乙型肝炎病毒前-S2蛋白结合蛋白基因S2-29的克隆化研究

目的:筛选人肝细胞中与乙型肝炎病毒(HBV)前-S2蛋白(Pre-S2)相互作用的蛋白,探寻HBV致病机制。方法:用多聚酶链反应(PCR)技术扩增HBV前-S2基因,连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,用营养缺陷型培养基及蓝白斑双重筛选阳性菌落,提取酵母质粒转化大肠杆菌并测序,进行生物信息学分析。逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法从HepG2细胞的mRNA中扩增出完整的新基因S2-29,连入另一酵母表达载体pGADT7,并用免疫共沉淀方法再次证实二者间的相互作用。结果:成功克隆出HBV前-S2基因并在酵母细胞中表达,配合后筛选出既能在四缺(SD/-Trp-Leu-His-Ade)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的四缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中有1个未知基因S2-29,该基因能在HepG2细胞中表达,免疫共沉淀方法证实二者在体外也有结合作用。结论:成功克隆出与乙型肝炎病毒前-S2蛋白相结合的新基因,为进一步研究HBV前-S2的作用提供了新线索。

利用岩石热解参数S2-Coc图谱分析盆地有机质类型及生油潜力

岩石热解是广泛应用于研究烃源岩有机质成熟度和生烃潜力的一种分析方法。利用热解参数绘制裂解烃（s2）-有机碳（C0c）图谱可有效地区分研究地层的有机质类型。将此方法应用于海拉尔一塔木察格盆地乌尔逊、贝尔、南贝尔和塔南凹陷的白垩系各生油岩层，得出了这4个主力凹陷干酪根类型：乌尔逊凹陷南屯组一段、南屯组二段为Ⅱ型干酪根，铜钵庙组为Ⅰ型干酪根，大磨拐河组为Ⅲ型干酪根；贝尔凹陷大磨拐河组、南屯组一段和南电组二段都为Ⅱ型干酪根，只有铜钵庙组为Ⅲ型干酪根；南贝尔凹陷铜钵庙组、南屯组一段和南屯组二段均为Ⅱ型干酪根；塔南凹陷铜钵庙组和南屯组一段为Ⅱ型干酪根。研究表明，海拉尔一塔木察格盆地干酪根主要类型为Ⅱ型，生油潜力较好。

一株高效硫氧化菌的筛选及其对S2-离子氧化途径的推测

以S2-离子为目标污染物,从北京东沙河黑臭水体中筛选分离得到一株具有高效S2-氧化功能的土著微生物。对其进行16S rRNA测序鉴定,结果显示,该菌株属于柠檬酸杆菌属(Citrobacter),命名为Citrobacter sp.sp1。菌株sp1的最适氧化条件为温度25℃,初始pH值7.0,初始葡萄糖浓度1.00 g/L和初始菌浓度1.00 g/L。在此最适条件下,菌株sp1对人工含硫废水中S2-的氧化率达到97.1%。在整个S2-氧化过程产生了S0、S2O32-、SO32-、S4O62-和SO42-这5种赋存形态的硫离子,且随着S2-浓度的持续下降SO42-浓度呈缓慢上升趋势。利用高通量测序技术推测菌株sp1通过副球菌硫氧化(Paracoccus sulfur oxidation,PSO)和副硫代硫酸盐代谢(S4 intermediate,S4I)这两条代谢途径将非稳定态的S2-逐步转化为稳定态的SO42-。在PSO途径中,一部分的S2-氧化为S0,生成的S0继续氧化为SO32-;而另一部分的S2-则直接氧化为SO32-,中间产物SO32-通过直接氧化途径与间接氧化途径氧化为SO42-。此外,在此途径中,S0亦可与SO32-自发反应生成S2O32-,而S2O32-发生歧化反应重新释放出SO32-和S0。在S4I途径中,一部分S2O32-转化为S4O62-;接着S4O62-被氧化为SO42-。

First Note on the Definition of S2-Convexity

In this short, but fundamental, note, we start progressing towards a mathematically sound definition of the real functional classes

