不同SDS-PAGE分离胶浓度条件下大豆贮藏蛋白亚基的分辨效果

采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度分别为9%、10%、11%、12%、13%的凝胶系统,探讨不同分离胶浓度条件下大豆籽粒主要贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基的分辨效果。结果表明,分离胶浓度大小对大豆贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基电泳图谱分辨率的影响非常明显。分离胶浓度为9%和10%时,7S组分亚基(α′、α和β)分辨效果较好;分离胶浓度为13%时,11S组分各亚基(A3、A4A2、A1aA1b、A5、B3、B1aB1bB2和B4)分辨效果较好。如需获得较好的7S和11组分亚基综合分辨效果,以分离胶浓度为12%的凝胶系统为佳。

燕麦麸蛋白质的Osboren分类及SDS-PAGE电泳分析

根据微量凯氏定氮法测定了燕麦麸中蛋白质含量,40～60目之间的燕麦麸蛋白质含量最高,平均为19.42%;并对其进行Osboren蛋白质分类以及分类后各类蛋白质组分含量的测定,结果表明,燕麦麸中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白占蛋白质总量依次为63.40%、15.18%、8.18%、13.24%。SDS-PAGE电泳分析各类蛋白的组成结果表明,燕麦麸中清蛋白含量最高且蛋白质亚基分布广泛。清蛋白必需氨基酸含量高,溶解性好,易于消化吸收,为优质的营养蛋白。

适于SDS-PAGE分析的苹果叶片蛋白质提取方法

为探索苹果叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、改良的Tris-HCl法、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法及Tris-HCl法等5种蛋白质的提取方法。制备的样品经SDS-PAGE分离采用银染显色。结果表明,改良的Tris-HCl法在加大PVPP用量和蛋白质提取缓冲液的基础上,将丙酮沉淀蛋白质的时间由30 min增加到1 h,使蛋白质的得率最高为3.243μg/μL,上样量5μL得到的蛋白质条带数量最多,条带最清晰为41条。利用这一改良方法对苹果实生树不同节位蛋白质的动态变化进行了研究,共发现6条蛋白质差异带,分子量分别为71.9,60.5,52.6,41.1,35.3,18.5 kDa,条带清楚,背景清晰。因此,改良的Tris-HCl法适用于苹果叶片的SDS-PAGE分析。

苹果实生树阶段转变特异蛋白质的SDS-PAGE分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS—PAGE）分析了6株苹果实生树（‘红玉’ב金冠’）叶片中蛋白质随节位升高的动态变化。结果表明，随节位升高蛋白质带发生变化，共发现了3条阶段转变特异蛋白质带，分子量分别为55kD、19kD和17kD。其中55kD蛋白质表现为定性变化，有5株实生树在36～75节出现，到101～126节消失；19kD蛋白质在实生树低节位含量高，在86—100节之后含量突然降低；17kD蛋白质在实生树低节位含量低，随着植株的发育蛋白质在36—50节含量突然增加并保持稳定，到91～105节后含量突然下降。认为这3种蛋白质是苹果实生树阶段转变的特异蛋白质。

牛初乳、常乳和免疫乳乳清中主要蛋白的SDS-PAGE分析

采集荷斯坦奶牛初乳、常乳和免疫乳，通过SDS—PAGE电泳对其乳清中的主要蛋白进行分析。结果表明：从SDS—PAGE电泳图谱上可见有5个清晰的条带，自上而下分别为乳铁蛋白、牛血清白蛋白、IgG重链、β-乳球蛋白和α-乳白蛋白。其中32d免疫乳和0～3d初乳可见有IgG轻链，其他乳样IgG轻链条带较弱。0-7d初乳乳清蛋白含量随泌乳天数的增加而逐渐下降，0～5d初乳乳清蛋白含量差异显著，并维持较低水平。免疫乳15和32d各乳清蛋白含量均高于常乳。

HMW-GS的SDS-PAGE图谱在小麦品质评价中的应用

采用SDS-PAGE技术对陕西关中地区各时期大面积推广小麦品种、品种资源和新品系的HMW-GS组成进行了分析.在该地区50多年大面积推广的33个品种中,检测出9种HMW亚基 对 及其组成;品种HMW-GS的评分在5～10分之间,平均6.9分;4个时期品种HMW-GS的平均评分有升有降,优质亚基出现的频率普遍偏低;向小麦品种中聚合多种优质HMW-GS将成为陕西关中未来小麦育种的主要目标之一.53种小麦品种资源的亚基或亚基对组合类型比较丰富,具有一批携带优质亚基5+10、1、2*、7+8、14+15或17+18等资源.8个新选品系中,有4个品系携带了多种优质亚基,其中3个品系HMW--GS的评分为10分;Q1043已被审定通过,目前正在陕西关中推广种植.实践证明,采用SDS-PAGE方法对生产上推广品种、品种资源和新选品系的HMW-GS变异研究,有助于在短时间内了解生产上推广小麦品质生产现状、制订育种目标、选配亲本和品系品质性状筛选,是一种非常实用的品质快速检测方法.

