毫米波对人角质形成细胞基因表达的影响

目的:研究低强度毫米波对人角质形成细胞(HaCaT)基因表达的影响。方法:采用30.16 GHz、强度为1.0和3.5 mW/cm2的毫米波分别每天连续辐照HaCaT细胞30 min。细胞经不同次数辐照后,用基因芯片技术筛选毫米波反应基因,并以RT-PCR验证基因芯片筛选得到的结果。结果:经基因芯片筛选和RT-PCR证实,30.16 GHz、3.5 mW/cm2的毫米波辐照4次后,人角质形成细胞PAR-2、ERGIC-53基因表达明显上调(相对值分别为1.72±0.11 vs 1.24±0.09、1.52±0.21 vs 0.86±0.09,P均<0.01),而经1次毫米波辐照的细胞,均未见上述基因表达上调;30.16GHz、1.0 mW/cm2的毫米波辐照4次后,ERGIC-53基因表达亦明显上调(相对值为1.49±0.19 vs0.84±0.09,P<0.01),而PAR-2基因表达未见明显改变。结论:毫米波辐照影响基因的表达,基因表达的改变与辐照功率密度的大小和次数有关。

染色体分离基因在纯化鼻咽癌组织中的表达

目的研究染色体分离基因(homosapiens chromosome segregation gene,CSE1L)在纯化鼻咽癌及非癌组织中的表达。方法首先从全基因组表达谱中筛选到鼻咽癌候选癌基因CSE1L。结合RNA保护、显微切割及线性扩增技术,获得纯化鼻咽组织中反义RNA(antisense RNA,aRNA),采用半定量逆转录聚合酶链式反应(semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,sqRT-PCR)研究从全基因组表达谱中筛选的候选癌基因—CSE1L在两种不同纯化鼻咽组织aRNA中的表达。结果在纯化鼻咽癌组织和鼻咽部非癌组织全基因组表达谱中,CSE1L基因表达值分别为1.056±0.296和0.465±0.835,相差2.27倍,两组比较有显著性差异(df=16,t=4.317,P=0.001<0.01)。sqRT-PCR检测纯化鼻咽癌组织及非癌组织aRNA中CSE1L基因的表达,分别为1.740±1.105和0.618±0.183,两组比较有显著性差异(df=30,t=3.159,P=0.004<0.01)。结论利用全基因组芯片构建基因表达谱可筛选到鼻咽癌发病相关的候选靶基因,sqRT-PCR可验证芯片杂交结果,CSE1L基因是鼻咽癌发生、发展过程中重要的候选癌基因。

肺癌A549细胞抗脱落凋亡相关基因表达谱及其TC-1的表达和意义

目的:应用基因芯片筛选出脱落培养A549细胞抗脱落凋亡相关基因,并探讨TC-1基因的表达和意义。方法:应用基因芯片检测脱落培养A549细胞与贴壁培养A549细胞的差异基因,利用NCBIPubmed数据库筛选出与肺癌细胞抗脱落凋亡相关的基因,从中找出差异表达倍数最大的基因,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术及蛋白质印迹技术测定其表达。结果:基因芯片共检测到表达差异的基因745个,筛选出63个与肺癌细胞抗脱落凋亡相关的基因,从中找出差异表达倍数最大的基因——TC-1基因,TC-1基因及其编码蛋白在脱落培养A549细胞中表达明显高于贴壁培养A549细胞,P<0.02。结论:基因芯片技术为筛选肺癌抗脱落凋亡相关基因提供了有效方法,TC-1基因可能参与调控肺癌细胞抗脱落凋亡过程,与肺癌细胞侵袭、转移等行为相关。