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SA387Gr11CL2主体材质超100万次疲劳容器设计探索
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作者 陈绍庆 《广州化工》 2025年第1期161-164,共4页
疲劳容器是石油化工装置中常见设备,分析设计标准JB4732附录C规定的设计疲劳曲线上限为100万次,实际工程中常遇到疲劳循环次数超100万次的情况,对此类工程问题,标准并未明确其设计方法与设计疲劳曲线。本文以SA387Gr11CL2主体材质、循... 疲劳容器是石油化工装置中常见设备,分析设计标准JB4732附录C规定的设计疲劳曲线上限为100万次,实际工程中常遇到疲劳循环次数超100万次的情况,对此类工程问题,标准并未明确其设计方法与设计疲劳曲线。本文以SA387Gr11CL2主体材质、循环次数为315万次的疲劳容器为例,建立五个分析模型,选取其危险截面,按JB4732标准进行应力分析,评价其薄膜应力、弯曲应力等,并采用ASME疲劳设计曲线进行应力最大点和螺柱的疲劳分析。结果表明,对于循环次数超100万次的疲劳容器,可以按照JB4732的方法进行应力和疲劳分析,疲劳分析可取ASME疲劳设计曲线,由于循环次数高,螺柱疲劳损伤大,设备操作应加强对螺栓的检验,定期更换螺栓。 展开更多
关键词 SA387Gr11CL2疲劳容器设计 高循环次数疲劳分析 螺柱疲劳寿命评估
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Machine Learning: An Overview
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作者 Mohd Izhan Mohd Yusoff 《Open Journal of Modelling and Simulation》 2024年第3期89-99,共11页
Machine learning is an Artificial Intelligence (or AI) application, an idea that came into being by giving machines access to data and letting them learn by themselves. AI has been making headlines, especially since C... Machine learning is an Artificial Intelligence (or AI) application, an idea that came into being by giving machines access to data and letting them learn by themselves. AI has been making headlines, especially since ChatGPT was introduced. Malaysia has taken many significant steps to embrace and integrate the technology into various sectors. These include encouraging large companies to build AI infrastructure, creating AI training opportunities (for example, the local media reported Microsoft and Google plan to invest USD 2.2 billion and USD 2 billion, respectively, in the said activities), and, as part of AI Talent Roadmap 2024-2030, establishing AI faculty in one of its public universities (i.e., “Universiti Teknologi Malaysia”) leading the way in the integration and teaching of AI throughout the country. This article introduces several products developed by the author (for the energy and transportation industries) and recommends their improvement by incorporating Machine learning. 展开更多
关键词 Machine Learning Artificial Intelligence sa2VING Non-Intrusive Load Monitoring Transportation Pricing System System Dynamics Dynamic Pricing
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鸡传染性喉气管炎病毒SA_2疫苗株免疫效力的研究 被引量:1
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作者 朱庆虎 黄骏明 +1 位作者 郭连喜 田枫岚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第2期141-143,共3页
鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)疫苗株尿囊膜乳剂原液经点眼接种2、7和15日龄雏,2日龄雏鸡组在接种后第7天有20%(1/5)鸡出现眼睑肿胀和流泪等眼部反应,7日龄和15日龄雏鸡组无明显临床变化。用该疫苗株乳剂原液点... 鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)疫苗株尿囊膜乳剂原液经点眼接种2、7和15日龄雏,2日龄雏鸡组在接种后第7天有20%(1/5)鸡出现眼睑肿胀和流泪等眼部反应,7日龄和15日龄雏鸡组无明显临床变化。用该疫苗株乳剂原液点眼接种1月龄以上鸡眼部无明显反应,但通过气管接种后,26.7%(4/15)鸡表现出ILT临床症状。试验用SA2株点眼接种免疫1月龄以上鸡,免疫组保护率为100%(20/20),对照组发病率为100%(10/10)、死亡率为40%(4/10)。2、7和15日龄雏鸡点眼毒力试验的3组鸡,于接种后21~34天用王岗株ILT强毒攻击,100%得到保护,而对照组鸡100%发病。试验结果表明,SA2疫苗株是一株毒力温和。 展开更多
关键词 sa2疫苗株 免疫效力 ILTV
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一体模钢锭轧制特厚SA387Gr11CL2钢板生产实践
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作者 瞿征 侯敬超 +4 位作者 王飞 李样兵 岳欣欣 陈家超 武杰 《宽厚板》 2024年第1期8-11,共4页
以33.2 t一体模钢锭轧制的(120×1 720×13 570) mm规格SA387Gr11CL2钢板为对象,重点研究帽口端表面、内部质量、化学成分及力学性能。结果表明:轧制钢板帽口对应位置的表面质量良好,探伤结果达到NB/T 47013.3—2015标准及第1... 以33.2 t一体模钢锭轧制的(120×1 720×13 570) mm规格SA387Gr11CL2钢板为对象,重点研究帽口端表面、内部质量、化学成分及力学性能。结果表明:轧制钢板帽口对应位置的表面质量良好,探伤结果达到NB/T 47013.3—2015标准及第1号修改单TⅠ级。距帽口线700 mm以内试样成分无明显偏析,满足标准要求,拉伸、冲击等力学性能良好。与传统钢锭相比,采用一体模钢锭轧制上述规格钢板,成材率可以提高3.29%。 展开更多
关键词 SA387Gr11CL2钢板 帽口 一体模 成分偏析 探伤
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SA508-3材料氮合金化工艺优化研究
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作者 黄飞 许耀先 顾帮建 《安徽冶金科技职业学院学报》 2024年第2期10-12,共3页
文章针对SA508M.Gr.3CL.2材料采用氮化锰合金充氮工艺氮收得率低的情况,对氮气氮合金化工艺进行优化与实践验证。结果表明,该材料的氮合金化速率主要与钢水温度、氮气流量、充氮压力有关,控制好关键参数能使充氮速率保持相对稳定,满足... 文章针对SA508M.Gr.3CL.2材料采用氮化锰合金充氮工艺氮收得率低的情况,对氮气氮合金化工艺进行优化与实践验证。结果表明,该材料的氮合金化速率主要与钢水温度、氮气流量、充氮压力有关,控制好关键参数能使充氮速率保持相对稳定,满足实际生产的需求。 展开更多
关键词 SA508M.Gr.3CL.2 含氮钢 氮气 氮合金化
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白英总碱质量标准研究 被引量:2
6
作者 杜肖 韩林 +3 位作者 孙彩霞 曹晓强 孙建 王建农 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2609-2612,共4页
目的建立白英总碱的质量标准。方法采用薄层色谱法进行定性鉴别;按照《中国药典》2015年版通则规定,对白英总碱水分、总灰分、有机溶剂残留、重金属及砷盐含量进行检查;采用紫外分光光度法及高效液相色谱法对白英总碱含量进行测定。结... 目的建立白英总碱的质量标准。方法采用薄层色谱法进行定性鉴别;按照《中国药典》2015年版通则规定,对白英总碱水分、总灰分、有机溶剂残留、重金属及砷盐含量进行检查;采用紫外分光光度法及高效液相色谱法对白英总碱含量进行测定。结果薄层色谱斑点清晰、分离较好;白英总碱中水分≤9%,总灰分≤3%,重金属含量≤10 mg/kg,砷盐含量<0.004%,苯、甲苯、(邻、间二甲苯)、对二甲苯、正已烷依次不得过9.82×10-6、7.29×10-6、1.42×10-5、1.76×10-5、1.71×10-5;紫外分光光度法测定白英总碱含量不低于50%,高效液相色谱法测定白英总碱含量不低于35%。结论该方法准确可靠,重现性好,所建标准具有可行性,能有效控制白英总碱药品质量。 展开更多
关键词 白英总碱 质量标准 高效液相色谱法 紫外分光光度法 白英生物碱sa2
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3GPP TSG-CN17次全会会议小结
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作者 魏亮 《电信网技术》 2002年第6期61-62,共2页
一、概述 3GPP TSG-CN第17次全会于2002年9月4日至6日在法国小镇Biarritz举行。按照会议的日程安排,会议的内容分为以下几部分: (1)听取来自相关会议和CN各工作组的报告,并对报告进行了讨论; (2)对其他部门和组织的联络函进行了讨论; (3... 一、概述 3GPP TSG-CN第17次全会于2002年9月4日至6日在法国小镇Biarritz举行。按照会议的日程安排,会议的内容分为以下几部分: (1)听取来自相关会议和CN各工作组的报告,并对报告进行了讨论; (2)对其他部门和组织的联络函进行了讨论; (3)对各部门提交的文稿进行了讨论; (4)讨论下一研究期的工作安排和会议安排。 展开更多
