Rhodococcus sp-1的Mn^2＋生物去除能力及诱导特性

利用传统的细菌分离方法,从地下水生物除锰滤池中分离、纯化出1株细菌,经LBB(leucoberbelin blue)法定性检测其具有Mn2+氧化能力,利用Sherlock细菌鉴定系统初步确定其属于红球菌属(Rhodococcus sp).对红球菌Rhodococcus sp-1菌株的生物除锰能力和诱导特性研究结果表明,Rhodococcus sp-1菌株在达到第1个生长稳定期,细菌浓度2.3×108个/mL时,其Mn2+的去除量可达到35 mg/L,具有很强的Mn2+生物去除能力;同时Fe的存在对Rhodococcus sp-1 Mn2+氧化活性的表达具有诱导作用,在相同培养条件下,Fe3+的诱导性强于Fe2+,其诱导速度是Fe2+的3~4倍;有机Fe3+的诱导性强于无机Fe3+,其诱导速度是无机Fe3+的1.6~2倍.

苯胺降解菌Rhodococcus sp.E2的分离与苯胺氧化酶基因簇的初步鉴定

从江苏省南通市某农药厂的活性污泥中分离出一株苯胺降解菌株E2,根据表型特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析,将其鉴定为红球菌属(Rhodococcus sp.)的细菌。菌株E2降解苯胺的最适温度为30℃、最适pH为7.0,降解苯胺的最高浓度为800 mg·L-1。该菌能降解苯胺、邻甲基苯胺、对甲基苯胺和2,5-二氯苯胺,与已报道的苯胺降解菌的底物谱显著不同。通过扩增高度保守的片段和染色体步移,获得了菌株E2中负责苯胺降解的基因簇,该基因簇在基因组成、排布及同源性方面和已报道的基因簇有较大差异,是研究苯胺降解分子机理的较好材料。

Rhodococcus sp.BX2菌对乙腈的降解特性及降解途径研究

对Rhodococcus sp.BX2菌降解乙腈的特性及其降解途径进行了研究.结果显示,在底物浓度为800mg·L-1,接种量为1.0%,培养温度为35℃,环境pH为7.5的条件下,16h时Rhodococcus sp.BX2菌对乙腈的降解率为95.98%;添加葡萄糖可在培养初期加快Rhodococcus sp.BX2菌的生长和对乙腈的降解,蔗糖、乙酰胺和尿素对其影响不大.将BX2菌接种到含有高乙腈浓度(25000mg·L-1)的合成废水中,培养180h后,乙腈降解率可达88.59%.在催化反应60min后,Rhodococcus sp.BX2腈水合酶与腈水解酶的总酶活可达到422.81U·mL-1,对其相关基因序列的分析结果表明,Rhodococcus sp.BX2中同时存在腈水解酶基因和腈水合酶基因,因此,确定乙腈的降解主要由腈水合酶途径完成,可能同时存在腈水解酶的降解途径.

两株喹啉降解菌代谢途径的分析

从焦化废水处理系统中分离得到2株以喹啉为唯一碳源和氮源生长代谢的降解菌,经形态、生理生化特征及16S rRNA基因的序列分析初步鉴定为Pseudomonas sp.QG6和Rhodococcus sp.QL2.2株菌对喹啉均表现出良好的降解性能,当喹啉初始浓度为150mg/L时,均能在8h内降解完全.QG6对TOC去除率高于QL2.采用HPLC检测到2株菌的中间产物不尽相同,所有被检出的中间产物均比喹啉极性强.GC/MS鉴定结果显示,QG6的中间产物有2-羟基喹啉、8-羟基香豆素和2,3-二羟基苯丙酸,QL2的中间产物包括2-羟基喹啉、2,6-二羟基喹啉和8-羟基香豆素.探讨了降解喹啉的2条不同代谢途径.

