乳康饮对裸鼠乳腺癌组织PI3K/Akt信号通路相关因子表达的影响

目的:观察中药乳康饮对移植瘤小鼠乳腺癌PI3K/AKT信号通路相关因子表达的影响,探讨其抑制乳腺癌的作用机制。方法:60只BALB/c裸鼠乳腺原位种植人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,建立乳腺癌移植瘤自发性转移模型,随机分成6组,分别为模型对照组,5-FU对照组、疏肝理气组、化痰散瘀组、益气健脾组、乳康饮组,每组10只。分别给予生理盐水、5-FU、乳康饮及各拆方(疏肝理气、化痰散瘀、益气健脾)药物灌胃,灌胃液体量均为0.4 mL/(d·只),均1次/d,连续6周后将裸鼠处死,检测裸鼠第2、3对乳腺原位肿瘤PI3K、Akt、PTEN、SHIP蛋白水平及mRNA的表达。结果:乳康饮及各拆方组药物对PI3K、Akt mRNA的表达均起到抑制作用,对PTEN、SHIP mRNA表达有促进作用,与模型对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05或P<0.01),而益气健脾组和乳康饮全方效果更具优势;裸鼠乳腺癌组织PI3K、Akt、PTEN、SHIP蛋白水平的表达的检测结果,乳康饮组及各拆方组对PI3K、Akt蛋白的表达均有不同程度的抑制作用,对抑癌因子PTEN、SHIP蛋白的表达有促进作用,各拆方组之间也存在统计学差异,乳康饮的作用明显优于各拆方组(P<0.05或0.01)。结论:乳康饮可能通过抑制PI3K、Akt的表达,促进PTEN、SHIP的表达,调控PI3K/AKT信号通路,对乳腺癌的发生发展起到抑制作用。

乳康饮对裸鼠乳腺癌自发性转移模型淋巴管生成的干预作用

目的观察复方中药乳康饮对乳腺癌移植瘤小鼠淋巴管生成和淋巴结转移的影响,探讨其抗肿瘤转移机制。方法 30只裸鼠乳腺原位种植人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,建立乳腺癌移植瘤自发性转移模型,随机分成6组,分别为模型组,5-氟尿嘧啶(5-FU)对照组,乳康饮小、中、大剂量组以及乳康饮加5-FU组,每组5只。模型组给予生理盐水0.4 mL/d灌胃;5-FU对照组给予30 mg/(kg.d)5-FU腹腔注射;乳康饮小、中、大剂量组分别给予乳康饮18、45、90 g/(kg.d)灌胃;乳康饮加5-FU组给予5-FU 30 mg/(kg.d)腹腔注射,同时给予乳康饮45 g/(kg.d)灌胃,均每天1次,连续6周。用药后检测肿瘤体积、抑瘤率和腋窝淋巴结转移抑制率;免疫组化法检测乳腺癌组织微淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LMVD)和血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)、血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor re-ceptor-3,VEGFR-3)的表达。结果与模型组比较,各用药组肿瘤体积明显减小,VEGF-C和VEGFR-3表达水平显著下调,LMVD明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);其中以乳康饮加5-FU组抑瘤率及腋窝淋巴结转移抑制率最高,LMVD最低,与其他用药组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论乳康饮可能通过干预VEGF-C及VEGFR-3的表达,影响淋巴管的生成,抑制乳腺癌淋巴转移。

乳康饮及拆方对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的研究乳康饮及拆方对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法采用乳康饮及拆方含药血清处理人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,分别在24、48、72h时间点,用cell counting kit-8(CCK-8法)检测乳康饮及拆方在不同时间点对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,FCM法(流式细胞术)检测乳康饮及拆方诱导MDAMB-231细胞凋亡。结果各组中药处理48h后,细胞增殖出现明显抑制,抑制率分别为46.05%、31.85%、41.24%,相对氟尿嘧啶组抑制作用时间有明显延迟,乳康饮组在48h与氟尿嘧啶组抑制率之间差异无统计学意义(P=0.076)。各处理组48h凋亡率分别为40.7%、16.3%、23.2%、57.5%,比空白对照组凋亡率显著增加(P<0.05),乳康饮组与氟尿嘧啶组凋亡率差异无统计学意义,但高于拆方2组(P=0.000)。结论乳康饮及其拆方能够显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡。

乳康饮含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的作用

目的探讨乳康饮及拆方各组含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移侵袭能力的抑制作用。方法乳康饮拆方为疏肝理气组和益气健脾组并制作动物含药血清,以各组含药血清处理三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系,培养48h后,应用划痕实验和Transwell细胞侵袭实验分别测定乳康饮及拆方组含药血清对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果乳康饮及及拆方含药血清能够显著抑制MDA-MB-231细胞迁移和侵袭,与空白血清对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),乳康饮全方组效果明显优于疏肝理气和益气健脾拆方组(P均<0.05)。结论乳康饮及拆方含药血清能够显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力。

