郑州地区RhD变异型献血者分子生物学分析

目的研究郑州地区RhD变异型献血者血清学特征及基因突变机制。方法选择2023年1月—2023年12月送至本实验室的1619名RhD阴性献血者为研究对象,应用试管法和微柱凝胶间接抗球蛋白试验方法进行RhD阴性确认试验及RhCE表型检测。采用RHD基因扩增和Sanger测序检测RhD变异型标本基因型。结果RhD阴性确认试验共检出RhD变异型69例,比例为4.26%(69/1619)。RhCE表型分别为ccEe、Ccee、CcEe、CCee。包含17种基因型,15种D变异型表型。RHD^(*)weak partial 15等位基因最多(33例),频率为47.83%(33/69),主要表型为ccEe;其次是RHD^(*)DVI.3等位基因20例,频率为28.99%(20/69),主要表型为Ccee。RHD^(*)weak partial 15/RHD^(*)01EL.01杂合子3例,频率为4.35%(3/69),皆为CcEe表型。其他罕见基因型共13例,频率为18.84%(13/69)。抗筛阳性3例,比例为4.35%(3/69)。女性献血者2名,皆有孕产史,经抗体鉴定为抗-D;男性献血者1名,为抗-M。结论郑州地区RhD变异型献血者中RHD^(*)weak partial 15基因型最常见,其次为RHD^(*)DVI.3基因型。对保障安全供血,指导临床精准输血具有重要作用。

人参皂苷Rh2通过mTOR/ROS信号通路抑制卵巢颗粒细胞衰老

目的探讨人参及其主要活性成分人参皂苷Rh2抗胰岛素抵抗导致的卵巢颗粒细胞衰老的作用及机制。方法采用网络药理学、分子对接和细胞热位移分析法(Cellular thermal shift assay,CETSA)检测人参抗卵巢储备减少(Diminished ovarian reserve,DOR)和衰老的核心分子及其潜在的下游信号通路。用胰岛素(0.5μg/ml,72 h)处理人卵巢颗粒细胞(KGN)作为卵巢衰老的体外模型,将KGN细胞分为3组:对照组、胰岛素组(0.5μg/ml,72 h)以及胰岛素(0.5μg/ml,72 h)+人参皂苷Rh2组(2μmol/L,24 h)。β-半乳糖苷酶染色、CCK-8、活性氧检测试剂盒、免疫蛋白印迹以及qRT-PCR检测KGN细胞活性以及衰老相关因子(p53、p21)的表达水平。结果网络药理学筛选出人参有效成分、DOR和衰老核心度最高的10个共同靶点,即TNF、ESR1、MAPK3、PPARG、STAT3、HSP90AA1、NR3C1、mTOR、AR以及NOS3。人参中主要的活性成分为人参皂苷Rh2。与胰岛素组相比,人参皂苷Rh2(2μmol/L,24 h)能够降低KGN细胞中衰老细胞占比及活性氧(ROS)活性;同时,人参皂苷Rh2能够抑制KGN细胞中p53以及p21的表达升高。分子对接结果显示,mTOR是人参皂苷Rh2抗DOR以及衰老的关键靶点。过表达mTOR能够逆转人参皂苷Rh2抑制KGN细胞的活性降低和细胞衰老,逆转人参皂苷Rh2抑制KGN细胞ROS水平下降。结论人参皂苷Rh2可能通过调控mTOR/ROS抑制胰岛素抵抗导致的卵巢颗粒细胞衰老,从而发挥抵抗DOR的作用。

