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猪传染性胃肠炎病毒RT-CPA检测方法构建及初步应用
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作者 赵子惠 陈伯祥 +3 位作者 王佳 成伟伟 杨明 李元新 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期65-71,共7页
为开发一种猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列,设计了3对引物,使用构建的重组质粒作为标准阳性对照,通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条,成... 为开发一种猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列,设计了3对引物,使用构建的重组质粒作为标准阳性对照,通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条,成功建立了一种一步法TGEV RT-CPA检测方法。本实验筛选最优条件为:Mg^(2+)浓度1.0 mmol/L,dNTP浓度0.8 mmol/L,Betaine浓度1.0 mol/L,BstDNA聚合酶浓度8.0 U,反应温度63℃,反应时间60 min,AMV逆转录酶5 U。本研究的扩增产物通过凝胶电泳显示出梯形条带,证明了其对TGEV的特异性检测和重复性良好,灵敏度高达10拷贝/μL。初步应用显示,该方法与TGEV抗原快速检测试剂盒的符合率超过90%,显示了高灵敏度。TGEV RT-CPA方法免去了RNA提取和cDNA合成的步骤,能够完成一步检测,且该方法不需要特殊仪器,适用于现场快速检测TGEV,为快速诊断和防控猪传染性胃肠炎提供了新的技术选择。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 RT-CPA S基因 检测方法
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献血者HBVs基因变异的生物信息学分析
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作者 范加诚 李青 +2 位作者 陈秀丽 刘世香 陈烨 《中国输血杂志》 CAS 2024年第8期933-939,共7页
目的分析HBV DNA+/HBsAg-献血者的传染性指标、S区基因序列突变情况及生物信息学特征变化。方法通过PCR方法筛查出1份HBV DNA+/HBsAg-的标本,应用酶联免疫和化学发光方法检测该标本乙肝病毒5项指标,对该标本HBVs区基因片段测序并分析变... 目的分析HBV DNA+/HBsAg-献血者的传染性指标、S区基因序列突变情况及生物信息学特征变化。方法通过PCR方法筛查出1份HBV DNA+/HBsAg-的标本,应用酶联免疫和化学发光方法检测该标本乙肝病毒5项指标,对该标本HBVs区基因片段测序并分析变异情况,应用分析软件对所测序列进行生物信息学分析。结果该标本HBV DNA+、HBsAg-、HBsAb+、HBeAg+、HBeAb-、HBcAb+;HBVs区基因序列内发生氨基酸单位点突变(P151L),空间结构发生改变。结论HBVs区基因序列空间结构改变,可能是导致检测结果出现血清学HBsAg-/HBsAb+/HBV DNA+的原因。 展开更多
关键词 HBV OBI S基因 献血者 生物信息学
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广西地区腹泻仔猪呼肠孤病毒的感染及序列分析 被引量:1
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作者 隆美金 陆颖 +8 位作者 李茂宁 易春华 廖梦娟 余科辰 覃一峰 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 《动物医学进展》 北大核心 2024年第7期31-37,共7页
为了解广西地区腹泻仔猪中哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)的感染情况及主要流行毒株,应用套式RT-PCR对广西部分地区2020-2022年173份腹泻猪样品进行检测,并选取部分阳性样品进行S 1基因扩增与分析,进一步了解广西地区MRV主要流行毒株的基因特... 为了解广西地区腹泻仔猪中哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)的感染情况及主要流行毒株,应用套式RT-PCR对广西部分地区2020-2022年173份腹泻猪样品进行检测,并选取部分阳性样品进行S 1基因扩增与分析,进一步了解广西地区MRV主要流行毒株的基因特征。结果显示,2020-2022年173份样品MR总阳性率为18%(32/173),各年阳性率分别为29.6%、9.9%和33%。获得1株S 1基因全长序列,序列比对结果发现该序列与其他MRV S 1基因序列的核苷酸同源性为43.4%~97.9%,氨基酸同源性为26.1%~97.8%;遗传进化分析显示,获得的毒株序列为MRV3型,与其他猪源MRV3型毒株ZJ2013、IND/MZ/3013789/reo在同一分支上,同属于谱系Ⅳ。结果表明广西地区猪群存在一定程度的MRV感染,为进一步防控广西腹泻猪群中MRV的流行提供科学依据。 展开更多
关键词 哺乳动物呼肠孤病毒 S 1基因 序列分析 感染情况
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2016年~2022年福建地区猪流行性腹泻病毒S基因的遗传变异分析 被引量:15
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作者 李雨琪 许静茹 +12 位作者 郑欣 黄林洁 周娴静 朱智豪 陈芳婷 邓莹滋 蔡思思 靳雨欣 刘璐 董波 戴爱玲 李晓冰 范克伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期84-91,共8页
