携带野生型PTEN基因的重组腺病毒治疗子宫内膜癌的体内研究

目的:探讨携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)进行子宫内膜癌基因治疗的可行性.方法:BALB/c裸鼠随机分3组,每组8只, 以空载体Ad-CMV转染或未转染作为对照组,观察Ad-PTEN体外转染后体内接种对子宫内膜癌细胞致瘤能力的影响.应用LacZ 作为报告基因,X-gal染色检测Ad-PTEN 体内转染效率.皮下荷人子宫内膜癌BALB/c裸鼠15只,随机分为对照组、Ad-CMV组及Ad-PTEN治疗组,每组5只,每只裸鼠皮下有2个移植瘤.待皮下移植瘤长至4～5 mm时,治疗组Ad-PTEN肿瘤内注射,每个移植瘤5×108 pfu/100 μl,隔日1次,共3次,观察裸鼠肿瘤体积的变化及有无不良反应,最后1次治疗后15 d处死裸鼠,取肿瘤组织及治疗组裸鼠肝脏病理检查.结果:Ad-PTEN体外转染子宫内膜癌RL 95-2细胞,子宫内膜癌细胞致瘤能力完全抑制,裸鼠成瘤率为0;而空载体转染组和PBS对照组裸鼠成瘤率均为100%.重组腺病毒在裸鼠体内具有较高的转染效率,Ad-CMV-LacZ肿瘤内注射后96 h,转染效率可达到80%. Ad-PTEN肿瘤内注射可使裸鼠皮下移植瘤生长速度显著减慢,肿瘤体积较对照组明显缩小(P<0.05),Ad-PTEN基因治疗未发现明显不良反应. 结论:PTEN基因治疗有可能成为子宫内膜癌非手术治疗的一个新方法,具有潜在的应用价值.

α干扰素和卡培他滨对肝癌根治性切除术后转移复发抑制作用的实验研究

目的研究干扰素和卡培他滨对肝癌根治性切除后转移、复发的抑制作用。方法采用裸鼠入肝癌转移模型(LCI-D(?))。40只模型鼠随机分成4组即对照组(生理盐水)、卡培他滨组(希罗达)、干扰素组(因特芬)、联合组(卡培他滨与因特芬)。观察肝癌根治性切除后肿瘤肝内复发率、复发瘤大小、肝内播散灶数量和肺转移率,检测复发瘤微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果对照组、干扰素组、卡培他滨组、联合组肝内复发率为100%、90%、100%和80%;复发瘤体积分别为(3981.54±262.59)mm3、(1012.05±70.61)mm3、(714.34±60.37)mm3和(35.60±5.25)mm3;肝内出现播散灶比率分别为100%、40%、50%和10%;肺转移率分别为90 %、40%、60%和0;肝脏复发瘤内MYD分别为22.36±4.36、6.42±1.66、19.32±3.25、5.92±2.63;VEGF阳性率分别为90%、30%、80%和30%;bFGF阳性率分别为100%、70%、90%和80%;干扰素组、卡培他滨组、联合组分别与对照组比,对肝癌术后肿瘤复发和转移的抑制作用有显著差异(P<0.05),干扰素对肝癌血管形成有良好的抑制作用,与对照组及卡培他滨组比较有统计学意义(P<0.05),α干扰素与卡培他滨联合应用对抑制肿瘤复发和转移有协同效应。结论干扰素和卡培他滨均可抑制肝癌术后肿瘤复发与转移,二者联用有协同作用。

健脾消癌方对人大肠癌裸鼠皮下移植瘤微血管生成的影响

目的:研究健脾消癌方对人肠癌裸鼠皮下移植瘤微血管生成的抑制作用。方法:通过在裸鼠腋下接种人肠癌HCT116细胞建立裸鼠人肠癌移植瘤模型。60只荷瘤裸鼠随机分为模型组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组及健脾消癌方高、中、低剂量组,每组12只,各组分别给予0.9%氯化钠溶液、5-Fu(30mg/kg,1次/d)及不同浓度的健脾消癌方(高、中、低剂量)干预。给药21d后,每组随机处死6只裸鼠,摘除瘤体并眼球取血,测量瘤体重量和体积,ELISA法检测裸鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达、免疫组化检测瘤体微血管密度(MVD);每组剩余裸鼠观察荷瘤鼠生存时间。结果:与模型组比较,药物干预组的瘤体重量均有不同程度减轻(P<0.01)、荷瘤鼠中位生存时间显著延长(P<0.01),其中5-Fu组和健脾消癌方高、中剂量组在瘤体重量、抑瘤率及延长荷瘤鼠中位生存时间方面均优于健脾消癌方低剂量组(P<0.01),且健脾消癌方高剂量组与5-Fu组的作用差异无统计学意义。同时,健脾消癌方能显著下调裸鼠血清中VEGF表达水平(P<0.01);免疫组化结果显示,健脾消癌方以浓度依赖性方式下调肿瘤组织MVD表达,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论:健脾消癌方能够抑制裸鼠人大肠癌移植瘤生长、延长生存期,其作用可能和降低血清VEGF表达及肿瘤MVD有关。

miRNA-194在裸鼠体内对骨肉瘤增殖和转移的影响

目的:通过使用慢病毒技术,建立肺转移裸鼠模型,观察miRNA-194对于骨肉瘤增殖和转移的影响,为研究miRNA-194在骨肉瘤中的作用及进一步的治疗提供理论依据。方法:使用慢病毒技术对骨肉瘤细胞系U2-OS进行转染后分组,然后将转染后的各组细胞注入裸鼠体内建立肺转移模型。5周后将裸鼠处死,观察和比较原位及肺部肿瘤的大小。结果:1)mi RNA-194下调组裸鼠的原位肿瘤的体积(3920±860 mm^3)和重量(2.15±0.32 g)明显的大于其余各组(P<0.05);2)miRNA-194上调组的肺部情况(36.7±12.4个)明显的优于其余各组(P<0.05);3)病理学检测证实其确实为原位骨肉瘤及肺部转移病灶。结论:miR-194可以明显的在裸鼠体内抑制骨肉瘤的增殖及肺部的转移,从而显示mi R-194在动物水平在骨肉瘤中呈现明显的抑癌基因的作用,为接下来关于miRNA-194的各项实验奠定了良好的实验基础。