急性髓系白血病患者外周血TK1和SPF的分析

目的探讨外周血胸腺嘧啶核苷激酶1(TK1)和S期细胞百分比(SPF)在急性髓系白血病(AML)诊断、疗效监测及预后中的意义。方法选取AML患者58例、血液系统良性增殖疾病患者(良性增殖组)6例和体检健康者(正常对照组)20名,采用印迹免疫-增强发光法检测TK1,采用流式细胞术(FCM)检测SPF。58例AML患者经1个疗程的标准诱导治疗后,比较治疗前、缓解组(39例,其中完全缓解11例、部分缓解28例)和未缓解组(19例)的TK1和SPF;同时检测58例AML患者治疗后1周和1个月的TK1和SPF。结果 AML组治疗前TK1为(2.43±1.02)pmol/L、SPF为(4.62±2.33)%,明显高于良性增殖组[TK1为(1.12±0.41)pmol/L、SPF为(2.62±1.05)%]及正常对照组[TK1为(0.39±0.15)pmol/L、SPF为(2.21±0.96)%](P<0.05)。AML完全缓解组TK1为(0.78±0.44)pmol/L、SPF为(1.89±1.23)%,明显低于治疗前和未缓解组[TK1为(4.26±0.46)pmol/L、SPF为(5.58±3.12)%](P<0.05)。AML患者治疗1个月后,TK1和SPF分别为(1.97±0.89)pmlol/L和(2.89±1.03)%,明显低于治疗前(P<0.05)。结论外周血TK1联合SPF检测能更准确地预测AML的细胞增殖情况,可很好地指示AML的治疗及提示预后。

喉癌和不典型增生上皮细胞的P53蛋白表达与S期组分

应用免疫组织化学方法和流式细胞技术对喉癌和不典型增生上皮的Ｐ５３蛋白表达和细胞周期中Ｓ期组分进行了研究，结果显示Ｐ５３蛋白在轻度、中度、重度不典型增生上皮的表达率分别为４０００％、６０００％、７１４３％和７３６８％，声带息肉、不典型增生上皮和喉癌的Ｓ期组分分别为３４５１％、５０１８％和６２２０％。其中有８例在２种指标中均为阳性，有两例均为阴性。结果表明Ｐ５３蛋白免疫组化和Ｓ期组分的测定对癌前病变的定性诊断具有重要意义。两种指标联合使用使诊断更准确可信。

子宫内膜癌DNA倍体及S期细胞比率测定的临床意义

目的 :研究DNA倍体、S期细胞比率 (SPF)在子宫内膜复合型增生、子宫内膜癌不同临床分期和病理分级中的变化并评价其临床意义。方法 :采用流式细胞术(FCM)测定 39例子宫内膜癌 ,8例复合型增生子宫内膜中DNA倍体和SPF的变化。结果 :DNA异倍体率和SPF在子宫内膜癌中高于复杂型增生子宫内膜 (P <0 0 1) ,晚期、低分化和深肌层浸润子宫内膜癌DNA异倍体率和SPF高于早期、高分化、浅肌层浸润子宫内膜癌。结论 :DNA异倍体率、S期细胞比率在子宫内膜癌的诊断和鉴别诊断、监测病情变化和评价预后方面有重要的临床意义。

UBE1表达SPF值在非霍奇金淋巴瘤中的临床意义

目的：应用免疫组化和细胞图像分析术（ICM-DNA）对非霍奇金淋巴瘤（NHL）进行泛素活化酶（UBE1）蛋白表达和S期分数（SPF）的检测，探讨UBE1表达、SPF在NHL的良恶鉴别、恶性程度判断中的意义。方法：210例NHL（WH02001新分类）和30例良性增生淋巴组织进行免疫组化染色（SP法）、改良Feulgen染色和ICM-DNA检测。结果：NHL中UBE1蛋白表达阳性率为76．19％，SPF为10．97±1．11％～30．87±2．17％，均高于对照组（P〈0．05）；UBE1蛋白表达阳性率在NHL高度侵袭性-惰性、高度侵袭性-侵袭性组间存在统计学差异（P〈0．05），SPF在惰性-侵袭性、惰性-高度侵袭性组间存在统计学差异（P〈O．05）；SPF与UBE1蛋白表达阳性率无相关性（P〉O．05）。结论：UBE1蛋白表达结合SPF检测可作为良恶性淋巴组织增生的鉴别指标，同时对NHL恶性程度的判定具有参考价值。