为了解2016年~2022年福建地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行现状及遗传变异情况,本研究对从福建地区采集的231份疑似猪流行性腹泻(PED)发病仔猪病料样品经RT-PCR进行PEDV的检测,选取不同地区22份PEDV阳性样品经PCR扩增S基因并测序,采用Meg... 为了解2016年~2022年福建地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行现状及遗传变异情况,本研究对从福建地区采集的231份疑似猪流行性腹泻(PED)发病仔猪病料样品经RT-PCR进行PEDV的检测,选取不同地区22份PEDV阳性样品经PCR扩增S基因并测序,采用MegAlign分析PEDV S基因及其编码氨基酸序列的相似性,采用MEGA7.0软件构建其系统发育树,采用MegAlign分析S基因编码氨基酸序列的分子特征,分别利用RDP4、SimPlot、MEGA7.0软件进行S基因的重组分析,并利用BEAST软件进行该基因分歧时间估算。结果显示,福建地区PEDV总阳性率为51.51%(119/231),福建5个不同地区PEDV阳性率为40.00%~63.16%。从22份PEDV阳性样品中获得19条PEDV S基因序列,全长4149 bp~4161 bp,共编码1382 aa~1386 aa,19株PEDV S基因序列及其编码氨基酸序列之间相似性分别为94.4%~100%和93.8%~100%。19株PEDV S基因系统发育分析结果显示,其中18株PEDV属于GIIb亚型,1株属于GIb亚型。S蛋白氨基酸序列分析结果显示,与经典疫苗株CV777相比,18株GIIb亚型PEDV S蛋白的氨基酸序列在aa55~aa56、aa135~aa136和aa155~aa156处存在插入与缺失,具有典型的PEDV变异株的分子特征;其中14株还出现了独特的aa1193缺失。与GII型疫苗株AJ1102相比,19株PEDV S1区氨基酸突变率为60.00%~83.82%,其中18株GIIb亚型PEDV S1区氨基酸突变位点中有10个位于S蛋白重要结构域;基因重组分析结果显示,有3株PEDV S基因存在重组事件,其中FJLY01-2018株由GD-B株和CH-S株重组而来,FJLY02-2018株由CH/HNPJ/2017株和PEDV4-S-3株重组而来,FJLY03-2022株由PEDV-1931-1-Valladolid-Molpeceres株和HUA-M17株重组而来;S基因分歧时间估算结果显示,福建地区GIIa亚型、GIIb亚型、GIa亚型及GIb亚型PEDV的最早分歧时间约为1995年、2009年、2010年和2011年。上述结果表明福建地区PEDV流行率较高,田间流行株基因型具有多样性,且存在重组现象,临床上应予以高度重视。本研究为福建地区PED的流行病学调查及免疫防控提供了参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S基因 遗传变异 基因重组 分歧时间
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一株牛呼吸道冠状病毒的分离鉴定及部分生物学特征
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作者 班玛王清 陈曦 +3 位作者 岳怡 苏玉蓉 岳华 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3094-3104,共11页
牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)是引起牛呼吸道疾病和消化道疾病的重要病原之一。本研究旨在分离牛呼吸道冠状病毒(BRCV)并研究其部分生物学特性。采集暴发呼吸道疾病的肉牛鼻拭子,经荧光定量PCR鉴定为BCoV阳性。将阳性样本接种... 牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)是引起牛呼吸道疾病和消化道疾病的重要病原之一。本研究旨在分离牛呼吸道冠状病毒(BRCV)并研究其部分生物学特性。采集暴发呼吸道疾病的肉牛鼻拭子,经荧光定量PCR鉴定为BCoV阳性。将阳性样本接种人盲肠腺癌细胞(HCT-8),分离纯化后,对引起细胞病变的病毒分离株的S和HE基因进行序列测定和系统发育分析,并将病毒分离株接种BALB/c小鼠进行致病性研究。结果显示,成功分离到1株致细胞病变的毒株,经荧光定量PCR、间接免疫荧光和电镜观察鉴定为BRCV,蚀斑纯化后计算病毒TCID_(50)为10^(-8.46)·0.1 mL^(-1)。S基因和HE基因序列分析表明两种基因均发生重组事件;S蛋白具有2个独特的氨基酸突变(A33G和A975V),分别位于S1亚基的受体结合域和S2亚基;HE基因具有2个独特的氨基酸突变(L235R和L365F),分别位于凝集素域和近膜端域。分离株对4周龄BALB/c小鼠具有较强的致病性,能够引起小鼠呼吸加快和腹泻等临床症状,剖检和组织病理学显示肺和肠道出血,病毒主要分布在肺和肠组织,以肺组织中病毒载量最高。本研究首次在国内肉牛中分离到1株BRCV,S和HE基因分子有独特氨基酸突变,成功建立了小鼠感染模型,为进一步研究BCoV的生物学特性和遗传进化提供了参考。 展开更多
关键词 牛呼吸道冠状病毒 S基因 HE基因 小鼠 致病性
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猪流行性腹泻病毒CH/HB/CZ01的分离鉴定及致病性研究
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作者 翟刚 刘莹 +5 位作者 赵云环 刘濮毓 王传文 李妍 范京惠 左玉柱 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期97-103,共7页