利用SDS-PAGE鉴定水稻品种(组合)的真实性和纯度

利用本实验室完善后的SDS-PAGE,分析了8个水稻品种(组合)的贮藏蛋白,结果表明,品种(组合)间贮藏蛋白带谱表现出明显的多态性;并在实际检验工作中,运用水稻品种(组合)贮藏蛋白SDS-PAGE带谱的多态性,进行了种子的真实性或纯度鉴定。

贵重动物类中药材蛋白质SDS-PAGE的图谱研究

目的:为贵重动物类中药材的真伪鉴别提供科学的依据。方法:用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定人工牛黄、鹿蹄筋、蝮蛇、乌梢蛇、金钱白花蛇及其伪品的主要蛋白质分子量。结果:获得清晰的电泳谱带及相应数据。结论:方法准确、可靠、重复性好,可为蛇类药材、人工牛黄、鹿蹄筋及其制剂的生产、质量控制提供参考。

鸭病毒性肠炎病毒的提纯及其结构蛋白SDS-PAGE分析

将鸭病毒性肠炎病毒（DEV）分离株SC-1经鸭胚成纤维细胞培养增殖后，采用差速离心结合蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯，获得多量、纯净的完整病毒粒子。病毒粒子主要位于40％～50％蔗糖层交界处，电镜下可观察到DEV具有典型的疱疹病毒特征，完整病毒粒子由囊膜、衣壳和核芯3个部分组成，直径为170～190nm。将纯化的DEV粒子经SDS—PAGE分析，发现其结构蛋白由11种多肽组成，即VP1（190000）、VP2（136000）、VP3（106000）、VP4（88000）、VP5（75000）、VP6（68000）、VP7（56000）、VP8（48000）、VP9（42000）、VP10（38000）和VP11（32000）．其中VP1、VP2、VP3、VP6、VP8和VP9等6条蛋白区带的相对百分含量较高，约占病毒结构蛋白总量的89．04％，为DEV的主要结构多肽。

SDS-PAGE电泳技术分析蛋白质的研究

SDS-PAGE是分析蛋白质的一项技术,重点介绍了其原理、凝胶制备及染色方法,并对双向电泳(2-DE)和电泳后蛋白质鉴定方法进行了简单的介绍。

利用SDS-PAGE法检测火腿肠中大豆蛋白的含量

利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）结合凝胶成像来分析测定火腿肠中大豆分离蛋白的含量.试验得出电泳分离肉制品中大豆分离蛋白的优化条件为：浓缩胶为5%、分离胶为12%、上样量为20μL、初始电压为80 V,进入分离胶层后电压100 V.大豆蛋白含量在06%范围内与其酸性A3亚基线性相关,回归方程为Y=2.760 9X-0.383 8,相关系数为0.994 1.

SDS-PAGE染色-脱色方法的改良

在传统的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）技术的基础上，对制备的凝胶进行快速染色-水洗脱色及提高灵敏度的探讨，建立改良的SDS—PAGE染色一脱色法。与传统的方法比较，快速法在不影响检测灵敏度的情况下，大大缩短了分析所需时间，整个分析过程只需40～60min，并且降低了实验成本，有重要的推广价值。提高灵敏度法可检测到0．1～0．5μg蛋白／条带。

SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱法研究人参蛋白热稳定性

目的研究人参蛋白在不同加热温度及时间下的热稳定性。方法采用中性缓冲液抽提和硫铵分级沉淀法提取人参蛋白,在不同加热温度及时间条件下,对人参蛋白进行SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱分析。结果人参蛋白随着加热温度的升高而发生聚集和解聚;在50℃时,人参蛋白会形成可溶性的大分子聚合物,这一聚合物的浓度随加热时间的延长而不断升高。结论人参中各种蛋白亚基的热敏感性各不相同。

大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离体系的建立

为建立和优化大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离技术,从凝胶的浓度、凝胶中乙二醇的使用、上样缓冲液中甘油的浓度、上样量、染色方法等多个方面对Tricine-SDS-PAGE分离效果进行比较研究。结果显示:凝胶质量分数T为18%、交联度C为5%并加入30%(体积分数)乙二醇能分离分子质量低至1.7 ku的大豆多肽,在含30%甘油的上样缓冲液中大豆酶解肽能得到较好的分离,上样量为20μg的分离效果较理想,考马斯亮蓝G-250染色方法能提高大豆低分子多肽电泳的分辨率,同时利用改进的TricineSDS-PAGE电泳技术对不同蛋白酶酶解液的分子质量分布进行了分析。研究结果表明,通过优化的TricineSDS-PAGE电泳技术能够获得较高分辨率的大豆蛋白酶解肽电泳图谱。

蟾蜍和麻蜥肝脏及肺组织中低分子蛋白的SDS-PAGE比较分析

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色法对花背蟾蜍和密点麻蜥肝脏和肺组织中的低分子蛋白质进行了分析.结果表明,花背蟾蜍和密点麻蜥的肝脏和肺组织中蛋白条带分别为21、14、23、16.二者肝脏和肺组织均有各自的特异性条带,且肝脏中蛋白条带多于肺组织.密点麻蜥肝脏和肺组织中蛋白质条带均多于花背蟾蜍.