肾组织preS1/S2-Ag检测在乙型肝炎病毒相关性肾炎诊断中的作用

目的:观察前S1/S2抗原(preS1/S2-Ag)及其它乙型肝炎病毒(HBV)抗原在HBV相关性肾小球肾炎(HBV-GN)患者肾组织中的表达,探讨它们在HBV-GN诊断中的应用价值。方法:回顾性收集2003年1月～2013年1月于中山大学附属第三医院肾内科住院的患者,并符合以下入组标准:血清学HBsAg阳性;有血尿、蛋白尿等临床表现;经肾组织活检病理诊断为肾小球肾炎病变;排除合并有系统性红斑狼疮、过敏性紫癜、糖尿病、丙肝等疾病。入组共49例。用免疫组织化学的方法对其肾组织石蜡切片进行preS1/S2-Ag、HBeAg、HBsAg和HBcAg检测。随机选取5例HBsAg阴性的肾小球轻微病变患者,5例HBsAg阳性的非肾小球肾炎患者作对照。结果:49例HBV感染合并肾小球肾炎患者中preS1/S2-Ag、HBeAg、HBsAg和HBcAg检出阳性率分别为32.7%(16例)、38.8%(19例)、14.3%(7例)和46.9%(23例),总阳性率为70.2%(36例);preS1/S2-Ag主要表达在肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞和内皮细胞胞质内;其表达与肾组织HBcAg的表达呈正相关(r=0.459,P<0.01)。5例HBsAg阴性的肾小球轻微病变患者,4种抗原均未检测到;5例HBsAg阳性的非肾小球肾炎患者有2例表达HBeAg,1例表达HBcAg,无1例表达preS1/S2-Ag及HBsAg。结论:HBV-GN患者肾组织中检测到preS1/S2-Ag;preS1/S2-Ag、HBeAg、HBsAg和HBcAg联合检测可提高HBV-GN的临床诊断率。

不同施氮量和留叶数对烤烟新品系S2-15生长、质量和效益的影响

为在生产中更好地推广种植烤烟新品系S2-15,本试验通过不同施氮量、不同留叶数对新品系S2-15生长、质量和效益影响的研究。结果表明:以施纯氮量8.5 kg/666.7m2、留叶20片处理的大田抗病性较好,产量、产值和中上等烟比例等效益性状较好,原烟外观质量和烟叶的化学成分等品质特征表现较优。

新型杨梅素衍生物S2-1-5的合成及抗肿瘤活性研究

目的:评价新设计合成的杨梅素衍生物S2-1-5对人肝癌SMMC-7721细胞的抗肿瘤活性,以期为杨梅素衍生物的结构优化和抗肝癌药的进一步研发提供依据。方法:以杨梅素为母体,通过化学反应合成S2-1-5,并用核磁共振(NMR)和高分辨质谱(HRMS)进行结构和定量分析,再验证其抗肿瘤活性:将不同浓度的S2-1-5和阳性对照药吉西他滨作用于SMMC-7721细胞,DMSO作为阴性对照组,通过MTT实验和形态学观察检测S2-1-5对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用,划痕实验检测SMMC-7721细胞迁移能力,流式细胞术检测SMMC-7721细胞周期和细胞凋亡。结果:NMR和HRMS确定了2-氟苄基4-((3-((5,7-二甲氧基-4-氧代-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4H-色烯-3-基)氧基)丙基)(甲基)氨基)哌啶-1-二硫代羧酸(S2-1-5)的分子结构,其化学式为C_(37)H_(43)FN_(2)O_(8)S_(2)。S2-1-5的抗肿瘤活性实验表明:与对照组相比,不同浓度下,S2-1-5的抑制活性更高,差异均具有统计学意义(P<0.05);S2-1-5能抑制SMMC-7721细胞迁移(P<0.05);S2-1-5使SMMC-7721细胞的细胞周期阻滞在S期(P<0.05);S2-1-5能诱导SMMC-7721细胞凋亡(P<0.01)。结论:成功合成S2-1-5,其能通过抑制SMMC-7721细胞增殖和迁移,诱导细胞周期阻滞和凋亡发挥其体外抗肿瘤作用。