为了获得猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的地方分离株,并对其生物学特性和致病性进行初步了解。本研究在河北省开展PEDV的收集与分离鉴定,并进行遗传进化分析,同时评价分离毒株在仔猪上的致病性。将在该地区... 为了获得猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的地方分离株,并对其生物学特性和致病性进行初步了解。本研究在河北省开展PEDV的收集与分离鉴定,并进行遗传进化分析,同时评价分离毒株在仔猪上的致病性。将在该地区收集到的PEDV样品接种Vero细胞连续盲传,经RT-PCR检测以及基因测序鉴定,成功分离了CH/HB/CZ01毒株。利用GenBank中公布的PEDV毒株序列对该毒株进行S基因的遗传进化分析,结果显示,该毒株与我国近年来流行毒株序列的同源性为97.1%~98.3%,明显高于CV777、LZC和DR13等传统毒株的同源性,属于GⅡb亚群。将分离的PEDV病毒液按照2.0 mL/头接种健康仔猪,均出现腹泻等症状且接种2 d后直肠拭子经RT-PCR鉴定均为PEDV阳性。结果表明,分离株为变异毒株具有较强的致病性,为掌握河北省PEDV最新流行毒株的基因组特性以及生物学特性研究奠定了初步基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 遗传进化 S基因 致病性
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内蒙古牛冠状病毒全基因组测序与遗传进化分析
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作者 其勒木格 王旭芬 +4 位作者 侯琳 张嘉磊 马聿田 张志丹 周伟光 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4984-4995,共12页
【目的】了解内蒙古地区牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)流行毒株的全基因组特征和遗传进化情况,为有效防控BCoV感染提供参考。【方法】本研究对疑似感染BCoV的犊牛脾脏进行宏病毒组测序和步移RT-PCR扩增,获得BCoV全基因组序列,并... 【目的】了解内蒙古地区牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)流行毒株的全基因组特征和遗传进化情况,为有效防控BCoV感染提供参考。【方法】本研究对疑似感染BCoV的犊牛脾脏进行宏病毒组测序和步移RT-PCR扩增,获得BCoV全基因组序列,并对其进行生物信息和遗传进化分析。利用Oligo 7.0软件设计特异性引物扩增S基因,并对其进行遗传进化、氨基酸序列变异、抗原表位预测及三级结构预测分析。【结果】本研究从疑似感染BCoV的犊牛脾脏中成功获得大小为30971 bp的BCoV全基因组序列,NCBI登录号为PP352170.1,该全基因组核苷酸序列与BCoV爱尔兰株ABGEB0-62相似性最高,为99.2%,并与该株亲缘关系最近,同时与BCoV法国株BCoV_2014_13和挪威株Nes_2012-01-03属于同一进化分支;扩增出的S基因核苷酸长度为4092 bp,与BCoV爱尔兰株ABGEB0-62 S基因序列亲缘关系最近,处于同一进化分支,但核苷酸序列与BCoV内蒙古株NMG1 S基因相似性最高,为99.4%;S基因编码的氨基酸与Mebus株比对发现,有15个氨基酸变异位点(S1亚基12个,S2亚基有3个),其中变异的氨基酸残基154、260、499-520、718、1192、1344位氨基酸处于抗原表位区,并导致S蛋白三级结构发生改变。【结论】本研究利用宏病毒组测序和基因组5′-端步移RT-PCR法获得内蒙古BCoV株全基因组序列,其S蛋白抗原表位区氨基酸位点发生变异和三级结构改变,预示S蛋白抗原性发生了改变;S1亚基的多态性区域氨基酸位点的变异预示S蛋白的致病性发生变化。 展开更多
关键词 牛冠状病毒(BCoV) 全基因组 宏病毒组 S基因 遗传进化
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牛环曲病毒云南株纤突蛋白基因分子特征及进化分析
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作者 耿娟 曲伟杰 +10 位作者 张晓梅 魏志杰 钟德凯 王鑫文 李文贵 张双玲 李金存 张振兴 张以芳 郑锦玲 宋建领 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4943-4955,共13页
【目的】了解牛环曲病毒(Bovine torovirus,BToV)在云南部分地区牛群中的流行及其S基因遗传进化情况。【方法】采集云南省内13个地区15个牛场不同年龄牛的粪便样品655份,利用RT-PCR方法检测BToV,并对其中6株BToV阳性样品进行S基因扩增... 【目的】了解牛环曲病毒(Bovine torovirus,BToV)在云南部分地区牛群中的流行及其S基因遗传进化情况。【方法】采集云南省内13个地区15个牛场不同年龄牛的粪便样品655份,利用RT-PCR方法检测BToV,并对其中6株BToV阳性样品进行S基因扩增、克隆、测序及遗传进化分析。【结果】RT-PCR检测结果显示,655份牛粪便样品检出71份BToV阳性,总阳性率为10.8%;其中腹泻样品阳性率为21.2%(59/278),非腹泻样品阳性率为3.2%(12/377);1周龄、1周龄~1月龄、1~6月龄和1岁及上样品的阳性率分别为15.0%(3/20)、17.7%(20/113)、14.0%(45/321)和1.5%(3/201)。相似性分析结果显示,6条BToV S基因序列相似性为96.0%~99.8%,且与原始毒株Breda1的相似性为94.7%~96.0%,与国内流行毒株的相似性为95.2%~99.7%。遗传进化分析结果显示,6条S基因均与原始毒株Breda1不在同一大分支,与国内四川、河南毒株及土耳其毒株形成一个大分支,表明云南省BToV毒株与目前国内流行毒株一致,亲缘关系近。氨基酸突变位点分析结果显示,S基因存在少量独特的氨基酸突变位点。重组分析结果显示,BTOV-China/YN03-2021、BTOV-China/YN01-2021和BTOV-China/YN06-2022为重组序列,其中重组序列BTOV-China/YN06-2022得分最高,重组区域为1438~1609 bp区间,主要亲本为BTOV-China/YN05-2021;重组序列BTOV-China/YN03-2021,重组区域位于1668~3569 bp区域,主要亲本为土耳其毒株BToV-HT2-TUR(MG957146.1);重组序列BTOV-China/YN01-2021,重组区域位于261~2552 bp,主要亲本为土耳其毒株BToV-HT2-TUR(MG957146.1)。基因选择压力分析结果显示,BToV S基因的进化方式主要以中性选择为主,但同时也存在净化选择和正向选择的压力影响。【结论】本研究揭示了BToV已存在于云南省部分地区牛群体中且防控形势较严峻,可为中国研究BToV流行病学和BToV S基因遗传进化关系提供参考,同时也为云南地区制定BToV感染的防控措施提供理论依据。 展开更多