关键词 3GPP TSG-CN17次全会会议 CN1 sa2 ZPV4 IPV6
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鸡流感病毒SAα-2,3 Gal和α-2,6 Gal受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的作用 被引量:8
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作者 张增峰 罗殿中 +2 位作者 陈日荣 魏丹儿 王嘉 《广西医科大学学报》 CAS 2010年第4期497-501,共5页
目的:探讨鸡流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法:应用凝集素组织化学染色技术检测鸡呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鸡呼吸道、消化道... 目的:探讨鸡流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法:应用凝集素组织化学染色技术检测鸡呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鸡呼吸道、消化道各解剖部位结合。结果:鸡呼吸道均表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,SA-α2,6Gal受体在气管、支气管和次级支气管呈高密度分布,而SA-α2,3Gal受体在呼吸道的分布以副支气管上皮细胞为主;消化道结肠上皮细胞SA-α2,3Gal受体呈弥漫分布,但SA-α2,6Gal受体仅少量分布。同时,禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1均可与呼吸道和消化道上皮细胞结合。结论:鸡同时表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于病毒基因重配,可充当产生人类流感大流行潜在的中间宿主。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 受体 唾液酸 SA-α2 3Gal受体 SA-α2 6Gal受体
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双抗棉花新型核不育系Yu988A2的选育及鉴定 被引量:2
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作者 杨晓杰 赵元明 +5 位作者 谢德意 吕淑平 唐中杰 李武 祝水金 房卫平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第7期32-35,共4页
以抗除草剂核单基因隐性不育系Yu98-8A1不育株为母本,转Bt基因抗虫棉中棉所41为父本,通过连续回交,选育出双抗(抗虫和抗除草剂)棉花核不育系Yu98-8A2。花冠、花药表型及花粉发育显微观察表明,新型不育系保持了原不育系转育受体Yu98-8A1... 以抗除草剂核单基因隐性不育系Yu98-8A1不育株为母本,转Bt基因抗虫棉中棉所41为父本,通过连续回交,选育出双抗(抗虫和抗除草剂)棉花核不育系Yu98-8A2。花冠、花药表型及花粉发育显微观察表明,新型不育系保持了原不育系转育受体Yu98-8A1的败育特性。棉铃虫抗性及草甘膦抗性试验暗示,Yu98-8A2既保持了原不育系Yu98-8A1的除草剂抗性,又聚合了棉铃虫抗性;PCR分子鉴定表明,Yu98-8A2聚合了Bt及EPSPS-G6基因。 展开更多
关键词 棉花 双抗核不育系Yu98-8A2 选育 鉴定
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乙型脑炎及其疫苗概况 被引量:7
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作者 沈强 史子学 +1 位作者 魏建超 马志永 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期56-62,共7页
乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的,在自然界中主要以鸟、猪为宿主,经蚊为主的虫媒传播的一种人兽共患传染病。该病主要流行于亚洲地区及环西太平洋地区,已成为人类脑炎疾病最主要的病因之一,严重威胁着人类健康,并影响畜牧业特别是养猪... 乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的,在自然界中主要以鸟、猪为宿主,经蚊为主的虫媒传播的一种人兽共患传染病。该病主要流行于亚洲地区及环西太平洋地区,已成为人类脑炎疾病最主要的病因之一,严重威胁着人类健康,并影响畜牧业特别是养猪业的发展。WHO公布数据显示,每年大约有50 000例乙型脑炎患者,造成至少10 000例死亡及15 000例神精后遗症患者,但至今仍无有效的治疗措施,接种疫苗依然是预防JEV感染的最佳途径。介绍JE的流行病学特点,乙型脑炎的发病情况,重点综述国内外市场上使用的JE疫苗情况及其最新研究进程,希望对我国JE疫苗的使用及研发提供有益参考。 展开更多
关键词 乙型脑炎 疫苗 IC51 IMOJEV SA14-14-2
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乙型脑炎病毒SA14-14-2株E基因的克隆、测序与表达 被引量:4
