人呼吸道禽流感病毒受体的分布趋势(英文)

禽类流感病毒和人类流感病毒具有很强的受体识别特异性,分别与唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体分子结合而感染各自的宿主细胞.这种受体结合特异性是流感病毒在禽类和人类之间跨种属传递的主要障碍.应用凝集素组织化学染色技术,探讨人呼吸道各解剖学部位流感病毒唾液酸受体的分布特征.结果显示,唾液酸α-2,3Gal受体,即禽类流感受体,主要分布在下呼吸道的呼吸部即呼吸细支气管和肺泡,而在主气管、支气管和细支气管仅少量分布.相反,人类流感病毒受体,唾液酸α-2,6Gal受体在气管、支气管呈高密度分布,随着支气管分级逐渐降低分布减少,至肺泡分布最少.但比较人呼吸道发育成熟过程中,唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体的表达,未发现明显差别.禽流感H5N1病毒体外感染人呼吸道组织试验结果表明,肺泡上皮较支气管和气管上皮易感染,与唾液酸α-2,3Gal受体分布特点相符合.结果提示,人呼吸道可被禽流感病毒感染,目前H5N1病毒极少发生人传人的特点,可能与个体间上呼吸道唾液酸α-2,3Gal受体表达差异有关.

鹧鸪禽流感病毒和人流感病毒唾液酸受体分布特征

目的探讨鹧鸪禽流感病毒和人流感病毒唾液酸受体分布特点及其作用。方法用亲和组化法检测鹧鸪呼吸道与消化道流感病毒唾液酸受体的分布,荧光素Alexa488标记禽流感病毒H9N1和人流感病毒H1N1,分别与鹧鸪呼吸道、消化道各解剖部位组织细胞结合。结果鹧鸪呼吸道同时表达SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal两种受体,但其消化道仅表达SAα-2,3Gal受体。SAα-2,3Gal受体在鹧鸪呼吸道各部位和消化道结肠上皮细胞呈强阳性弥漫分布;SAα-2,6Gal受体在呼吸道气管、支气管和次级支气管呈强阳性弥漫分布,而副支气管、消化道结肠均为缺乏或仅表达极少量。H9N1禽流感病毒与鹧鸪呼吸道各部位和消化道结肠均结合;人流感病毒H1N1与鹧鸪的气管、支气管、次级支气管结合,但未见与副支气管和结肠结合,此结果与鹧鸪呼吸道和消化道SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal受体分布总体一致。结论鹧鸪同时表达SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于禽流感病毒与人流感病毒基因重配,提示其可充当流感病毒潜在的中间宿主。

流感病毒受体结合特性鉴别方法的建立

目的建立一种快速鉴别流感病毒受体结合特性的方法。方法应用流式细胞仪技术,通过地高辛标记的植物凝集素DIG-SNA和DIG-MAA,检测正常鸡红细胞、绵羊红细胞和经α-2,3唾液酸酶处理的鸡红细胞表面受体。分别应用两种受体类型不同的红细胞进行微量血凝试验,检测流感病毒的受体结合特性,并检测醛化红细胞对其受体结合特性的影响。结果流式细胞检测结果表明,鸡红细胞表面既有SAα2,6Gal受体,也有SAα2,3Gal受体,绵羊红细胞表面只有SAα2,3Gal受体,处理后的鸡红细胞表面只有SAα2,6Gal受体。经分别检测人禽流感病毒毒株,证实该方法能快速准确地鉴别流感病毒的受体结合特性,醛化红细胞未影响其受体结合特性。结论已成功建立了流感病毒受体结合特性的鉴别方法。

鹌鹑流感病毒SA受体的分布特点及其在流感病毒生态系统中的作用

目的探讨鹌鹑流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法应用亲和组化法检测鹌鹑呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鹌鹑呼吸道、消化道各解剖部位结合。结果鹌鹑呼吸道均表达SAα-2,3Gal受体和SAα-2,6Gal受体,SAα-2,3Gal受体在呼吸道气管、支气管、次级支气管和消化道结肠上皮细胞均呈弱阳性分布,而副支气管呈阳性弥漫分布;SAα-2,6Gal受体在呼吸道气管、支气管和次级支气管多呈强阳性弥漫分布,而在副支气管、消化道结肠均为缺乏或仅极少量分布。禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1均可与呼吸道和消化道上皮细胞结合。结论鹌鹑同时表达SAα-2,3Gal受体和α-2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于病毒基因重配,可充当产生人类流感大流行潜在的中间宿主。

流感病毒受体特异性间接ELISA检测方法的建立

本研究采用过碘酸钠法对去唾液酸胎球蛋白进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,然后通过两种不同类型的唾液酸转移酶对HRP去唾液酸胎球蛋白进行唾液酸标记,使其成为只含有单一受体的载体。利用MAA和SNA以及已知受体特性的两株流感病毒对唾液酸标记的HRP去唾液酸胎球蛋白进行受体结合特异性鉴定。结果表明,该方法可以快速准确的鉴定流感病毒的受体特异性。

流感病毒受体特异性红细胞检测试剂的制备及初步应用

为优化流感病毒受体特异性的检测方法,本研究利用霍乱弧菌神经氨酸酶(VCNA)对鸡红细胞(RBC)进行去唾液酸化处理后,再分别通过α2,3和α2,6唾液酸转移酶以CMP-唾液酸作为底物进行不同唾液酸受体的标记,使其分别仅含SAα2,3Gal和SA2,6Gal受体,利用血凝试验和流式细胞仪检测其标记效果。流式检测结果显示,经过α2,3唾液酸转移酶处理的红细胞只含有SAα2,3唾液酸受体,而α2,6唾液酸转移酶只将SAα2,6唾液酸受体标记到红细胞表面。将两种红细胞分别经过人流感病毒和禽流感病毒的检测,表明该方法可以快速鉴定流感病毒的受体特异性。本研究所建立的流感病毒受体特异性标记和检测方法为流感病毒宿主嗜性范围的检测提供了一种有效的技术手段。

H9N2亚型禽流感病毒对鸡输卵管致病性的研究

为了研究H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)对鸡输卵管的致病性,本研究首先采用凝集素亲和组化染色法检验了流感病毒受体SAα-2,3Gal在鸡输卵管上的分布;然后用H9N2AIV人工感染产蛋母鸡,制作输卵管的病理组织切片观察其病理变化;最后,采用胶原酶I灌注消化法培养鸡输卵管膨大部的原代上皮细胞,接毒H9N2AIV后观察细胞病变。试验结果表明,鸡输卵管除漏斗部没发现SAα-2,3Gal受体,其余部分均呈强阳性分布;攻毒后病理组织切片观察,输卵管膨大部上皮细胞绒毛脱落,部分细胞坏死、脱落,组织间隙变大,子宫内部组织内部充血出血,其他部分变化不明显;原代细胞接毒72h后,细胞病变不明显,但是上清中HA滴度可以达到3log2。从以上三方面可以看出,鸡输卵管上皮细胞膜上存在禽流感病毒受体,H9N2AIV可以引起侵害鸡输卵管,并引起部分输卵管病变,而且H9N2AIV可以感染鸡输卵管膨大部原代上皮细胞,H9N2AIV有可能通过输卵管感染母鸡。