关键词 牛环曲病毒(BToV) S基因 分子特征 进化分析
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欧李种质资源自交不亲和S-RNase基因的克隆及序列分析
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作者 郭夕雯 穆霄鹏 +3 位作者 王鹏飞 张建成 张帅 杜俊杰 《中国果树》 2024年第2期38-43,共6页
为鉴定不同欧李种质资源的S基因型,分析欧李S基因序列特点,以70份欧李种质为材料,通过PCR特异性扩增S基因,并克隆测序得到其基因序列。结果表明:利用BFP93/BFP94-1引物,在52份种质中各鉴定到2个S基因,在16份种质中各鉴定到单个S基因,在3... 为鉴定不同欧李种质资源的S基因型,分析欧李S基因序列特点,以70份欧李种质为材料,通过PCR特异性扩增S基因,并克隆测序得到其基因序列。结果表明:利用BFP93/BFP94-1引物,在52份种质中各鉴定到2个S基因,在16份种质中各鉴定到单个S基因,在3-32-扁黄和10-32两份种质中未扩增出条带;共克隆得到120条基因,鉴定得到36种S基因型,并将其中的新基因登录到NCBI中,登录号依次为OQ124075~OQ124109。 展开更多
关键词 欧李 S基因 自交不亲和 特异性引物
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胡萝卜14-3-3基因家族的鉴定与分析
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作者 王瑞雪 郭杰 +1 位作者 郝楠 朱丽君 《北方园艺》 CAS 北大核心 2024年第6期17-24,共8页
以胡萝卜为试材,采用分子生物学和生物信息学方法对胡萝卜14-3-3基因家族各成员进行鉴定,研究分析其理化特性、基因结构、保守结构域、复制事件、系统进化及顺式作用元件,以期为进一步研究胡萝卜14-3-3蛋白的功能提供参考依据。结果表明... 以胡萝卜为试材,采用分子生物学和生物信息学方法对胡萝卜14-3-3基因家族各成员进行鉴定,研究分析其理化特性、基因结构、保守结构域、复制事件、系统进化及顺式作用元件,以期为进一步研究胡萝卜14-3-3蛋白的功能提供参考依据。结果表明:胡萝卜中共鉴定到11个14-3-3基因,不均匀分布在6条染色体上,含有3~7个外显子,其中1对基因发生片段复制事件;编码的蛋白序列长度为236~264 aa,分子量为26.64~30.14 kD,等电点为4.65~5.33,具有7个Motif,全部为酸性非分泌型蛋白,定位在细胞核。系统进化分析显示,胡萝卜14-3-3蛋白分为ε类(3个)与非ε(8个)类2个亚族。此外,顺式作用元件分析结果表明,胡萝卜14-3-3基因含有大量激素与逆境胁迫相关元件。 展开更多
关键词 胡萝卜 14-3-3基因家族 系统进化分析
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帕金森病患者血清LCN2、PROS1水平变化及其与疾病分期、认知障碍的相关性
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作者 单树崇 吴召军 何清 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第9期1068-1072,1079,共6页
目的探讨帕金森病(PD)患者血清脂质运载蛋白2(LCN2)、蛋白S基因(PROS1)水平变化及其与疾病分期、认知障碍的相关性。方法选取2019年1月至2022年12月该院诊治的PD患者120例为研究对象(PD组),参考改良版Hoehn-Yahr分级(H-Y分级),分为早期P... 目的探讨帕金森病(PD)患者血清脂质运载蛋白2(LCN2)、蛋白S基因(PROS1)水平变化及其与疾病分期、认知障碍的相关性。方法选取2019年1月至2022年12月该院诊治的PD患者120例为研究对象(PD组),参考改良版Hoehn-Yahr分级(H-Y分级),分为早期PD组(0~1.5级,n=50),中期PD组(>1.5~3.0级,n=39),晚期PD组(>3.0~5.0级,n=31)。以同期健康体检的60例体检健康者为对照组。检测两组血清LCN2、PROS1水平。比较不同PD疾病分期PD患者血清LCN2、PROS1水平差异。Spearman秩相关分析血清LCN2、PROS1水平与简易智力状态检查量表(MMSE),蒙特利尔认知评估量表(MoCA)及H-Y分级的相关性。多因素Logistic回归分析影响PD患者认知功能障碍的相关因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LCN2、PROS1水平对PD患者认知障碍的评估价值。结果PD组血清LCN2、PROS1水平分别为(97.47±11.28)μg/L、(77.52±8.69)μg/L,明显高于对照组(40.15±6.22)μg/L、(32.49±4.37)μg/L,差异均有统计学意义(t=36.641、37.783,均P<0.05)。晚期PD组血清LCN2、PROS1水平高于早期、中期PD组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。认知障碍组PD患者病程、血清LCN2、PROS1、H-Y分级均高于认知正常组患者,而MoCA评分、MMSE评分低于认知正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清LCN2、PROS1水平与MoCA评分,MMSE评分呈负相关(r=-0.634、-0.489,均P<0.05),与H-Y分级呈正相关(r=0.467、0.625,均P<0.05)。血清LCN2、PROS1是影响PD患者认知功能障碍的相关危险因素。血清LCN2、PROS1单独及联合对PD患者认知功能障碍预测的曲线下面积(AUC)为0.905(95%CI:0.868~0.955),0.803(95%CI:0.764~0.849),0.836(95%CI:0.770~0.867),血清LCN2、PROS1联合检测AUC明显高于单独检测,差异具有统计学意义(Z=5.558,4.974,均P<0.001)。结论PD患者血清LCN2、PROS1水平升高,与PD疾病分期、认知障碍有关,两者联合检测对PD患者认知障碍具有较高的评估价值。 展开更多
