E_(838)对小鼠移植瘤S180放疗增敏的实验研究

目的观察E838的体内抗肿瘤活性,探讨其体内抑瘤作用的机制。方法取E838三个剂量对小鼠S180癌细胞实体瘤模型,进行体内抑瘤及合用137Csγ射线放射增效实验,测定肿瘤生长曲线、骨髓有核细胞(BMNC)数及脾脏、胸腺重量的变化,计算肿瘤生长抑制率。结果E838低、中、高三个剂量对小鼠S180的抑瘤率分别为49.52%、54.81%、53.85%,合用1Gy137Csγ射线抑瘤率分别为52.12%、59.62%、59.62%,其成瘤时间晚于对照组,肿瘤生长速度明显减慢,BMNC数均高于对照组,有统计学意义。结论E838对小鼠S180肿瘤的生长有明显的抑制作用,同时具有放射增敏效应。

红曲霉M1发酵糙米代谢产物抗S180细胞增殖效应研究

以红曲霉M1分别发酵大米和糙米,比较其代谢产物的变化;采用MTT比色法,初步研究了Monacolin K标准品、红曲糙米及红曲大米乙醇提取物对S180小鼠腹水瘤细胞的抑制作用.结果表明:在MBR乙醇提取物中,可检测到MK的酸式构型,MK含量约为MR乙醇提取物的1.3倍.经红曲霉M1发酵后,MBR中γ-氨基丁酸(GABA)质量浓度达到2.98 mg/g,是MR乙醇提取物的3.1倍.MBR中桔霉素质量浓度低于MR.MK标准品、MBR及MR乙醇提取物均对S180小鼠腹水瘤细胞具有一定的抑制作用.MK质量浓度在3～50μg/mL,三者抑制S180小鼠腹水瘤细胞增殖效应随MK质量浓度的增大而增大.在MK含量相同的条件下,MR和MBR乙醇提取物的抑制效果显著大于MK标准品(P<0.01).

松生拟层孔菌提取物对肝癌细胞H22和肉瘤细胞S180的抑制作用

目的:观察松生拟层孔菌(Fomitopsis pinicola,FP)乙醇提取物Ⅰ号(简称FP-Ⅰ)的体内外抗肿瘤活性及其可能的机制。方法:以乙醇提取FP,获取乙酸乙酯相即为FP-Ⅰ。MTT法检测FP-I体外对小鼠肝癌细胞株H22及小鼠肉瘤细胞株S180增殖的抑制作用;建立S180细胞小鼠移植瘤模型,检测各组小鼠瘤质量、抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、外周血白细胞数及淋巴细胞比例、肿瘤红细胞花环形成率,H-E染色观察FP-Ⅰ对各组S180移植瘤细胞凋亡的影响及心、肝、肾、胸腺和脾脏的组织学变化。结果:50、100、200、400μg/ml FP-Ⅰ对S180细胞增殖的抑制率分别为22.35%、32.49%、40.01%和74.01%,对H22细胞的抑制率分别为45.19%、51.10%、66.37%和82.40%。25、50、100 mg/kg FP-Ⅰ对小鼠S180移植瘤生长的抑瘤率分别为79.92%、66.18%和78.45%,CTX阳性对照(30 mg/kg)的抑瘤率为84.10%;中、高剂量FP-Ⅰ组S180荷瘤小鼠的淋巴细胞比例、胸腺指数及红细胞花环率均有一定程度的提高(P<0.05或P<0.01);各剂量组的S180移植瘤细胞均出现细胞凋亡的典型形态变化。结论:松生拟层孔菌提取物具有较强的抗肿瘤活性,其机制与其增强小鼠免疫功能和诱导肿瘤细胞凋亡有关。

