腺苷受体拮抗剂对加压培养的视网膜Müller细胞钾离子通道的调控作用

目的阐明腺苷受体拮抗剂SCH442416对体外加压的视网膜Müller细胞的钾离子通道的调控作用。方法出生后5 d的SPF级SD大鼠30只，将大鼠的视网膜Müller细胞分离和培养，分为正常对照组（正常培养）、加压培养组[40 mmHg/24 h加压培养（1 mmHg＝0.133 kPa）]和腺苷＋SCH442416干预组（40 mmHg/24 h加压培养后加入10 μmol/L腺苷＋100 nmol/L SCH442416培养）。对大鼠视网膜Müller细胞体外加压40 mmHg/24 h培养，采用real-time PCR、Western blot等方法研究离体加压培养的视网膜Müller细胞的钾离子通道Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的表达变化情况。体外加压培养的视网膜Müller细胞给予腺苷＋腺苷A2A受体拮抗剂SCH442416进行干预（药物终浓度为腺苷10 μmol/L＋ SCH442416 100 nmol/L），检测视网膜及Müller细胞Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的mRNA和蛋白的表达变化。结果40 mmHg/24 h加压培养可致视网膜Müller细胞钾离子通道Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的蛋白表达下调，与正常对照组相比分别下降了14.7%、38.6%和52.6%，2个组Kir2.1蛋白的表达差异无统计学意义（P＝0.082），Kir4.1和TASK-1蛋白的表达差异均有统计学意义（P＝0.000、0.000）；腺苷＋ SCH442416干预组视网膜Müller细胞Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的蛋白表达较加压培养组上调，分别上升了8.8%、60.7%和61.4%，2个组Kir2.1蛋白表达比较差异无统计学意义（P＝0.354），2个组Kir4.1和TASK-1的蛋白表达比较，差异均有统计学意义（P＝0.000、0.000）。40 mmHg/24 h加压培养可致视网膜Müller细胞Kir2.1、Kir4.1和TASK-1 mRNA表达较正常对照组下调，差异均有统计学意义（P＝0.047、0.001、0.000）；与加压培养组相比，腺苷＋ SCH442416干预组Kir4.1和TASK-1的表达均上调，差异均有统计学意义（P＝0.038、0.030），而Kir2.1的表达无明显变化，差异无统计学意义（P＝0.612）。结论SCH442416对视网膜Müller细胞Kir4.1和TASK-1的蛋白和mRNA表达具有调控作用。