关键词 帕金森病 脂质运载蛋白2 蛋白S基因 疾病分期 认知功能障碍
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2022年江苏省4种猪腹泻病毒分子流行病学调查
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作者 樊毛迪 李群 +7 位作者 侯闻闻 朱振邦 丁国伟 范娟 李智 曲向阳 陈昌海 李向东 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第8期44-58,共15页
为了解江苏省猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪δ冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)流行毒株的遗传变异趋势,采集了2022年江苏省不同猪场的病猪腹泻病料36份,使用RT-PCR方法分别检测PEDV、TGEV、PDCoV和PoRV感染... 为了解江苏省猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪δ冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)流行毒株的遗传变异趋势,采集了2022年江苏省不同猪场的病猪腹泻病料36份,使用RT-PCR方法分别检测PEDV、TGEV、PDCoV和PoRV感染情况,并对部分检测结果为阳性的PEDV、TGEV、PDCoV进行S基因扩增、测序和分析,对PoRV进行VP4、VP7基因扩增、测序和分析,共获得8个PESV S基因,1个TGEV S基因,1个PDCoV S基因,9个PoRV VP4及VP7基因序列。基于PEDV S基因的序列分析结果表明,2022年江苏PEDV流行毒株与我国2010年以来流行的GⅡ-b亚群变异株的序列同源性为97.0%~99.7%,属于同一亚群,而与CV777、SD-M等早期毒株亲缘关系较远;江苏PEDV流行毒株S1蛋白区域存在氨基酸的突变、插入及缺失,不同流行毒株之间存在一定的差异。基于TGEV S基因的序列分析结果表明,江苏TGEV流行毒株与中国毒株WH-1同源性最高,为99.9%;其S基因仅发生了3个氨基酸突变。基于PDCoV S基因的序列分析结果表明,江苏PDCoV流行毒株与CHN/HG/2017株的同源性最高,为98.2%,与来自中国、越南、老挝、泰国等东南亚国家的毒株亲缘关系较近,属于同一群;江苏PDCoV流行毒株的S1蛋白区域发生6个氨基酸的突变。基于PoRV VP4及VP7基因的序列分析结果表明,江苏PoRV流行毒株属于A群轮状病毒,具有G3[P13]型、G3[P23]型、G4[P13]型、G4[P23]型、G9[P13]型、G9[P23]和G11[P13]型7个不同的基因组合型。本研究结果为掌握江苏地区PEDV、TGEV、PDCoV、PoRV的流行情况、遗传进化趋势及其防控提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪δ冠状病毒 猪轮状病毒 S基因 VP4基因 VP7基因
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北京市猫冠状病毒流行特征及S基因遗传进化分析
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作者 吴迪 李志军 +3 位作者 苗东影 李刚 陈会玲 杜鹃 《中国动物检疫》 CAS 2024年第10期23-29,共7页
为了解北京市猫冠状病毒(feline coronavirus,FCoV)的生物型、血清型、遗传进化情况及其流行特征,对2023年在北京市动物医院收集的24份疑似FCoV感染猫的粪便或肛拭子样品进行RT-PCR检测、S基因扩增测序分析,并依据检测结果分析了来源猫... 为了解北京市猫冠状病毒(feline coronavirus,FCoV)的生物型、血清型、遗传进化情况及其流行特征,对2023年在北京市动物医院收集的24份疑似FCoV感染猫的粪便或肛拭子样品进行RT-PCR检测、S基因扩增测序分析,并依据检测结果分析了来源猫年龄和采样季分布特征。结果显示:24份疑似样品中,检出11份FCoV阳性,其S基因核苷酸序列同源性为86.7%~98.5%,与日本、德国分离株同源性较高;11份阳性样品的血清型均为FCoV-I型,生物型均为猫肠道冠状病毒(FECV);猫只年龄与FCoV感染率呈负相关,季节变化与FCoV感染率不相关。结果表明:北京市2023年猫只感染的FCoV毒株属于同一血清型与生物型,且幼猫更易感染,一年四季皆可流行,同时提示毒株可能由入境宠物猫传入。因此在加强FCoV感染防控的同时,应重视出入境宠物猫FCoV的检测。 展开更多
关键词 猫冠状病毒 S基因 生物型 血清型 同源性 流行特征
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To Analyze the Sensitivity of RT-PCR Assays Employing S Gene Target Failure with Whole Genome Sequencing Data during Third Wave by SARS-CoV-2 Omicron Variant
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作者 Pooja Patel Yogita Mistry +1 位作者 Monika Patel Summaiya Mullan 《Advances in Microbiology》 CAS 2024年第5期247-255,共9页
