肺岩宁颗粒干预细胞周期G_1/S检测点调控信号抗Lewis肺癌细胞增殖的研究

目的观察肺岩宁颗粒对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长、肿瘤细胞周期分布,以及G1/S检测点调控信号RB-E2F1生物轴的影响。方法采用C57BL/6小鼠,造模并随机分为6组:模型组、顺铂组、肺岩宁煎剂组(煎剂组)、肺岩宁颗粒低剂量组(低剂量组,0·3g)、肺岩宁颗粒中剂量组(中剂量组,0·6g)、肺岩宁颗粒高剂量组(高剂量组,1·2g)。造模后顺铂组1、3、5天腹腔注射顺铂0·1mg,其他各组分别灌胃给药14天,观察各组治疗后抑瘤率、瘤重、体重,流式细胞术检测细胞周期时相分布,RT-PCR测定肿瘤组织视网膜母细胞瘤蛋白(RB)-腺病毒E2启动子结合转录因子(E2F1)的mRNA表达,Western blot检测RB、E2F1蛋白表达。结果各用药组瘤重低于模型组(P<0·05,P<0·01),中剂量组体重明显高于模型组和顺铂组(P<0·05,P<0·01)。流式细胞术发现中剂量组的G0/G1比例较模型组、顺铂组和煎剂组显著增多(P<0·01),癌细胞增殖指数明显降低(P<0·01,P<0·05)。RT-PCR显示中剂量组E2F1mRNA水平明显低于模型组、顺铂组和煎剂组(P<0·01);中剂量组RBmRNA表达明显高于模型组、顺铂组和煎剂组(P<0·01)。Western blot分析显示中剂量组较模型组和顺铂组明显抑制E2F1蛋白表达(P<0·05),并较模型组、顺铂组和煎剂组明显增加RB蛋白表达(P<0·05)。结论肺岩宁颗粒抑制Lewis肺癌肿瘤生长与干预细胞周期时相分布有关,能使癌细胞较多的阻滞在细胞周期G0/G1期,通过抑制E2F1,增强RB表达,从而干预细胞周期G1/S检测点信号通路中RB-E2F1生物轴实现抗肺癌增殖。

bFGF单抗协同替吉奥抑制肺癌Lewis细胞的增殖及移植瘤血管新生

目的:探讨碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)单抗与替吉奥(gimeracil and oteracil porassi-um,又称S-1)联合应用体内外抑制小鼠Lewis肺癌细胞增殖、移植瘤生长及转移、肿瘤血管新生的协同作用。方法:CCK-8法检测bFGF单抗及S-1对Lewis细胞增殖的抑制作用。建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌自发转移瘤模型,32只小鼠随机分成生理盐水(NS)组、bFGF单抗组、S-1组和bFGF单抗+S-1组,每组8只;测量瘤体,绘制生长曲线,称瘤质量并计算抑瘤率;计数各组肺表面转移瘤结节;CD31标记血管内皮细胞,计数转移瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:bFGF单抗、S-1剂量依赖性抑制Lewis细胞增殖(P<0.05),联合用药组抑制率明显高于单药组(P<0.05或P<0.01)。bFGF单抗组、S-1组以及bFGF单抗+S-1组对Lewis转移瘤的抑瘤率分别为37.8%、47.7%、65.9%,联合组抑瘤率明显高于单药组(P<0.05或P<0.01)。联合组肺表面转移结节、微血管密度明显低于单药组(2.71±0.76vs6.57±0.98、4.71±0.76;21.6±2.9vs33.4±4.9、41.9±6.3;P<0.05或P<0.01)。结论:bFGF单抗联合S-1对Lewis肺癌移植瘤具有协同抑制作用,其机制与抑制细胞增殖及血管新生有关。

蚕蛹虫草的抗肿瘤及激素样作用

蚕蛹虫草对小鼠Ｓ１８０有明显抑制作用，延长荷瘤小鼠寿命；可明显抑制小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌原发灶生长和自发性肺部转移。蚕蛹虫草明显升高正常大鼠血浆皮质醇及睾酮含量，促进正常及去势大鼠性器官的增殖，具有雄激素样作用。

