S100A2和p63蛋白在食管癌中的表达及其临床意义

目的观察S100A2和p63蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法收集40例手术切除的食管鳞状细胞癌标本,同时取40例手术切缘食管正常黏膜组织,应用免疫组化S-P法检测S100A2蛋白、p63蛋白的表达。结果S100A2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中阳性表达率(72.5%)明显低于正常食管黏膜(100.0%)(P<0.001),其表达与癌组织分化程度及有无淋巴结转移显著相关(P<0.01);p63蛋白在食管鳞状细胞癌组织中阳性表达率(52.5%)及强阳性表达率(37.5%)均明显高于正常食管黏膜(25.0%、0%)(P<0.05、P<0.001),其表达与各临床病理因素均无关(P>0.05);食管鳞状细胞癌组织中S100A2蛋白和p63蛋白的表达呈明显负相关(r=-0.474,P<0.01)。结论S100A2蛋白和p63蛋白在食管癌的发生、发展中均具有重要作用,同时两者具有协同作用,联合检测其表达情况,较单一检测更有意义。

S100A2蛋白表达与胃癌分化程度的关系研究

目的 研究胃癌中S1 0 0A2蛋白表达 ,并分析其与胃癌分化程度的关系。方法 采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶 (S -P)免疫组织化学方法检测 40例胃癌组织和正常胃黏膜组织中S1 0 0A2蛋白的表达水平。结果 胃癌中S1 0 0A2蛋白表达率为 5 2 .5 0 % ( 2 1 40 ) ,而正常胃黏膜组织S1 0 0A2蛋白表达率为 1 0 0 % ( 4 0 40 ) ,S1 0 0A2蛋白在胃癌中的表达率明显低于正常胃黏膜 (P <0 .0 5 ) ;S1 0 0A2蛋白在不同分化程度胃癌中的阳性表达率分别为 :高分化组 75 .0 0 % ,中分化组 5 3.84% ,低分化组 1 8.1 8% ,表明S1 0 0A2蛋白表达与胃癌分化程度有关。结论 S1 0 0A2基因编码的产物S1 0 0A2蛋白质在胃癌中存在表达缺失或下调 ,表明S1 0 0A2蛋白表达减少与胃癌的发生发展及分化程度有关。S1 0 0A2蛋白表达的检测 。

钙结合蛋白S100A2对Wnt/β-catenin信号途径活性的上调作用

目的研究钙结合蛋白S100A2对Wnt/β-catenin信号途径活性的影响,并探讨其可能的机制。方法原核诱导表达GST-hS100A2,经纯化后加入骨肉瘤细胞株MG63和人结肠癌细胞株HCT116的培养液中,Western blot检测细胞中β-catenin含量的变化;荧光素酶活性分析法检测S100A2对HEK293细胞中β-catenin/TCF4活性的影响;以表达GSK-3β、DVL、Axin的相应质粒分别转染HEK293细胞,GST-Pulldown/Western blot实验检测S100A2与这些蛋白质和β-catenin之间的相互作用。结果S100A2使MG63和HCT116细胞中β-catenin含量增加、β-catenin/TCF4活性增强;S100A2分别与β-catenin和GSK-3β之间存在相互作用,而与DVL和Axin之间则未发现相互作用。结论S100A2可以上调Wnt/β-catenin信号途径的活性,其机制可能涉及S100A2与β-catenin和GSK-3β之间的相互作用。

肺腺癌中S100A2蛋白的表达

目的研究S100A2蛋白在不同分化程度肺腺癌组织中的表达,阐明其与肺腺癌分化程度的关系。方法以16例正常肺组织为对照,采用免疫组织化学方法(SP法)检测45例不同分化程度肺腺癌中S100A2的蛋白表达水平。结果 S100A2在16例正常组织中不表达,在26例高分化肺腺癌组织和19例低分化肺腺癌组织中阳性表达率分别为46.2%、84.2%,肿瘤与正常组织表达差异有显著性(P<0.05),低分化组与高分化组表达差异有显著性(P<0.05)。结论 S100A2蛋白在高分化肺腺癌组织和低分化组织表达显著增加,提示S100A2可作为判断肺癌生物学行为的重要参考指标。