温水膀胱冲洗加S2-S4区间腰骶部按摩治疗神经源性尿潴留的临床研究

目的：通过人体中枢及周围神经分布路径、创新的护理思维,寻找能够有效治疗脑梗死所引发的神经源性尿潴留的方法.方法：将2012 年50 例我院收治的脑梗死引发的神经源性尿潴留患者随机分为两组：研究组25 例,采用液体温度为30-37℃的生理盐水在膀胱排空情况下进行膀胱冲洗加S2-S4 区间的腰骶部神经按摩.对照组25 例,进行间歇性导尿术,具体方法 是：嘱患者先自己试行排尿,再插入导尿管排尽尿液,同时可以测残余尿量,根据患者的膀胱残余尿量制定导尿次数.二组疗程均相同,一周为一疗程,间隔一天后,进行第二个疗程,共进行2 个疗程后,对数据进行统计分析.结果：两组脑梗死引发的神经源性尿潴留患者治疗后评分的比较差异具有统计学意义（P〈 0.05）,研究组优于对照组.结论：通过运用温水膀胱冲洗加S2-S4 区间神经脊髓段按摩治疗神经源性尿潴留的治疗护理方法,对于促进患者排尿神经功能的恢复及减少并发症、提高患者生活质量,具有确切的疗效.

Bt抗虫核不育系S2-28A的利用

本文主要报道利用自育Bt抗虫核不育两用系S2-28A与转基因抗虫或抗病及优质的棉花品种(品系)杂交,筛选出转基因抗虫、抗病、优质的杂交组合,对推动棉花杂种优势的利用,将起到积极作用。

红色邻米草菌S2-4-1H^(T)摇瓶发酵产六氢环庚基灵菌红素的培养基配方优化

产自红色邻米草菌株S2-4-1H^(T)的六氢环庚基灵菌红素(six hydrogen cycloheptane prodigiosin,ShcPG)具有极高抗肿瘤新药开发潜力.为提高摇瓶发酵产ShcPG的产量,试验的菌株为红色邻米草菌S2-4-1H^(T),基础培养基为MB,以庚基灵菌红素(heptylprodigiosin,hPG)和ShcPG质量浓度为响应值,在单因素试验基础上采用Box-Behnken中心组合试验设计进行响应面实验,优化S2-4-1H^(T)菌株发酵的培养基组分,并构建二次回归方程.结果表明,发酵培养基优化配方为:花生油、蛋白胨、无水氯化钙、六水合氯化镁和柠檬酸铁的质量浓度分别为2.00、4.00、1.35、9.00和0.22 mg/mL.在最佳发酵培养基配方工艺下发酵48 h,hPG和ShcPG的总产量为(4.86±0.30)mg/L、是用MB培养基培养产量的22.84倍,且预测值和测定值的绝对差值<5%,表明回归模型可靠.该结果对红色邻米草菌S2-4-1H^(T)发酵开发生产ShcPG具有实际应用价值.

设计改造羧酸还原酶合成医药中间体(S)-2-氨基丁醇

(S)-2-氨基丁醇同时具有羟基及氨基官能团,是多种重要药物分子的关键手性中间体,生物合成(S)-2-氨基丁醇尚缺少有效的酶元件。以塞格尼氏菌(Segniliparus rugosus)来源的羧酸还原酶SrCAR为研究对象,通过对实验室已有SrCAR突变文库进行筛选测试,结合活性位点共进化分析,同时利用组合活性中心饱和突变策略(Combinatorial active-site saturation test,CAST)构建新的突变体文库,经测试最终获得优势突变体XH7(G430V/E533F/A627N)。该突变体催化底物N-Boc-(S)-2-氨基丁酸到醛产物的活性(kcat/Km)较野生型SrCAR提高2.1倍,热熔值(Tm)提升2.3℃。进一步通过引入荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)来源的醇脱氢酶PfADH,可还原N-Boc-(S)-2-氨基丁醛到醇产物。XH7和PfADH的双酶共表达体系反应5 h即可将20 mmol/L底物实现几乎完全转化,转化率达到99%,并经脱Boc保护与分离纯化获得终产物(S)-2-氨基丁醇,得率为60%。通过分子动力学模拟解析最优突变体活性及热稳定性提高的分子机制,为SrCAR酶设计改造提供新的研究思路,拓展酶法合成(S)-2氨基丁醇的生物酶工具箱,可为类似高附加值医药中间体的生物合成提供理论和实践指导。

