SBP2基因突变小鼠模型的制备及甲状腺表型分析

目的构建硒代半胱氨酸插入序列结合蛋白2(SBP2)突变型转基因小鼠模型,并分析其甲状腺表型。方法利用同源重组工程技术建立Sbp2基因突变敲入打靶载体,Southern blot筛选阳性胚胎干细胞克隆,利用显微注射法制备嵌合体小鼠,经育种后获得F3代小鼠。采用充足硒饲料和低硒饲料喂养F3代小鼠60 d,喂养30 d及60 d时采用放射性免疫法测定其甲状腺功能。结果Sbp2 R129X和R775X突变敲入打靶载体电转入胚胎干细胞后分别获得12个和23个阳性克隆,经Southern blot筛选后通过显微注射法分别获得36只Sbp2 R129X和27只Sbp2 R775X嵌合体雄鼠,育种结果显示纯合突变和复合杂合突变的F3代小鼠均在胚胎期死亡。充足硒饲料喂养下Sbp2 R129X和R775X杂合突变小鼠的甲状腺功能与野生型小鼠相比差异无统计学意义,而低硒饲料喂养下R775X杂合突变雌鼠的血清T4、雄鼠的血清rT3,以及雌鼠和雄鼠的T4/T3比值均显著增高(P<0.05)。结论成功建立了Sbp2 R129X和R775X基因突变敲入小鼠模型,低硒诱导下R775X杂合突变小鼠可模拟SBP2缺陷患者的甲状腺表型。

基于IEEE 1394b总线的存储系统设计

提出了一种基于IEEE 1394总线的存储系统设计方法,该存储系统是由主机端、传输总线、存储卡端组成。设计了基于IEEE 1394总线存储系统的系统架构、硬件环境、IEEE1394 b协议模型、SBP-2协议模型、ATA块设备驱动模型和文件系统。按该设计实现的存储系统经测试和试验验证证明能实现可靠的数据存储,可充分发挥IEEE 1394b总线及SBP2协议的优势。该设计有效可行,可应用于实际工程项目或作为同类设备研制的重要参考。

硒和蛋白质与大鼠心肌GPX1、GPX4表达及翻译

目的研究硒和蛋白质对大鼠心肌GPX1、GPX4表达及其翻译过程的影响。方法 60只雄性Wistar大鼠按硒与蛋白质两因素两水平的析因设计随机分为四组,饲养一年后处死,western blot方法检测心肌GPX1、GPX4和SBP2蛋白表达水平;RT-PCR方法扩增心肌GPX1、GPX4 mRNA上SECIS序列,SSCP法确定其基因型后进行碱基序列测定。结果低硒组心肌组织GPX1、GPX4含量低于常硒组(P<0.001;P<0.05),SBP2含量高于常硒组(P<0.05);低蛋白组心肌组织GPX1含量低于常蛋白组(P<0.001),SBP2含量高于常蛋白组(P<0.05);硒与蛋白质在影响心肌GPX1表达方面有交互作用(P<0.001);GPX1、GPX4基因的SECIS碱基序列并未发生变异。结论在低硒低蛋白条件下,心肌GPX1和GPX4含量显著降低,而SBP2含量则增加;GPX1、GPX4基因的SECIS碱基序列并未发生变异。