Introduction: Omicron is a highly divergent variant of concern (VOCs) of a severe acute respiratory syndrome SARS-CoV-2. It carries a high number of mutations in its spike protein hence;it is more transmissible in the... Introduction: Omicron is a highly divergent variant of concern (VOCs) of a severe acute respiratory syndrome SARS-CoV-2. It carries a high number of mutations in its spike protein hence;it is more transmissible in the community by immune evasion mechanisms. Due to mutation within S gene, most Omicron variants have reported S gene target failure (SGTF) with some commercially available PCR kits. Such diagnostic features can be used as markers to screen Omicron. However, Whole Genome Sequencing (WGS) is the only gold standard approach to confirm novel microorganisms at genetically level as similar mutations can also be found in other variants that are circulating at low frequencies worldwide. This Retrospective study is aimed to assess RT-PCR sensitivity in the detection of S gene target failure in comparison with whole genome sequencing to detect variants of Omicron. Methods: We have analysed retrospective data of SARS-CoV-2 positive RT-PCR samples for S gene target failure (SGTF) with TaqPath COVID-19 RT-PCR Combo Kit (ThermoFisher) and combined with sequencing technologies to study the emerged pattern of SARS-CoV-2 variants during third wave at the tertiary care centre, Surat. Results: From the first day of December 2021 till the end of February 2022, a total of 321,803 diagnostic RT-PCR tests for SARS-CoV-2 were performed, of which 20,566 positive cases were reported at our tertiary care centre with an average cumulative positivity of 6.39% over a period of three months. In the month of December 21 samples characterized by the SGTF (70/129) were suggestive of being infected by the Omicron variant and identified as Omicron (B.1.1.529 lineage) when sequence. In the month of January, we analysed a subset of samples (n = 618) with SGTF (24%) and without SGTF (76%) with Ct values Conclusions: During the COVID-19 pandemic, it took almost more than 15 days to diagnose infection and identify pathogen by sequencing technology. In contrast to that molecular assay provided quick identification with the help of SGTF phenomenon within 5 hours of duration. This strategy helps scientists and health policymakers for the quick isolation and identification of clusters. That ultimately results in a decreased transmission of pathogen among the community. 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 S Gene Target Failure Whole Genome Sequencing Omicron
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PROS1基因新同义突变致以脑梗死起病的遗传性蛋白S缺陷症家系调查
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作者 赵瑾莹 潘蓉蓉 +4 位作者 金慧慧 刘春梅 黄婷 张颖冬 田有勇 《临床神经病学杂志》 CAS 2024年第3期184-187,共4页