角燕制剂的抗肿瘤作用研究

采用盐溶液抽提 ,有机溶剂分级沉淀 ,分子筛层析等步骤 ,从海洋鱼类——角燕的有效部位中制备得到角燕制剂。选用 Hela细胞为研究对象 ,人肺成纤维细胞 HLF为正常对照细胞 ,采用 MTT测定法测定了不同剂量的角燕抗肿瘤制剂对上述两种细胞生长的抑制效应 ,结果显示角燕制剂显著抑制肿瘤细胞的生长 ,并有明显的剂量依赖关系 ;而对人肺成纤维细胞的生长无明显的影响。采用台盼蓝染色测定了角燕制剂对Hela细胞和 HL F细胞的细胞毒作用 ,结果显示角燕制剂对 Hela细胞产生明显的细胞毒作用 ,对 HL F细胞无明显影响。提示角燕制剂在细胞水平上能够抑制肿瘤的生长。选用小鼠 lewis肺癌模型、S180 肉瘤模型 ,评价角燕制剂的抗肿瘤作用 ,结果显示角燕制剂在剂量 0 .2 5～ 1.0 0 mg· g-1的范围内对小鼠 Lewis肺癌、S180 肉瘤的生长均具有显著的抑制作用 ,且呈较好的剂量依赖关系 ,在剂量为 1.0 0 mg· g-1时 ,对小鼠 L ewis肺癌、S180 肉瘤的抑瘤率为 5 9.11%、5 4 .67%。

内折香茶菜素和内折香茶菜素D抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究内折香茶菜素和内折香茶菜素 D(以下简称内折素和内折素 D)对动物移植性肿瘤的作用以及对机体免疫状态的影响。方法 以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌 (ECA)、肉瘤 180 (S1 80 )、肝癌 (HCA)和 L ewis肺癌为模型 ,以 5 - Fu为阳性对照组 ,以生理盐水为阴性对照组 ,观察 12 .5和 2 5 m g/ kg内折素和内折素 D的抗肿瘤作用 ,并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折素和内折素 D对机体免疫状态的影响。结果 内折素和内折素 D与阴性对照组相比在体外对 ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力 ,在体内对 S1 80 实体型和腹水型肿瘤 ,HCA实体型和腹水型肿瘤以及 L ewis肺癌实体型肿瘤均有较强的抑制作用 ,对机体免疫状态无明显影响。结论 内折素和内折素 D具有较强的抗肿瘤作用 。

松节藻抗肿瘤活性

目的对松节藻中得到的10种化合物进行体外细胞毒活性筛选,并对其醇提取物进行体内抑瘤活性研究。方法采用碘酰罗丹明B(SRB)蛋白染色法和MTT法对10种化合物进行细胞毒活性筛选;用S180荷瘤小鼠模型进行松节藻醇提取物的体内抗肿瘤活性评价,分别测定半数致死量(LD50)、抑瘤率、胸腺指数、脾指数、脾淋巴细胞增殖活性(MTT法)、免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和脾淋巴细胞凋亡率等指标,应用软件SPSS进行数据处理。结果体外活性筛选实验表明4,4′-亚甲基-二(5,6-二溴-1,2-二苯酚)()、3-溴-4-[2,3-二溴-4,5-二羟基苯基]甲基-5-(甲氧基甲基)-1,2-二苯酚()、3-溴-4,5-二(2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基)-1,2-二苯酚()、二(2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基)醚()和3-溴-4-[2,3-二溴-4,5-二羟基苯基]甲基-5-(乙氧基)-1,2-二苯酚()5种单体化合物对人肺癌细胞株A-549具有一定的细胞毒活性。松节藻醇提取物中剂量(1g/kg)组表现出较高的抑瘤率,但中剂量组胸腺指数及脾指数均有所升高;松节藻醇提取物各组均可较好抑制脾淋巴细胞增殖;各组免疫球蛋白IgA和IgG无明显变化,而松节藻醇提取物中剂量组IgM含量有明显升高;中、高剂量组脾淋巴细胞凋亡率显著升高。结论从松节藻中提取的部分化合物表现出一定的细胞毒活性;其醇提取物对肿瘤细胞有一定的抑制作用,并可增强机体免疫功能。

内折香茶菜素D抗肿瘤作用的研究

目的:研究内折香茶菜素D(以下简称内折素D)对动物移植性肿瘤的作用以及对机体免疫状态的影响。方法:以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌(ECA),肉瘤S180,肝癌(HCA),Lewis肺癌为模型,以5_Fu为阳性对照组,以生理盐水为阴性对照组,观察12.5 mg/kg和25 mg/kg内折素D的抗肿瘤作用,并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折素D对机体免疫状态的影响。结果:内折素D与阴性对照组相比在体外对ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力,在体内对S180实体型和腹水型肿瘤,HCA实体型和腹水型肿瘤以及Lewis肺癌实体型肿瘤均有较强的抑制作用,与阳性对照组相比,对机体免疫状态无明显影响。结论:内折素D具有较强的抗肿瘤作用,且对机体免疫状态无明显影响。

