奶牛瘤胃胃液微生物总DNA的提取和纯化

本研究建立了从奶牛瘤胃液中提取混合微生物总DNA的方法,对现有的方法进行改进使其适合于瘤胃混合微生物总DNA的提取。粗提后的瘤胃DNA可以直接扩增出16SrDNA。提取效率为每毫升瘤胃液的DNA提取量为0.1～0.3μg。通过SiO2回收进行纯化,纯化回收率达到34%～50%;用cleanup试剂盒纯化,纯化率可达到85%以上。经过纯化后的DNA可进行其它的分子生物学操作。

利用体外法研究不同水平黄曲霉毒素B1对蜀宣花牛瘤胃内环境的影响

以3头安装永久性瘤胃瘘管的蜀宣花牛母牛为试验动物,采用瘤胃微生物体外培养法,研究添加不同水平的黄曲霉毒素B1(0.1μg/m L,1.0μg/m L,5.0μg/m L,10.0μg/m L)对母牛瘤胃p H值、氨态氮(NH3-N)及挥发性脂肪酸(VFA)浓度随时间的动态变化规律。结果表明:添加黄曲霉毒素B1能够降低微生物降解蛋白质的活性,随着B1浓度的升高,微生物降解能力下降的起始时间节点逐步提前;添加10μg/m L B1组的VFA浓度较低,该水平下微生物活性较弱,不利于瘤胃发酵,且添加10μg/m L B1组的乙酸比例较低,推测10μg/m L水平下纤维分解菌的活性相对受到抑制。

红豆草茬地放牧对湖羊和小尾寒羊生长性能、瘤胃内环境参数及微生物区系的影响

本试验以空怀期湖羊和小尾寒羊为研究对象,分析在红豆草茬地放牧条件下其生长性能、瘤胃内环境参数及瘤胃微生物区系之间的差异,以期为不同品种放牧绵羊对红豆草茬地的响应情况积累数据,进而为陇中地区草地生产系统的科学管理提供技术支持。选择年龄一致、体况良好的空怀期湖羊[平均体重(31.95±1.60)kg]和小尾寒羊[平均体重(27.38±2.84)kg]各24只为试验动物,于红豆草二茬草地进行为期45 d的混群放牧试验,试验期间测定动物体重并采集瘤胃液用于瘤胃内环境参数和瘤胃微生物区系分析。结果表明:1)湖羊组始重和末重显著高于小尾寒羊组(P<0.05),但平均日增重和体重增长率显著低于小尾寒羊组(P<0.05)。2)小尾寒羊组瘤胃总挥发性脂肪酸含量显著高于湖羊组(P<0.05)。3)小尾寒羊组瘤胃微生物Shannon指数显著高于湖羊组(P<0.05),Simpson指数显著低于湖羊组(P<0.05)。4)在门水平上,湖羊组的优势菌门依次为变形菌门(58.81%)、拟杆菌门(17.21%)和厚壁菌门(16.09%),而小尾寒羊组的优势菌门依次为厚壁菌门(36.52%)、拟杆菌门(36.00%)和变形菌门(5.97%)。小尾寒羊组瘤胃中拟杆菌门和厚壁菌门相对丰度显著高于湖羊组(P<0.05),但变形菌门相对丰度显著低于湖羊组(P<0.05)。5)功能预测分析结果显示,湖羊组在疾病和抗生素合成通路的功能基因相对丰度显著高于小尾寒羊组(P<0.05)。由此可见,在红豆草茬地放牧条件下,湖羊和小尾寒羊对该饲养管理方式的响应情况不同,小尾寒羊生长性能、瘤胃内总挥发性脂肪酸含量及瘤胃内微生物多样性均高于湖羊,且湖羊和小尾寒羊瘤胃微生物群落结构和功能存在差异。