(1R,2S)-2-氟环丙胺对甲苯磺酸盐合成工艺的改进

研究了(1R,2S)-2-氟环丙胺对甲苯磺酸盐的合成工艺。以丁二烯为原料,经过成环、氧化、还原、拆分等反应,设计合成(1S,2S)-2-氟环丙甲酸,通过考察与优化确定了最佳反应条件;进一步制得目标产物(1R,2S)-2-氟环丙胺对甲苯磺酸盐,产物收率达到75%。

S^(2-)/NO_3^--N对硫自养反硝化与厌氧氨氧化耦合脱氮除硫启动的影响

为寻求经济、有效的同步脱氮除硫工艺,采用HABR(复合式厌氧折流板反应器),接种厌氧氨氧化活性污泥,以人工模拟废水为研究对象,在进水p H为8.0、温度为(32±1)℃、HRT为6.5 h的条件下,调整进水S2-/NO3--N〔n(S2-)∶n(NO3--N)〕分别为2.0∶5、3.5∶5、5.0∶5、6.5∶5,研究其对硫自养反硝化和厌氧氨氧化耦合工艺启动的影响,试验连续进行了54 d.结果表明:当S2-/NO3--N<1时,S2-的供应量相对不足,导致硫自养反硝化生成的NO2--N量不足,进而影响后续厌氧氨氧化效果,NH4+-N去除率较低,平均值为53.5%,同时剩余NO3--N继续氧化硫自养反硝化生成的S0,致使出水中ρ(SO42-)增大;当S2-/NO3--N=1时,S2-供应量充足,硫自养反硝化生成NO2--N量最大,厌氧氨氧化效果最好,NH4+-N去除率最高,平均值为65.1%;当S2-/NO3--N>1时,S2-过量,S2-去除率下降.试验通过控制S2-/NO3--N,在HABR内成功实现了硫自养反硝化和厌氧氨氧化耦合工艺启动,NH4+-N、S2-、NO3--N最大去除率分别为74.3%、99.0%、99.5%,S2-/NO3--N=1为最佳比例.

巢湖南淝河口黑水团区流速和溶解氧与Fe^(2+)、S^(2-)浓度的空间关联性

黑臭现象在我国东部地区浅水湖泊频繁发生,已经严重影响环湖地区的社会经济发展.厌氧环境和高浓度Fe^(2+)、S^(2-)是引起黑臭现象的必要条件.本文解析巢湖南淝河口区黑臭水团范围内Fe^(2+)、S^(2-)与DO、流速的分布特性;基于空间计量模型重点探讨了流速、DO和Fe^(2+)、S^(2-)分布的空间关联性.结果发现,水体流动在黑臭水团中主要有两个作用:使Fe^(2+)、S^(2-)和DO彼此产生空间相关性以及通过分散作用改变局部Fe^(2+)、S^(2-)浓度分布;同时流速通过增强复氧间接影响Fe^(2+)及S^(2-)总体浓度的作用较小.流速与Fe^(2+)、S^(2-)之间均满足线性空间滞后模型;而线性回归模型中流速对Fe^(2+)的影响低估了约7%,对S^(2-)的影响则低估了12%.

铝酸钠溶液中S^(2-)对低合金钢腐蚀行为的影响

采用钢弹群釜溶出装置进行高温腐蚀实验,结合SEM和XRD等分析技术,研究S2-对低合金钢在高温铝酸钠溶液中腐蚀行为的影响。采用极化曲线法分析S2-加速低合金钢腐蚀的原因。结果表明:在高温条件下,随着S2-和碱浓度的升高,低合金钢具有很高的腐蚀速率,而随着氧化铝浓度的升高,腐蚀速率减小。表面腐蚀产物主要成分为Fe3O4,其结构疏松,在搅拌条件下易于从表面脱落。低温极化研究表明,S2-加速腐蚀原因是在金属表面形成结构不稳定的铁硫化物,当该硫化物被氧化成具有较稳定结构的氧化物时,铁的腐蚀得到抑制。