血清抗体、血红蛋白、胆红素、心肌酶及肝酶联合对新生儿Rh溶血病的诊断效果

目的研究血清抗体、血红蛋白、胆红素、心肌酶及肝酶联合对新生儿Rh溶血病的诊断效果。方法选择2021年7月至2022年11月于赣州市人民医院分娩的53例新生儿Rh溶血病患儿,按照疾病严重程度分为重症组20例和轻症组33例,检测并比较血清抗体、血红蛋白、胆红素、心肌酶及肝酶水平,分析其诊断价值。结果重症组血红蛋白低于轻症组,胆红素、肌酸激酶、丙氨酸氨基转移酶高于对照组(P<0.05);两组血清抗体比较,差异无统计学意义(P>0.05);经logistic多因素分析结果显示,血清血红蛋白(β=-0.136,OR=0.873,95%CI:0.814~0.936)是新生儿Rh溶血病的保护因素(P<0.05);胆红素(β=0.031,OR=1.032,95%CI:1.012~1.052)、肌酸激酶(β=0.093,OR=1.098,95%CI:1.039~1.160)及丙氨酸氨基转移酶(β=0.120,OR=1.128,95%CI:1.042~1.221)是新生儿Rh溶血病的危险因素(P<0.05);绘制ROC曲线图,结果显示,血清血红蛋白、胆红素、心肌酶及肝酶联合检测在新生儿Rh溶血病诊断中的AUC分别为0.938、0.817、0.815、0.929、0.977,均有一定诊断价值。结论血清血红蛋白、胆红素、心肌酶及肝酶联合检测在新生儿Rh溶血病诊断中有一定应用价值。

微量法筛血在Rh血型系统相容性输血中的应用研究

目的研究快速筛选患者Rh血型系统C、c、E和e意外抗体对应抗原阴性血液的方法以及该方法在相容性输血中的价值。方法文章以产生意外抗-e的O型患者为研究对象,使用微孔板稀释献血者红细胞,制备2%~5%红细胞悬液,用微量法检测标本红细胞Rh血型抗原,用标准法确定目标血液导管Rh血型抗原,比较两种方法的差异性。结果使用微量法检测的献血者标本Rh血型抗原结果与标准法确认结果100%相符,临床无溶血性输血反应发生。结论在不影响细胞凝集和结果观察的前提下,微量法可以节约近70%的试剂、耗材成本,且该方法简便易行,为临床产生Rh血型系统意外抗体患者的精准输血治疗赢取宝贵时间,适合基层血站和输血科开展应用。

Eu掺杂ZnO多孔片状材料的制备及其降解印刷染料RhB

采用常温络合-水解法构筑Eu掺杂Zn O多孔片状材料。通过SEM、TEM、XRD、EDS等表征手段证明稀土元素Eu成功掺杂到Zn O之中,Eu-Zn O的形貌为多孔片状结构。研究了Eu-Zn O多孔片状材料对染料的光催化性能。结果表明:该材料对Rh B具有较好的降解效率,降解效率高达99.2%,循环稳定性能高达98.3%,远大于商用Zn O的76.2%的降解效率和82.3%的循环稳定性能,由以上数据说明Eu-Zn O具有很好的光催化降解效率和循环稳定性能。其优异的光催化性能归因于稀土元素Eu掺杂和多孔片状结构。

RH精炼钢包智能顶升模型及精度的研究

智能化RH精炼技术已成为钢铁生产行业的研究热点,钢包智能顶升技术是实现RH高效、稳定生产的关键。基于RH精炼过程的钢包顶升原理建立了钢包智能顶升模型,并分析了在线测距仪测量精度的影响因素。研究结果表明:阻尼系数为1.5 Ns/m,钢包车经过在线测距仪时运行速度为10 m/min,钢包中心经过在线测距仪正下方的-1000 mm至1000 mm,在线测距仪数值与净空计算模型的精准度较高,钢包智能顶升模型计算的自动顶升高度与实际顶升误差<5%,可用于RH精炼工艺的钢包智能顶升过程。

