SB203580对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的:探讨SB203580对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响.方法:将32只♀SD大鼠分为4组:正常组(N组)8只、肝纤维化组(HF组)8只、DMSO溶剂干预组(D组)8只、P38MAPK抑制剂SB203580干预组(SB组)8只.采用四氯化碳复合因素法复制肝纤维化模型,肝纤维化模型制作结束后,D组给予2‰DMSO溶液3 mL/(kg?d),SB组给予SB203580溶液10 mg/(kg?d),N组、HF组给予同等剂量0.9%生理盐水3 mL/(kg?d)腹腔注射,连续注射4 d.干预结束后,宰杀大鼠留取肝脏,行肝组织病理切片HE染色评价肝纤维化分期,行Masson染色观察胶原纤维沉积情况,采用SP免疫组织化学法检测肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,应用逆转录PCR法检测肝脏中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达.结果:正常对照组(N组)、肝纤维化组(H F组)、S B203580溶剂组(D M S O组)和P38MAPK通路特异性抑制剂组(SB203580组)的肝纤维化分期平均秩分别为4.50、22.50、24.00和15.00;SSS评分分别为2.750±0.707、15.875±0.835、16.000±0.926和11.625±0.9 1 6;Ⅰ型胶原显色指数分别为1.5 7 5±0.249、7.650±0.621、7.725±0.501和4.625±0.495;Ⅲ型胶原显色指数分别为2.375±0.518、4.025±0.446、4.075±0.544和3.375±0.167;Ⅰ型胶原mRNA表达分别为0.020±0.003、0.012±0.002、0.009±0.002和0.016±0.005;Ⅲ型胶原mRNA表达分别为0.412±0.772、0.773±0.137、0.799±0.116和0.572±0.862.HF组与N组相比,Ⅰ、Ⅲ型胶原及其mRNA表达升高(均P<0.001),与肝纤维化分期结果一致(P<0.001);D组与HF组无明显差异(均P>0.05);SB组与HF组相比,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达降低(Ⅰ型胶原显色指数P<0.001,Ⅲ型胶原显色指数P=0.041);Ⅰ型胶原mRNA表达降低(P=0.005),同时Ⅲ型胶原mRNA表达亦降低(P=0.005),肝纤维化分期下降(P=0.015).结论:P38MAPK抑制剂SB203580阻断P38MAPK通路具有降低肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的作用,能够延缓肝纤维化的发生发展.

SB203580和WP631对照射后肺成纤维细胞内Smad通路信号转导的影响

背景与目的:放射性肺纤维化以成纤维细胞增殖和细胞外基质过度沉积为特征。转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)是放射性肺纤维化发生发展的"开关"性分子并被作为治疗的靶分子,因此阻断TGFβ1的信号转导可能减轻肺纤维化。本研究检测Smad通路抑制剂SB203580和WP631对照射后人肺成纤维细胞(human lung fibroblast,HLF)中信号转导的影响并探讨其效应。方法:将HLF用25"mol/LSB203580和5nmol/LWP631预处理后,再应用3Gy60Coγ射线照射和10"g/LTGFβ1刺激,通过凝胶阻滞电泳(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)、免疫印迹、免疫组织化学及细胞周期流式细胞仪检测等方法检测转录因子SP1和AP1活性的变化、Smad3,4,7和p-Smad3及Ⅰ型胶原和Ⅰ型组织纤溶酶原激活物抑制剂(type Ⅰ plasminogen activator inhibitor,PAI-1)的表达变化及细胞周期的变化。结果:经3Gyγ射线照射及TGFβ1刺激后,与未经预处理的HLF相比,应用SB203580或WP631预处理的HLF出现G2-M期阻滞,S期细胞显著减少。SB203580预处理可减少HLF中P21WAF1/CIP1和p-Smad3的表达,而WP631预处理可减少HLF表达PAI-1,抑制转录因子SP1和AP1的活化。结论:SB203580和WP631通过阻断TGFβ-Smad通路的信号转导,抑制#射线和TGF!1作用所导致的HLF过度增殖和P21WAF1/CIP1及PAI-1表达增多。

