RP-HPLC-ELSD法同时测定中药及保健食品中酸枣仁皂苷A和B含量的方法验证

目的建立测定中药及保健食品中酸枣仁皂苷A和B的高效液相含量测定方法。方法色谱柱Agilent zorbaxC18(4.6mm×250mm,5μm),柱温25℃;流动相为0.5%冰醋酸-甲醇(32∶68),流速1.0ml/min;蒸发光散射检测器,飘移管温度105℃,氮气流速2.4L/min。在以上条件下制备对照品及供试品溶液,并观察比较其测定效果。结果酸枣仁皂苷A和B的线性范围分别为4.37～39.20μg和4.25～38.60μg;最低检测限分别为0.63μg和0.85μg;定量限分别为2.11μg和2.73μg;加样回收率(n=5)分别为96.35%和97.12%;12h内稳定性良好;仪器精密度良好;重复性良好。结论RP-HPLC-ELSD法简便、灵敏、准确、重复性良好,可用于含酸枣仁中药及保健食品中2种以上成分的含量测定和产品质量控制。

RP-HPLC-ELSD测定当归补血口服液中黄芪甲苷的含量

目的建立测定当归补血口服液中黄芪甲苷含量的方法。方法用RP-HPLC-ELSD法,固定相为Shim-Pack-vp-ODS(150L×4.6),流动相为乙腈-水(35︰65),流速为1.00mL/min,ELSD漂移管温度:95℃,氮气压力:3.2kPa。结果黄芪甲苷对照品的回归方程为Y=1.598X+2.216,r=0.9998(n=8)。浓度在0.13～1.04 mg/mL范围内,峰面积(A)与进样量(C)二者有良好的线性关系,回收率为99.36%,RSD为0.81%。结论本方法简便快速,重复性好,能排除其他成分干扰,测定结果可靠,为完善当归补血口服液的质量标准提供了重要依据。

RP-HPLC-ELSD法测定野生白花丹药材1～12月份根、茎、叶中β-谷甾醇的含量

目的:测定野生白花丹药材1～12月份根、茎、叶中β-谷甾醇的含量。方法:采用HPLC-ELSD法测定白花丹中β-谷甾醇的含量。色谱条件为:流动相为纯甲醇;色谱柱为迪马C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流速为1.0mL/min;柱温25℃;蒸发光散射检测器检测参数为漂移管温度65℃,载气(N2)流速为2.5L/min。结果:白花丹叶中β-谷甾醇的含量最高,其次是茎,根中含量最少;3、5、7、8月份采收的药材中含量最高,11、12月最低。结论:以β-谷甾醇为主要成分指标时最佳入药部位为叶,最佳采收期在3、5、7、8月份。

RP-HPLC-ELSD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的含量

目的 阐明 EL SD对于检测菝葜皂苷元等不含发色团的化合物是一种优越的检测器 ,为知母药材及含知母制剂提供了一种可靠的质检手段。方法 采用 RP- HPL C- EL SD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的含量。结果 分离完全的色谱峰 ,有良好的线性关系 ,r=0 .9990 ,对药材及制剂测定的回收率分别为 10 0 .5 %、91.38%。结论 该方法先进、可靠、简便 。

RP-HPLC-APCIMS和RP-HPLC-ELSD法分析鸡脂甘油酯组成及结构

利用反相高效液相色谱-大气压化学电离质谱(RP-HPLC-APCI MS)及反相高效液相色谱-蒸发光散射检测(RP-HPLC-ELSD)分析鸡脂甘油酯组成及结构。C18色谱柱,乙腈-二氯甲烷(60:40,V/V)为流动相,APCI MS正离子模式。根据APCI一级质谱的准分子离子及二酰基甘油碎片离子鉴定出26种甘油酯,包括4种甘油二酯和22种甘油三酯。根据二酰基甘油碎片离子的丰度高低及离子阱碰撞诱导解离产生的二级/三级碎片离子的丰度高低,判定各甘油酯中脂肪酸的位置分布。采用RP-HPLC-ELSD分析,面积归一化法定量,甘油三酯占总甘油酯的99.88%,含量最高的为1-棕榈酸-2,3-二油酸甘油酯(23.65%),其次为1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯(19.37%)、1-亚油酸-2,3-二油酸甘油酯(16.02%)。