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作者 徐高原 陈焕春 +4 位作者 徐晓娟 李自力 孙圣福 何启盖 吴斌 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期22-25,共4页
目的 克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达 ,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。方法 根据乙型脑炎病毒株SA14 - 14 - 2E基因的序列设计一对引物 ,采用RT -PCR技术扩增其E基因全长cD NA ,将扩增产物克隆... 目的 克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达 ,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。方法 根据乙型脑炎病毒株SA14 - 14 - 2E基因的序列设计一对引物 ,采用RT -PCR技术扩增其E基因全长cD NA ,将扩增产物克隆到pBlusecriptIISK(+)载体中 ,然后亚克隆到原核表达载体PGEX -KG中 ,筛选重组质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)表达重组蛋白。结果与结论 获得了含全长乙型脑炎病毒E基因的重组质粒 ,经酶切和测序证实构建正确。表达的目的蛋白经SDS -PAGE和Westernblot分析证实确为乙型脑炎病毒E蛋白且有生物学活性。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 SA14—14—2株 E基因 克隆 测序 表达
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乙型脑炎病毒SA_(14)-14-2减毒疫苗株的生物学和基因稳定性 被引量:10
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作者 许乐燕 徐闻青 +2 位作者 徐帆洪 王兵 张秀娟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第10期833-837,共5页
目的研究乙型脑炎病毒(JEV)SA14-14-2减毒疫苗株传代过程中的生物学和基因稳定性,为疫苗的安全性和免疫原性提供依据。方法将JEVSA14-14-2减毒疫苗株PHKC7代病毒在原代地鼠肾细胞(PHKC)上连续传代,检测各代次病毒的培养特性以及第8、12... 目的研究乙型脑炎病毒(JEV)SA14-14-2减毒疫苗株传代过程中的生物学和基因稳定性,为疫苗的安全性和免疫原性提供依据。方法将JEVSA14-14-2减毒疫苗株PHKC7代病毒在原代地鼠肾细胞(PHKC)上连续传代,检测各代次病毒的培养特性以及第8、12、17和22代病毒的安全性及免疫原性;对起止代次病毒(PHKC8和22代)进行全基因组序列测定,对中间代次病毒(PHKC12和17代)的结构蛋白基因进行测序,并与基因库乙脑病毒SA14-14-2株(D90195)比较。结果各代次病毒产生的细胞病变基本一致,病毒滴度在17代前较稳定;在BHK21细胞上形成的蚀斑形态一致;小鼠脑内的致病力未发生变化,乳鼠传代返祖试验高代次病毒毒力有升高趋势。8、12、17和22代病毒免疫小鼠后,对P3强毒攻击均具有保护作用。E蛋白核苷酸和氨基酸序列,PHKC8代与D90195完全一致;而PHKC12、17和22代出现单个碱基(第2142或2143位)突变,导致E389氨基酸改变(D→N或D→A),但并非回复突变。4个代次病毒的PrM-C区结构蛋白基因均未发生变化。PHKC8、22代病毒的其他核苷酸突变发生在基因组非结构蛋白区和3′端非编码区;全序列PHKC8和22代与D90195比较,发现7~8个核苷酸不同,导致3~4个氨基酸的差异,核苷酸和氨基酸的同源性分别大于99.93%和99.88%,且以上突变不存在于明确的相关减毒位点上。结论JEVSA14-14-2减毒疫苗株在PHKC上连续传15代,仍保持高度的生物学和基因稳定性,疫苗生产用病毒控制在10代以内较为安全。 展开更多
关键词 乙型脑炎 减毒活疫苗 SA14-14-2株 基因稳定性 生物学稳定性
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三带喙库蚊和致倦库蚊经口感染乙型脑炎病毒疫苗SA14-14-2株的研究 被引量:11
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作者 章域震 张海林 +5 位作者 俞永新 冯云 董关木 杨卫红 贾丽丽 姚亚夫 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第7期584-586,591,共4页
目的通过实验,确定被SA14-14-2乙脑减毒活疫苗免疫的宿主动物和人在被媒介蚊虫叮咬后,是否存在感染和传播的可能.方法建立三带喙库蚊和致倦库蚊的实验室种群,用乙型脑炎SA14-14-2疫苗株病毒和乙脑野毒株经口感染两种库蚊,感染后不同时... 目的通过实验,确定被SA14-14-2乙脑减毒活疫苗免疫的宿主动物和人在被媒介蚊虫叮咬后,是否存在感染和传播的可能.方法建立三带喙库蚊和致倦库蚊的实验室种群,用乙型脑炎SA14-14-2疫苗株病毒和乙脑野毒株经口感染两种库蚊,感染后不同时间取一定数量的蚊,研磨制成悬液,应用空斑试验方法检测感染后不同时间蚊体内的病毒存在情况和病毒滴度.结果在用6.06logPFU/ml SA14-14-2病毒经口感染的两种库蚊中,没有检测到病毒空斑,即没发现蚊虫的感染;在用较高的6.18logPFU/ml病毒经口感染的三带喙库蚊和致倦库蚊中,分别有一组蚊虫出现低滴度感染,空斑形成单位分别是1.24和1.11log10PFU/ml;在用野毒株经口感染的两种库蚊,共计19组蚊虫中,有14组发生感染,空斑形成单位在3.18~4.79log10PFU/ml.结论作为乙脑主要传播媒介的三带喙库蚊和致倦库蚊对SA14-14-2疫苗株病毒的经口感染和病毒在体内的复制严重受限,当叮咬接种疫苗的人后,不具备发生乙脑病毒感染和传播的能力. 展开更多