DNA含量和S期细胞比值与食管癌生物学特性的关系

目的 :研究食管癌患者不同组织细胞的DNA含量、S期细胞比值 (SPF)及倍体状态与临床病理特性的关系。方法 :应用流式细胞仪检测食管癌患者新鲜手术标本食管癌组织、癌旁组织、正常食管粘膜及淋巴结中DNA含量及S期细胞比值。结果 :食管癌组织的异倍体发生率明显高于癌旁组织、正常食管粘膜和淋巴结 (P <0 0 5)。二倍体组织之间的细胞DI差异无显著性 (P >0 0 5)。异倍体与二倍体细胞同一组织之间、异倍体组癌组织与癌旁组织、癌组织与正常组织、癌旁组织与淋巴结、正常组织与淋巴结之间DI差异显著 (P <0 0 5)。在二倍体组中癌组织与正常组织、癌组织与淋巴结之间SPE之间差异显著 (P <0 0 5)。DNA倍体与患者性别、肿瘤部位及大体病理类型等无关 (P >0 0 5) ,而与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结状况有关 (P <0 0 5)。结论 :食管癌DNA倍体及SPF均与肿瘤的增殖活性有关 ,有助于对食管癌生物学行为的了解和患者预后的判断。

非霍奇金淋巴瘤恶性程度与S期比值及DNA倍体关系

目的 :探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)恶性程度与S期比值、DNA倍体间的关系。方法 :取43例经组织学确诊的NHL(其中低度恶性12例 ,中度恶性7例 ,高度恶性24例)石蜡包埋标本 ,制成单细胞悬液 ,染色并行流式细胞术(FCM)分析 ,并对35例病人进行为期3年的随访。结果 :低度恶性NHL12例 ,S期比值均数为13.56%±6.89% ,中度恶性NHL7例 ,S期比值均数为34.55 %±26.20% ;高度恶性NHL24例 ,S期比值均数为31.93%±16.14% ;低恶组与中恶组相比 ,有显著性差异(P<0.05) ;低恶组与高恶组相比 ,有高度显著性差异(P<0.01) ;中恶组与高恶组相比 ,无显著性差异(P>0.05)。DNA倍体分析显示 ,43例NHL中 ,低度恶性者12例 ,全为二倍体 ;中度恶性者7例 ,二倍体6例 ,异倍体1例 ;高度恶性者24例 ,二倍体15例 ,异倍体9例 ;从低恶组至高恶组DNA异倍体率有显著性差异(P<0.05)。此外 ,对随访的35例病人 ,其中异倍体组9例 ,S期比值为38.65 %±16.72% ,有8例复发(其中1例于复发后6个月死于NHL) ;DNA二倍体组26例 ,S期比值为19.40±18.02 % ,有2例复发 ,二组病人复发率有高度显著性差异(P<0.01)。结论 :结合S期比值与DNA倍体分析 ,有助于NHL恶性程度的鉴别。

肾母细胞瘤组织中DNA倍体、SPF和NM23表达的检测

目的:检测肾母细胞瘤组织中DNA倍体、SPF和NM23的表达。方法:选取35例肾母细胞瘤组织和10例正常肾组织,采用流式细胞仪(FCM)检测DNA倍体、SPF,免疫组化SP法检测NM23的表达。结果:肾母细胞瘤组织中DNA异倍体率、SPF均高于正常对照组,差异有统计学意义。NM23在正常对照组的阳性表达率(90.0%)明显高于肾母细胞瘤组织(31.4%)。DNA倍体与NM23呈负相关。结论:联合检测DNA倍体、SPF、NM23可为评价肾母细胞瘤的生物学行为和临床治疗提供一定的依据。

DNA含量和S期分数在非霍奇金淋巴瘤诊断中的意义

目的采用细胞图像分析术(ICM)对非霍奇金淋巴瘤(NHL)进行DNA含量、S期分数(SPF)的检测,探讨两个参数在NHL诊断分型、鉴别诊断及预后判断中的意义。方法210例NHL和30例良性增生淋巴组织进行改良Feulgen染色和ICM-DNA检测。结果NHL的DNA含量为(7.01±0.21)pg～(10.77±0.27)pg,SPF为(10.97±1.11)%～(30.87±2.17)%,均高于对照组(P<0.05);NHL侵袭性、高侵袭性组的DNA含量和SPF均高于惰性组(P<0.05);滤泡性淋巴瘤FL-II、III级的DNA含量、SPF均高于FL-I级(P<0.05)。结论DNA含量、SPF对良恶性淋巴组织增生的鉴别诊断、NHL惰性或侵袭性判断是有意义的参考指标,但对侵袭性高低无提示;FL是相对异质化群体,DNA参数检测只能做为参考。