RP-HPLC-ELSD同时测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量

采用反相高效液相色谱-蒸发光散射监测器（RP-HPLC-ELSD）测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量。色谱柱为Krom asil C18（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%乙二胺水溶液（体积比为60∶40）,柱温为室温,流速1 mL/m in,漂移管温度89.0℃,气体流量2.60 L/m in。结果表明,新乌头碱和次乌头碱均得到较好分离,均在12.5~400μg/mL呈现良好的线性关系;平均加样回收率分别为100.01%（RSD=0.31%）,99.53%（RSD=0.51%）。RP-HPLC-ELSD法具有准确度高,简便快捷,干扰少,重现性好的优点,可用于附子地上部分中双酯型生物碱的测定。

反相高效液相色谱法(RP-HPLC-ELSD)测定重组蛋白注射剂中聚山梨酯20含量

介绍了利用Agilent1260 InfinityⅡ四元液相色谱系统、Agilent1290InfinityⅡELSD检测器和Agilent Poroshell120 SB-C18, 3.0 mm×150 mm, 2.7μm色谱柱对PEG偶联重组蛋白注射剂中的聚山梨酯20(吐温20)进行定量分析的简单灵敏的方法。该方法采用含三氟乙酸(0.1%TFA)的乙腈和水溶液为流动相,以梯度条件对注射剂中吐温20进行分离分析。该方法操作方便,灵敏度高,具有良好的线性关系、精密度和准确度,为生物制药企业测定PEG偶联的一类重组蛋白制剂中的吐温20辅料提供一种可选的解决方案。

RP-HPLC-ELSD同时测定复方益母草胶囊中阿魏酸、盐酸水苏碱、梓醇、麦角甾苷的含量

复方益母草胶囊是由益母草、熟地黄、当归3种中药经过一定工艺组成的胶囊,功效为调经活血、祛瘀生新,临床主要用于治疗瘀血所致月经过多、过少及经期延长、产后子宫复旧不全引起的恶露不绝等症状[1~3]。目前复方益母草胶囊没有明确的质量控制标准,为了有效地、准确地控制其内在质量,

RP-HPLC-ELSD法测定白花丹野生药材根·茎·叶中胡萝卜苷的含量

[目的]建立测定白花丹药材中胡萝卜苷含量的方法,并研究不同采收期的野生白花丹药材根、茎、叶中胡萝卜苷的含量变化情况。[方法]采用RP-HPLC-ELSD检测法。迪马色谱柱C18(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温25℃;流动相为无水甲醇;体积流量为1.0ml/min;载气为氮气,漂移管温度65℃。[结果]在0.129～2.58μg/ml浓度范围内,胡萝卜浓度对数值与峰面积对数值呈良好线性关系,R为0.9994(n=7);平均回收率99.93%,RSD为0.212%(n=9)。叶中含量最高,根中含量最低,2、7、8月份含量最高,5、6月份含量最低。[结论]该方法快速、简便、稳定,为建立白花丹野生变家种的栽培技术规范打下基础。

Rp-HPLC-ELSD法测定驴胶补血颗粒中黄芪甲苷的含量

目的:建立Rp-HPLC-ELSD法测定驴胶补血颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:色谱柱为KromasiL C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(40︰60),流速:1.0mL.min-1;ELSD参数Parameter:漂移管温度40℃,雾化气体Atomization Gas(N2)流速:3.5 L.min-1.结果:黄芪甲苷在0.4464～6.696ug的范围内,有良好的线性关系r=0.999 9;平均回收率为97.20%,RSD为1.60%(n=6)。结论:该检测方法可靠Reliable、准确、重现性好,适用于驴胶补血颗粒中黄芪甲苷的含量测定。

RP-HPLC-ELSD法测定贝杏止咳膏中桔梗皂苷D的含量

目的:建立反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(RP-HPLC-ELSD)测定贝杏止咳膏中桔梗皂苷D含量的方法。方法:以甲醇溶液沉淀贝杏止咳膏中的蛋白,同时提取桔梗皂苷D,采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;流动相为乙腈-水(25∶75);流速为0.5 mL/min;蒸发光散射检测器检测,波长为210 nm;柱温为30℃。结果:RP-HPLC-ELSD的平均加样回收率为97.62%,RSD%为0.84%(n=6)。结论:该方法简便易行,准确可靠,可用于贝杏止咳膏的质量控制。

