甜叶悬钩子(Rubus suavissimus S.Lee)中UDP-糖基转移酶基因的克隆、表达及序列分析

糖基化是植物次生代谢产物生物合成中重要的修饰反应。目前已报道的以二萜为底物的UDP-糖基转移酶(UGT)数量稀少。本研究基于甜叶悬钩子叶片的转录组数据,利用生物信息学分析手段,选定可能具有二萜类催化活性的UDP-糖基转移酶基因进行克隆。最终克隆得到18条UGT基因序列,在大肠杆菌中进行了异源表达,并对克隆的基因进行了初步的序列分析。本研究为进一步挖掘和验证甜叶悬钩子中UGT的功能奠定了基础。

广西甜茶ISSR-PCR反应条件的建立与优化

为了探讨广西甜茶ISSR实验中的多种因素对实验结果的影响,采用单因素法对PCR反应体系中的5个潜在因素(Mg2+,dNTP,引物,Taq酶和模板DNA)在5水平上进行优化实验,并进一步优化了反应程序中的退火温度和循环次数。结果表明:25μL的最佳反应体系为,1×PCR Buffer、MgCl22.0mmol/L、dNTP0.2mmol/L、引物0.8μmol/L、Taq DNA聚合酶0.75U、模板DNA 80ng;最佳反应程序为:在94℃下进行3min预变性;随后循环扩增35次(包括94℃变性1min,54℃退火1min,72℃延伸1min);最后在72℃下延伸10min。本研究建立的广西甜茶的最佳ISSR-PCR反应条件为进一步进行遗传多样性研究奠定了基础。

广西瑶山甜茶质量控制研究

目的:控制广西瑶山甜茶的质量。方法:对广西瑶山甜茶进行性状观察、显微与理化鉴定、TLC鉴别、水分等的检查和浸出物测定,并用HPLC法对其所含主要甜味成分甜茶素进行含量测定。结果:实验测定得到广西瑶山甜茶质量控制的各项指标。结论:该实验方法可行,重复性良好,能有效地控制广西瑶山甜茶药材的质量。

瑶山甜茶可溶性糖的测定

为探明瑶山甜茶中可溶性糖的含量和种类,采用蒽酮—硫酸比色法测定其可溶性总糖含量,运用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定多糖分子量分布范围,并利用高效液相色谱—蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法在两种流动相体系中测定和分析其低分子寡糖和单糖的种类与含量。结果表明,瑶山甜茶中可溶性总糖含量为15.20%,相对标准偏差(RSD)为0.996%;多糖分子量Mw范围为51551～55628,RSD为0.64%～1.23%;单糖种类主要为木糖、果糖和葡萄糖,相对含量分别是0.54%、52.18%和42.76%。

甜茶中鞣花酸抗氧化作用研究

[目的]研究甜茶中鞣花酸的抗氧化作用。[方法]以甜茶根为原料,经提取、溶剂萃取、重结晶等手段,得到了鞣花酸晶体;采用体外试验对甜茶中鞣花酸的清除DPPH.自由基能力及还原能力进行了研究,并用磷钼酸盐法测定了甜茶中鞣花酸的总抗氧化活性。[结果]鞣花酸清除DPPH.效果明显,并且具有速度快、用量少、抗氧化能力强等特点;当浓度为0.10 mg/ml时,鞣花酸对DPPH.自由基的清除率达到92.5%以上。鞣花酸的还原能力随着浓度的增大而变强;与BHT相比,当浓度低于0.5 mg/ml时,鞣花酸的还原能力低于BHT;而当浓度达到0.5 mg/ml时,鞣花酸的还原能力强于BHT。鞣花酸总抗氧化活性随着浓度及加入时间的增大而增大;当浓度为1.2mg/ml时,EA的抗氧化性没有BHT强,但1 h后EA的抗氧化性比BHT稍强。[结论]甜茶鞣花酸清除自由基的能力很强,具有开发利用意义。

罗汉果甜茶复合低糖饮料的研制

研究罗汉果甜茶复合低糖饮料的制备工艺及配方。首先采用单因素试验,考察料液比、提取温度和提取时间对罗汉果汁品质的影响,然后以黄酮得率为指标,采用正交试验设计方法,优化甜茶提取液的制备工艺,最后通过感官评价确定罗汉果甜茶复合饮料的配方。罗汉果汁的制备工艺为料液比1∶50(W∶V),提取时间40 min,提取温度90℃;甜茶提取液制备工艺为料液比1∶90(W∶V),提取时间1 h,提取温度90℃;罗汉果甜茶复合饮料的配方为罗汉果与甜茶的比例为3∶1,罗汉果和甜茶混合液所占饮料的比例为50%,蜂蜜2%,柠檬酸0.10%,食盐0.05%。

