马缨杜鹃种子育苗技术研究

【目的】为解决滇东地区马缨杜鹃种子繁殖出苗率和存活率低的问题。【方法】对马缨杜鹃进行浸种催芽处理、不同播种时间、不同遮荫度、不同叶面施肥的研究。【结果】马缨杜鹃种子的浸种催芽处理以50℃温水浸种处理最佳,出苗时间仅22 d;繁殖最佳时间是夏季6月,出苗时间短、出苗率高、整齐度好;幼苗期需要进行遮荫处理,遮荫以70%为最佳;幼苗生长初期采用沼液和矾肥水叶面喷施,补充营养的效果较好。【结论】在滇东地区,马缨杜鹃种子于50℃温水浸种、夏季6月份播种,幼苗期采用遮荫70%、叶面喷施沼液和矾肥水,可有效提高苗木存活率、促进植株长高及培育壮苗。

马缨杜鹃叶的化学成分及其抗菌活性研究

目的:研究马缨杜鹃Rhododendron delavayi Franch.叶乙醇提取物的化学成分及其抑菌活性。方法:通过硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和半制备液相色谱等技术进行分离纯化,通过核磁共振及其质谱等波谱技术进行化合物结构鉴定;采用微量倍比稀释法对单体化合物进行最小抑菌浓度的测定。结果:从马缨杜鹃叶中分离得到15个化合物,分别鉴定为:(-)-rhododendrol(1)、(-)-rhododendrin(2)、benzyl-β-D-glucopyranoside(3)、(1R,7R,10S)-11-O-β-D-glucopyranosyl-4-guaien-3-one(4)、槲皮素(5)、methyl-2-O-β-D-glucopyranosylbenzoate(6)、(-)-南烛木树脂酚-9-O-β-D-吡喃木糖苷(7)、(+)-南烛木树脂酚-9-O-β-D-吡喃木糖苷(8)、3,5-dimethoxyl-4-hydroxylphenylpropanol-9-O-β-D-glucopyranoside(9)、α-tocopherylquinone(10)、α-亚麻酸(11)、亚油酸(12)、β-谷甾醇(13)、lawsaritol A(14)、28-羟基-β-香树脂醇(15)。化合物5对金黄色葡萄球菌和青枯菌有显著抑菌作用,最小抑菌浓度分别为50和25μmol/L。结论:其中,化合物3、4、6、9、10、14为首次从杜鹃花科植物中分离得到,化合物15为首次从该属植物中分离得到,化合物1、2、7、8、11、12为首次从该植物中分离得到。

苗药榜留丽叶中毒性成分杜鹃醇的提取工艺与含量测定

采用RP-HPLC法,以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱,检测波长210 nm,柱温25℃,流速1 mL·min^(-1);在单因素实验基础之上,采用Box-Behnken响应面分析法优化杜鹃醇的最优工艺条件。杜鹃醇在0.1~2.5μg(r=0.9998)内具有良好的线性关系,平均加样回收率为97.90%,RSD=1.38%,榜留丽叶中杜鹃醇含量在7.02~23.23 mg/g间。在最佳工艺条件下:乙醇浓度为90%、料液为1∶50、温度为90℃、提取3次、每次2 h,杜鹃醇含量达8.17 mg/g。本文所筛选的RP-HPLC检测方法可作为苗药榜留丽的质量控制方法。

马缨杜鹃繁殖技术研究进展

马缨杜鹃繁殖技术一直是其产品商业化的关键环节,通过对近年来众多科研工作者在马缨杜鹃种子繁殖、扦插繁殖、组织培养等方面展开的研究进行综述,总结了马缨杜鹃繁殖技术要点,指出了当前马缨杜鹃繁殖技术存在的问题:主要是种子繁殖商品化周期长、组培繁殖技术门坎高且商品化周期长、扦插和嫁接繁殖成活率低、分株繁殖系数低。同时,提出了马缨杜鹃繁殖技术未来需要研究解决的方向是如何缩短马缨杜鹃营养生长,提高扦插和嫁接繁殖成活率,并兼顾高繁殖系数与短营养生长,以加快其商品化、市场化、产业化进程。