瘿花甲素对S180细胞抗肿瘤活性及其细胞周期的影响

目的研究瘿花甲素（rosthorin A）体内外抗肿瘤活性及其作用机制。方法采用改良MTT法测试rosthorin A对S180细胞株增殖的影响;以荷S180肉瘤小鼠为模型,检测rosthorin A对荷瘤小鼠肉瘤重量、体重的影响;通过流式细胞术检测rosthorin A对S180细胞株和肉瘤组织细胞周期的影响。结果Rosthorin A对S180细胞株的IC50值为2.69 mg·L-1。小鼠经腹腔注射rosthorin A的LD50为83.20mg·kg-1。与溶剂对照组相比,rosthorin A在2-8 mg·kg-1内对荷S180肉瘤小鼠肿瘤生长无抑制作用（P〉0.05）,但可使S180细胞株和S180肉瘤组织细胞G0/G1期所占比例增多。结论 Rosthorin A对S180细胞株体外有较强的细胞毒活性,可通过阻滞细胞由G0/G1期进入S期抑制细胞增殖,体内在实验剂量范围内对荷S180肉瘤小鼠无抑瘤作用。

青蒿琥酯对S180实体瘤的抑制作用

目的:研究青蒿琥酯的体内抗肿瘤作用。方法:每只小鼠腋窝皮下接种1∶10S-180细胞悬液0.2ml,24h后每天给予腹腔注射不同剂量青蒿琥酯,连续10d。结果:实验表明,腹腔注射100mg/(kg·d)、150mg/(kg·d)和200mg/(kg·d)对S-180具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为19.10%、28.30%和31.80%。结论:青蒿酯在体内具有抗小鼠S180实体肿瘤作用。

超声激活血卟啉对S180瘤细胞杀伤作用的观察

光敏剂血卟啉具有在肿瘤组织易聚集的特性,受激发时发生光敏反应,产生具有细胞毒性的单线态氧,它对癌细胞的显微结构具有一定的破坏作用,本文报道采用超声激活血卟啉的方法,探讨超声激活血卟啉对S180瘤细胞形态结构的影响,为超声化学激活血卟啉抗癌研究提供形态学依据。

中医肿瘤痰浊对S180肿瘤细胞的增殖影响作用的体外实验研究

目的针对肿瘤生存环境进行研究,观察在肿瘤间质液(痰浊)影响下对体外培养的S180肿瘤细胞生长增殖的影响作用。方法取传3代S180肉瘤实体瘤,经研磨,用生理盐水与瘤重按照2:1比例稀释,以每只小鼠0.2mL右侧腋下接种混悬液,制备荷瘤鼠。至2周,肿瘤长至蚕豆大小。取瘤、研磨、离心、过滤,取不含肿瘤细胞的肿瘤间质液(痰浊)、间质液(痰浊)以3种不同质量浓度各20μL,对照组用生理盐水20μL,观察对S180肿瘤细胞的生长影响;MTT法观察肿瘤细胞增殖情况。结果提取的肿瘤间质液中不含肿瘤细胞,不同时间各组OD值差异有统计学意义,在时间上存在质量浓度递增关系;S180肿瘤细胞的质量浓度与所加入的肿瘤间质液质量浓度存在依赖性。连续培养4d间质液组对S180肿瘤细胞可见明显增殖作用,高质量浓度组最明显。结论肿瘤间质液(痰浊)对体外培养S180肿瘤有生长和增殖有促进作用,且成质量浓度依赖性。

