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利用λRed重组系统敲除伤寒沙门氏菌rfaH基因
被引量:
6
1
作者
姜娜
王芃
+5 位作者
王艳春
袁盛凌
展德文
陶好霞
王令春
刘纯杰
《生物技术通讯》
CAS
2009年第2期173-176,共4页
目的:利用λRed重组系统敲除伤寒沙门氏菌的rfaH基因。方法:以伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi Ty2,S.ty2)基因组为模板扩增得到的同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段共同构建同源重组载体;以重组载体为模板扩增打靶片段,...
目的:利用λRed重组系统敲除伤寒沙门氏菌的rfaH基因。方法:以伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi Ty2,S.ty2)基因组为模板扩增得到的同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段共同构建同源重组载体;以重组载体为模板扩增打靶片段,将其转化S.ty2;在抗生素压力和λRed重组系统帮助下,打靶片段和菌体基因组发生同源重组,通过卡那抗性筛选得到带有抗性标记的重组菌;转入重组酶表达质粒pCP20以去除抗性标记,得到保留单一FRT位点的突变菌株;通过PCR鉴定重组菌,并经透射电子显微镜分析表型。结果:在S.ty2中敲除了rfaH基因,经PCR扩增和序列测定正确;初步的表型分析表明突变体的鞭毛合成显著减少。结论:获得了S.ty2突变株,为将沙门氏菌进一步减毒成为疫苗表达载体奠定了基础。
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关键词
伤寒沙门氏菌
λRed重组系统
rfah
基因
基因敲除
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职称材料
大肠埃希菌毒力因子ColBM质粒和转录反终止子研究进展
被引量:
2
2
作者
夏梦芸
汤文
岳华
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第5期86-89,共4页
大肠埃希菌是临床上常见的人兽共患病的病原,其致病性是由多种毒力相关因子共同协调作用所决定的。ColBM质粒和转录反终止子(RfaH)是两个近年发现的大肠埃希菌毒力相关因子。论文对这两个大肠埃希菌毒力相关因子的研究进展进行了综述,...
大肠埃希菌是临床上常见的人兽共患病的病原,其致病性是由多种毒力相关因子共同协调作用所决定的。ColBM质粒和转录反终止子(RfaH)是两个近年发现的大肠埃希菌毒力相关因子。论文对这两个大肠埃希菌毒力相关因子的研究进展进行了综述,分析其与宿主菌致病力之间的关系。
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关键词
大肠埃希菌
ColBM质粒
转录反终止子
毒力因子
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职称材料
题名
利用λRed重组系统敲除伤寒沙门氏菌rfaH基因
被引量:
6
1
作者
姜娜
王芃
王艳春
袁盛凌
展德文
陶好霞
王令春
刘纯杰
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2009年第2期173-176,共4页
文摘
目的:利用λRed重组系统敲除伤寒沙门氏菌的rfaH基因。方法:以伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi Ty2,S.ty2)基因组为模板扩增得到的同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段共同构建同源重组载体;以重组载体为模板扩增打靶片段,将其转化S.ty2;在抗生素压力和λRed重组系统帮助下,打靶片段和菌体基因组发生同源重组,通过卡那抗性筛选得到带有抗性标记的重组菌;转入重组酶表达质粒pCP20以去除抗性标记,得到保留单一FRT位点的突变菌株;通过PCR鉴定重组菌,并经透射电子显微镜分析表型。结果:在S.ty2中敲除了rfaH基因,经PCR扩增和序列测定正确;初步的表型分析表明突变体的鞭毛合成显著减少。结论:获得了S.ty2突变株,为将沙门氏菌进一步减毒成为疫苗表达载体奠定了基础。
关键词
伤寒沙门氏菌
λRed重组系统
rfah
基因
基因敲除
Keywords
Salmonella typhi Ty2
λRed recombination system
rfah
gene
gene knock-out
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
大肠埃希菌毒力因子ColBM质粒和转录反终止子研究进展
被引量:
2
2
作者
夏梦芸
汤文
岳华
机构
西南民族大学生命科学与技术学院
动物医学四川省高校重点实验室
重庆市第二人民医院
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第5期86-89,共4页
基金
"十一五"国家科技支撑项目(2006BAD06A11)
文摘
大肠埃希菌是临床上常见的人兽共患病的病原,其致病性是由多种毒力相关因子共同协调作用所决定的。ColBM质粒和转录反终止子(RfaH)是两个近年发现的大肠埃希菌毒力相关因子。论文对这两个大肠埃希菌毒力相关因子的研究进展进行了综述,分析其与宿主菌致病力之间的关系。
关键词
大肠埃希菌
ColBM质粒
转录反终止子
毒力因子
Keywords
Escherichia coli
ColBM
rfah
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用λRed重组系统敲除伤寒沙门氏菌rfaH基因
姜娜
王芃
王艳春
袁盛凌
展德文
陶好霞
王令春
刘纯杰
《生物技术通讯》
CAS
2009
6
下载PDF
职称材料
2
大肠埃希菌毒力因子ColBM质粒和转录反终止子研究进展
夏梦芸
汤文
岳华
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010
2
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