2例罕见RhD变异型RHD*DEL37的分子生物学分析

Rh血型系统是输血医学中重要的常规检测血型系统,因RhD血型不合引起的溶血性输血反应及新生儿溶血病一直以来倍受临床重视。本研究报道了2例罕见的RHD基因变异型RHD*DEL37个体的血清学和基因特征,这2例个体的血液样本经血清学方法(试管法和微柱凝胶法)鉴定为RhD阴性。采用聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific prime,PCR-SSP)对样本进行RHD基因分型和合子型分析,基因分型结果为RHD基因阳性,并排除了常见的几种RHD基因变异体的可能。RHD基因合子型检测阳性,证明其中一条RHD等位基因1~10外显子全部缺失。进一步对样本RHD基因1~10外显子基因进行Sanger法测序,测序结果显示在另一条等位基因第8内含子上的第1154-31号碱基发生了T>C突变,国际输血协会(International Society of Blood Transfusion,ISBT)将该突变等位基因命名为RHD*DEL37,表型为RhD放散型(D-elute,Del)。本研究中,2例血清学初筛RhD阴性的样本通过分子生物学检测,其基因型为RHD*DEL37/RHD-(RHD*01N.01)。由于这2例个体无血缘关系,提示我国可能存在携带该基因突变的人群。本研究提示分子生物学方法可辅助鉴别血清学初筛为阴性的RhD变异体样本,联用分子生物学方法和血清学方法在准确鉴定血型、保障患者输血安全方面有重要意义。

RH精炼炉用耐材技术研究进展

简述了RH精炼炉的分类和冶炼工艺,总结了RH精炼炉用耐火材料的主要种类及其损毁机理,详细论述了RH精炼炉用高档镁铬砖、镁尖晶石砖、低碳MgO-C砖、尖晶石-C砖、含ZrO_(2)/Y_(2)O_(3)的MgO砖、MgAlON结合MgO质耐火材料,以及不定形耐材技术的研究新进展概况,并指出我国RH精炼炉用耐材技术取得的显著进步,但与国外新技术相比仍存在一定差距,未来仍有较大的发展空间。

中国人输血产生RhCE同种抗体的风险和预防策略

目的探索一种评估输血产生RhCE同种抗体风险的新途径,并制定选择RhCE相容供者的策略。方法根据兰德施泰纳法则和群体遗传学原理,确定在随机输血中供者与受者RhCE抗原错配的组合,根据中国人Rh血型分布大数据资料,计算错配组合的概率以及找到相容供者的机会。结果分析文献报告的458542例中国人RhD、C、c、E和e抗原分型资料,结果表明在只采用RhD同型输血的策略中,RhCE抗原错配占全部输血的25.16%,其中Rh表型DCCee、DccEE、DCcee和DccEe错配分别占比14.97%、5.01%、2.21%和2.26%,表型Dccee、DCCEE、DCCEe和DCcEE错配合计占比0.71%。Rh表型DCcEe个体可以接受任何Rh表型供者的血液。结论中国人Rh血型以高频率DCe单倍型为特征,Rh表型DCCee个体是随机输血后产生RhCE同种抗体的高风险群体。RhC、c、E和e抗原分型对寻找Rh抗原匹配供者有重要意义。使用常见RhCE表型相容供者的输血,可以预防大约90%的受者产生RhCE同种抗体。

孕产妇Rh表型分布特征及相容性输血的可行性探讨

目的:分析重庆地区孕产妇Rh表型分布特征,探讨Rh表型在孕产妇中的临床意义及实行Rh表型相容性输血的可行性。方法:采用微柱凝胶法对65161例孕产妇进行ABO血型和Rh表型检测,以同期48122例男性为对照,通过χ^(2)检验对数据进行比较分析。结果:113283例样本中,RhD+112870例(99.64%),以CCDee(48.39%)和Cc DEe(32.88%)为主要表型,并检出重庆地区首例Rh缺失型D--表型;Rh D-413例(0.36%),以ccdee(52.78%)和Ccdee(33.41%)为主要表型;RhD+组与Rh D-组的Rh表型分布差异有统计学意义(P<0.01)。在65161例孕产妇中,Rh5种抗原的阳性率由高到低为D>e>C>c>E,与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);孕产妇Rh表型分布与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);不同ABO血型的孕产妇间Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。在孕产妇中,正常妊娠人群、有不良流产史人群、采用人类辅助生殖技术人群和不孕症患者人群间Rh表型分布无明显差异(P>0.05),4个孕产妇人群与本地区综合性三甲医院住院患者和献血者相比,Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。RhD阳性孕产妇中,CcDEe表型找到相容性血液的概率为100%,CCDee、CcDee和CCDEe表型找到相容血液的概率为45%-60%,ccDEE、ccDEe、CcDEE表型找到相容血液的概率为5%-10%,其余表型的相容概率均低于0.5%;提供CCDee和ccDEE两个表型的血液即可满足99%以上患者7种Rh表型相容性输血需求。结论:应对孕产妇进行Rh表型检测,对需要输血的孕产妇推行Rh表型相同或相容性输血是切实可行的输血举措。