^(125)Ⅰ粒子植入照射对纤维肉瘤S180瘤株的治疗作用及其机制

目的探讨125Ⅰ粒子植入内照射治疗对纤维肉瘤S180瘤株的疗效及其治疗机制。方法本试验选用纤维肉瘤细胞S180株,通过36只雄性昆明种小鼠,建立纤维肉瘤动物模型,随即分成3组:对照组、外放疗组、125Ⅰ粒子内放疗组,每组12只小鼠。外放疗组采用直线加速器照射200cGy/次,剂量率为210cGy/分,1次/d,共3次。125Ⅰ粒子内放疗组通过特制长穿刺针将125Ⅰ粒子插入小鼠瘤体内,其中6只小鼠植入1个粒子,另外6只小鼠植入2个粒子。外放疗组照射后6、30、54h取材,内放疗组于粒子植入后4、8d取材,瘤体标本用甲醛固定,用原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞,测定凋亡指数(AI),用免疫组化方法检测p53蛋白。结果(1)对照组未经治疗,也可发生自发性凋亡,但凋亡出现时间较晚,凋亡指数较小。(2)外放疗可以诱导细胞凋亡,且随着时间推移,凋亡指数有所增加。(3)125Ⅰ粒子植入内照射治疗可以诱导S180纤维肉瘤细胞凋亡,凋亡指数达到峰值的时间在4d左右,且随着植入粒子的增多,照射剂量的增加,细胞凋亡指数也随着增加。2个粒子内照射组与1个粒子内照射组比较,4、8dP均<0.05。(4)p53免疫组阴性。结论(1)S180瘤株对放疗敏感性较差,其放疗敏感性与突变型p53状态无关。(2)125Ⅰ粒子植入内照射和外放疗一样,可诱导纤维肉瘤S180瘤株细胞凋亡,而且随着植入粒子的增多,凋亡指数也随之增加,有显著杀伤作用,其诱导细胞凋亡机制与突变性p53基因状态无关。(3)125Ⅰ粒子植入照射是治疗肿瘤的一种有效方法。

吴茱萸碱对S180荷瘤小鼠抑瘤作用及血常规的影响

目的研究吴茱萸碱对小鼠肉瘤S180细胞肿瘤模型生长的抑制作用及对外周血常规的影响。方法小鼠左后肢皮下接种S180。接种后将小鼠按体重随机分为3组:模型组(0.5%羧甲基纤维素钠,剂量10 ml/kg)、阳性对照组(给予环磷酰胺,剂量50 mg/kg)、吴茱萸碱组(给予吴茱萸碱,剂量50 mg/kg)。每组小鼠10只。给药结束后,观察抑瘤率,检测血常规。结果吴茱萸碱对荷瘤小鼠的肿瘤生长具有较明显的抑制作用,50 mg/kg吴茱萸碱可使抑瘤率达到43.6%左右。吴茱萸碱(剂量50 mg/kg)能升高S180荷瘤小鼠外周血的白细胞(P<0.05),红细胞和血小板的影响不大。结论吴茱萸碱对小鼠在体肿瘤S180具有一定的抑制作用,吴茱萸碱作为抗肿瘤药有较大的开发潜力;吴茱萸碱能升高S180荷瘤小鼠外周血的白细胞数量,可能是其抗肿瘤的作用机制之一。

酶育牛黄对肉瘤S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及机制

目的观察酶育牛黄(CBCG)对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其抑瘤的分子机制。方法取昆明种小鼠50只,建立肉瘤S180荷瘤模型,随机分为5组,各10只。CBCG高、中、低剂量组分别给予2、1、0.5 g/kg的CBCG灌胃,NCB组给予1 g/kg的天然牛黄灌胃,模型组给予0.1 g/L淀粉溶液灌胃。连续给药10 d后,处死小鼠剥取肿瘤,称重计算除模型组外各组小鼠抑瘤率。提取各组肿瘤组织蛋白,用Western blot法检测PI3K/AKT通路的PTEN、AKT、P-AKT(Thr308)、P-AKT(Ser473)及细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达量。结果随着CBCG剂量增加,抑瘤率逐渐增高(P均<0.05)。NCB组抑瘤率与CBCG高剂量组抑瘤率比较差异无统计学意义。与模型组相比,CBCG高、中、低剂量组PTEN、BAX表达增加,P-AKT(Thr308)/AKT、P-AKT(Ser473)/AKT值及Bcl-2表达降低(P均<0.05)。结论 CBCG在体内具有抑制肉瘤生长的作用,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT通路从而促进细胞凋亡有关。