生物炭-泥炭复合基质对马缨杜鹃生长和生理的影响

以马缨杜鹃(Rhododendron delavayi Franch.)1年生幼苗为材料,用体积分数10%、20%、30%和40%木炭或稻壳炭与木炭组成8组复合基质,比较各组复合基质的理化性质差异,分析幼苗生长及叶片光合生理指标和矿质元素含量的变化及其与复合基质理化性质的相关性。结果表明:木炭和稻壳炭形态结构和理化性质均不同。随木炭或稻壳炭体积分数的提高,复合基质的pH值、电导率、通气孔隙度、总孔隙度以及P、K、Mg、Na、Fe和Mn含量总体上逐渐升高,持水孔隙度和N含量总体上逐渐降低,Zn含量则无明显变化,且多数复合基质的各项理化指标与对照(泥炭)无显著差异。随木炭体积分数的提高,幼苗的株高、地径、单株叶片数、单株叶面积、单株各器官干质量和单株总干质量以及叶片的叶绿素相对含量(SPAD)、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)总体上先升高后降低,水分利用效率(WUE)逐渐降低;叶片的N、P、K、Mg、Na、Fe、Mn和Zn含量总体上逐渐升高。随稻壳炭体积分数的提高,除幼苗株高外,其他7项生长指标以及叶片的SPAD、Pn、Tr和Gs值总体上逐渐升高,WUE值总体上逐渐降低;叶片的P、Mg、Fe和Mn含量逐渐升高,N、K、Na和Zn含量波动变化。相关性分析结果表明:幼苗的株高和地径与复合基质各项理化指标均无显著相关性;叶片的胞间CO 2浓度和WUE值与复合基质总孔隙度呈显著负相关;单株的叶片数、叶面积、叶干质量和根干质量以及SPAD、Pn、Tr和Gs值与复合基质的总孔隙度和Mn含量呈极显著或显著正相关,与pH值、电导率和Na含量呈显著负相关。综合分析结果表明:木炭或稻壳炭与泥炭组成的复合基质均可不同程度促进马缨杜鹃幼苗的生长、光合代谢和矿质元素吸收;添加体积分数20%或40%稻壳炭时,马缨杜鹃幼苗长势较佳、光合能力较强。

马樱杜鹃花色素的提取及其性质研究

以马樱杜鹃花为原料,用树脂法提取马樱杜鹃花红色素,并对其理化性质进行研究。结果表明,HPD-200树脂对该色素具有较高的吸附量,用75%乙醇为洗脱剂得到的产品质量好、色价高,且HPD-200树脂重复使用20次后吸附率仅降低1.4%;该色素在酸性条件下具有较好的稳定性,并且对光、热和常用食品添加剂比较稳定,是一种价廉易得、安全可靠、使用方便的天然植物色素,在食品工业中有一定的开发利用价值。

马缨杜鹃寄生化学成分的研究

杜鹃花科植物马缨杜鹃寄生，经不同溶剂提取及多次层析分离、纯化后，首次从中分离出９个化合物。经波谱及色质联用等鉴定为二十九碳烷、琥珀酸、槲皮素、槲皮素－３－Ｏ－α－阿拉伯呋喃糖甙、槲皮素－３－Ｏ－α－鼠李吡喃糖甙、菜油甾醇、菜子甾醇。

营养元素对马缨杜鹃花芽发育和花期的影响

采用正交设计研究了N、P、K、Ca等营养元素对百里杜鹃花区马缨杜鹃花芽发育和花期的影响。结果表明:N、P、K、Ca各营养元素对花芽横径、花芽纵径、花朵直径无影响;而400mg/kg N5、0 mg/kg P2、00 mg/kg K5、0 mg/kg Ca组合对花芽纵径的影响最大;200 mg/kg N、200mg/kg P2、00 mg/kg K5、0 mg/kg Ca组合对花朵直径影响最大;400 mg/kg N、50 mg/kg P、200mg/kg K和50 mg/kg Ca组合能分别使始花期、末花期提前8 d和5 d。