广西甜茶生理活性成分及其提取纯化研究进展

广西甜茶,为悬钩子属,具有较高的食用与药用价值,如降血糖、血脂、血压、促进新陈代谢、调节人体免疫功能等功效。广西甜茶含有甜茶苷、多酚、氨基酸、黄酮类化合物等多种生理活性成分,目前人们采用各种方法提取与纯化这些功能性成分,并取得较大进展。本文对广西甜茶的生理活性成分、药理作用、分离纯化工艺及其开发与应用研究作了较详尽的综述,为广西甜茶的进一步研究和开发提供依据。

瑶山甜茶提取物抗氧化性能的化学发光检测

基于分级膜分离对瑶山甜茶干叶浸提液进行纯化,获得分子质量分布范围不同的5种水溶性组分。采用Fe^(2+)-H_2O_2-Luminol体系及邻苯三酚-Luminol体系化学发光法分别检测各组分对羟自由基(·OH)及超氯阴离子(O_2^-·)的清除能力,并以Vc作为对照比较各组分的抗氧化性能。结果表明:瑶山甜茶提取物的分子质量分布范围对其抗氧化能力有较大的影响,其水溶性抗氧化活性片断的分子质量在5～10ku范围内。

广西甜茶二萜类成分的研究

目的研究广西甜茶Rubus suavissimusS.Lee叶中的活性成分。方法利用反复硅胶柱层析对广西甜茶水提物进行分离和纯化,通过IR,MS,NMR等光谱技术和化学方法鉴定出其结构。结果从广西甜茶叶中分离得到4个对映-贝壳杉型二萜类化合物,分别鉴定为ent-16β,17-dihydroxy-kauran-3-one(Ⅰ),ent-16β,17-dihydroxy-kauran-19-oic acid(Ⅱ),ent-kauran-16β,17-diol-3-one-17-O-β-D-glucoside(Ⅲ),rubusoside(Ⅳ)。结论化合物Ⅰ,Ⅱ均为首次从该植物中分得。

广西甜茶总黄酮的超声提取工艺研究

研究广西甜茶中总黄酮的超声提取工艺,通过正交试验得出最佳提取条件为:乙醇浓度30%,料液比1∶30,提取温度50℃,提取时间40min。在该条件下总黄酮的提取得率为3.85%。

广西甜茶化学成分的研究

目的:研究广西甜茶(Rubus suavissimus S.Lee)叶中的活性成分。方法:利用反复硅胶柱层析的方法对广西甜茶进行分离和纯化,通过IR、MS、NMR等光谱技术和化学方法鉴定化合物的结构。结果:从广西甜茶叶中分离得到2个对映-贝壳杉烯型二萜类化合物,经鉴定化合物Ⅰ为对映-13-羟基-贝壳杉-16-烯-19-羧酸(ent-13-hydrox-y-kauran-16-en-19-oic acid),化合物Ⅱ为对映-贝壳杉-16-烯-19-酸-13-O-β-D-葡萄糖苷(ent-kauran-16-en-19-oic-13-O-β-D-glucoside)。结论:化合物Ⅱ为首次从该植物中分得。

瑶山甜茶和百色甜茶化学成分及药理研究进展

瑶山甜茶和百色甜茶主要含甜味成分、抗过敏成分等,都具有抗过敏作用。瑶山甜茶还具有控糖、降血脂等作用,百色甜茶的其它药理作用研究尚少。

广西甜茶化学成分的研究Ⅱ

目的研究广西甜茶(Rubus suavissimusS.Lee)叶中的活性成分。方法利用反复硅胶柱层析的方法对广西甜茶进行分离和纯化,通过IR、MS、NMR等光谱技术和化学方法鉴定化合物的结构。结果从广西甜茶叶中分离得到3个对映-贝壳杉型二萜类化合物,经鉴定化合物1为对映-16α,17-二羟基-贝壳杉-19-羧酸(ent-16α,17-dihydroxy-kauran-19-oic acid),化合物2为对映-贝壳杉-3α,16β,17-三醇(ent-kauran-3α,16β,17-3-triol),化合物3为对映-13,17二羟基-贝壳杉-15-烯-19-羧酸(ent-13,17-di-hydroxy-kauran-15-en-19-oic acid)。结论化合物1,2,3均为首次从该植物中分得。