S100 A2基因cDNA克隆及其在肝癌细胞中的表达

目的 克隆S10 0A2cDNA、构建S10 0A2重组表达载体并在肝癌细胞QGY770 1中进行表达 .方法 应用RT-PCR和DNA重组技术构建绿色荧光蛋白 (EGFP) -S10 0A2融合蛋白表达载体 ,经脂质体导入QGY770 1细胞中进行表达 .应用荧光显微镜直接观察EGFP -S10 0A2融合蛋白的表达情况 ,G4 18筛选阳性细胞克隆 .结果 构建了带有EGFP的S10 0A2重组表达载体命名为EGFP -C2 -A2 ,并在肝癌细胞QGY770 1中获得了表达 .荧光显微镜下可见EGFP-S10 0A2融合蛋白定位于胞浆及胞核 ,而pEGFP载体对照之EGFP只定位在胞浆中 .结论 EGFP -S10 0A2融合蛋白能够在肝癌细胞QGY770 1中获得表达 ,各自在细胞中的定位互不受影响 ,推断此融合蛋白具有各自的生物学活性 .

钙结合蛋白S100A2对肝癌细胞生长增殖的抑制作用

目的 探讨钙结合蛋白S10 0A2对肝癌细胞生长增殖的抑制作用。方法 构建绿色荧光蛋白 S10 0A2融合基因的重组表达载体 ,经脂质体介导转入QGY770 1肝癌细胞中进行表达 ,应用荧光显微镜直接观察融合蛋白的表达和定位 ;通过肿瘤细胞集落形成实验 ,观察外源性S10 0A2表达对体外培养细胞增殖能力的影响 ;以流式细胞仪分析S10 0A2对肿瘤细胞增殖周期的影响 ;通过裸鼠接种实验 ,观察S10 0A2对肿瘤细胞在体内增殖能力的影响。结果 绿色荧光蛋白 S10 0A2融合蛋白表达、定位在胞浆和胞核 ,而单一的绿色荧光蛋白 (载体对照 )则只定位在胞浆中 ;细胞在液体和半固体培养基中培养的细胞集落形成率 ,实验组 (QGY770 1/A2 )明显低于载体对照组 (QGY770 1/pc)和细胞对照组 (QGY770 1) ;细胞周期分析显示 ,实验组细胞有G1和G2 期阻制 ,DNA合成量明显减少 ;实验组裸鼠体内移植瘤重量明显低于两个对照组。结论 外源性S10 0A2可抑制QGY770 1肝癌细胞在体外的集落形成和在裸鼠体内的增殖能力 ,并对细胞周期有阻滞作用。

融合蛋白GST-hS100A2对人结肠癌细胞HCT116和SW480的抑制作用

目的探讨GST-人S100A2融合蛋白(GST-hS100A2)对人结肠癌细胞HCT116和SW480的抑制作用。方法将重组质粒pGST-moluc-hS100A2和pGST-moluc转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Western blot鉴定后采用谷胱甘肽-琼脂糖4B球珠分离纯化。以制备的GST-hS100A2融合蛋白分别处理HCT116和SW480细胞,以GST处理的细胞和空白细胞作为对照,分别用MTT法检测细胞增殖活力,Hochest33258染色检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,划痕愈合法检测细胞迁移能力,Transwell小室试验检测细胞侵袭能力。结果融合蛋白GST-hS100A2能以剂量依赖和时间依赖的方式抑制HCT116和SW480细胞的增殖,并可明显促进两种细胞凋亡,阻滞HCT116细胞周期,抑制HCT116细胞迁移和两种细胞的侵袭能力。结论 GST-hS100A2对人结肠癌HCT116和SW480细胞具有一定的抑制作用,有可能成为结肠癌分子治疗的新靶标。