卵巢癌DNA水平、S期比例、雌孕激素受体与临床病理组织学的关系

测定了２４例卵巢癌标本的ＤＮＡ水平、Ｓ期比例（ＳＰＦ）及雌、孕激素受体（ＥＲ、ＰＲ），分析了它们之间以及与临床病理组织学之间的关系。结果表明，卵巢癌ＤＮＡ水平、ＳＰＦ与有无腹水及病理分级有明显的关系；二倍体组的ＰＲ阳性率明显高于异倍体组；二倍体组的ＳＰＦ明显低于异倍体组；ＥＲ（－）ＰＲ（－）组的ＳＰＦ明显高于ＥＲ（＋）ＰＲ（＋）组。提示卵巢癌ＤＮＡ水平和ＳＰＦ可作为一个相对独立的反映卵巢癌生物学行为的客观指标，对估计卵巢癌的预后和选择治疗方案有较大的价值。

胶质瘤DNA倍体、SPF值及EGFR蛋白表达的研究

目的 :检测胶质瘤DNA倍性、SPF及EGFR表达 ,探讨其与胶质瘤病理级别的关系及它们之间相关性。方法 :4 6例手术切除的脑胶质瘤作为实验组 ;10例正常脑组织作为对照组。采用免疫组化SABC (Strept Avidin BionComplex)法检测EGFR蛋白表达 ;采用流式细胞技术 (Flow Cytometry ,FCM )检测DNA含量及SPF。结果 :对照组均为二倍体且无EGFR表达 ;胶质瘤Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ～Ⅳ级组DNA异倍体率分别为 13 3%、4 6 2 %、77 8% ,Ⅰ级组与Ⅲ～Ⅳ级组、Ⅱ级组与Ⅲ～Ⅳ级组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;EGFR阳性率分别为 2 0 0 %、6 9 2 %和 83 3% ,Ⅰ级组与Ⅱ级组、Ⅰ级组与Ⅲ～Ⅳ级组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;SPF值随胶质瘤级别增高而升高 ,各组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;EGFR阳性胶质瘤DNA发生率及SPF值均明显高于EGFR阴性胶质瘤 (P <0 0 5 )。结论 :DNA异倍体的发生、SPF值、EGFR阳性率与胶质瘤恶性级别正相关。

DNA含量及S期细胞比值和胃癌生物学特性的关系

目的 研究DNA含量及SPF值与胃癌临床病理指标及PCNA表达的关系。方法 应用流式细胞术测定 72例胃癌新鲜组织及 3 1例良性胃粘膜病变新鲜组织的DNA含量及SPF值 ,并采用免疫组织化学方法检测 66例胃癌石蜡切片的PCNALI ,并结合临床资料分析其临床意义。结果 胃癌组的DI( 1.2 1)及异倍体检出率 ( 4 4.44%)明显高于良性胃粘膜病变组 (分别为1.0 5和 9.68%)。胃癌患者中异倍体组的SPF值 ( 2 2 .74%)及PCNALI( 66.12 %)明显高于二倍体组的SPF值 ( 15 .5 8%)及PC NALI( 61.0 3 %) ,高SPF值组的异倍体检出率 ( 67.86%)及PCNALI( 66.89%)明显高于低SPF值组的异倍体检出率 ( 2 1.0 5 %)及PCNALI( 60 .3 4 %)。DNA倍体与患者年龄及肿瘤部位有关 ,SPF值仅与肿瘤部位有关 ,两者均与其他临床病理指标无相关性。结论 胃癌DNA倍体及SPF值均与肿瘤的增殖活性有关。

