大位阻氨基酸Fmoc-Arg(Pbf)-OH与Rink Amide-AM树脂的高效缩合

采用集自动搅拌、过滤、鼓泡等多重功能于一体的自制多肽固相合成反应器,以对称酸酐法、活化酯法、2,6-二氯苯甲酰氯(DCB)法研究了大位阻氨基酸Fmoc-Arg(Pbf)-OH与Rink Amide-AM树脂的连接反应工艺。探讨了催化体系、溶剂体系、反应时间、反应物配比以及搅拌方式对合成Fmoc-Arg(Pbf)-Rink Amide-AM树脂反应的影响。结果表明,采用活化酯法(DIC/HOBt/DMAP)时连接率最高,最佳反应条件为:在采用N2辅助磁力拌系统,以体积比为1∶1的DMA/DCM为反应溶剂,氨基酸与树脂物质的量的比为3∶1,反应时间为3 h时,连接率高达93%。

Rink酸树脂—4-(2′,4′-二甲氧苯基羟甲基)苯氧甲基聚苯乙烯的合成

加入KI可使Linker(I)与氯甲基聚苯乙烯的反应时间大大缩短 ;在用NaBH4 还原时加入金属卤化物增强其还原能力 。

内吗啡肽-2的合成

采用多肽固相合成法,以Rink Amide树脂为载体,Fmoc保护氨基酸为原料,以DIC/HOBt为缩合体系,按照内吗啡肽-2的肽序列,从C端向N端偶联,肽树脂经三氟乙酸裂解,得到内吗啡肽-2粗品,纯度为98.5%,再经制备型反相高效液相色谱法纯化和转盐,得到醋酸内吗啡肽-2纯品,纯度>99.0%,收率为80%。

生长抑素类似物TT-232的合成

采用多肽固相合成法,以Rink Amide树脂为载体、Fmoc保护的氨基酸为原料、DIC/HOBt为缩合体系,按照生长抑素类似物TT-232的氨基酸序列从C端向N端顺次偶联,肽树脂裂解得到还原型TT-232粗品,环化后再经制备型RP-HPLC纯化,得到纯度为98%的TT-232。

Fmoc固相合成JFT的工艺研究

目的:研究多肽JFT的合成工艺。方法:本实验采用固相合成法(spps),以Fmoc—氨基酸为原料,TBTU\HoBt\DIEA混合试剂缩合,用三氟乙酸\苯甲硫醚\巯基乙醇\苯酚\水脱保护,将多肽从MBHA树脂上切割下来。结果:粗肽的收率为62%,经RP-HPLC纯化,即可获得纯度在98%以上的目标肽。经MALDI—MS质谱分析其分子量与理论值一致。结论:此工艺操作简单,便于推广,适合大规模生产。

不同树脂对胸腺素α1合成工艺的影响

目的:采用固相法合成胸腺素α1及其片段,比较二氯三苯甲基树脂、Wang树脂和Rink Amide MBHA树脂作为载体时对不同长度片段及目标肽的产率和纯度的影响。方法:FMOC策略合成胸腺素α1及其C端7肽、14肽、21肽片段,以反相高效液相色谱进行粗肽的分析和纯化。结果:氨基酸数小于10时,3种树脂合成的粗肽纯度均>95%,随着氨基酸数的增加,3种树脂合成的粗肽纯度均下降,其中Wang合成的粗肽纯度变化最明显,28肽纯度为21.24%。3种树脂合成粗肽1次纯化后,得到Ta1纯度均大于95%;Wang树脂合成产率最高,CTC树脂产率最高。结论:以二氯三苯甲基树脂作载体,合成胸腺素α1其产率和纯度优于Wang树脂和Rink树脂,因此,二氯三苯甲基树脂作载体合成胸腺素α1在大规模工业化生产中具有更大的潜力。

抗皱肽Pentapeptide-3的合成

本文介绍一种抗皱肽Pentapeptide-3(氨基酸序列为Gly-Pro-Arg-Pro-Ala-NH_2)的固相合成方法。实验在氮气保护体系中以Rink Amide树脂为载体,以Fmoc-保护的氨基酸为原料、在DIC/HOBt/DMF体系中合成Pentapeptide-3。目标产物收率高,副产物少,结构经质谱与标准品对照一致。本文的合成方法操作简单便捷,副产物少,重复性高,成本低廉,适用于批量生产制备。

福州于山溜冰场工程的施工技术

本文介绍了地下大跨岩石隧洞于山溜冰场的施工步骤 ,微振动控制爆破技术在施工中的应用 ,以及树脂张拉锚杆的施工等技术。