两种Rh血型系统抗体导致交叉配血不合原因分析与实验室处理策略

目的分析RhDC、RhEc抗原阴性患者血清中存在IgG型抗DC及抗Ec联合抗体的血型血清学特点及临床意义。方法回顾性分析12例血清中存在两种Rh系统不规则抗体的病例的临床资料及实验室检查结果,包括年龄、性别、输血史/妊娠史及血型血清学检测结果(ABO、RhD血型鉴定及Rh分型结果、不规则抗体筛选、抗体特异性鉴定、吸收放散试验、抗体效价测定、交叉配血试验)。结果12例患者中,年龄(51.4±16.9)岁。9例有输血史,8例有妊娠史,5例既有输血史又有妊娠史。在血型血清学检测中抗体筛选阳性、交叉配血不合。抗体特异性鉴定及吸收放散试验结果显示,3例患者血清中同时存在IgG型抗D、抗C抗体,抗D效价16~32、抗C效价8~16;9例患者血清中同时存在IgG型抗E、抗c抗体,抗E、抗c效价均为8~16;抗D、抗C联合抗体的患者选择ABO同型RhD阴性,其他Rh抗原为ccee的悬浮红细胞,抗E、抗c联合抗体的患者选择ABO同型RhD阳性,其他Rh抗原为CCee的悬浮红细胞,交叉配血试验结果显示,在盐水、聚凝胺、抗人球蛋白介质中均无凝集、无溶血。结论输血和(或)妊娠免疫是产生两种Rh系统不规则抗体、导致抗体筛选阳性及交叉配血不合的主要原因,ABO同型基础上常规进行Rh配合性输注,对于临床输血的安全性和预防新生儿溶血病的发生具有重要的价值和意义。

RH底喷粉精炼过程数值模拟研究

RH真空槽底喷粉精炼将脱硫粉剂直接喷入钢液,冶金反应程度高,终点元素含量稳定,能够完成高品质钢的炉外精炼任务。对RH底喷粉过程进行数值模拟研究,探究底喷粉过程的粉剂行为及对钢液流场的影响规律,优化喷嘴布置方案,旨在推动该技术的工业化应用。研究结果表明,180°喷嘴布置方案(即下降管侧喷吹,简称方案2)的钢液环流量比0°喷嘴布置方案(即上升管侧喷吹,简称方案1)增加1.8 t/min(增量比例为1.4%);方案2的钢包最下端钢液粉剂浓度比方案1高0.2~0.9 kg/m^(3)(增量比例为6.7%~81.8%);方案2条件下,钢包内钢液流动死区的粉剂浓度随喷嘴布置高度的降低而降低。结合粉剂收得率,确定方案2喷嘴布置高度为300 mm,此时粉剂收得率较方案1提升2.59%。

血液病患者异基因造血干细胞移植后Rh血型转变研究

目的检测血液病患者造血干细胞移植(HSCT)前供、受者及移植后患者的Rh血型抗原C、c、E、e,探究受者Rh血型抗原转变为供者Rh血型抗原C、c、E、e转变时间与过程。方法收集HSCT前供、受者以及移植后患者的抗凝全血标本,用微柱凝胶卡检测ABO血型、Rh血型,统计分析并比较ABO、Rh血型抗原转变与时间。结果排除红细胞输注的影响,58例HSCT患者Rh血型抗原C、c、E、e完全转变为供者的Rh血型抗原所需时间为(57.81±8.99)d,患者的年龄和血液病种类影响Rh血型抗原转换时间,性别、移植方式和供受者ABO血型相合性对Rh抗原转变时间无影响。移植后第3周部分患者开始出现少量供者红细胞,第4周开始检测到混和嵌合状态,第7~10周Rh血型抗原完全转变。此外,比较25例供、受者ABO血型和Rh血型均不相同的HSCT患者的Rh血型抗原转变时间和ABO血型转变时间,Rh血型抗原转变时间较ABO更短,差异具有统计学意义。结论定期检测HSCT患者移植后Rh血型抗原可以作为辅助判断移植效果的指标之一,对HSCT患者移植后输注Rh血型相容性的红细胞具有指导意义。