茯苓三萜成分RP-HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的利用RP-HPLC-ELSD技术建立不同菌株茯苓三萜的指纹图谱,为评价不同菌株培育茯苓药材的质量品质提供理论依据,以期规范培育茯苓的菌株,提高茯苓资源品质。方法色谱柱为Kromasil 100-5 C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.2%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),采用梯度洗脱法;体积流量为1.0 mL/min;柱温为30℃;蒸发光检测条件:雾化温度为40℃,压力为350 kPa,gain值为7;进样量为20μL。结果建立的指纹图谱中有18个共有峰,且方法学考察符合规定的标准。结论该方法简便快速、准确可靠,可作为评价不同菌株茯苓药材质量的有效手段。

20个产地茯苓三萜成分RP-HPLC-ELSD指纹图谱

目的:利用RP-HPLC-ELSD技术建立不同产地茯苓三萜的指纹图谱,为评价不同产地的茯苓药材的质量品质提供理论依据。方法:色谱柱为Kromasil 100-5 C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.2%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),采用梯度洗脱法,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,蒸发光检测条件:雾化温度40℃,压力350 kPa,gain值为7;进样量20μL。结果:建立的指纹图谱中有18个共有峰,方法学考查表明,各主要色谱峰相对保留时间及峰面积的RSD均<3%,峰面积占总峰面积>10%的共有峰其相对峰面积差值均在±25%以内,符合指数图谱的技术要求,仪器的精密度良好,且供试品溶液至少12 h内稳定。结论:该方法简便快速、准确可靠,可作为评价不同产地茯苓药材质量的有效手段。

RP-HPLC-ELSD测定草乌中准噶尔乌头碱的含量

目的:建立测定草乌中准噶尔乌头碱含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Agilent Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%三乙胺溶液(40∶60),流速1.0 m L·min^(-1),柱温25℃;蒸发光散射检测器(ELSD)的漂移管温度96℃,气体(空气)压力2.50 bar,撞击器呈关闭状态。结果:准噶尔乌头碱在1.5~30μg呈良好线性关系(r=0.999 5),平均回收率为96.86%,RSD 1.7%。结论:该方法简便、准确、快速,可用于测定草乌中准噶尔乌头碱的含量,为草乌的质量评价提供依据。

RP-HPLC-ELSD法测定康柏西普眼用注射液中辅料吐温20的含量

目的： 建立反相高效液相色谱法联用蒸发光散射检测器测定康柏西普眼用注射液中辅料吐温20含量的分析方法。 方法： 采用Agilent Poroshell 120 SB-C18（2.7 μm，4.6 mm×150 mm）色谱柱，以乙腈-纯水为流动相进行梯度洗脱（0-5 min，5%B；5-6 min，5%B→60%B；6-10 min，60%B→80%B；10-15 min，80%B；15-15.01 min，80%B→5%B；15.01-20 min，5%B），流速0.5 mL·min^-1，蒸发光散射检测器漂移管温度为45 ℃，雾化压力设为2.8×10^5 Pa。 结果： 吐温20进样量在1.12-6.72 μg范围内，与色谱峰面积呈良好线性关系（R^2〉0.999）；高、中、低浓度样品的回收率均在100%±10%范围内。 结论： 本法经方法学验证可用于康柏西普眼用注射液中辅料吐温20含量的检测。

不同生长年限、不同采收月份加拿大原产地西洋参根中9种人参皂苷和2种拟人参皂苷含量动态变化研究

目的：研究加拿大原产地1-5年生5-9月采收西洋参根中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、Rd、Rg3和拟人参皂苷F11、RT5的含量动态变化。方法：采用RP-HPLC-ELSD法。Dimaonsil C18柱（250 mm×4.6mm,5μm）,柱温30℃,流动相为乙腈（A）-水（B）,流速1.0 m L/min,进样量为10μL,ELSD载气为氮气,气体流量为2.8 L/min,漂移管温度为100℃。采用SPSS 19.0统计软件对试验结果进行主成分和系统聚类分析。结果：建立了同时测定西洋参根中9种人参皂苷和2种拟人参皂苷类成分含量的RP-HPLC-ELSD方法。人参皂苷积累表明,1、2年生含量低,5-9月呈增加趋势;3-5年生样品,6、7月呈下降趋势,随后缓慢增加,9月均达到最大积累;从3年生9月开始样品的含量接近;除人参皂苷Rc的含量较低和部分样品中未检测到外,其他组分含量均很高,其中以人参皂苷Rd、Rb3和拟人参皂苷F11的含量最高。主成分分析表明,人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rg3和拟人参皂苷F11、RT5为加拿大西洋参的特征皂苷成分。系统聚类分析表明,除4年生7月（S18）样品外,1年生和2年生的西洋参根样品在皂苷组成和含量变化上接近;3-5年生各月的皂苷组成和含量变化没有明显的界限划分。结论：基于人参皂苷含量、西洋参栽培第4-5年的栽培种植成本、遭受涝害和病虫害的风险,建议从3年生9月开始,西洋参根可以视为同等质量。

