RhDel型与RhC抗原的相关性研究

目的研究RhDel型与RhC抗原之间的相关性,为临床鉴别RhDel型提供一种更为简便的方法。方法收集137份样本,血清学方法检测Rh抗原,吸收放散实验鉴定RhDel型,PCR-SSP技术检测RHD1227多态性。结果 137例RhDel型样本中,RhC抗原阳性比例为84.67%(116/137),RhDel型与RhC抗原具有显著的相关性(P<0.05)。RHD1227A等位基因在Rh-Ccee和RhCCee表型所占的比例分别为65.52%(76/116)和18.10%(21/116)。结论 RhDel个体与RhC阳性表型具有相关性,将RhC表型检测和RHD1227A联合检测用于RhDel型的鉴定,是一种临床可行的方法。

122名Rh阴性献血者中检出35例RhDel表型

目的了解目前常规血清学方法鉴定的Rh阴性献血者中RhDel表型的概率。方法采用盐水试管法鉴定Rh血型,吸收放散试验鉴定Del表型。结果122名Rh阴性血型的献血者中检出35例RhDel表型(概率为28.69%)。结论目前常规盐水法初筛的Rh阴性献血者中存在一定比例的RhDel表型,应引起输血工作者的重视。

中国哈尔滨地区献血人群RhDel表型的分子机理研究

本研究探讨中国哈尔滨地区献血人群RhDel表型表达的分子机制。应用血清学及分子生物学方法,对374例经间接抗人球蛋白试验确认为RhD阴性的献血者进行红细胞RHD血型基因分型和RH基因变异体检测,并对无法确定RHD基因型别的特殊样本进行测序分析。结果表明,374例阴性献血者样本中共检出RHD Del型62例,占16.6%。其中RHD 1227A型61例,发现中国人中罕见的RHD Del(cde)1等位基因1例。经测序分析,检出存在RHD711DelC等位基因者11例。另外,在3份样本中发现了新等位基因突变点。结论:RHD1227A等位基因是中国哈尔滨地区Del表型人群所普遍携带的等位基因,是Del表型个体的重要遗传标记。

RhDel表型与RHEC表型的相关性研究

目的分析广东汉族人群RhD阴性个体中,RhDel表型个体RHEC表型的分布情况和两者的相关性,以及PCR-SSP技术在RhDel基因检测中的应用价值。方法对400份广东汉族人群中血型血清学检测为RhD阴性的标本,采用血型血清学方法对RhDel表型和RHEC表型进行检测,并采用PCR-SSP方法进行RHD1227G>A基因检测。结果在400份RhD阴性标本中,89例(22.25%)检测到RhDel表型,主要分布在CCee、CeEe和Ccee表型的个体,在CCEe、ccEE、ccEe和ccee表型中未发现。在RhDel表型的标本中,同时检测到RHD1227G>A基因。结论 RhDel表型与RHEC表型具有一定的相关性;应用PCR-SSP技术能够对RhDel基因进行检测;与传统的间接抗人球蛋白实验和吸收放散实验相比,PCR-SSP技术能够快速、便捷筛查RhDel献血者和受血者,避免抗-D抗体引发的同种免疫反应和RhD阴性血液的浪费。

4例Rh部分D基因型研究

Rh血型系统的抗原至今已发现40多个,但涉及临床的主要有D、C、c、E、e 5个抗原,其中以D抗原最为重要,是临床上引起新生儿溶血病、溶血性输血反应的最重要的血型抗原[1],具有很强的免疫原性.D抗原存在多种变异体,如部分D、弱D、D放散型、-D-型等.D抗原的表达强弱不一,其中以RhCcEe缺失型（-D-）的抗原性最强,而D放散型（Del）最弱,RhD常规定型技术多被误定为RhD阴性.