马缨杜鹃茎的化学成分研究

利用各种色谱技术从马缨杜鹃(Rhododendron delavayi Franch.)茎中分离得到10个化合物。通过波谱学方法鉴定为异鼠李素(1),nectandrin B(2),resveratrol-3-O-β-D-glucoside(3),lysidiside N(4),19α-hydroxyasiatic acid(5),白桦脂酸(6),3β-hydroxylup-12-en-28-oic-acid(7),obtusalin(8),methyl 2,4-dihydroxy-6-methylbenzoate(9),2,5-dihydroxy-3-methoxytoluene(10)。化合物2～9为首次从该种植物中分离得到。

马缨杜鹃组织培养中抗褐技术研究

以马缨杜鹃2 a生带芽茎段为外植体,在组织培养过程中研究了光照强度、温度、抗氧化剂、吸附剂等对褐化的影响。结果表明:暗培养的抗褐效果较光照培养好,暗培养的最佳时间为10 d。在暗培养条件下,培养基中添加1.0 g/L Ac抗褐效果最好,转接是削弱或减轻褐化现象的有效措施,把二者结合起来褐化率可以降到15.03%。低温处理、添加AgNO3和PVP不能有效地抑制褐化。

马缨杜鹃组织培养过程中外植体褐变与多酚氧化酶及酚类物质的关系

在马缨杜鹃组织培养过程中测定了1～3年生马缨杜鹃叶片、茎尖、茎段的总酚含量和PPO活性。结果表明,1～2年生茎段的总酚含量和PPO活性均较低,两者无显著差异,组织培养中发现,2年生茎段的褐变率最低。进一部研究不同季节2年生茎段组培总酚含量和多酚氧化酶活性变化与褐变率的关系,褐变率和总酚含量呈极显著正相关(r=0.879**),PPO活性与外植体褐变率之间呈显著正相关(r=0.714*),说明外植体褐变率是由酚类物质和PPO引起的。

马缨杜鹃壮苗与生根培养基的筛选研究

以马缨杜鹃组织培养苗为试材,进行了壮苗和生根培养基配方的研究,为最终建立马缨杜鹃组织培养和快速繁殖技术体系奠定基础。结果表明,壮苗的最适培养基为添加蔗糖20 g.L-1和卡拉胶6 g.L-1的WPM,最适于生根的培养基为WPM+NAA 0.5 mg.L-1+IBA 1.00 mg.L-1+活性炭0.2%+蔗糖20 g.L-1,生根率达到85.0%。

马缨杜鹃离体快繁体系的建立及优化

以马缨杜鹃种子为外植体,建立和优化了马缨杜鹃高效而稳定的离体快繁体系,并采用ISSR标记对试管苗的遗传稳定性进行分子检测.结果表明:种子在接种于1/4MS+1.0mg/L KT培养基上,萌发率在70%以上,丛生芽诱导以无菌苗带顶芽茎段为佳,最适培养基为WPM附加0.5mg/L TDZ和1.0mg/L IBA,丛芽伸长最适培养基为WPM+KT 0.5mg/L+GA 1.0mg/L.在1/2WPM+KT 0.5mg/L+NAA 1.0mg/L+IBA 2.0mg/L培养基上30d开始生根,生根率可达100%.90d后驯化移栽成活率在80%以上.采用20个ISSR引物扩增,对通过上述流程快繁的试管苗的体细胞无性系遗传变异进行分子检测,未检测到多态性带,表明该快繁体系能生产出遗传稳定性高的试管苗.

阿魏酸对2种野生杜鹃种子萌发的化感作用

为探究化感物质阿魏酸对马缨杜鹃和露珠杜鹃种子萌发的化感作用,本研究采用不同浓度阿魏酸分别处理马缨杜鹃和露珠杜鹃种子,利用单因素方差对其发芽率、发芽势、发芽指数和化感指数进行差异性分析。结果表明:阿魏酸显著抑制马缨杜鹃和露珠杜鹃种子的萌发,对2种杜鹃种子的抑制作用随浓度的增加而增加。阿魏酸对马缨杜鹃和露珠杜鹃种子均具有显著的化感作用,化感效应的最强浓度为1 000μg/mL。