血清S100A2和S100A6浓度对非小细胞肺癌患者诊断价值

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清S100A2和S100A6蛋白浓度及其诊断价值。方法纳入自2018年1月至12月自贡市第一人民医院141例NSCLC患者为NSCLC组,选取同时间段的150例健康受试者为健康对照组。采用酶联免疫吸附法比较2组患者血清中S100A2和S100A6蛋白浓度,受试者工作特征曲线分析血清S100A2和S100A6蛋白浓度对NSCLC诊断价值。结果NSCLC组患者血清中S100A2蛋白浓度高于对照组(t=3.794,P<0.001),NSCLC组患者血清S100A6浓度高于对照组(t=70.320,P<0.001)。当cut-off值为13.81μg/L时,血清S100A2浓度区分NSCLC与健康对照者的受试者工作特征曲线下面积为0.696,特异度为82.0%,敏感度为59.3%;当cut-off值为10152 ng/L时,血清S100A6浓度区分NSCLC与健康对照者的受试者工作特征曲线下面积为0.738,特异度为64.0%,敏感度为61.7%。血清S100A2和S100A6浓度与患者肿瘤大小有相关性(r=0.89、0.91,P值均<0.05)。结论血清S100A2和S100A6蛋白对NSCLC具有良好的诊断效能,是潜在NSCLC分子标志物。

血清Eotaxin-1和IL-35及S100A2表达水平对溃疡性结肠炎合并Hp感染的评估价值

目的探讨血清嗜酸性粒细胞趋化因子-1(Eotaxin-1)、白细胞介素-35(IL-35)及钙结合蛋白S100A2表达水平对溃疡性结肠炎(UC)患者合并幽门螺旋杆菌(Hp)感染的评估价值。方法选取2017年2月-2020年2月辽宁省健康产业集团阜新矿总医院消化内科收治的活动期UC患者97例作为研究组,另选取非活动期UC患者50例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)、RT-PCR技术检测血清中Eotaxin-1、IL-35及S100A2 m RNA表达水平,采用14C呼气技术检测研究组患者Hp感染情况,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估对溃疡性结肠炎合并Hp感染的诊断价值。结果研究组患者血清Eotaxin-1、S100A2 mRNA水平明显高于对照组,IL-35水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。研究组患者Hp感染阳性率为50.52%(49/97),高于对照组患者Hp感染阳性率28.00%(14/50),差异有统计学意义(χ2=6.830,P=0.009)。研究组中Hp阳性患者血清中Eotaxin-1、S100A2 mRNA水平明显高于阴性患者,IL-35明显低于阴性患者,差异均有统计学意义(P<0.001)。不同程度活动期UC患者血清中Eotaxin-1、IL-35、S100A2 mRNA水平差异有统计学意义(P<0.001);重度活动期患者血清Eotaxin-1、S100A2mRNA水平明显高于中度活动期、轻度活动期,IL-35水平低于中度活动期、轻度活动期,差异均有统计学意义(P<0.001);中度活动期患者血清Eotaxin-1、S100A2 mRNA水平高于轻度活动期,IL-35水平低于轻度活动期,差异均有统计学意义(P<0.001)。Eotaxin-1、IL-35、S100A2 mRNA对诊断UC合并Hp感染的曲线下面积(AUC)分别为0.782、0.813、0.734,三者联合诊断的AUC为0.956(95%CI:0.877~0.999),均高于单项诊断,差异有统计学意义(P<0.001)。结论活动期UC患者血清Eotaxin-1、IL-35、S100A2 m RNA水平与非活动期患者具有明显差异,且与是否感染Hp相关,可作为UC患者合并Hp感染的早期诊断指标及活动期严重程度的评价标准发挥临床作用。