近二十年宝钢RH装备及技术进步

在汽车板、硅钢、镀锡板、管线钢、船板等高等级品种钢开发和质量提升需求的推动下,近二十年来宝山基地在RH精炼装备、工艺技术及自动化等方面取得了长足的进步,特别在RH真空精炼装备、高效脱碳、低成本处理、顶枪真空加热、夹杂物控制、RH专线化生产、环保耐材、RH智能一键精炼等方面形成了具有自身特点的工艺技术,满足了品种钢开发、质量提升和产能提高的需求。

SPE-UPLC联用快速检测保健品中人参皂苷Rh2成分

目的:基于固相萃取与超高液相色谱联用技术,建立一种快速准确检测保健品中人参皂苷Rh2成分的方法,为市售含有人参皂苷Rh2成分的保健品的质量评价提供参考。方法:样品预处理后经甲醇超声提取,中性氧化铝SPE小柱净化,筛选合适的洗脱剂进行HLB-SPE小柱分离纯化,采用WatersT3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,PDA全波长扫描,流速0.3 mL·min^(-1)。结果:SPE-UPLC法测得人参皂苷Rh2浓度在9.7~99.8μg·mL^(-1)与其峰面积线性关系良好(r=0.999),平均回收率为99.20%。结论:该方法准确、简便、快速,并能有效去除辅料干扰,稳定性高,可用于含有人参皂苷Rh2有效成分的保健食品的质量控制。

青海湖裸鲤Rh基因家族的全基因组分析及其碳酸盐碱胁迫响应

为探究Rh(Rhesus)基因家族在青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)高碱适应中的作用,研究基于青海湖裸鲤基因组数据对Rh基因家族进行了生物信息学分析,并开展碱胁迫和基因表达检测。结果显示,青海湖裸鲤Rh基因家族由7个成员组成,编码425—562个氨基酸不等。Motif、Domain及基因结构分析结果均表明该家族成员具有较高的保守性,但基因结构差异较大。染色体定位分析结果显示,Rh基因家族成员分布在7条染色体上(Chr 37、29、46、13、14、15和26),所有基因产物均为疏水性稳定蛋白,除Rhd产物外其余6个基因的产物均为酸性蛋白,其中α-螺旋是主要的二级结构,亚细胞定位预测结果显示,Rh基因产物全部位于细胞膜中。选择压力分析结果显示Rhbg和Rhcg2a受到正选择作用。在碳酸盐碱度胁迫下,青海湖裸鲤血氨浓度逐渐升高,胁迫48h后开始下降。基因表达研究表明,青海湖裸鲤鳃、皮肤、肾脏和肝脏组织中,Rhag、Rhbg、Rhcg1、Rhcg2a和Rh50的表达量呈现先上升后下降趋势;在血液组织中,Rhag、Rhbg、Rhcg2a和Rh50的表达量逐渐降低,Rhd的表达量呈现先上升后下降趋势。Rhbg和Rhcg2a可能是青海湖裸鲤氨氮代谢中发挥作用的关键基因,同时Rhag、Rhcg1、Rhcg2b和Rh50也发挥着一定的作用。就组织器官而言,鳃在青海湖裸鲤排氨中发挥主要作用,皮肤、肾脏和肝脏的作用次之。研究揭示了青海湖裸鲤Rh基因家族成员在氨氮代谢中的作用,为青海湖裸鲤资源保护提供了科学依据。

