)对人肾癌786-0细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法用不同浓度(1 000、2 000、3 000、4 000和5 000 U/ml)的IFNγ作用人肾癌786-0细胞不同时间,CCK-8法检测细胞增殖抑制率;将786-0细胞分为试验... 目的探讨干扰素γ(interferonγ,IFNγ)对人肾癌786-0细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法用不同浓度(1 000、2 000、3 000、4 000和5 000 U/ml)的IFNγ作用人肾癌786-0细胞不同时间,CCK-8法检测细胞增殖抑制率;将786-0细胞分为试验组(加入900 U/ml IFNγ)和细胞对照组(未作任何处理),作用48 h后,流式细胞术检测786-0细胞细胞周期的分布,RT-PCR法检测细胞中肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)基因mRNA的转录水平,Western blot法检测细胞中有丝分裂抑制缺陷蛋白1(mitotic arrest deficiency 1,MAD1)的表达水平;将腺病毒质粒hepaCAM及空腺病毒质粒瞬时转染786-0细胞,Western blot检测细胞中hepaCAM及MAD1蛋白的表达水平。结果 IFNγ可抑制786-0细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖性(P<0.05);与细胞对照组相比,试验组细胞G1期细胞比例、hepaCAM基因mRNA的转录水平及MAD1蛋白的表达水平均明显升高(P均<0.01);转染腺病毒质粒的786-0细胞中hepaCAM和MAD1蛋白的表达水平明显高于空腺病毒质粒组及空白对照组(P<0.05)。结论 IFNγ可能通过hepaCAM-MAD1途径使细胞周期阻滞于G1期,从而抑制肾癌786-0细胞增殖,本实验为进一步研究肾癌的发生发展机制及有效治疗途径奠定了基础。 展开更多
关键词 干扰素Γ 肾癌 786-0细胞 肝细胞黏附分子 有丝分裂抑制缺陷蛋白1 细胞增殖
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Wnt/β-catenin/TCF-4通路对肾癌细胞生物学行为的影响及其机制 被引量:6
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作者 陈少安 苏增存 +2 位作者 陈友根 夏庆华 邢念增 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期1890-1894,共5页
目的探讨Wnt/β-连环链蛋白(catenin)/TCF-4通路在肾癌细胞中的作用,并初步分析其可能的机制。方法分别构建β-catenin sh和TCF-4△Nsh的真核表达载体,并分别转染肾癌786-O细胞,采用CCK8检测转染后细胞的增殖能力,吖啶橙-溴乙锭(AO-EB)... 目的探讨Wnt/β-连环链蛋白(catenin)/TCF-4通路在肾癌细胞中的作用,并初步分析其可能的机制。方法分别构建β-catenin sh和TCF-4△Nsh的真核表达载体,并分别转染肾癌786-O细胞,采用CCK8检测转染后细胞的增殖能力,吖啶橙-溴乙锭(AO-EB)染色法检测转染后细胞死亡情况,Western印迹检测转染组、空转组以及空白组细胞TCF-4、Bcl-2、bax、Caspase-3的表达情况。结果转染β-catenin siRNA病毒后,细胞的增殖能力较空转组明显降低(0.443±0.145与0.910±0.721),细胞死亡率较空转组明显增加(16.38±5.32与6.61±1.04),TCF-4的表达受抑制、凋亡蛋白Caspase 3、bax表达增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减低(均P<0.05)。转染TCF-4 siRNA病毒后,细胞的增殖能力较对照组明显降低,细胞死亡率较对照组明显增加,TCF-4的表达受抑制导致凋亡蛋白Caspase 3、bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达减低(均P<0.05)。结论Wnt/β-catenin/TCF-4通路在786-O肾癌细胞中具有可调节肾癌细胞的增殖和凋亡的作用,其机制可能为通过调节其下游的凋亡蛋白Caspase 3、bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平来实现。 展开更多
关键词 肾肿瘤 Wnt/β-catenin/TCF-4信号通路 786-o肾癌细胞 增殖 凋亡
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