甜叶悬钩子植物组织培养褐化现象控制研究

[目的]寻求甜叶悬钩子组织培养中的最佳抗褐化剂。[方法]以甜叶悬钩子的茎和叶为外植体,以MS为基本培养基,加入不同浓度的抗褐化剂(20%Na2S2O3、Vc和AC),研究不同抗褐化剂对甜叶悬钩子组织培养的影响。[结果]AC和Vc都能对不同外植体起到抗褐化作用,在加入20%Na2S2O3的培养基上,外植体的褐化程度与Na2S2O3的浓度成正比,培养基中20%Na2S2O3的添加量达20m l时,外植体褐化最为迅速;在加入Vc的培养基上,随着Vc添加量的增加,培养基变成液体或半固体培养基,接入的外植体容易死亡;在加入AC的培养基上,AC的添加量为5 g/L时,外植体的褐化率可控制在5%以下。抗褐化控制处理后,可以在诱导愈伤组织的培养基上培养出大量的愈伤组织。[结论]AC是较为理想的抗褐化剂,用量为5 g/L。

甜茶的应用历史与研究现状

甜茶Rubus suavissimus S.Lee是广西民间长期使用的茶、糖、药三位一体的甜味植物,具有茶文化特征。民间饮用经验证明,甜茶有清热解毒、生津、润肺、止咳、利咽的功效。甜茶含有黄酮类、二萜及其苷类、多酚类、鞣质等化学成分。现代药理研究表明,甜茶具有抗氧化、抗过敏、抗炎、防龋齿、降血糖、降血脂、抗肿瘤等多种药理活性成分,且安全无毒。笔者还对甜茶的应用现状以及今后的发展进行了讨论,为进一步研究开发甜茶提供科学依据。

广西甜茶叶总黄酮提取工艺研究

[目的]研究提取广西甜茶叶总黄酮的工艺条件。[方法]以总黄酮含量和提取率为考察指标,采用正交设计的方法研究提取广西甜茶叶总黄酮的工艺条件。[结果]影响广西甜茶叶总黄酮提取效果的主次因素为:乙醇浓度>溶剂用量>提取次数>提取时间,广西甜茶叶总黄酮最佳提取工艺为加入20倍量70%乙醇提取3次,每次120min。[结论]优化的提取方法效率高,稳定性好,可作为广西甜茶总黄酮的提取工艺。

不同药剂防治广西甜茶毛毡病田间药效试验

对广西甜茶(Rubus suavissimus S.Lee)毛毡病防治药剂进行筛选研究。结果表明,5.6%阿维·哒螨灵乳油1000倍稀释液、22%螺螨酯悬浮剂3000倍稀释液,对甜茶毛毡病具有较好的防治效果,防治效果分别为80.9%、83.3%。

天然甜茶保健饮料加工技术的研究

研究了天然甜茶保健饮料的生产工艺,并着重研究了最佳浸提条件及如何解决天然甜茶保健饮料产生混浊沉淀、色泽褐变、风味改变等问题。研制出色泽清亮、香气宜人、甘甜清凉可口的天然无糖保健饮料。

广西甜茶醇提物对小鼠血糖及糖耐量的影响

为研究广西甜茶(Rubus suavissimus S.Lee)醇提物对小鼠血糖及糖耐量的影响,分为空白组、广西甜茶醇提物高、中、低(250、150、100 g/kg)等4组剂量组,对小鼠连续灌胃给药40 d,观察其对小鼠血糖的影响。结果表明,广西甜茶醇提物低剂量组(P<0.01)和中剂量组(P<0.05)对小鼠空腹血糖有显著影响,并随着给药时间的延长,对葡萄糖致小鼠高血糖有一定的抑制作用,与空白对照组相比低剂量组和中剂量组给药40 d后体重明显降低。

天然甜茶饮料加工技术的研究

研究了天然甜茶保健饮料的生产工艺,并着重研究了最佳浸提条件及如何解决天然甜茶保健饮料产生混浊沉淀、色泽褐变、风味改变等问题。