p38蛋白激酶抑制剂SB203580对支气管哮喘小鼠气道炎症和Th2类细胞因子的影响

目的观察特异性p38蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th2类细胞因子的影响。方法BALB/c小鼠30只随机分成3组,即正常对照组、哮喘模型组和SB203580干预组。通过原位分子杂交和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织IL-4、IL-5 mRNA和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL-4、IL-5)含量的变化,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4、IL-5含量以及肺组织IL-4、IL-5mRNA的表达较正常对照组明显升高,差异具有显著性(P<0.01);SB203580干预组小鼠上述指标较哮喘模型组小鼠明显降低,差异亦具有显著性(P<0.01),肺组织病理学改变明显减轻。结论SB203580能降低气道炎症细胞的聚集和炎症介质的表达。抑制p38 MAPK的活性可能成为哮喘治疗的新途径。

硫化氢在SB203580影响肝星状细胞增殖、凋亡中的作用

目的探讨H2S在P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)阻断剂SB203580影响大鼠肝星状细胞(HSC)-T6增殖、凋亡中的作用及对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法设对照组(HSC加含10%胎牛血清的DMEM培养液)、二甲基亚砜(DMSO)组(对照组基础上加DMSO)、NaHS组(对照组基础上加NaHS至最适浓度)、SB组(DMSO组基础上加SB203580至最适浓度)、SB+NaHS组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定SB203580及H2S对HSC的增殖抑制率(IR);Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测HSC凋亡率;逆转录PCR法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达。结果 SB组(7.64±2.46)、SB+NaHS组(12.71±2.73)细胞凋亡率高于对照组(1.70±0.88),且SB+NaHS组高于SB组(均P<0.05);DMSO组(2.07±1.18)、NaHS组(2.56±1.23)与对照组差异无统计学意义。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA在各组细胞中均表达,其中NaHS组表达高于对照组(P<0.05),且表达量最多,条带最亮、最宽,SB组与SB+NaHS组表达低于对照组和NaHS组(P<0.05),表达量较少,条带较暗。结论 H2S激活P38MAPK信号通路,且SB203580特异性阻断P38MAPK信号通路后,H2S刺激的HSC增殖受到抑制,凋亡得到促进。

p38蛋白激酶抑制剂SB203580对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)抑制剂SB203580对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用。方法健康雄性SD大鼠60只,随机均分为3组:假手术组、重症胰腺炎组(模型组)、p38MAPK抑制剂SB203580+重症胰腺炎组(抑制剂组),12 h后取左肺下叶测组织湿/干重比,用Western印迹法检测右肺上叶环氧合酶(COX)-2、基质金属蛋白酶(MMP)9、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和磷酸化p38(p-p38)蛋白的表达,右肺下叶行病理学观察。结果与假手术组比较,模型组肺组织湿/干重比明显增加(P<0.05),肺组织p-p38、i NOS、MMP9、COX-2蛋白表达明显增高(P<0.05),与模型组比较,抑制剂组肺组织湿/干重比明显降低(P<0.05),p-p38、i NOS、MMP9、COX-2蛋白表达量明显(P<0.05)。结论 P38抑制剂SB203580通过减轻肺组织中p-p38、MMP9、i NOS和COX-2的表达,从而减轻肺组织的损伤。