扶正固本颗粒联合顺铂对S180荷瘤小鼠T细胞免疫功能调节作用的研究

目的研究扶正固本颗粒联合顺铂对荷瘤小鼠体内抗肿瘤治疗及T细胞免疫调节的影响。方法选取昆明种小鼠120只,雌雄各半,随机分为6组,每组20只,建立小鼠S180腹腔积液瘤模型。空白组,无任何处理;模型组:等体积蒸馏水灌胃;化疗组:顺铂注射液(1 mg/kg)腹腔注射;低、中、高剂量组:顺铂注射液(1 mg/kg)腹腔注射联合扶正固本颗粒(5.625、11.250、22.500 g/kg)灌胃给药,每日给药1次,共10天,观察小鼠一般情况,记录体重变化,计算抑瘤率、脏器指数,流式细胞仪检测小鼠外周血中CD4+、CD8+及T淋巴细胞亚群水平。结果化疗组和低、中、高剂量组的抑瘤率分别为65.5%、43.2%、44.0%、57.6%。与化疗组比较,低、中、高剂量组小鼠体重与血液中Th1/Th2水平均提高;中、高剂量组小鼠胸腺指数和血液中CD4+、Th1、Th17水平均提高,CD8+水平降低;高剂量组小鼠血液中Th2、Treg水平下降,Th17/Treg水平提高,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论顺铂联合高剂量扶正固本颗粒治疗较单独化疗能增强荷瘤小鼠T细胞免疫。

软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠免疫功能的初步研究

目的:研究软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠的免疫功能及灭活S180细胞对小鼠免疫功能的影响,分析其免疫机制。方法:用MTT法测定软骨多糖治愈的S180腹水瘤小鼠的血清、脾细胞及胸腺细胞对S180细胞和MCF-7乳腺癌细胞的生长影响,并以灭活的S180细胞对健康小鼠免疫,观察其对小鼠免疫功能的影响。结果:软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠的血清、脾细胞及胸腺细胞对肿瘤生长均有一定抑制效果。其中在不含胎牛血清的RPMI1640培养基培养下,治愈小鼠10%的血清对S180细胞和MCF-7乳腺癌细胞的抑制率分别为64.09%、73.48%,而其20%血清对两种肿瘤细胞的抑制率则分别为88.70%、96.80%。结论:软骨多糖治愈的S180荷瘤小鼠对肿瘤有一定的免疫能力。

热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制

目的探讨热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制。方法40只昆明小鼠,接种S180肿瘤细胞株后用加热进行实验干预,标本于实验后6、2、54h取材,原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,流式细胞仪测定细胞周期分布,RT-PCR检测bcl-2基因的mRNA表达。结果热疗对纤维肉瘤有显著的治疗作用,可以诱导纤维肉瘤S180株细胞凋亡,改变细胞周期分布,使发生G1期阻滞,下调Bcl-2基因。结论热疗可以诱导纤维肉瘤S180株细胞凋亡,改变细胞周期分布,使发生G1期阻滞,下调bcl-2基因,为进一步的基因配合热放疗治疗肿瘤和选择肿瘤放化疗结合时机和化疗药物提供了理论基础。

热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制

目的探讨热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制。方法实验用40只昆明小鼠,接种S180肿瘤细胞株后用加热进行实验干预,标本于实验后6、20、54h取材,原位末断标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,流式细胞仪测定细胞周期分布,RT-PCR检测Bcl-2基因的mRNA表达。结果热疗可以诱导纤维肉瘤S180株细胞凋亡,改变细胞周期分布,使发生G1期阻滞,下调Bcl-2基因。结论热疗对纤维肉瘤S180株有抑瘤作用,本实验结果为进一步开展基因配合热放疗治疗肿瘤和选择肿瘤放化疗结合时机和化疗药物提供了实验依据。