临床输血中Rh表型检测及同型输注的必要性

目的探讨Rh表型检测及同型输血的重要性。方法采用微柱凝胶法对本院3411例反复输血患者与4735例献血员样本进行Rh表型(CcDEe)分型检测,对患者进行不规则抗体产生情况统计。对Rh同型输血组与随机输血组的输血效果进行统计学分析。结果本研究Rh抗原及其表型分布情况与已报道的结果相似,Rh CCDee、Rh CcDEe为高频表型,Rh血型系统的抗体为高频不规则抗体,占检出抗体的62.42%;随机输血组Rh系统不规则抗体产生率6.67%、直接抗人球蛋白试验阳性率10%均高于Rh同型输血组的0和3.3%,随机输血组发生输血不良反应3例,Rh同型输血组无输血不良反应发生,且该组输注红细胞后的血红蛋白上升更明显。结论在反复输血的患者中,Rh表型检测和同型输血,可避免随机输血造成的Rh血型鉴定和交叉配血困难,有效降低由Rh血型系统引起的输血免疫和输血不良反应的风险,提高输血疗效,确保临床输血安全。

装载人参皂苷Rh2外泌体的制备及其对肝癌细胞株Huh7、PLC半数抑制浓度测算

目的制备装载人参皂苷Rh2(G-Rh2)的外泌体(Exos@G-Rh2),并测算其对肝癌细胞株Huh7、PLC的半数抑制浓度(IC50)。方法利用外泌体提取试剂盒从肝癌Huh7细胞培养上清中分离提纯外泌体(Exos),采用电穿孔法制备装载G-Rh2的外泌体Exos@G-Rh2,使用透射电子显微镜观察Exos@G-Rh2、Exos形态,使用纳米颗粒跟踪分析仪测算Exos@G-Rh2、Exos粒径,采用高效液相色谱(HPLC)法测算Exos@G-Rh2中G-Rh2含量,并计算Exos@G-Rh2载药量。采用PKH-26荧光染色法观察肝癌细胞株Huh7、PLC对Exos@G-Rh2的摄取情况,采用CCK-8法测算Exos@G-Rh2、游离G-Rh2对Huh7细胞、PLC细胞的IC50。结果Exos及Exos@G-Rh2在电镜下均可见经典的茶托状结构,且有质膜包裹,形态无显著差异。Exos@G-Rh2、Exos粒径分别为(156.90±10.23)nm、(143.47±8.62)nm,两者相比,P>0.05。Exos@G-Rh2载药量为24.25%±0.27%。在Huh7细胞、PLC细胞中,红色荧光清晰可见,主要在细胞质中。在Huh7细胞中,游离G-Rh2的IC50值为(34.96±1.37)µg/mL,而Exos@G-Rh2的IC50值为(29.74±2.83)µg/mL,两者相比,P<0.05;在PLC细胞中,游离G-Rh2的IC50值为(33.41±1.47)µg/mL,而Exos@G-Rh2的IC50值为(30.08±1.12)µg/mL,两者相比,P<0.05。结论成功制备Exos@G-Rh2,其形态和粒径与Exos无显著差异,可被Huh7细胞、PLC细胞摄取。与游离G-Rh2相比,Exos@G-Rh2对Huh7细胞、PLC细胞的IC50更低。

镁尖晶石砖在RH真空处理的应用及对钢水增铬的影响

针对武汉钢铁有限公司炼钢厂RH真空处理装置使用镁铬砖存在的铬污染及钢水增铬问题,以大结晶电熔镁砂、铝镁尖晶石、金属铝粉和硅粉为原料,以热固性酚醛树脂为结合剂,制备了RH真空用镁尖晶石砖,在该炼钢厂进行了工业应用试验,三炼钢分厂RH真空插入管平均使用寿命130次,底部槽平均使用寿命384次,使用寿命与镁铬砖相当。四炼钢分厂RH真空插入管平均使用寿命97.17次;底部槽平均使用寿命194.28次;冶炼电工钢条件下寿命有所降低。镁尖晶石砖与镁铬砖相比增Cr质量分数平均降幅64.49%,利于降低钢水中的Cr含量。