白藜芦醇联合SB203580对宫颈癌细胞凋亡迁移的影响及机制

目的探讨白藜芦醇联合SB203580对宫颈癌细胞凋亡迁移的影响及机制。方法培养人宫颈癌HeLa细胞,CCK8实验检测不同浓度白藜芦醇作用于细胞48 h后对细胞增殖影响,挑选最佳作用浓度。将细胞分为四组,即对照组(A组):不做处理;SB203580组(B组),加10μmol/L SB203580;白藜芦醇组(C组),加60μmol/L白藜芦醇;白藜芦醇组+SB203580组(D组),加60μmol/L白藜芦醇和10μmol/L SB203580。流式细胞仪、Transwell小室检测四组细胞的凋亡率和迁移数,Western blot检测p38、p-p38、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)、B型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果白藜芦醇能显著抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,60μmol/L白藜芦醇抑制了一半的细胞增殖(P<0.001);B组(14.83±1.23)%细胞凋亡率显著低于A组(3.42±0.78)%,细胞迁移数(189.20±7.93)显著高于A组(135.40±7.23);C组(35.57±1.86)%和D组(23.45±1.45)%细胞凋亡率显著高于A组,C组(51.30±5.49)和D组(97.60±6.88)细胞迁移数显著低于A组;D组细胞凋亡率显著高于B组,低于C组,细胞迁移数显著低于B组,高于C组(P<0.001);B组p-p38[(0.087±0.011比0.152±0.014)]、Cleaved-caspase3 [(0.162±0.011比0.093±0.009)]、Bax蛋白表达[(0.191±0.013)比(0.154±0.012)]显著低于A组,Bcl-2蛋白表达[(0.208±0.014)比(0.347±0.015)]显著高于A组;C组和D组p-p38[(0.282±0.016)、(0.201±0.015)]、Cleaved-caspase3[(0.315±0.013)、(0.223±0.012)]、Bax蛋白表达[(0.441±0.015)、(0.294±0.014)]显著高于A组,C组和D组Bcl-2蛋白表达[(0.071±0.010)、(0.156±0.012)]显著低于A组;D组p-p38、Cleaved-caspase3、Bax蛋白表达显著高于B组,低于C组,Bcl-2蛋白表达显著低于B组,高于C组(P<0.001)。p38蛋白表达在各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论白藜芦醇通过调控p38MAPK信号通路抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移,并通过调节Cleaved-caspase3、Bax、Bcl-2促进细胞凋亡。

SB203580与雷帕霉素联合对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的体外抗肿瘤作用

目的观察体外P38MAPK信号通路抑制剂SB203580单独及SB203580联合mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)信号通路抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)对Ishikawa细胞生长、细胞凋亡以及细胞侵袭能力的作用。方法一定浓度梯度的SB203580单独或联合运用雷帕霉素,MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测细胞抑制率、软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞体外成瘤性、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell法检测Ishikawa细胞体外侵袭力的改变。结果SB203580对Ishikawa细胞有抑制生长、降低体外成瘤性、诱导凋亡和降低细胞侵袭能力的作用;在相同条件下,SB203580与雷帕霉素联合的抗肿瘤作用要明显优于SB203580单用。结论SB203580与雷帕霉素可协同抑制人子宫内膜癌细胞Ishikawa的生长、诱导细胞凋亡,并同时抑制Ishikawa细胞的侵袭性,具有良好抗肿瘤前景。

牛磺酸、SB-203580对烧伤后心肌细胞cTnT、TNFα的影响

目的观察p38激酶抑制剂SB203580和牛磺酸对烧伤后心肌细胞心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肿瘤坏死因子α(TNFα)的影响。方法将原代培养的心肌细胞在缺氧、10%烧伤血清条件下培养,建立心肌细胞损伤模型。随机分为A、B、C、D组。A组为对照组,B组加入终浓度为20 mmol/L牛磺酸,C组加入终浓度为10μmol/L的SB203580,D组加入终浓度为20 mmol/L牛磺酸及10μmol/L的SB203580。用酶联免疫法及放射免疫法分别检测各组培养1、3、6、12 h培养液中的cTnT和TNFα。结果从培养3 h开始,B、C、D组培养液cTnT、TNFα水平均比A组低(P均<0.05);D组比B、C组低(P均<0.05),B、C组相比P均>0.05。结论 牛磺酸和SB203580均可降低烧伤后心肌细胞cTnT、TNFα,二者联用具有协同作用。

SB203580对肾缺血/再灌注损伤时细胞凋亡及p38MAPK影响的实验研究

目的 探讨不同时间及不同浓度p38MAPK特异性抑制剂SB2 0 35 80对肾缺血 /再灌注损伤过程中肾功能、细胞凋亡及 p38MAPK活性、表达量、p38MAPK底物的影响。 方法 4 9只大鼠按缺血 /再灌注及给药时间的不同 ,随机分为 7组 ,每组7只大鼠按正交拉丁方表的顺序 ,经尾静脉注射相同体积、不同剂量的SB ,使其在大鼠体内达到不同的浓度。测定BUN和Scr;用TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况 ;Westernblot技术用于蛋白定性及半定量分析。结果 SB可显著减轻大鼠肾缺血 /再灌注损伤造成的Scr和BUN的升高、肾小管上皮细胞的凋亡及 p38MAPK的激活 ,但存在模型、剂量及给药时机的差异 (P<0 .0 5 ) ,缺血前 3h之前给药 ,使其体内血药浓度达到 5 μmol/L左右可取得较好的效果。 结论 SB可显著减轻大鼠肾缺血 /再灌注损伤 ,在缺血前 3h之前给药 ,同时使其血药浓度达到 5 μmol/L左右可取得最佳效果。

