背景与目的以往的研究表明,RhoC在许多肿瘤中过表达,RhoGDIβ、RhoGDIγ(Rho GDP dissociation inhibitors.β、γ)被认为是Rho的负性调节因子,目前在肿瘤中研究有限。本研究旨在探讨RhoC及其调节因子RhoGDIβ、RhoGDIγ在肺鳞癌、腺癌...背景与目的以往的研究表明,RhoC在许多肿瘤中过表达,RhoGDIβ、RhoGDIγ(Rho GDP dissociation inhibitors.β、γ)被认为是Rho的负性调节因子,目前在肿瘤中研究有限。本研究旨在探讨RhoC及其调节因子RhoGDIβ、RhoGDIγ在肺鳞癌、腺癌中的表达、他们之间的关系及临床意义。方法应用Western blot,RT-PCR检测40例新鲜肺癌组织中RhoC及RhoGDIβ、RhoGDIγ蛋白和mRNA表达,分析其与临床病理参数间的关系。结果RhoC、RhoGDIβ、RhoGDIγ蛋白和mRNA在肺癌组织表达均显著高于对应正常肺组织;RhoC、RhoGDIγ和临床TNM分期,淋巴结转移正相关(r=0.659,P<0.05)(r=0.597,P<0.05),RhoGDIβ和临床TNM分期,淋巴结转移呈负相关(r=-0.621,P<0.05)。结论RhoC及RhoGDIβ、RhoGDIγ表达水平与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关。展开更多
目的探讨HBx(hepatitis B virus X protein)及HBs(hepatitis B virus S protein)对RhoC启动子的作用机制,分析可能相互作用的启动子调控元件。方法构建RhoC启动子截短突变克隆,双荧光素酶报告分析系统(the dual-luciferase repor...目的探讨HBx(hepatitis B virus X protein)及HBs(hepatitis B virus S protein)对RhoC启动子的作用机制,分析可能相互作用的启动子调控元件。方法构建RhoC启动子截短突变克隆,双荧光素酶报告分析系统(the dual-luciferase reporter assay system)检测RhoC启动子相对荧光素酶活性,通过分析启动子相对活性变化进而筛寻到起调控作用的启动子区段。过表达Ets-1转录因子,检测RhoC启动子相对荧光素酶活性。结果①成功构建了5个RhoC启动子截短变异克隆。②分别在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中验证了RhoC截短变异启动子活性,确定了起关键作用的启动子区段(-491bp~-320bp、-124bp~-58bp)。③HepG2细胞中分别过表达HBx及HBs,发现启动子区段-491bp~-320bp及-187bp~-124bp可以被HBx及HBs调控。④文献检索结合软件分析这些启动子区段序列,找到了高度相关的转录因子Ets-1、NF-κB、Sp1等。⑤荧光素酶检测和Real-time PCR初步验证了转录因子Ets-1对RhoC的调控作用。结论HBx及HBs可能通过Ets-1等转录因子调控RhoC启动子进而上调RhoC启动子活性。展开更多
文摘背景与目的以往的研究表明,RhoC在许多肿瘤中过表达,RhoGDIβ、RhoGDIγ(Rho GDP dissociation inhibitors.β、γ)被认为是Rho的负性调节因子,目前在肿瘤中研究有限。本研究旨在探讨RhoC及其调节因子RhoGDIβ、RhoGDIγ在肺鳞癌、腺癌中的表达、他们之间的关系及临床意义。方法应用Western blot,RT-PCR检测40例新鲜肺癌组织中RhoC及RhoGDIβ、RhoGDIγ蛋白和mRNA表达,分析其与临床病理参数间的关系。结果RhoC、RhoGDIβ、RhoGDIγ蛋白和mRNA在肺癌组织表达均显著高于对应正常肺组织;RhoC、RhoGDIγ和临床TNM分期,淋巴结转移正相关(r=0.659,P<0.05)(r=0.597,P<0.05),RhoGDIβ和临床TNM分期,淋巴结转移呈负相关(r=-0.621,P<0.05)。结论RhoC及RhoGDIβ、RhoGDIγ表达水平与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关。
文摘目的探讨HBx(hepatitis B virus X protein)及HBs(hepatitis B virus S protein)对RhoC启动子的作用机制,分析可能相互作用的启动子调控元件。方法构建RhoC启动子截短突变克隆,双荧光素酶报告分析系统(the dual-luciferase reporter assay system)检测RhoC启动子相对荧光素酶活性,通过分析启动子相对活性变化进而筛寻到起调控作用的启动子区段。过表达Ets-1转录因子,检测RhoC启动子相对荧光素酶活性。结果①成功构建了5个RhoC启动子截短变异克隆。②分别在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中验证了RhoC截短变异启动子活性,确定了起关键作用的启动子区段(-491bp~-320bp、-124bp~-58bp)。③HepG2细胞中分别过表达HBx及HBs,发现启动子区段-491bp~-320bp及-187bp~-124bp可以被HBx及HBs调控。④文献检索结合软件分析这些启动子区段序列,找到了高度相关的转录因子Ets-1、NF-κB、Sp1等。⑤荧光素酶检测和Real-time PCR初步验证了转录因子Ets-1对RhoC的调控作用。结论HBx及HBs可能通过Ets-1等转录因子调控RhoC启动子进而上调RhoC启动子活性。