乳康饮对乳腺癌患者αβT和γδT细胞的调控及生活质量的影响

目的观察乳康饮对乳腺癌化疗患者αβT、γδT细胞和生活质量的影响,探讨中药调控细胞免疫提高生活质量的作用。方法选取2019年1月—2019年12月期间山东第一医科大学第二附属医院乳腺外科收治的乳腺癌化疗患者128例,抽签法随机分为观察组86例,对照组42例,所有患者采用AC-T方案化疗8个周期。观察组化疗同步给予乳康饮冲服,1剂/d,连服10 d。检测化疗前、后外周血αβT、γδT细胞,Karnofsky评分及PSQI指数的变化。结果两组患者化疗前后αβT、γδT细胞均有不同程度的改变,但观察组化疗前后比较,差异无统计学意义(P>0.05),对照组化疗后CD3^(+)、CD4^(+)、γδT细胞较化疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05);化疗后对照组CD3^(+)、γδT细胞较观察组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗后两组患者karnofasky(卡式,KPS)评分及匹兹堡睡眠质量指数(Pittsbuigh Sleep Quality Indes,PSQI)的7个维度化疗前后均出现变化,观察组化疗后PSQI的睡眠质量、睡眠时间、睡眠障碍3个维度评分较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);对照组化疗后睡眠质量、睡眠时间、入睡时间、睡眠效率、催眠药物、睡眠障碍、日间功能7个维度评分较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);化疗后对照组与观察组比较,睡眠时间、入睡时间、睡眠效率、催眠药物、睡眠障碍5个维度的评分升高,差异有统计学意义(P<0.01),睡眠质量、日间功能2个维度的评分升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。观察组化疗前后KPS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),对照组化疗后KPS评分较化疗前下降,差异有统计学意义(P<0.01),对照组化疗后KPS评分较观察组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳康饮显著拮抗化疗对乳腺癌患者部分αβT细胞和γδΤ细胞的损害,改善患者体质和睡眠,提高患者的生活质量。

乳康饮对乳腺癌术后化疗患者免疫功能的影响

目的观察乳康饮对乳腺癌术后化疗患者免疫功能影响情况。方法选取120例乳腺癌术后化疗患者,按照就诊顺序,依次利用随机序列软件生成的随机序列数将所选患者分为观察组(60例)和对照组(60例)。对照组采取吡柔比星、环磷酰胺序贯多西他赛(4AC→4T)方案治疗,观察组在此化疗方案基础上联合乳康饮治疗,在完成8个治疗周期后对比两组患者外周血淋巴细胞亚群、免疫球蛋白变化及不良反应发生情况。结果疗程结束后,观察组CD3+、CD4^+、NK细胞和CD4^+/CD8^+比值水平高于对照组,CD8^+细胞水平较对照组低(P<0.05)。对照组CD8^+细胞和CD4^+/CD8^+比值水平低于治疗前(P<0.05),但CD3+、CD4^+、NK细胞水平化疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组IgA、IgM、IgG水平均低于治疗前(P<0.05)。但治疗后观察组IgA、IgM、IgG水平高于对照组水平(P<0.05)。治疗后观察组出现不良反应及骨髓抑制情况总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳康饮可明显改善乳腺癌术后经4AC→4T方案化疗患者的免疫功能。

乳康饮对裸鼠乳腺癌组织VEGF-C/D、VEGFR-3 mRNA表达的影响

目的:观察中药乳康饮对移植瘤小鼠乳腺癌血管内皮生长因子C/D(VEGF-C/D)、血管内皮生长因子受体(VEGFR-3)mRNA表达的影响,探讨其抑制乳腺癌转移的机制。方法:30只BALB/c裸鼠乳腺原位种植人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,建立乳腺癌自发性转移模型,随机分为模型对照组,5-FU对照组,乳康饮小、中、大剂量组,乳康饮+5-FU组,每组5只。模型对照组给予0.9%氯化钠溶液0.4mL/d灌胃;5-FU对照组给予5-FU 30mg·kg-1·d-1腹腔注射;乳康饮小、中、大剂量组分别给予乳康饮18、45、90g·kg-1·d-1灌胃;乳康饮+5-FU组给予5-FU注射液30mg·kg-1·d-1腹腔注射,同时给予乳康饮45g·kg-1·d-1灌胃,均每天1次,连续6周。用药后检测肿瘤质量和腋窝淋巴结转移抑制率,肿瘤组织VEGF-C/D、VEGFR-3基因的表达。结果:乳康饮各剂量组及乳康饮+5-FU组肿瘤质量与模型对照组比较明显减小(P<0.01),乳康饮+5-FU组抑瘤率及腋窝淋巴结转移抑制率明显高于其他药物组(P<0.05)。乳康饮各剂量组VEGF-D mRNA表达显著下调,与模型对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。乳康饮大剂量组和乳康饮+5-FU组VEGF-C mRNA、VEGFR-3 mRNA表达量下调,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:乳康饮可能通过干预VEGF-C/D、VEGFR-3 mRNA的表达,影响淋巴管的生成,抑制乳腺癌淋巴转移。