预设靶标免疫靶向盐酸吡柔比星治疗小鼠S180肉瘤的试验研究

目的:制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-盐酸吡柔比星(THP)免疫靶向偶联物,在肿瘤组织中接种人IgG非特异性靶点,探讨人造靶点免疫导向治疗肿瘤的可行性。方法:制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP偶联物,建立荷瘤小鼠模型。采用ELISA法测定小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP偶联物抗体活性;体外细胞毒性实验(四甲基偶氮唑蓝法)比较分析小鼠抗人IgG、THP、小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP对S180细胞的毒性作用;比较THP、小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP、小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP+人IgG的抑瘤作用及对荷瘤小鼠生存时间的影响。结果:制备的偶联物中,小鼠抗人IgG、葡聚糖与THP物质的量比为1∶2.5∶54;偶联物保留了小鼠抗人IgG抗体活性;体外细胞毒性实验表明偶联物对S180细胞有体外杀伤作用。小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP+肿瘤中接种人IgG组对小鼠移植性S180肉瘤的抑瘤率达34.3%,并可延长荷瘤小鼠的生存时间。结论:通过在肿瘤组织中接种IgG非特异性靶点,用抗人IgG单克隆免疫靶向THP治疗小鼠S180肉瘤较对照组具有明显靶向作用。

同化激素康力龙对S180小鼠腹水瘤细胞周期动力学的影响

目的研究同化激素康力龙对S180小鼠腹水瘤细胞周期动力学的影响。方法建立S180腹水瘤小鼠模型,给予康力龙灌胃一定时间后,用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测肿瘤细胞动力学。结果S180腹水瘤实验组S期肿瘤细胞(55.94±10.84)%,对照组S期肿瘤细胞(40.31±7.47)%,两组间S期所占百分数相比较有显著性差异(P<0.01)。结论同化激素可影响肺癌细胞周期动力学,使S180腹水瘤细胞S期数量百分率增加。

Toll样受体在S180肿瘤细胞上的表达及意义

目的通过比较S180肿瘤细胞体内、体外TLRs表达的变化,探讨TLRs在肿瘤发生、发展中的作用和意义。方法①将传代培养的S180腹水癌细胞接种于ICR小鼠腹腔左侧,建立S180腹水癌模型;②采用密度梯度离心法分离纯净肿瘤细胞;③采用半定量RT-PCR方法检测S180腹水癌体外传代培养细胞与荷瘤鼠体内瘤细胞TLR1-9 mRNA表达水平。结果TLR1、2、4、6在S180腹水癌体外传代培养细胞中表达水平高于荷瘤鼠体内瘤细胞;TLR7体外传代培养细胞中表达水平低于荷瘤鼠体内瘤细胞;TLR5、9体外传代培养细胞中有表达,荷瘤鼠体内瘤细胞无表达;TLR3、8体外传代培养细胞与荷瘤鼠体内瘤细胞均无表达。结论S180肿瘤细胞可表达TLRs,并且不同的TLRs在体内、体外的表达有所差异,提示TLRs在肿瘤的免疫逃逸中发挥一定的作用。

小鼠一体多瘤模型复制与S180脉冲致敏树突状细胞抗瘤特异性观察

目的 :复制一种新的荷瘤动物模型 ,同一小鼠皮下 ,不同部位荷 3种不同类型肿瘤 (S180、H2 2、EAC瘤株 ) ,继之以一种肿瘤抗原 (冻融S180细胞 )脉冲刺激的树突状细胞 (DC)免疫治疗 ,观察其效应。方法 :昆明小鼠随机分为 5组 ,6只 /组 ,1、2、3组分别荷单一瘤株S180、H2 2和EAC瘤细胞 ;4、5组荷以上 3种瘤株 ;所接种的 3种瘤细胞数均为 6× 10 6,接种部位二侧后腿腋下和背部 ,分别交替接种 3种瘤细胞株 ,其中每 2只接种部位相同 ,第 5组另接受肿瘤抗原 (冻融S180细胞 )脉冲刺激DC行免疫治疗。观察接种后瘤体大小和特异的淋巴细胞毒杀伤活性(CTL)。结果 :1～ 4组组间相比 ,单一荷瘤与复合荷瘤的相同瘤株在肿瘤生长速度上基本相同 (P >0 .0 5 ) ,4组荷瘤鼠生存期相近 (P >0 .0 5 )。与 1～ 4组荷同一瘤株鼠比较 ,脉冲DC免疫治疗鼠 (第 5组 ) ,S180、H2 2和EAC瘤株的增生速度明显减缓 ,荷瘤第 3周时 ,S180、H2 2增生减缓更为明显 (P <0 .0 1) ;EAC瘤株亦呈同样变化趋势 ,但幅度较小。CTL结果显示 ,T淋巴细胞对S180和H2 2瘤细胞株均有很强杀伤活性 (78% ,72 % ) ,而对EAC瘤株杀伤活性较弱 (34% )。结论 :同一小鼠体内同时荷 3种移植瘤株即一体多瘤动物模型可行 ;