关键词 乙型脑炎SA14—14—2疫苗株 三带喙库蚊 致倦库蚊 经口感染 空斑试验
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对鸡传染性喉气管炎SA_2株的初探 被引量:3
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作者 张文生 李富桂 齐秀芬 《中国畜禽传染病》 CSCD 1993年第1期51-53,共3页
自鸡传染性喉气管炎SA_2株疫苗中分离出SA_2株病毒。此株生长稳定,保持了原毒株毒性低、副作用小、具有良好的免疫效果的特性,为研制开发此株疫苗奠定了基础。
关键词 鸡病 传染性 喉气管炎 sa2
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费托反应器SA387 Gr11 Cl2特厚板筒体立焊施工技术 被引量:5
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作者 邵光辉 陈明健 +2 位作者 葛新生 徐胜 刘智勇 《压力容器》 2015年第1期65-71,共7页
全面分析了费托反应器SA387 Gr11 Cl2筒体特厚板的焊接性,针对立焊过程中易产生的冷裂纹、再热裂纹及不易成型等问题,制定了详细的焊接工艺并施焊,通过对产品焊接试件化学成分、力学性能等的检测、分析,对焊接工艺的适用性进行了评判。... 全面分析了费托反应器SA387 Gr11 Cl2筒体特厚板的焊接性,针对立焊过程中易产生的冷裂纹、再热裂纹及不易成型等问题,制定了详细的焊接工艺并施焊,通过对产品焊接试件化学成分、力学性能等的检测、分析,对焊接工艺的适用性进行了评判。结果表明,采用PHOENIX CHROMO 1焊条,双U形坡口,焊前预热,小电流、短弧多层多道施焊,焊后立即消氢和消应力热处理等多种工艺措施,可以有效避免冷裂纹、再热裂纹的产生,得到高质量的焊接接头,满足费托反应器的制造质量要求。 展开更多
关键词 SA387Gr11Cl2特厚板 焊接性 冷裂纹 再热裂纹
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乙型脑炎减毒活疫苗病毒SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性 被引量:9
16
作者 刘志文 俞永新 +5 位作者 张海林 王志伟 贾丽丽 章域震 董关木 张云 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期419-421,共3页
目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK2... 目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到SA14-14-2M1C1病毒液。应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验。提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与SA14-14-2原株的E基因序列进行比较分析。结果SA14-14-2M1C1病毒液滴度达1.4×107PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡。扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是SA14-14-2株发生基因变异的8个位点之一。结论SA14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 SA14-14-2株 三带喙库蚊 生物学特性 分子生物学特性
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μ_3-氧桥三核和四核锰水杨叉-β-丙氨酸配合物的合成和表征 被引量:4
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作者 陈克 宋路林 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期24-28,共5页
合成了μ_3-氧桥三核锰配合物Mn_3O(Salala-β)_3·3H_2O和四核锰配合物Mn_4O_2(sa-lala-β)_3(ClO_4)_2·8H_2O,其中salala-β^(2-)是水杨叉-β-丙氨酸三齿希夫碱的负二价阴离子,运用元素分析、化合价测定、电导率、磁化率、... 合成了μ_3-氧桥三核锰配合物Mn_3O(Salala-β)_3·3H_2O和四核锰配合物Mn_4O_2(sa-lala-β)_3(ClO_4)_2·8H_2O,其中salala-β^(2-)是水杨叉-β-丙氨酸三齿希夫碱的负二价阴离子,运用元素分析、化合价测定、电导率、磁化率、热重分析、红外和电子光谱等实验结果对其进行了表征,并提出了配合物的可能结构。 展开更多
关键词 锰配合物 多核配合物 H2Sa/a/a-
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流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析 被引量:6
18