P38抑制剂SB203580对大鼠脑缺血再灌注后AQP4表达及脑水肿的影响

目的探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580对大鼠脑缺血再灌注后脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达及脑水肿的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠54只,随机分为假手术组(sham组)、模型组(I/R组)和P38抑制剂组(SB203580组)。用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。模型组与P38抑制剂组分别于造模前15 min舌下静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO,400μg/kg)和P38抑制剂(SB203580,400μg/kg)。缺血2 h再灌注24 h后对大鼠进行神经功能缺损评分,采用HE染色观察大鼠脑组织病理改变,干湿比重法测定缺血半球的脑含水量,Western blot检测磷酸化P38(p-P38)和AQP4蛋白的表达、RT-PCR法检测AQP4 mRNA的表达。结果与I/R组相比,SB203580组大鼠神经功能缺损症状明显改善,缺血侧半球脑含水量明显降低(P<0.05)。I/R组大鼠缺血周边区脑组织p-P38、AQP4蛋白及mRNA的表达分别为2.463±0.138、2.660±0.130及1.065±0.125,高于SB203580组的1.653±0.105、1.771±0.092及0.552±0.069(P<0.05)。结论 P38抑制剂SB203580减轻大鼠脑缺血再灌注后AQP4表达及脑水肿,其机制可能与SB203580抑制P38信号通路的激活降低了下游AQP4的表达有关。

SB203580对IR鼠模型脑组织中神经元凋亡的影响

将120只大鼠随机分为四组。A组12只为对照组,B组12只为假手术组,C、D组各48例均行脑缺血再灌注(IR)。D组于造模前30 min腹腔注射p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580。TUNEL法测定再灌注后2、6、24 h及2 d各组海马CA1区凋亡神经元,免疫组化法检测再灌注后2、6、24 h及2 d各组脑组织中的p38MAPK。C组再灌注后2、6、24 h及2 d缺血侧海马CA1区神经元凋亡数分别为(18.83±3.81)、(53.33±5.28)、(106.83±7.39)、(41.17±4.07)个/HP,D组分别为(10.31±2.18)、(26.33±4.18)、(51.67±4.84)、(19.67±3.34)个/HP,两组各时间点凋亡神经元数相比,P均≤0.05;C组2、6、24 h及2 d脑组织中p38MAPK的OD值分别为0.209±0.031、0.484±0.052、0.364±0.024、0.356±0.036,D组分别为0.101±0.021、0.293±0.018、0.163±0.017、0.143±0.013,两组各时间点OD值相比,P均≤0.05。认为SB203580具有一定的抗神经元凋亡作用,其机制是抑制神经元细胞p38MAPK的降解。

苦参煎与SB203580对p38MAPK信号传导通路的调控影响

目的:探讨苦参煎与SB203580对p38MAPK信号传导通路的调控影响。利用苦参煎与SB203580抑制p38 MAPK信号传导通路,来证明中药对基因转录表达具有一定的调控作用。方法:模拟血管内膜损伤术,采用ELISA方法检测188只Webster大鼠血清中P38MAPK的水平含量。将其随机平均分为正常对照组、假手术组、生理盐水组、苦参煎组和SB203580组。结果与结论:中药苦参煎有着与SB203580相同的功效,即对P38MAPK的显著抑制作用。所以对血管内皮有比较明确的保护作用,能干扰MAPK信号传导通路,既能减轻内皮损伤后的炎性细胞释放反应,也能使再生的内皮某些功能得到恢复,有利于内皮细胞结构和功能恢复,防止炎性因子对细胞的损害。

SB203580对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨SB203580对大鼠隐睾所致生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为隐睾组、隐睾+SB203580(p38MAPK抑制剂)组、隐睾+溶媒组、假手术组。复制单侧隐睾模型,术后分别腹腔内注射溶媒或SB203580。7 d后快速断颈椎处死,TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术(FCM)检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡,免疫组化观察各组右侧睾丸磷酸化p38MAPK蛋白表达的变化。结果:FCM及TUNEL法均显示隐睾+ SB203580组生精细胞凋亡指数低于隐睾组和隐睾+溶媒组,同时磷酸化p38MAPK蛋白表达减少。结论:SB203580能降低p-p38MAPK蛋白表达并抑制热压诱导的生精细胞凋亡。

