合肥地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型及耐药性分析

目的 研究合肥地区临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)携带mec基因簇的葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)分型及药物敏感性,了解合肥地区MRSA流行株的耐药表型和分型特征。方法 从5所教学医院随机选取2016年1月至2021年12月的264株非重复MRSA菌株,利用头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA,采用PCR扩增mec A基因,采用多重PCR进行MRSA的SCCmec分型分析。采用WHONET 5.6软件分析不同SCCmec型别MRSA菌株对抗菌药物的敏感性。结果 264株MRSA菌株中,SCCmecⅡ型156株(59.1%),Ⅳa型92株(34.8%),Ⅲ型4株(1.5%),12株(4.5%)未分型。SCCmecⅡ型和Ⅳa型MRSA对达托霉素、替加环素、利奈唑胺和万古霉素的敏感率均为100.0%。SCCmecⅡ型MRSA对环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和庆大霉素的耐药率高于SCCmecⅣa型,差异均有统计学意义(P均<0.05)。不同分型的MRSA菌株对红霉素、克林霉素、四环素、复方磺胺甲唑和利福平的耐药率差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 合肥地区MRSA菌株SCCmec分型以Ⅱ型和Ⅳa型为主,不同分型MRSA对某些抗菌药物的耐药性存在差异,动态监测这类细菌的分型和药物敏感性有一定临床意义。

SCCmec遗传元件及其在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型中的应用

携带mec基因簇的葡萄球菌盒式染色体(Staphylococcal chromosome cassette mec,SCCmec)遗传元件的获得是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)耐药的主要原因。SCCmec由一个mec基因簇、一个染色体重组酶(ccr)基因簇及3个J区组成。mec基因簇含有mec A及其调控基因,mec A基因编码的耐药决定簇使MRSA对β-内酰胺类抗生素耐药;ccr基因簇编码的重组酶负责SCCmec元件的整合与切离;J区差异大,导致不同来源MRSA菌株携带SCCmec的大小不一,在组成上也具有多样性。这些特征为利用SCCmec元件进行MRSA分型创造了条件。文章介绍了SCCmec元件的结构和功能,综述了基于SCCmec的MRSA分型研究。

猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及其SCCmec基因分型研究

为了解陕西猪场耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药表型及其SCCmec基因型分布情况,我们于2009年1月～7月在陕西地区6个规模化猪场,采集鼻腔拭子共计173份,利用选择性培养基分离金黄色葡萄球菌(SA),采用多重PCR方法扩增其中是否含有nuc基因和mecA基因进行MRSA鉴定;以琼脂稀释法进行药敏试验;并通过多重PCR方法对SCCmec进行基因分型。结果显示,调查的6个猪场中有2个猪场分离到MRSA,共分离到83株SA,其中有14株(16.9%)为MRSA,均为SCCmec-IVb型;药敏结果显示MRSA除对CFP、CHL、AMK和VAN敏感外,对CIP、OXA耐药率分别为57.1%和92.6%,对FOX、TET、ERY、甲氧嘧啶和卡那霉素的耐药率均为100%。结果显示了猪源SCCmec-IVb型MRSA株具有多重耐药特点,与人源SCCmec-IV型MRSA株耐药谱存在较大差异,这一结果提示猪源MRSA容易通过猪及其产品感染人。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及SCCmec分型

目的了解上海市普陀区人民医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药情况及SCCmec型别,为预测耐药菌株的发展趋势、为临床预防和治疗MRSA感染提供理论依据。方法收集该院2012年1月至2016年12月临床分离的MRSA共380株,采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验,采用多重聚合酶链反应检测SCCmec型别。结果所有菌株对利奈唑胺、万古霉素均敏感,敏感率为100.0%;对利福平、复方磺胺甲噁唑耐药率较低,分别为5.0%和7.6%;对红霉素、左氧氟沙星、四环素高度耐药,耐药率分别是100.0%、94.2%、93.4%和90.0%;对青霉素耐药率为100.0%。380株MRSA有SCCmecⅡ型281株(73.9%),SCCmecⅢ型59株(15.5%),SCCmecⅣa型5株(1.3%),另有35株(9.2%)未能分型。结论上海市普陀区人民医院分离的MRSA标本以SCCmecⅡ型为主,具有多重耐药的特征,不同SCCmec型别的耐药谱有所差异。

猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药表型及其SCCmec基因分型研究

目的了解上海猪场及屠宰场耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行状况、耐药谱特征及其SCCmec基因分型特点。方法我们于2011年8月—2012年5月分别在上海市5个规模化猪场和1个屠宰场,采集猪鼻腔拭子样品共计232份。通过7.5%氯化钠肉汤预增菌,显色培养基显色培养分离金黄色葡萄球菌(SA),采用双重PCR方法扩增其中是否含有nuc基因和mecA基因进行MRSA鉴定;以肉汤稀释法进行药物敏感性试验;应用多重PCR方法进行SCCmec基因分型;同时检测杀白细胞素(PVL)基因。结果共计分离得到139株SA,其中70株MRSA,MRSA的检出率为30.2%(70/232)。基因分型显示均为SCCmecⅣb型,未检测到PVL基因,药敏结果显示MRSA除对利奈唑胺,万古霉素,阿米卡星全部敏感外,对头孢噻呋,庆大霉素,诺氟沙星耐药率分别为74.3%,62.9%和42.9%,对阿奇霉素,红霉素,氟苯尼考,氯霉素,苯唑西林的耐药率均为100%,值得注意的,本研究中分离的全部MRSA都对截短侧耳类药物泰妙菌素、沃尼妙林以及人医新药瑞他帕林表现高水平耐药。结论结果显示了上海地区猪源MRSA主要流行SCCmecⅣb型,并且具有多重耐药的特点,尤其对截断侧耳类人医新药全部耐药,这也提示我们要防控动物源耐药菌或耐药基因通过食物链或者环境向人类的传播的潜在风险。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的两种新SCCmec型别及其抗药性研究

为探明本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的耐药性、流行病学分布状况及携带的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)型别,用K-B琼脂扩散法、E-test和多位点PCR,对临床分离的金黄色葡萄球菌菌株进行了SCCmec分型及耐药性测定。结果发现了两种新的SCCmec型别,新1型含Ⅱ型的mecA上游特异性位点B和位于mecA内的M位点以及Ⅲ型的下游位点F,缺乏Ⅱ型上游位点C和下游位点D、G;新2型含Ⅰ、Ⅱ型的上游特异性位点A、B和两个Ⅲ型的下游位点F、H,同样缺乏位点C、D、G,可能分别为原有Ⅱ型和Ⅰ、Ⅱ型与Ⅲ型的基因重组株;且携带有新SCCmec型别的MRSA菌株,其流行病学分布特点及抗药性也与国外已报导的菌株不同,多分自门诊病人,且耐药性高,抗药谱广,值得引起高度重视和关注。

62株临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型及耐药性分析

目的了解医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的SCCmec基因型别及耐药特征。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术检测MRSA菌株的mecA基因并对其进行分型,应用E-test法测试MRSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、左氧氟沙星和利福平5种药物的MIC值。结果 62株MRSA的mecA基因全部阳性,SCCmecⅢ型60株,SCCmecⅣa型1株,还有1株用本实验方法未能分型。药敏试验显示所检菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感,对左氧氟沙星和利福平的耐药率分别为96.8%和82.3%。结论该院以SCCmecⅢ型为主要流行类型,治疗MRSA仍首选万古霉素等糖肽类抗菌药物。

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究

目的对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据。方法采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因。结果药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0%,对克林霉素耐药率为58.8%,对复方磺胺类耐药率为13.8%,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75%、SCCmecⅢ型(13.75%)、SCCmecⅤ型(12.5%)。Spa分型,28株为t2460型(35%)、9株为t002型(11%)、6株为t030型(8%)、7株为t632型(9%)、5株为t037型(6%),其他Spa型相对分散。pvl基因阳性率为7.5%(6株),tsst基因为阴性。结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MRSA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性,SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MRSA的SCCmec基因型、PVLT、SST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主(47.2%),PVL基因均为阴性,12株(22%)MRSA TSST-1阳性。结论53株MRSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。

社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型及药敏结果

目的了解某院门诊和住院患者标本分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)盒式染色体基因(SCCmec)型别以及CA-MRSA耐药性。方法收集该院2011年5月—2015年8月分离的MRSA及其相关病史资料,利用聚合酶链反应(PCR)方法进行MRSA的mecA基因和CA-MRSA的SCCmec基因分型检测,对CA-MRSA进行药物敏感性试验并进行统计分析。结果共收集MRSA 305株,其中mecA阳性296株。CA-MRSA88株,占29.73%(88/296),其中48株为SCCmecⅣ型,36株为SCCmecⅤ型,4株未定型。药敏试验显示,CA-MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替加环素均100%敏感,对青霉素和苯唑西林100%耐药;SCCmecⅣ和Ⅴ型CA-MRSA对左氧氟沙星、利福平、环丙沙星的耐药率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SCCmecⅣ、Ⅴ型CA-MRSA对氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、红霉素的耐药率均>58%。结论该院CA-MRSA的SCCmec分型以Ⅳ和Ⅴ型为主,且耐药率较高,临床医生应对此高度重视,根据药敏结果合理应用抗菌药物。