作者 杨耀武 齐香荣 +3 位作者 陈德胜 何孔旺 陈溥言 沈国顺 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第5期31-35,共5页
目的 获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础。方法 根据已发表的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并... 目的 获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础。方法 根据已发表的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并将其克隆入 pET - 32a(+)表达载体中 ,构建重组融合表达载体pET -E ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,利用IPTG诱导获得高效表达。结果 扩增的E蛋白基因片段长 1113bp ,编码 371个氨基酸残基 ,该基因片段与国内发表的减毒株SA14 - 14 - 2碱基序列同源性为 10 0 %。表达产物分子量约为 6 2kD ,经Westernblotting分析表明表达产物具有较好的抗原性。结论 通过序列分析表明 ,我国的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株未发生基因突变。表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性分析为今后ELISA早期诊断试剂盒的研制提供了依据。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎病毒 SA14-14-2株 E蛋白 基因表达 原核细胞 抗原性 基因克隆
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乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白主要抗原片段的高效表达 被引量:2
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作者 葛菲菲 邱亚峰 +1 位作者 杨耀武 陈溥言 《中国病毒学》 CSCD 2005年第2期117-120,共4页
在本实验室已构建的原核表达载体(含乙脑疫苗株SA14 14 2株E蛋白基因主要抗原片段)的基础上用巴斯德毕赤酵母系统表达,该片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,将其亚克隆入酵母表达载体pPICZαA,以电穿孔法转化酵母X 33,用Zeocin平板筛选... 在本实验室已构建的原核表达载体(含乙脑疫苗株SA14 14 2株E蛋白基因主要抗原片段)的基础上用巴斯德毕赤酵母系统表达,该片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,将其亚克隆入酵母表达载体pPICZαA,以电穿孔法转化酵母X 33,用Zeocin平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS PAGE和免疫印迹分析表达产物。由于糖基化不同,所表达产物有两种,其相对分子质量分别为44kDa和50kDa,表达量较高,约为290mg/L,经Western印迹验证,有较好的抗原性。在ELISA试验中,我们直接以PBS透析后的酵母上清包被,能够很明显地区分出乙脑阴阳性血清,与RT PCR检测的相符率达95%,为制备JEV的诊断抗原和基因工程疫苗提供了依据。 展开更多
关键词 乙脑疫苗株SA14—14—2株 E蛋白基因主要抗原片段 巴斯德毕赤酵母 高效表达
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乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的基因序列研究 被引量:1
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作者 李明 赵丹华 李玉华 《中国药事》 CAS 2019年第12期1444-1448,共5页
目的:研究乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的病毒基因序列,以深入控制乙型脑炎减毒活疫苗的安全性。方法:将乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上连续传代,选取第二代病毒(P2)、第五代病毒(P5)、第十五代病毒(P15... 目的:研究乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的病毒基因序列,以深入控制乙型脑炎减毒活疫苗的安全性。方法:将乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上连续传代,选取第二代病毒(P2)、第五代病毒(P5)、第十五代病毒(P15)提取RNA,反转录为c DNA后,进行各代病毒全基因序列分析,分析与乙型脑炎病毒毒力密切相关的关键位点基因是否发生改变。结论:乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传5代后,病毒E蛋白上关键基因第279位(E279)氨基酸由甲硫氨酸(M)突变为赖氨酸(K)。 展开更多
关键词 乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2 BHK21 E蛋白基因序列
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