P38MAPK抑制剂SB203580对高糖诱导HK-2细胞转分化的影响

目的探讨不同浓度P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)抑制剂SB203580在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的机制及其较佳作用浓度。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2)并分为对照组(5.5 mmol/L GS)、DMSO组(5.5 mmol/L GS+30μmol/L SB203580等体积的DMSO)、高糖组(30mmol/L GS),以及30 mmol/L GS+5、10、20、30μmol/LSB203580处理的S5、S10、S20及S30组,干预48 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);选取对照组、高糖组、S30组,Western blot法检测P38MAPK、P-P38MAPK及α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达、免疫荧光法检测α-SMA的表达。结果 (1)与对照组相比,DMSO对HK-2细胞增殖无显著抑制作用(P>0.05);高糖组、S5组HK-2细胞增殖增多(P<0.05);S20、S30组HK-2细胞增殖减少(P<0.05)。与高糖组相比,S5、S10、S20、S30组细胞增殖均受到抑制(P<0.05)。(2)与对照组相比,高糖组、S30组P-P38MAPK表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组P-P38MAPK的表达量降低(P<0.05)。3组P38MAPK表达量无显著差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,高糖组、S30组α-SMA表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组α-SMA表达量降低(P<0.05)。结论 30 mmol/L GS可以诱导HK-2细胞TEMT;30μmol/L SB203580是抑制HK-2细胞TEMT的较佳抑制浓度,SB203580可能通过下调P-P38MAPK表达,从而抑制HK-2细胞增殖及胞浆中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。

SB203580对急性肺栓塞后肺动脉高压及MCP-1表达的影响

目的:观察单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)与急性肺栓塞(pulmonary thromboembolism,PTE)后肺动脉高压形成的关系;探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)特异性抑制剂SB203580对急性PTE后肺动脉高压及MCP-1表达的影响。方法:采用自体血栓回输法复制Sprague-Dawley大鼠急性PTE模型;将大鼠随机分成5组,每组观察1 h、4 h和8 h 3个时点;急性PTE模型复制前1 h,分别对MCP-1中和抗体C1142组及SB203580组进行药物预处理;在1 h、4 h和8 h检测各组肺动脉平均压力(mean pulmonary artery pressure,MPAP)和MCP-1 mRNA及蛋白表达。结果:(1)在相同时点,急性PTE组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较溶剂对照组显著升高(P<0.05);(2)在相同时点,C1142组及SB203580组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较急性PTE组显著降低(P<0.05)。结论:(1)急性PTE后MCP-1的大量表达参与急性PTE性肺动脉高压的形成;(2)SB203580可能通过p38 MAPK信号转导通路,下调MCP-1表达,降低急性PTE肺动脉压力。

SB203580对小鼠造血组织辐射损伤的保护作用

目的观察SB203580对接受γ射线照射的C57BL/6小鼠造血组织损伤的保护作用。方法小鼠随机分为对照(Ctr)组、照射(IR)组及SB203580给药(SB)组,以6.0 Gy 137Csγ射线全身均匀照射SB组和IR组的C57BL/6小鼠。收集并计数外周血红细胞、白细胞和血小板,以及单侧股骨骨髓有核细胞(BMMNC);骨髓细胞半固体培养法检测BMMNC增殖能力。另外收集小鼠BMMNC,同样分组,IR组与SB组细胞进行1 Gy体外照射,照射之后孵育过夜,酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果 SB组外周血白细胞、血小板的数量分别比IR组高111.8%和157.7%(P<0.05);SB组BMMNC较IR组高135.4%,CFU-GM高188.5%(P<0.05);SB组BMMNC内ROS较IR组低56.2%(P<0.05)。结论 SB203580对照射造成的小鼠造血组织损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能与其降低照射后细胞内ROS水平有关。