SCCmec相关的psm-mec在血液来源人葡萄球菌中的基因定位

目的了解SCCmec相关的psm-mec基因在血液来源人葡萄球菌中的基因定位特征,为深入研究psm-mec基因在人葡萄球菌中的功能奠定基础。方法收集临床血培养分离的人葡萄球菌25株,通过PCR扩增mecA基因和psm-mec基因,多重PCR对耐甲氧西林人葡萄球菌SCCmec分型,PCR扩增mecR1/psm-mec基因与psm-mec/xylR基因间隔序列及fudoh基因,探究psm-mec基因在SCCmec上的定位特点。结果 PCR检测显示,21株为耐甲氧西林人葡萄球菌,psm-mec基因的检出率为47.6%,4株为甲氧西林敏感人葡萄球菌,未检出psm-mec基因。多重PCR结果显示,10株psm-mec基因阳性菌株中,2株属典型SCCmecⅢ型,5株属类SCCmecⅢ型,3株属SCCmec新型别。基因间隔序列和fudoh基因检测显示,10株psm-mec基因阳性人葡萄球菌中,mecR1/psm-mec基因和psm-mec/xylR基因及fudoh基因均阳性。结论 SCCmec相关的psm-mec基因广泛存在于血液来源的人葡萄球菌中,主要分布在典型SCCmecⅢ型、类SCCmecⅢ型和SCCmec新型别上,定位于mecR1基因与xylR基因之间。

临床分离携带psm-mec基因耐甲氧西林表皮葡萄球菌的SCCmec型别分析

目的探讨临床分离携带psm-mec基因耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)的SCCmec型别。方法收集临床分离并经全自动微生物鉴定系统准确鉴定的表皮葡萄球菌165株,通过PCR扩增esp和mecA基因准确鉴定MRSE,扩增psm-mec、fudoh和p221片段鉴定携带psm-mec菌株。采用多重PCR对携带psm-mec基因的MRSE的mec、ccr和SCCmec进行分型。结果 138株MRSE菌株中,29株携带psm-mec基因,携带率为17.58%。多重PCR对mec和ccr分型结果显示,携带psm-mec基因MRSE均为Class A mec,但ccr型别存在明显的多样性。多重PCR对SCCmec分型结果显示,所有菌株均可扩增出Ⅱ型和/或Ⅲ型SCCmec条带,且为混合型别。结论临床分离携带psm-mec基因的MRSE的SCCmec具有同源性,以含Class A mec的携带Ⅱ型和/或Ⅲ型SCCmec为主。

葡萄球菌属中交换基因的载体——SCCmec

MRSA在世界范围内广泛蔓延,是医院感染最常见的病原菌之一。一种具有移动能力的新型基因元件SCCmec携带mecA基因,并通过位点特异性重组作用整合到葡萄球菌属的染色体上,使金葡菌携带上mecA基因,产生对β-内酰胺类抗生素的耐药作用。SCCmec共分为5种类型和多种亚型,不同类型的SCCmec其基因构件也不同,适应不同环境。I、II和III型SCCmec携带多个耐药基因,其多重耐药的表型适合于医院环境;IV和V型SCCmec一般比较轻便,该类MRSA能获得较快的生长速率,适合于社区环境。在国际上,不同地区或不同环境流行的MRSA有多种类型,可以分为5大组(CC5、CC8、CC22、CC30和CC45)。不同的MR-SA流行株是通过获得不同类型的SCCmec,经过不同途径进化而来的。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型研究

目的检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型,初步了解MRSA分子流行病学特征,从而进一步指导临床感染MRSA的治疗,更好地控制MRSA引起的感染,并减少耐药株的出现。方法以MRSA菌株65株为研究对象,使用多重PCR扩增技术检测SCCmec基因分型,PCR产物进行琼脂糖电泳凝胶检测,阳性株进行基因测序,与目的基因进行比对。结果65株MRSA的SCCmec基因分型均为Ⅲ型。结论我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型,均为SCCmec-Ⅲ型,尚未发现CA-MRSA菌株。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及SCCmec基因分型研究