脑瘤克胶囊抑癌抗转移实验研究

目的探讨脑瘤克胶囊对小鼠移植性肿瘤生长及转移的影响。方法采用昆明种小鼠复制肝癌H22腹水转实体瘤模型,ICR小鼠复制肉瘤S180模型,观察脑瘤克对小鼠移植性肿瘤的生长的影响;采用C57BL/6小鼠复制Lewis肺癌模型,观察脑瘤克对其自发性肺转移的抑制作用。结果脑瘤克各剂量组能明显抑制肝癌H22腹水转实体瘤瘤体的生长,与对照组比较均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);其对肉瘤S180瘤体生长有明显抑制作用,与对照组比较有统计学意义(P<0.01,P<0.05);脑瘤克各组可明显抑制肺转移灶数目,与模型对照组比较有统计学意义(P<0.01)。结论脑瘤克胶囊对肝癌H22腹水转实体瘤、肉瘤S180有一定的抑制作用,能显著抑制Lewis肺癌的自发性肺转移灶数目。

紫红参提取物抗肿瘤作用的实验研究

目的探讨紫红参提取物的抗肿瘤作用。方法以小鼠S180肉瘤、肝癌HepA22、Lewis肺癌实体瘤模型考察紫红参提取物对小鼠整体抗肿瘤作用。结果紫红参提取物在体内对小鼠S180肉瘤、肝癌HepA22、Lewis肺癌均有明显的抑制作用。结论紫红参提取物在体内通过对小鼠S180肉瘤、肝癌HepA22、Lewis肺癌的明显抑制作用,达到抗肿瘤的目的,其抗肿瘤活性可能与其所含有的Rh2、Rg3有关。

中肺合剂对S180肉瘤、Lewis肺癌荷瘤小鼠抑瘤作用实验研究

[目的]探讨中肺合剂对S180肉瘤、Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并初步探索其机制。[方法]采用S180肉瘤、Lewis肺癌移植瘤小鼠模型,分荷瘤阴性对照组、低、中、高剂量中肺合剂组和CTX阳性对照组,观察中肺合剂对两种荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;运用EnVision免疫组化染色法观察中肺合剂对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织cyclinD1周期蛋白表达的影响。[结果]中肺合剂低、中、高剂量组和CTX组对移植性荷S180小鼠的抑瘤率分别为16.48%、29.73%、23.51%、41.87%;与阴性对照组相比,中肺合剂低、中、高剂量组和CTX组瘤重均有显著性差异(P<0.05)。中肺合剂低、中、高剂量组和CTX组对移植性荷Lewis肺癌小鼠的抑制率分别为22.33%、39.02%、25.48%、64.16%;与阴性对照组相比,低剂量组和高剂量组瘤重均有显著性差异(P<0.05),中剂量组和CTX化疗组瘤重均有非常显著性差异(P<0.01)。中肺合剂能下调Lewis肺癌小鼠肿瘤组织cyclinD1蛋白的表达水平,中、高剂量组阳性表达率与阴性对照组相比,有显著性差异(P<0.05)。[结论]中肺合剂对S180和Lewis荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,量-效关系呈抛物线型,其抑瘤作用可能与下调肿瘤组织cyclinD1蛋白表达水平有关。

拟缺香茶菜水提物抗肿瘤作用的研究

为了研究拟缺香茶菜水提物（以下简称拟水）对动物移植性肿瘤和对机体免疫功能的影响，本实验采用动物移植性肿瘤艾氏腹水癌（EAC）、肉瘤180（S180）、肝癌（HCA）、lewis肺癌为模型，以5-氟尿嘧啶（5-Fu）为阳性对照，以生理盐水（N.S）为阴性对照，观察拟水（5g／kg）的抗肿瘤作用；并通过小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验，观察其对机体免疫状态的影响。与阴性对照组相比，拟水在体外对EAC肿瘤细胞有较强的杀伤力，在体内除对实体型S180（抑瘤率38．83％）、HCA（抑瘤率32．03％）、Lewis肺癌（抑瘤率30．97％）有些作用外，对其他肿瘤作用不明显，与对照组相比，对机体免疫状态无明显影响。本实验得出拟水对腹水型肿瘤作用较弱，对实体型肿瘤有一定作用，且对机体免疫状态无明显影响。