SB203580减轻体外循环肺组织炎症介质产生的实验研究

目的研究体外循环肺组织中P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)的变化对肺组织炎症反应的作用及其机制。方法54只SD大鼠随机分为3组:全麻开胸组(S组)、体外循环组(CPB组)、体外循环+SB203580组(SB组)。不同时间段处死动物,留取标本,Western blotting检测肺组织中P38MAPK、磷酸化P38MAPK,EMSA检测核因子(NF)-κB的DNA结合活性变化,ELIASA分别检测TNF-α和IL-1β产量。结果CPB组磷酸化P38MAPK较S组增加,NF-κB活性水平也较S组明显增加,肺组织中TNF-α和IL-1β产量增加。SB203580减轻了肺组织中磷酸化P38MAPK活性水平,减少了肺组织中炎症因子的产生。结论(1)P38MAPK通过影响NF-κB的激活而参与体外循环术后肺组织炎症因子的产生;(2)SB203580通过阻断P38MAPK的激活而减轻体外循环术后肺炎症因子的产生。

SB203580对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的干预

目的:探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响。方法:30只SD大鼠随机分为3组:假手术对照(control,C)组,肺缺血/再灌注(I/R)组,肺缺血/再灌注+SB203580(S组);TUNEL法检测肺组织细胞凋亡的改变;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达;电镜观察肺组织形态学改变。结果:I/R组与C组比较,Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达均明显上调(均P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著下降(P<0.01),凋亡指数(AI)显著增高(P<0.01),肺组织超微结构明显异常;使用SB203580后,Bcl-2蛋白表达上调(P<0.01),Bax蛋白表达下调(P<0.01),Bcl-2/Bax比值上升(P<0.01),AI显著下降(P<0.01),肺组织超微结构异常改变不同程度减轻。结论:SB203580可通过上调Bcl-2蛋白的表达、下调Bax蛋白的表达、调控Bcl-2/Bax蛋白之间的平衡而减轻细胞凋亡,对肺缺血/再灌注损伤发挥积极的防治作用。

SB203580对大鼠肝星状细胞凋亡及bcl-2蛋白表达影响

目的:通过观察P38MAPK信号传导通路特异抑制剂SB203580对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)凋亡和bcl-2蛋白表达的影响,探讨P38MAPK信号传导通路与bcl-2蛋白在HSCs中的作用,为肝纤维化的治疗提供理论依据。方法:不同浓度SB203580处理乙醛刺激的HSC-T6,利用MTT法检测SB203580对细胞的抑制作用,ELISA酶联法检测细胞凋亡情况,Western blot法观察bcl-2蛋白表达水平。结果:SB203580抑制乙醛刺激的HSC-T6存活和诱导其凋亡,呈剂量依赖性(F=13.388和F=155.351,P<0.01);随着SB203580浓度增加,bcl-2蛋白表达逐渐降低(F=691.470,P<0.01)。结论:不同浓度SB203580能诱导乙醛刺激的HSC-T6凋亡,其作用机制可能与下调bcl-2蛋白表达有关。

SB203580对脑缺血再灌注损伤后基质金属蛋白酶9表达的影响

目的:通过检测抑制剂SB203580对缺血侧大脑皮质p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,探讨p38MAPK是否可以影响MMP-9的表达而参与高血脂加重脑缺血再灌注损伤。方法:喂食高脂饲料建立高脂血症动物模型,模型成功后随机分为抑制剂SB203580预处理的脑缺血2h再灌注24h组(SB组)、DMSO组、sham+SB组和sham+DMSO组,然后采用线栓法建立脑缺血再灌注模型。神经行为学评分观察神经行为损伤症状,TTC染色检测梗死灶体积,伊文思蓝染色检测血脑屏障通透性,免疫印迹检测p38MAPK和MMP-9表达水平,反转录PCR检测MMP-9mRNA水平。结果:与假手术组比较,SB组和DMSO组p38MAPK和MMP-9表达均明显增高。与DMSO组比较,SB组p38MAPK和MMP-9表达明显降低,差异有统计学意义。且SB组MMP-9mRNA水平较DMSO组明显降低,神经行为损伤程度、梗死灶体积和血脑屏障通透性亦明显降低,差异均有统计学意义。结论:高脂血症脑缺血再灌注损伤中,p38MAPK可上调MMP-9表达,促进细胞凋亡的发生及增加血脑屏障通透性,进而加重脑缺血再灌注损伤。