NDV+IL-12联合应用抗小鼠S180肉瘤作用的实验研究

目的研究白细胞介素12(IL-12)与新城疫病毒(NDV)联合治疗小鼠S180肉瘤的效果及其作用机理。方法用NDV、IL-12、NDV+IL-12联合分组免疫治疗BALB/c小鼠S180肉瘤模型,通过分析瘤指数和抑瘤率及T细胞亚群分布、CTL活性,探讨免疫治疗效果与T细胞亚群分布及CTL活性之间的关系。结果NDV、IL-12、NDV+IL-12实验组的抑瘤率分别为(30.26±9.25)%、(31.85±7.24)%、(48.96±3.80)%,NDV+IL-12联合组的抑瘤率与NDV、IL-12单独治疗组相比,差异有显著性(P<0.01);瘤指数分别为(5.26±0.49)、(5.51±1.35)、(3.95±0.49),明显低于生理盐水组(7.67±0.67)(P<0.01),NDV组、IL-12单独治疗组与NDV+IL-12组小鼠相比,差异具有显著性(P<0.01)。NDV、IL-12和NDV+IL-12组的CTL活性明显高于生理盐水组(p<0.01);NDV+IL-12组又显著高于NDV、IL-12组(P<0.01)。NDV、IL-12、NDV+IL-12组的荷瘤小鼠外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞所占百分数均高于生理盐水组(P<0.01),且CD4/CD8比值也在升高。结论NDV、IL-12单独应用均能提高机体抗S180肉瘤的免疫力,NDV与IL-12联合免疫治疗能协同提高抗肿瘤作用,但其协同抗肿瘤机制还有待进一步研究。

局部应用IL-12对小鼠S180实体瘤的抗瘤效应及机制初探

目的研究白细胞介素-12(Interleukin 12,IL-12)对小鼠S180实体瘤的抗肿瘤作用并初步探讨其机制.方法将小鼠左后肢皮下接种S180细胞荷瘤后的BaLB/c小鼠随机分为生理盐水组和IL-12组,分别给予生理盐水和IL-12.接种第28天,眼球取血,流式细胞仪分析外周血T细胞亚群的变化;解剖取瘤称重,计算瘤指数和抑瘤率,组织切片进行形态学观察.结果在接种瘤细胞第14天时,IL-12组、生理盐水组的肿瘤大小分别达到(7.56±0.09)mm、(8.52±0.46)mm,到第27天时,IL-12组的肿瘤大小为(5.12±1.56)mm,明显小于生理盐水组(15.34±3.18)mm(P<0.01).IL-12组的抑瘤率为(31.85±7.24)%,IL-12组的小鼠瘤指数为(5.51±1.35),与生理盐水组(7.67±0.67)相比差异具有显著性(P<0.01).IL-12组的小鼠血液中CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞均高于生理盐水组.生理盐水组小鼠肿瘤细胞无明显坏死,并可见有丝分裂象,IL-12组的小鼠肿瘤组织有明显坏死,核固缩、细胞碎片多,但在瘤细胞之间很少见到淋巴细胞及巨噬细胞.结论 IL-12具有明显的抗肿瘤作用,初步显示涉及改变细胞亚群和诱导细胞凋亡的机制.