良种银杏幼苗叶质量分析(Ⅱ)

目的 进行良种银杏幼苗叶质量分析。方法 采用 RP- HPL C- EL SD法测定良种银杏幼苗叶内酯含量。结果 总内酯含量 ,6月份高于 8月份 ,11月份含量明显下降 ;嫁接苗高于实生苗 ,雄性高于雌性。结论 活性成分含量与生长季节、树龄、培育方式、生长环境、立地条件等诸因素有关。由主要活性成分 BB与 GB综合评价 :江西良种银杏幼苗叶优于文献报道的银杏叶的质量。

反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定西洋参和西洋红参中人参皂苷的含量

目的 建立一种同时测定西洋参和西洋红参中拟人参皂苷和人参皂苷含量的方法。方法 采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定。色谱条件：迪马公司Diamonsil^TM C18色谱柱（5μm，250mm×4．6mm）；流动相为甲醇-水（71：29）；流速为0．95ml／min。ELSD参数：漂移管温度40℃；氮气压力：2．8Bar。结果 在选定的色谱条件下，反相高效液相色谱-蒸发光检测法符合精密度、准确度、线性（r〉0．999）的基本要求。3个浓度水平的回收率测定值在97．0％-104．9％之间，RSD在1．47％-2．89％之间。结论 该方法简便，准确，灵敏度高，重现性好，可用于西洋参和西洋红参单体皂苷的含量测定。

HPLC-UV-ELSD联用测定黄花蒿叶片中青蒿素及相关倍半萜的含量

目的HPLC-UV-ELSD联用建立黄花蒿叶片中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。方法采用Venusil XBP-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,检测波长:203 nm,流速:1.0 mL.min-1,ELSD载气压力:0.35 MPa,喷嘴温度:35℃,漂移管温度:60℃,检测器:UV-ELSD联用,测定黄花蒿叶片中青蒿素、青蒿素B、3α-羟基-1-去氧青蒿素含量。同一色谱柱条件下流动相改为乙腈-水-甲酸(体积比为60.00∶40.00∶0.08),检测波长:215 nm,流速:1.0 mL.min-1,检测器:UV检测器,测定黄花蒿叶片中青蒿酸含量。结果4种倍半萜在各自的线性范围内线性关系良好(r≥0.9990),RSD<3%,平均加样回收率分别为98.5%(RSD=2.3%)、96.5%(RSD=1.8%)、97.5%(RSD=3.6%)、95.4%(RSD=2.5%)。结论该方法可作为黄花蒿中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。

利用蒸发光散射检测器 RP-HPLC 同步分析水溶性维生素和脂溶性维生素

目的:建立用蒸发光散射检测器反相 HPLC 同时分析水溶性与脂溶性维生素的方法。方法:首先,不启动梯度,注射脂溶性维生素样品,流动相流速为1.5mL·min^(-1),保持5min;然后,注射水溶性维生素样品,并启动梯度从100%水相过渡到100%有机相;以典型的反相顺序洗脱所有的维生素。色谱柱为 Alltech Prevail-C_(18)(150mm×4.6mm,5μm);流动相 A:pH为3.2的水和甲酸的缓冲溶液,流动相 B:乙腈-甲醇(83∶17);流速:1.5mL·min^(-1)。ELSD 条件:温度:40℃,气体流量:1.5L·min^(-1);撞击器模式:开。结果:采用反相 C_(18)色谱柱和两次进样技术,优化梯度和 pH 条件,可以在30min 内实现对15种水溶性和脂溶性维生素进行同时分析,在30min 内获得了较为理想的分离与峰形。结论:建立了反相 HPLC 分析测定两类维生素的方法,避免了使用多种类型的色谱柱,较长的平衡时间和样品消耗。