目的调查一个以急性脑梗死起病的遗传性蛋白S缺陷症家系的临床特征,分析其PROS1基因的突变特点。方法收集先证者及其直系亲属的临床资料,采集血标本,检测蛋白S活性水平并对PROS1基因进行测序。结果该家系直系亲属三代8人,其中3名确诊为... 目的调查一个以急性脑梗死起病的遗传性蛋白S缺陷症家系的临床特征,分析其PROS1基因的突变特点。方法收集先证者及其直系亲属的临床资料,采集血标本,检测蛋白S活性水平并对PROS1基因进行测序。结果该家系直系亲属三代8人,其中3名确诊为遗传性蛋白S缺陷症,先证者及其兄均表现为急性脑梗死,余家系成员尚未发生血栓事件。检测蛋白S活性:先证者、先证者之兄、先证者母亲分别为16.8%、38.0%、31.8%,父亲正常。基因分析发现先证者、先证者之兄、先证者母亲PROS1基因第11外显子均存在c.1323G>A杂合变异,父亲为野生型。结论本家系为一个新发现的由PROS1基因c.1323G>A同义突变引起的遗传性蛋白S缺陷症家系;此突变可能导致青年缺血性脑卒中的发生。 展开更多
关键词 青年缺血性脑卒中 PROS1基因 同义突变 遗传性蛋白S缺陷症
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铜死亡相关基因DLAT在胰腺癌中的表达及临床意义
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作者 张钦泉 匡鹏 +4 位作者 董毅 王理承 毛连春 李中虎 金炜东 《联勤军事医学》 CAS 2024年第2期105-112,共8页
目的 探讨铜死亡相关基因在胰腺癌中发挥的作用,构建预后模型,筛选并验证铜死亡相关基因在胰腺癌中发挥的重要作用。方法 利用生物学数据库分析胰腺癌中铜死亡相关基因的表达水平、预后分析并构建预后模型。结果 以二氢硫辛酰胺S-乙酰... 目的 探讨铜死亡相关基因在胰腺癌中发挥的作用,构建预后模型,筛选并验证铜死亡相关基因在胰腺癌中发挥的重要作用。方法 利用生物学数据库分析胰腺癌中铜死亡相关基因的表达水平、预后分析并构建预后模型。结果 以二氢硫辛酰胺S-乙酰转移酶(dihydrolipoamide S-acetyltransferase, DLAT)为代表的铜死亡相关基因在胰腺癌中高表达(P均<0.05)。以铜死亡相关基因构建预后模型,与低风险评分胰腺癌患者相比,高风险评分胰腺癌患者预后较差(P<0.05)。公共数据库及临床数据的免疫组织化学法验证了DLAT在胰腺癌中高表达不利于胰腺癌患者预后,其表达水平可作为胰腺癌患者病情进展的独立危险因素(P均<0.05)。结论 铜死亡相关基因可以作为胰腺癌患者潜在的预后预测因子。以DLAT为代表的铜死亡相关基因可能为胰腺癌治疗提供新的途径。 展开更多
关键词 铜死亡相关基因 二氢硫辛酰胺S-乙酰转移酶 胰腺癌 免疫组织化学 预后
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谷胱甘肽转移酶M1基因多态性与亚洲人群宫颈癌易感性的meta分析
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作者 周青 刘帅妹 +6 位作者 林宁 张瑞金 李孟兰 封婕 黄丽丽 吴玉璘 石慧 《中国计划生育学杂志》 2024年第8期1720-1726,共7页
目的:探讨谷胱甘肽转移酶M1(GSTM1)基因多态性与亚洲人群宫颈癌易感性的关系。方法:检索中国知网、万方、PubMed等中英文数据库,收集关于GSTM1基因多态性与亚洲人群宫颈癌易感性相关研究,检索时间为建库至2024年5月,对纳入的研究,运用St... 目的:探讨谷胱甘肽转移酶M1(GSTM1)基因多态性与亚洲人群宫颈癌易感性的关系。方法:检索中国知网、万方、PubMed等中英文数据库,收集关于GSTM1基因多态性与亚洲人群宫颈癌易感性相关研究,检索时间为建库至2024年5月,对纳入的研究,运用Stata11.0软件计算OR值和95%CI,评价其相关性。结果:共纳入19项研究,宫颈癌病例组2324例和对照组2611例,meta分析结果显示亚洲人群中GSTM1纯合缺失型与宫颈癌易感性存在明显正相关(OR=1.74,95%CI 1.41~2.14),亚组分析发现,东亚人群(OR=1.54,95%CI 1.21~1.97)、中亚人群(OR=8.32,95%CI 2.84~24.36)、南亚人群(OR=2.11,95%CI 1.48~3.02)、中国人群(OR=2.03,95%CI 1.46~2.82)、印度人群(OR=1.89,95%CI 1.39~2.57)、哈萨克斯坦人群(OR=8.32,95%CI 2.84~24.36)和巴基斯坦人群(OR=5.52,95%CI 2.34~13.07)的GSTM1纯合缺失型均与宫颈癌易感性存在显著关联。结论:GSTM1纯合缺失型可能会增加亚洲人群宫颈癌发生风险。 展开更多
关键词 宫颈癌 亚洲女性 谷胱甘肽转移酶M1 基因多态性 META分析
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山新杨谷胱甘肽S-转移酶编码基因PdbGSTU功能分析
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作者 黄颖 王晓东 遇文婧 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期68-78,共11页
【目的】本研究旨在通过分析山新杨谷胱甘肽S-转移酶编码基因PdbGSTU的抗病功能,为林木抗性育种提供基因资源与抗性种质。【方法】克隆PdbGSTU基因序列并对其进行生物信息学分析,利用荧光定量PCR技术分析该基因的组织特异性表达及植物... 【目的】本研究旨在通过分析山新杨谷胱甘肽S-转移酶编码基因PdbGSTU的抗病功能,为林木抗性育种提供基因资源与抗性种质。【方法】克隆PdbGSTU基因序列并对其进行生物信息学分析,利用荧光定量PCR技术分析该基因的组织特异性表达及植物激素诱导下的表达模式。利用转基因技术获得山新杨的过/抑制表达PdbGSTU基因植株,通过观察比较接种细链格孢菌后各植株叶片的表型和病斑面积,验证该基因的抗病功能;同时测定接种病原菌前后,野生型和转基因山新杨植株内过氧化氢含量和抗氧化相关酶活性。【结果】(1)山新杨PdbGSTU基因开放阅读框全长753 bp,编码氨基酸250个,对应的蛋白质相对分子质量为29.01 kDa,为稳定的酸性亲水蛋白,定位于细胞质中;系统进化分析显示,PdbGSTU蛋白与银中杨的蛋白KAJ6918316亲缘关系最近;启动子序列分析显示,PdbGSTU基因启动子序列含多种响应植物激素和逆境胁迫的顺式作用元件。(2)RT-qPCR结果显示,PdbGSTU基因在山新杨顶芽表达量最高,在其根部表达量最低,且该基因受茉莉酸甲酯、水杨酸和1-氨基环丙基-1-羧酸3种植物激素诱导,均上调表达。(3)接种细链格孢菌后,野生型和抑制表达PdbGSTU基因植株的叶片上,病斑面积分别为6.42和16.46 mm2,而过表达PdbGSTU基因的植株叶片上,少部分接种点出现明显病斑,其余接种部分仅出现褪色。【结论】PdbGSTU正向参与山新杨对细链格孢菌侵染的抵御过程,可通过清除活性氧提高杨树对病原菌的抗性。 展开更多