应用岩石热解数据S_2-TOC相关图进行烃源岩评价

应用岩石热解数据评价烃源岩的传统方法具有一定的局限性。由于矿物基质的吸附或"死碳"的影响,有机质类型的"范氏图解"往往夸大烃源岩有机质类型的非均质性。对松辽盆地上白垩统不同有机质丰度和有机质类型的烃源岩生烃动力学研究表明,它们具有相似的生烃动力学特征,说明尽管有机质丰度存在较强的非均质性,但其有效源岩类型(区别于应用范氏图划分的有机质类型)是一致的。这些烃源岩的岩石裂解烃(S2)与有机质丰度(TOC)的相关系数很高,与生烃动力学的分析结果一致,表明应用S2-TOC相关图划分烃源岩的有机质类型可以更真实地反映烃源岩的有效源岩类型,S2-TOC相关图是评价烃源岩有效源岩类型的有效手段。过去岩石热解数据用于反映烃源岩成熟度的主要指标是tmax,tmax对于偏Ⅱ/Ⅲ型的烃源岩比较适用,而对于Ⅰ型烃源岩,由于生油窗内变化不明显,tmax不能完全反映有机质的成熟过程;而且tmax也受运移油等其他因素影响。不同成熟度的烃源岩的S2-TOC图分析结果显示,随着成熟度的增加,S2-TOC的回归斜率和TOC逐渐减小;利用不同成熟度的烃源岩建立的S2-TOC图可用于评价烃源岩的成熟度。松辽盆地不同沉积相中烃源岩的S2-TOC相关图的特征表明,只要有有利的有机质保存条件,各沉积相下均可发育优质的烃源岩;S2-TOC相关图可以反映烃源岩形成的沉积环境和有机质保存条件。

用MnO_2脱除工业铝酸钠溶液中S^(2-)的研究

采用氧化铝生产中的循环母液调配液对不同含硫量的铝土矿进行溶出,来研究赤泥自身净化除硫的能力,并在溶出过程中添加MnO2作为氧化剂,对工业铝酸钠溶液中的硫进行氧化脱除,通过实验考察MnO2添加量和氧化时间对脱硫效果及脱硫产物的影响。实验证明,赤泥对工业铝酸钠溶液具有一定的除硫的能力;在溶出过程中添加MnO2,能有效氧化溶液中的含硫离子。S2-经过S2O32-、SO23-的形态转化,最终被氧化成为SO24-。MnO2的添加量不同,其还原产物也不同,MnO2不足量时,还原产物为Mn(OH)2和Mn3O4;MnO2过量时,还原产物为Mn3O4。

X80管线钢焊接热影响区在含S^(2-)介质中的耐蚀性分析

采用三电极电化学测试方法研究了H06H1和H05MnNiMo两种焊丝对X80管线钢焊接接头热影响区在Na2S介质中的耐蚀性.结果表明,热影响区的金相组织为针状铁素体+粒状贝氏体,晶粒细小.焊接接头的热影响区在温度为20~60℃,Na2S质量分数为1.0%~2.0%的范围内,随着Na2S质量分数的增大和温度的升高,腐蚀速率加大,腐蚀速率在0.24~0.81 mm/a的范围内,腐蚀过程为阳极极化控制的腐蚀体系.在温度达40℃以上,出现阳极扩散控制的腐蚀过程.

超临界水冷壁管材T23在弱碱性S^(2-)溶液中的腐蚀行为

采用挂片试验、电化学工作站、金相显微镜、X射线衍射仪等研究了在不同pH、温度及S^(2-)浓度条件下,T23材料的电化学腐蚀行为及腐蚀产物的特点。根据试验结果分析认为:在温度范围10～70℃条件下,T23的腐蚀程度随着温度的升高加剧,弱碱溶液中S^(2-)对材料表面侵蚀,破坏了OH^-的抑制作用;pH=9,t=70℃,0.1mol/L S^(2-)溶液中,试片表面形成了Fe_2(SO_4)_3或Fe_2(SO_3)_3物质,出现了较大的腐蚀坑,而空白溶液浸泡过的试片表面存在致密的Fe_3O_4颗粒。

s2-连续性的遗传性和映射不变性

基于正规完备化算子,本文讨论了s2-连续性和拟连续性的遗传性和映射不变性。主要结果有:(1)s2-连续性,s2-交连续性与拟连续性对弱Scott开集都是可遗传的;(2)s2-连续性,s2-交连续性和s2-拟连续性对弱Scott闭集一般不具有遗传性;(3)s2-连续偏序集的连续收缩与s2-连续偏序集在弱Scott连续的核映射下的像还是s2-连续的;(4)s2-拟连续偏序集的连续收缩与s2-拟连续偏序集在弱Scott连续的核映射下的像仍是s2-拟连续的。