目的了解大连地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其葡萄球菌盒染色体SCCmec的基因型特点。方法采用纸片扩散法检测MRSA对抗菌药物的耐药性;聚合酶链反应(PCR)对SCCmec进行基因分型。结果分离出的38株MRSA菌株均具有多重耐药性,但对万古霉素和氯霉素较为敏感。SCCmec基因型以Ⅱ型最为常见,占86.84%;其次为Ⅲ型,占10.53%;未定型的占2.6%。结论大连地区分离出的MRSA具有多重耐药的特征,SCCmec基因型以Ⅱ型为主。

成都地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型的研究

目的研究成都地区2013至2014年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型,了解本地区现阶段主要流行株的分子流行病学特征及耐药现状。方法采用PCR方法对86株MRSA菌株的SCCmec进行基因分型;采用微量肉汤稀释法对86株MRSA进行药敏试验。结果 86株MRSA的基因分型为:SCCmecⅠ型3株,SCCmecⅡ型5株,SCCmecⅢ型63株,SCCmecⅣ型3株,SCCmec V型1株,未分型11株。SCCmecⅡ、Ⅲ型MRSA菌株对大多数抗菌药物均呈不同程度耐药。结论目前成都地区MRSA菌株的SCCmec基因型呈多态性分布,其中Ⅲ型仍为主要流行菌株;Ⅲ型MRSA菌株的耐药表型随时间的迁移而发生改变。

SCCmec相关的psm-mec在血液来源人葡萄球菌中的分布

目的探讨SCCmec相关的psm-mec在血液来源人葡萄球菌中的分布,了解人葡萄球菌的分子特征。方法收集血培养阳性并经过全自动微生物鉴定系统准确鉴定的人葡萄球菌25株,通过PCR扩增mecA和psm-mec基因,采用多重PCR对耐甲氧西林人葡萄球菌SCCmec分型,分析psm-mec在人葡萄球菌中的分布。结果 PCR扩增结果显示,21株为耐甲氧西林人葡萄球菌,4株为甲氧西林敏感人葡萄球菌;耐甲氧西林人葡萄球菌psm-mec基因的检出率为47.6%,甲氧西林敏感人葡萄球菌中未检出psm-mec基因。多重PCR结果显示,21株mecA阳性人葡萄球菌中,3株属SCCmec类I型,1株属SCCmecⅢA型,1株属SCCmecⅢB型,4株属SCCmec类IIIA型,1株属SCCmec类IIIB型,3株属SCCmec类Ⅳ,8株属SCCmec新型别。在psm-mec阳性菌株中,1株分布于SCCmecⅢA,1株分布于SCCmecⅢB,4株分布于SCCmec类IIIA,1株分布于SCCmec类IIIB,3株分布于SCCmec新型别。结论 SCCmec相关的psm-mec广泛存在于血液来源的耐甲氧西林人葡萄球菌中,主要分布于SCCmecⅢ型、类III型和SCCmec新型别。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型方法的比较

目的:比较两种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)SCCmec分型方法的分型效果,为MRSA的SCCmec分型选择合适的方法。方法:分别用2002年Oliveira的多重PCR方法和2005年Zhang的多重PCR方法对30株MRSA菌株进行SCCmec分型。结果:两种分型方法分型效率经统计学检验差异无显著性,但各有优缺点。结论:MRSA菌株SCCmec的地区性差异仅通过一种方法不能很好地鉴别,SCCmec分型研究应结合实际选择合适的分型方法。

深圳东部地区耐甲氧西林葡萄球菌SCCmec基因型分析

目的了解深圳东部地区耐甲氧西林葡萄球菌的流行现况,并探讨分析MRS所携带SCCmec主要的基因亚型,为MRS流行病学调查及其防控提供理论依据。方法头孢西丁琼脂稀释法对MRS进行筛查,PBP2a进行表型确证,并用PCR法进行SCCmec分型,确认MRS所携带的SCCmec亚型。结果 1093例葡萄球菌临床分离株中共检出127例为MRS,占11.62%,除氨苄西林、青霉素、万古霉素3种抗生素外,MRS对其他抗生素的耐药性均较甲氧西林敏感葡萄球菌高,且有66.9%的MRS表现为多重耐药。SCCmec基因分型共检出Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ3个亚型,检出例数分别为20株(15.75%)、97株(76.38%)和10株(7.87%),Ⅱ、Ⅲ型菌株对多种β-内酰胺类抗生素耐药,对利福平的耐药率均较低,对万古霉素完全敏感,其中Ⅲ型MRS菌株有76例表现为多重耐药,耐药率明显高于Ⅱ、Ⅳ型MRS菌株。结论本地区临床分离的MRS所携带的SCCmec基因以Ⅲ型为主,且具有对抗生素多重耐药的特性。