喉鳞癌组织中SOX9表达与S期组分的研究

目的:研究SOX9在喉鳞癌组织中的表达以及S期组分(S phase fraction,SPF)的变化,探讨与肿瘤发生发展的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测60例喉鳞癌(喉癌组)与32例正常喉黏膜组织(对照组)中SOX9蛋白表达变化,应用图像分析技术检测SOX9阳性表达产物的面密度及积分光密度值变化,同时采用流式细胞术检测喉癌组与对照组组织中SPF变化。结果:喉癌组面密度及积分光密度值较对照组升高,两组比较差异有显著性(P<0.01)。喉鳞癌组织中SOX9蛋白表达升高,喉鳞癌组织中SOX9蛋白表达与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。喉癌组SPF高于对照组,二者差异有统计学意义(P<0.01)。结论 :SOX9蛋白异常表达及SPF变化可能在喉鳞癌发生发展中发挥重要作用。

肺癌MRI与癌细胞核DNA含量及S期分数的相关性

目的：探讨肺癌ＭＲＩ信号及形态特征与ＤＮＡ倍体的关系。材料和方法：２６例原发性支气管肺癌患者，术前用Ｒｅｓｏｎｅｘ ０．３８Ｔ磁共振成像仪行冠状面及横断面成像（ＳＥ Ｔ１ＷＩ和ＧＲ），增强后行横断面ＳＥ Ｔ１ＷＩ。术后肺癌标本用细胞图像分析仪，测定每例患者的ＤＮＡ含量及Ｓ期分数（ＳＰＦ）。结果：未增强Ｔ１ＷＩ异倍体肿瘤信号强度比显著大于二倍体肿瘤的信号强度比。异倍体肿瘤的ＳＰＦ值也显著大于二倍体肿瘤，ＭＲＩ形态特征（大小、分叶、毛刺、坏死）不能反映ＤＮＡ指数和ＳＰＦ。结论：ＭＲＩ信号强度比在一定程度上可反映肿瘤细胞的ＤＮＡ含量，信号强度高的肺癌细胞较信号强度低者ＤＮＡ含量高。

S频段小数分频锁相环频率合成器实现与应用

传统的整数分频锁相环频率合成技术无法在单个环路实现高频率、低分辨率和低相噪的目标,小数分频锁相环在提高鉴相频率的同时减小分频计数值,从而降低相位噪声。针对USB统一测控系统的需要,本文提出基于单片小数分频锁相环的微波频率合成方法。实验结果表明,小数分频锁相环频率合成器具备良好的信号输出特性,可以为测控系统提供低成本频率合成方案。

卵巢癌类固醇受体表达与DNA水平及S期比例之间的关系

采用流式细胞技术对24例卯巢癌患者的新鲜速冻卵巢癌组织的细胞DNA水平及S期比例(S-phase fraction,SPF)进行了定量测定,用亲和酶标法埘新鲜卵巢癌绀织的雌激素受体(Estrogen receptor,ER)、孕激素受体(Progesterone receptor,PR)进行了半定量测定,探讨了卵巢癌类固醇受体表达与DNA水平及SPF之间的关系。结果表明,ER阳性牢与DNA倍体无明显关系,但二倍体组的PR阳性率明显高于异倍体组(P<0.05)。ER+PR+、ER+PR-.ER-PR+的表达在二倍体组与异倍体组无明显差异。受体阴性组平均SPF明显高于ER+PR+组,但与ER+PR-、ER-PR+组无明显差异,SPF<9％、9％～16％和>16％三组间的受体表达也均无明显差异。作者认为,卵巢癌组织ER、PT与细胞DNA水平及S期比例的关系有助于更好地判断预后和选择激素疗法。

流式细胞术检测鼻腔鼻窦肿瘤细胞周期的DNA分析

目的探讨流式细胞术检测DNA指数(DNA index,DI)及细胞周期在鼻腔鼻窦肿瘤组织中的意义。方法取石蜡包埋的30例鼻腔鼻窦恶性肿瘤、30例鼻腔内翻性乳头状瘤标本为实验组;以30例鼻中隔偏曲患者的正常黏膜组织作为对照组。用流式细胞术检测各组的DNA指数及细胞周期的S期细胞百分数(S-phase Fraction,SPF),研究各指数与肿瘤良恶性之间相关性。结果鼻腔内翻性乳头状瘤组DI值高于对照组,但无统计学意义,而SPF值差异有显著性;恶性组织组与对照组之间,DI与SPF的差别均有高度统计学意义;恶性肿瘤组与内翻性乳头状瘤组之间,DI值、SPF值的差别均有统计学意义。结论流式细胞术检测DI、SPF在鼻腔鼻窦良、恶性病变的诊断中有重要意义。