燃料油的生物脱硫

从大港油田的污泥中分离出一株能以二苯并噻吩(DBT)为唯一硫源而生长的菌株(Rhodococcussp.EBT-2)。HPLC分析结果表明,EBT-2可专一性降解DBT,生成2-羟基联苯(2-HBP)。以DBT为唯一硫源考察了培养基的初始pH、温度、碳源和氮源等因素对EBT-2生长和脱硫的影响。结果表明,EBT-2的最适初始pH为7.5,最适温度为30℃,最佳碳、氮源分别是葡萄糖和氯化铵。在最适条件下,EBT-2能够在48 h内将DBT从0.25 mmol/L降解到0.03 mmol/L,同时生成0.19 mmol/L 2-HBP。

苄嘧磺隆和丁草胺降解菌原生质体融合条件优化

研究以苄嘧磺隆降解菌Rhodococcus sp.BX2与丁草胺降解菌Acinetobacter sp.LYC-1为亲本,优化用于构建可同时降解苄嘧磺隆与丁草胺的融合子的原生质体融合条件。通过单因素试验和正交试验,确定原生质体融合的最佳条件:PEG4000 40%、35℃、10 min,500μL新生磷酸钙溶液,pH 7.5,此条件下融合频率达到2.67×10-7。以青霉素和磷霉素作为筛选的遗传标记,最终获得在含有上述两种除草剂的无机盐培养基中可稳定继代培养8代以上的融合子F1。该融合子在含有100 mg·mL-1苄嘧磺隆和100 mg·mL-1丁草胺的无机盐培养基中,F1的降解率分别为65.35%和62.41%。

生物脱硫技术用于清洁燃料生产的初步研究

从高硫油田筛选的红球菌Rhodococcussp.FS-2可以通过专一性断裂C—S键的“4S”途径将二苯并噻吩(DBT)转化成2-羟基联苯,从而降低油品中的硫含量。利用该菌株对DBT和汽油、柴油的脱硫研究结果表明,FS-2菌株对DBT及柴油中的有机硫有良好的选择性脱除作用,而且脱硫前后的烃类组分基本没有改变。说明该菌的脱硫过程不会破坏燃料油的有效成分,可以用于燃料油的深度脱硫。

红球菌HX-2所产胞外多糖的特性和对Cu^2+的吸附

【背景】目前,微生物所产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的理化性质及其在重金属吸附中的应用受到了广泛关注。【目的】研究红球菌HX-2所产胞外多糖的理化性质,并探究其对重金属的吸附情况。【方法】使用离子交换和凝胶色谱分离法对胞外多糖粗品进行纯化;利用苯酚硫酸法测胞外多糖中糖含量;用Bradford试剂盒检测胞外多糖中蛋白含量;使用甲醇萃取法检测胞外多糖中脂质含量;用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法分析胞外多糖中单糖组成;用扫描电镜(scanningelectronmicroscopy,SEM)法观察多糖表面形态;通过等温吸附模型和动力学模型探究胞外多糖对重金属的吸附效果。【结果】测得胞外多糖主要成分EPS-G-1中总糖含量为78.43%,蛋白含量为8.31%,脂质含量为8.22%;纯化后胞外多糖中单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和岩藻糖,质量比为27.31:26.67:24.83:15.85:4.80;通过等温吸附模型拟合得到HX-2所产胞外多糖对Cu^2+的最大吸附量为144.93 mg/g。【结论】红球菌HX-2所产胞外多糖对水体中Cu^2+具有良好的吸附作用,可用于工业废水中重金属离子的处理。

一株高效不对称还原产生(R)-苯基乙二醇的菌株筛选、鉴定及全细胞催化体系

R）-苯基乙二醇是合成许多光学活性药物的重要手性中间体，其制备具有重要的现实意义. 以α-羟基苯乙酮为底物，从土壤中筛选得到一株能够立体选择性催化α-羟基苯乙酮产生（R）-苯基乙二醇的细菌菌株HBU-SI7. 经形态学观察和16S rDNA序列分析，鉴定此转化菌株为红球菌属菌株Rhodococcus sp. 菌株全细胞催化体系研究表明在邻苯二甲酸二丁酯-磷酸盐缓冲液（V：V = 1：3）的两相催化体系下，菌体转化α-羟基苯乙酮的最优浓度为3.0 g/L，转化率高达96.2%，e.e值为99.3%. 本研究建立的红球菌全细胞催化还原体系对（R）-苯基乙二醇的高效制备具有潜在的研究和应用价值. （图6 表2 参20）