8例Rh Del型研究

目的了解常规血清学试验为 ＲｈＤ阴性者中 Ｒｈ Ｄｅｌ（Ｄ极弱型）的情况，并探讨其临床价值。方法采用 ＰＣＲ－ＳＳＰ 技术，检测３３例常规血清学试验为ＲｈＤ阴性，１８例为ＲｈＤ阳性样本的Ｄ基因外显子。并对３３例ＲｈＤ阴性样本进行 吸收放散试验。结果３３例ＲｈＤ阴性样本Ｄ基因外显子有８例无缺失、５例部分缺失、２０例完全缺失，其中８例无缺失 样本可以吸收并放散出Ｄ抗体，为ＲｈＤｅｌ型。１８例ＲｈＤ阳性样本Ｄ基因无缺失。结论ＲｈＤｅｌ型常规血清学试验易被 误认为ＲｈＤ阴性，其Ｄ抗原虽然表达极弱，但外显子无缺失。提示凡常规血清学方法检测为ＲｈＤ阴性的供血者，必须 进一步作吸收放散试验作Ｄｅｌ排除，以确保输血安全。

流式细胞术检测不同RhD血清型红细胞RhD抗原的表达

本研究旨在建立流式细胞术(FCM)检测红细胞表面RhD抗原的实验方法,并研究不同RhD血清型红细胞表面D抗原表达的差异。选取标准的RhD(+)和RhD(-)细胞按1∶1比例混合,用间接标记法[一抗为IgG抗-D,二抗为FITC-抗-IgG F(ab′)2]染色,应用FCM检测RhD(+)细胞的比例,并确立IgG抗-D的最佳使用稀释度。采用FCM检测RhD阳性、弱D型、RhDel型、RhD阴性红细胞表面D抗原数量。结果显示,IgG抗-D单克隆抗体的最佳使用稀释度是1∶4,1×106/50μl。RhD阳性、弱D型、RhDel型、RhD阴性者RhD(+)红细胞百分率分别为(96.8±2.97)%、(79.5±9.88)%、(47.8±11.43)%、(3.7±2.96)%,红细胞表面D抗原平均荧光强度依次为33.3±6.21道、18.6±5.39道、7.10±1.17道、0.79±0.55道。结论:4种不同血清表现型的RhD抗原数量的差异有显著性,以RhD阳性的抗原数量最多,弱D型次之,RhDel型最少。

89例Rh阴性血清学调查分析

Rh血型学系统的抗原至今发现60多个，其中大多数是RhD多态性，涉及临床的有D、C、c、E、e5个抗原．在临床上，凡带有D抗原者为RhD阳性，不带有D抗原者为RhD阴性．研究表明，常规盐水法RhD阴性样本中有相当一部分样本存在减弱的RhD抗原，而D抗原具有很强的免疫原性，是最重要的输血反应抗原和引起新生儿溶血病的主要血型抗原,

番禺地区RhD阴性献血者Del表型的基因分型研究

目的研究分析番禺地区RhD阴性献血者Del表型的基因分型特征。方法采用120孔微量板法对参加无偿献血的样本进行RhD阴性筛查;采用抗人球蛋白法进行确认,采用吸收放散实验进行Del表型筛选;采用RH基因变异体基因分型检测试剂盒(PCR-SSP法)对确认阴性样本进行RH DEL基因分型。结果在26 172例献血者中筛选出60例RhD阴性,经确认59例为RhD阴性,阴性频率为0.23%;吸收放散实验检出10例Del表型;基因分型检测出10例RHD 1227A DEL基因型。结论番禺地区RH DEL发生频率约为16.9%(10/59),以RHD 1227A DEL为主。吸收放散实验联合PCR-SSP法检测,能进一步提高RH DEL鉴定的准确性。

洛阳地区无偿献血者Rh血型临床相关高频抗原分布调查

目的:准确估计洛阳地区Rh血型系统Rh表型频率和估算Rh单倍型频率。方法:回顾性统计356041例献血者的RhD检测数据,采用血清学检测10373例RhD阳性献血者的CcEe抗原,Rh基因频率和单倍型频率的计算采用方根法〔1〕。结果:洛阳地区献血者中RhD阳性率为99.54%,其中弱D检出率约为0.02%;阴性率为0.46%,其中Del检出率约为0.03%。Rh抗原基因和单倍型频率为:D:0.9324,d:0.0676,DCe:0.6154,DcE:0.2704,dce:0.0515,Dce:0.0343,dCe:0.0122,DCE:0.0132,dcE:0.0023,DCE:0.0006。弱D以表型Dc-cEe、DCcee为主,Del型以表型DccEe、DCCee为主,RhD阴性献血者表型以dccee、dCcee为主。结论:精确地估算出了献血者中RhD抗原阴性分布频率,并准确计算出RhDCcEe抗原的基因频率和Rh单倍型频率,对一些稀有的Rh弱D型,Del型其D抗原弱表达与C、E抗原有关联。需要制定标准的弱D定型方法和合理的输血策略,来减少抗球蛋白试验对弱D抗原的漏检。