肺癌端粒酶活性、p53突变蛋白及细胞增殖DNA合成期比例相关研究

目的 探讨端粒酶、p5 3突变蛋白作为肺癌肿瘤标记物的可能性以及二者与细胞增殖DNA合成期比例(SPF值 )的关系。方法 采用改良银染 -端粒重复序列扩增法 (TRAP)检测 4 0例原发性支气管肺癌端粒酶活性 ,免疫组织化学方法检测其p5 3突变蛋白 ,流式细胞术检测其SPF值。结果 87.5 % (35 /40 )肺癌组织端粒酶活性阳性 ,92 .5 % (37/40 )p5 3突变蛋白阳性 ;SPF值在端粒酶活性阴性组、阳性组之间 ,p5 3突变蛋白阴性组、阳性组之间均有显著性差异。结论 端粒酶、p5 3突变蛋白可能是灵敏、特异的肺癌肿瘤标记物。端粒酶的异常活化、表达主要发生在细胞分裂周期的S期 ,p5

乳腺癌流式细胞光度术及临床病理与预后的关系

对有随访资料的乳腺癌102例经流式细胞光度术测定及病理学检查,就乳腺癌细胞DNA含量、细胞周期时相分布、病理组织学分型、核分裂相数(M)、临床分类分期、肿瘤大小、年龄、术式、术后处理及癌旁病变等诸因素与术后生存期以及各因素间的关系做了统计学分析。结果显示DNA指数(DI)越高、DNA合成期细胞分数(S%)越大、临床分类分期越高,癌旁病变有癌变者及浸润型导管癌患者术后生存期均明显为短(P<0.01),手术方式以根治术效果好,术后生存期长(P<0.01);另外也显示DI值与S%间有明显相关性,异倍体组S%明显增高(P<0.05);S%越大、M数越大则肿瘤越大(P<0.05)。

直肠癌远端直肠系膜内DNA含量的检测及其临床意义

目的 :探讨直肠系膜内DNA含量 ,为全直肠系膜切除术切除范围提供理论依据。方法 :采用流式细胞术对 37例直肠癌切除标本的癌组织、远端 3cm ,5cm处直肠系膜以及 10例正常结肠系膜中的DNA含量、细胞增殖活性进行检测 ,分析比较各组间DNA指数 (DI)、增殖指数 (PI)及S期细胞百分比 (SPF)等指标。结果 :癌组织、癌远端 3cm ,5cm处直肠系膜中异倍体率及PI,SPF值均显著高于正常组织 (P <0 .0 5 ) ;远端直肠系膜中异倍体率与癌组织无显著差异 ;不同范围内的远端系膜中异倍体率、PI及SPF无显著差异。结论 :直肠癌远端 3cm ,5cm处直肠系膜中存在着DNA含量及细胞增殖活性的异常改变 ,呈现出恶性肿瘤生物学特性 。

局部晚期宫颈鳞癌流式细胞术分析与放射治疗预后的关系

目的研究局部晚期宫颈鳞癌流式细胞术分析结果(DNA倍体、SPF和PI)与放疗预后的关系,探讨它们在预测宫颈癌放疗效果中的价值。方法68例ⅢB期宫颈鳞癌病人在放疗前钳取宫颈癌组织,制备成单细胞悬液,采用流式细胞术检测癌细胞DNA倍体、S期比例(SPF)及增殖指数(PI),分析他们及其他临床参数与患者根治性放疗后疾病复发和生存的关系。结果在68例标本中,异倍体检出率为47.1%(32/68),SPF和PI值为分别为(7.49±2.91)和(12.89±3.75);在随访期间,全组宫颈癌患者复发率为44.1%(30/68);二倍体组和异倍体组的5年无复发生存率分别为52.7%和35.2%(P<0.05),高SPF组和低SPF组5年无复发生存率分别为25.3%和56.6%(P<0.05),高PI组和低PI组5年无复发生存率分别为37.5%和49.3%(P<0.05);经多因素分析显示,肿瘤大小和SPF是影响宫颈癌患者无复发生存的独立预后因素。结论通过流式细胞术检测宫颈癌组织SPF可以预测局部晚期宫颈鳞癌放射治疗后的预后。