关键词 基因表达 山新杨 谷胱甘肽S-转移酶 细链格孢菌 抗病功能
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谷胱甘肽S转移酶P1和X线修复交错互补基因1基因多态性与前列腺癌化疗敏感性及预后关系研究
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作者 薛松 张祥 +2 位作者 潘鑫 易晓明 商学军 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2024年第9期803-808,共6页
目的:探究前列腺癌患者谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和X线修复交错互补基因1(XRCC1)基因多态性与化疗敏感性及预后的关系。方法:选取2018年5月至2021年5月行雄激素剥夺治疗+双药化疗的前列腺癌患者103例,收集患者临床资料,采用PCR-PFLP方... 目的:探究前列腺癌患者谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和X线修复交错互补基因1(XRCC1)基因多态性与化疗敏感性及预后的关系。方法:选取2018年5月至2021年5月行雄激素剥夺治疗+双药化疗的前列腺癌患者103例,收集患者临床资料,采用PCR-PFLP方法对患者行基因分型,并分析其GSTP1-rs1695位点和XRCC1-rs25487位点的多态性,分析其与化疗敏感性的关系,并探究GSTP1和XRCC1基因多态性与患者3年生存率的相关性。结果:103例前列腺癌化疗患者GSTP1-rs1695位点和XRCC1-rs25487位点分布均符合Hardy-Weinberg平衡(χ2=9.794,P>0.05)。GSTP1-rs1695位点中AA基因型占比为65.05%(67/103),AG基因型占比为23.30%(24/103),GG基因型占比为11.65%(12/103);XRCC1-rs25487位点中AA基因型占比为29.13%(30/103),AG基因型占比为50.49%(52/103),GG基因型占比为20.39%(21/103)。GSTP1-rs1695 AA型化疗敏感性为35.82%,低于AG/GG型58.33%(P<0.05)。XRCC1-rs25487 AA型化疗敏感性为40.00%,AG/GG型45.21%,两者差异无统计学意义(P>0.05)。GSTP1-rs1695、XRCC1-rs25487不同表型患者3年无进展生存率之间无明显差异(P>0.05)。GSTP1-rs1695 AA型3年总生存率低于AG/GG型;XRCC1-rs25487 AA型低于AG/GG型(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,GSTP1-rs1695 AA型、XRCC1-rs25487 AA型均为前列腺癌患者化疗后3年总生存期的独立影响因素。结论:GSTP1-rs1695、XRCC1-rs25487基因多态性对前列腺癌患者化疗敏感性和预后均有一定影响,GSTP1-rs1695和XRCC1-rs25487 A等位基因突变均可导致更短的3年生存率,G等位基因突变可带来更好的化疗敏感性和生存期。 展开更多
关键词 前列腺癌 谷胱甘肽S转移酶P1 X线修复交错互补基因1 基因多态性 化疗敏感性
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表达猪流行性腹泻病毒变异株S基因重组伪狂犬病病毒的构建与鉴定 被引量:2
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作者 张传健 郭仕琦 +6 位作者 郭容利 刘晓琳 陈赛赛 王志胜 曾容愚 咼荣兵 王继春 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期51-58,共8页
为研制预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株感染的重组伪狂犬病病毒(PRV)活载体疫苗,本研究应用PRV变异株的细菌人工染色体和同源重组技术,将PEDV流行株的S基因表达盒插入PRV基因组UL40与UL41之间的非编码区,构建重组病毒rPRV-S(UL40-41)... 为研制预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株感染的重组伪狂犬病病毒(PRV)活载体疫苗,本研究应用PRV变异株的细菌人工染色体和同源重组技术,将PEDV流行株的S基因表达盒插入PRV基因组UL40与UL41之间的非编码区,构建重组病毒rPRV-S(UL40-41),该毒株还缺失了TK和gE基因。生长动力学显示该毒株在猪睾丸(ST)细胞的增殖效率与亲本毒株相似,表明S基因表达盒的插入对病毒生长性能无显著影响。重组病毒在ST细胞传至15代,PCR和测序鉴定S基因未发生碱基的丢失和变异,间接免疫荧光显示重组病毒感染鸡胚成纤维细胞后可稳定表达S蛋白。应用该毒株接种断奶仔猪,产生低水平的针对PEDV的抗体。该研究为PRV活载体疫苗的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 猪流行性腹泻病毒 重组病毒 S基因 细菌人工染色体
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