洗必泰MIC作用下大肠杆菌和金黄色葡萄球菌SDS-PAGE图谱的变化

〔目的〕探讨在洗必泰MIC(最小抑菌浓度 )状态下大肠杆菌 ( 80 99株 )、金黄色葡萄球菌 (ATCC 65 3 8株 )菌体蛋白质SDS -PAGE(十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 )图谱的改变 ,为消毒剂抑菌机理的研究和从蛋白质组角度寻找抑菌靶蛋白提供参考。〔方法〕以消毒试验常用的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌标准菌株为例 ,收集在洗必泰作用下的菌体 ,SDS溶解菌体蛋白 ,SDS—PAGE后 ,对比研究洗必泰MIC、低于MIC以及无洗必泰作用下的菌体蛋白质在SDS—PAGE图谱中所表现出来的差异 ,并对试验的有关影响因素进行了摸索。〔结果〕在洗必泰MIC下 ,金黄色葡萄球菌的四条蛋白带 (分别位于 3 1KD左右、3 1KD和 43KD之间、43KD左右处和大于 97.4KD处 )发生明显变化 ;大肠杆菌的一条蛋白带 (位于 66.2KD与 97.4KD之间 )发生明显变化。〔结论〕菌体蛋白条带在SDS -PAGE图谱中所表现出的变深或变浅的现象 ,提示在洗必泰MIC下菌体蛋白正常表达量的增多或减少。

蜂毒素的SDS-PAGE质控方法研究

目的 建立以 SDS- PAGE进行蜂毒素质量控制的方法。方法 将通过凝胶色谱法从蜜蜂毒中分离纯化所得到的蜂毒素 ,以 SDS- PAGE法测定其相对分子质量 ,并通过凝胶成像扫描测定蜂毒素纯度。结果 蜂毒素样品电泳后在凝胶块上显示为均一条带 ,相对分子质量约为 2 80 0 ,含量为 (90 .5 9± 0 .85 ) % ,与 HPL C测定结果平行。结论 SDS- PAGE法作为蜂毒素的质控方法 ,结果准确、可靠。

改进Tricine-SDS-PAGE法分析重组牛乳铁蛋白肽

为了有效分离3.1kDa乳铁蛋白肽,试验调整分离胶中聚丙烯酰胺浓度及凝胶的交联度,并加入适量甘油,改进了传统的Tricine-SDS-PAGE方法。结果表明,该方法与常规的SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE相比较,改进的凝胶不仅可以有效分离3.1kDa的肽,而且对分子量为212kDa的大分子量蛋白也有很好的分离效果,明显优于常规的SDS-PAGE和现有的Tricine-SDS-PAGE方法。

尿素改善SDS-PAGE分离小分子肽的效果

目的 :探讨尿素对Tricine-SDS -PAGE系统分离小分子蛋白的影响。方法 :利用常规SDS -PAGE和Tricine -SDS - PAGE分离小分子肽 ,比较不同组成的分离胶的分离效果。结果 :调整聚丙烯酰胺凝胶的分子组成 ,使丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的交联度为 5 .0 5 % ,能够改善小分子肽的分离效果。加入 36 %的尿素比加入甘油可以更有效分离 1kD的小肽。但尿素胶聚合太快影响分离效果。结论 :尿素改善SDS -PAGE分离小分子肽的效果 ,制作尿素胶时 ,宜采用低浓度的AP和TEMED使凝胶慢速聚合。

湖北地产麦冬、湖北麦冬和短葶山麦冬的SDS-PAGE研究

目的:研究湖北地产麦冬、湖北麦冬与短葶山麦冬蛋白的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),为三种麦冬的分类和品质鉴别研究提供新的方法和依据。方法:用SDS-PAGE技术对湖北地产麦冬、湖北麦冬与短葶山麦冬的块根进行分析比较,用BIO-1D凝胶成像分析仪对电泳结果进行了摄影分析,测定了各品种水溶性蛋白的相对分子量,聚类分析图则显示了几种麦冬亲缘关系的远近。结果:湖北地产麦冬、湖北麦冬与短葶山麦冬的SDS-PAGE谱带、水溶性蛋白相对分子量和聚类关系均有明显的区别。结论:SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)研究可用于三种麦冬的分类和品质鉴别研究。