有机锡化合物对S-180和胃癌细胞的影响

有机锡化合物(Et_2SnCl_2phen)是类似于顺铂结构的新型抗癌物质。实验结果表明,Et_2SnCl_2phen对S-180细胞生长有明显的抑制作用,阻止G_2+M→G_1期的进行,造成G_2+M期细胞堆集。Et_2SnCl_2phen与胃癌作用后,扫描电镜观察表明,粘着在裸露的玻璃表面的癌细胞变为球形,膜皱襞,微绒毛减少。可使S-180和人胃癌细胞的DNA相对含量明显减少。

中药复方JHL免疫抑制作用的实验研究

目的 :探讨中药复方JHL的免疫抑制作用。方法 :以动物移植肿瘤造模的实验方法 ,观察JHL对S180 及Lewis肺癌模型动物的免疫抑制作用。结果 :对S180 有一定的抑制作用 ,对Lewis肺癌抑制作用无显著差异。使荷瘤小鼠胸腺明显萎缩 ;抑制其NK细胞活性 ;明显增强荷S180 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能。而对Lewis肺癌仅 5g kg剂量可增强其腹腔巨噬细胞吞噬功能。 10g kg、2 0g kg给药组能提高荷S180 小鼠脾细胞对ConA反应性 ,而 5g kg组作用相反 ;5g kg、10g kg降低Lewis肺癌小鼠脾细胞对ConA反应性。对荷瘤小鼠血清溶血素抗体的含量及IL 2水平作用不显著。与环磷酰胺合用 ,未见加强其作用。结论 :JHL具有良好的免疫抑制作用 ,是一种颇有希望的免疫抑制剂 ,对S180 有一定抑制作用。

人和小鼠抑癌因子作用专一性的研究

从肺癌病人胸水和小鼠Hepatoma腹水中提取抑癌因子,分别作用于人羊膜上皮细胞、人喉上皮癌细胞、小鼠Hepatoma细胞、小鼠Sarcoma180细胞。实验证明,两种不同来源的抑癌因子对人羊膜上皮细胞影响极小,对三种癌细胞都有强烈的杀伤作用。这种专一杀伤癌细胞的特点可能在理论上和实用上有重要意义。

蕲蛇酶抗小鼠实验性肿瘤转移作用研究

目的 探讨从尖吻蝮蛇毒中分离得到的具有凝血酶样酶活性的蕲蛇酶抗实验性肿瘤转移作用。 方法 用尾静脉注射体外培养的黑色素瘤 B1 6和肉瘤 S-1 80细胞的小鼠肺转移模型 ,注射瘤细胞前后分别腹腔注射药物 ,2 0天后处死小鼠 ,计数肺表面转移瘤结节数。 结果 蕲蛇酶剂量在 2～ 5AU/kg ip能明显减少 B1 6在 C57BL小鼠及 S-1 80在昆明鼠的肺转移结节数 ,但对转移瘤小鼠的生命无明显的延长作用。

肺岩宁颗粒对Lewis肺癌细胞周期G1/S检测点信号通路中MDM2-P53生物轴的影响

目的:观察肺岩宁颗粒对Lewis肺癌小鼠细胞周期G1/S检测点信号通路中MDM2-P53生物轴的影响。方法:采用C57BL/6小鼠,造模并随机分为6组:模型组、顺铂组、肺岩宁煎剂组、肺岩宁颗粒低剂量组、肺岩宁颗粒中剂量组、肺岩宁颗粒高剂量组,进行相应药物干预。观察各组抑瘤率、瘤重、体质量、去瘤体质量,流式细胞术检测细胞周期时相分布,RT-PCR测定肿瘤组织MDM2、P53的mRNA表达。结果:肺岩宁颗粒中剂量组瘤重显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01),与顺铂组比较差异无统计学意义。肺岩宁颗粒中剂量组体质量与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与顺铂组比较,体质量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);肺岩宁颗粒中剂量组去瘤后体质量显著高于煎剂组、模型组、顺铂组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术发现肺岩宁颗粒中剂量组的G0/G1比例较模型组和顺铂组显著增多,癌细胞增殖指数也明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR显示肺岩宁颗粒中剂组MDM2 mRNA水平明显低于模型组、顺铂组、煎剂组,差异有统计学意义(P<0.01);肺岩宁颗粒中剂组P53 mRNA表达明显高于模型组、顺铂组和煎剂组,差异有统计学意义(P<0.01)。肺岩宁颗粒高剂量组无小鼠存活,考虑与颗粒剂溶解度有关。结论:在Lewis肺癌模型中,调节细胞周期G1/S检测点信号通路MDM2-P53生物轴可能是肺岩宁颗粒抗肺癌增殖的重要途径之一。