马缨杜鹃继代培养培养基配方研究

[目的]研究马缨杜鹃组织培养中继代培养阶段的培养基,以期筛选出最适继代培养培养基配方,为最终建立马缨杜鹃无毒快繁体系奠定基础。[方法]以1/4 MS培养基为基本培养基,附加不同浓度的2-ip和6-BA,并以食用白砂糖代替分析纯蔗糖,对马缨杜鹃进行继代培养,比较芽诱导率和生长状况。[结果]试验结果表明,2-ip能促进马缨杜鹃单芽茎段增殖,6-BA不能;当2-ip浓度为1.50mg/L时,增殖系数和平均株高均高,分别为2.10和3.60 cm。[结论]最适继代培养基为1/4 MS,30 mg/L蔗糖,8 mg/L琼脂,2-ip 1.50 mg/L,NAA1.50 mg/L,可以用食用白砂糖代替分析纯蔗糖对腋芽的诱导。

马缨杜鹃下胚轴组织培养及全息现象的研究

以马缨杜鹃下胚轴为外植体,用L9(34)正交实验法研究基本培养基、NAA、2-ip对芽器官诱导的影响。以马缨杜鹃下胚轴切断为材料,研究全息现象。结果表明马缨杜鹃下胚轴诱导芽的最佳培养配方为1/4 MS+NAA0.75 mg/L+2-ip2.0 mg/L。马缨杜鹃切段在离体培养时存在全息现象,其不定芽发生的部位及数量、频率的梯度变化都遵循生物全息律,全息律的呈现在一定程度上受外源激素和切断位置的影响。

黔西北马缨杜鹃花红色素的毒性试验

马缨杜鹃（ＲｈｏｄｏｄｅｎｄｒｏｎｄｅｌａｖａｙｉＦｒａｎｃｈ．）是贵州省分布较广的一种植物。为提高其利用价值，对花的红色素进行了毒性试验。结果表明：急性毒性试验属实际无毒范围，Ａｍｅｓ试验，骨髓细胞微核试验和精子畸形试验均未显示诱变作用。

百里杜鹃保护区马缨杜鹃土壤真菌群落特征

近年来,贵州百里杜鹃保护区戛木管理区发现有部分马缨杜鹃感染根腐病,造成其大量死亡,致病机制尚不明确。为了研究马缨杜鹃根腐病发病区土壤真菌群落结构组成,探讨真菌微生物种类组成变化与根腐病发病的关联,以感病马缨杜鹃根部土壤和未感病马缨杜鹃根部土壤的土壤为对象,利用高通量测序技术进行测序,发现2份感病杜鹃根部土壤中分别有846和911个操作分类单元(operating taxonomic unit, OTUs),而未感病杜鹃根部土壤仅有439个OTUs。通过分析土壤真菌物种丰度和分类、α-多样性、β-多样性、主成分(principal component analysis, PCA)分析和聚类分析。结果表明:感病马缨杜鹃和未感病马缨杜鹃根部土壤真菌多样性和群落结构存在较大差异,未感病杜鹃根部土壤的真菌微生物种类明显少于感病杜鹃根部土壤。

水淹胁迫下马缨杜鹃幼苗叶片转录组初步分析

为探究马缨杜鹃叶片基因表达水平对水淹胁迫的响应。本研究分别以水淹胁迫下不同处理时间的马缨杜鹃幼苗叶片和正常叶片(CK)为试验材料,通过lllumina Hisq高通量测序平台进行转录组测序,分析水淹胁迫下马缨杜鹃幼苗叶片差异表达基因。结果显示,与对照组相比,水淹胁迫10 d后,2006个基因呈现差异表达(其中1067个基因上调,939个基因下调);水淹胁迫20 d后,3564个基因呈现差异表达(其中1698个基因上调,1866个基因下调)。对差异表达基因进行GO富集分析发现,差异表达基因主要富集在代谢过程、细胞过程、单一生物过程、细胞、细胞区域、细胞膜、细胞膜部分、催化活性和结合蛋白。对差异表达基因进行KEGG富集分析发现,差异基因主要富集在植物激素信号转导、淀粉和糖代谢、氨基酸的生物合成及苯丙素的生物合成途径。结果表明水淹胁迫诱导马缨杜鹃叶片相关基因表达,从而响应水淹胁迫,本研究结果为进一步探究马缨杜鹃对水淹胁迫响应分子机制提供初步理论依据。