表面增强激光解析电离-飞行-质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术在大肠癌围手术期中医证候研究中的应用价值

目的:探讨表面增强激光解析电离-飞行-质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术在大肠癌围手术期中医证候研究中的应用价值。方法:对大肠癌围手术期的病因病机及证候的发展规律进行研究。结果:通过对大肠癌围手术期中医证候规律的研究深入认识该病特定阶段的病因病机,掌握该病证候的发展规律,为该病中医临床诊断治疗提供依据。利用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术探索该病特定阶段中医证候诊断的客观化和标准化,从而提高中医药诊疗该病的可信度与可重复性,为病证结合的深层次研究提供依据。结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术日益成熟,其正逐渐向其他医药领域延伸,在大肠癌围手术期证候研究方面也将会有广阔的运用前景。

SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术建立胃癌血清特异性标志物诊断分类树研究

目的:观察胃癌手术前后血清蛋白质谱的变化,筛选能够快速诊断胃癌的特异性标志物。方法:采用IMAC#3蛋白质芯片和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术,对46例胃癌患者和40例正常人的血清蛋白质谱进行分析。结果:胃癌术前血清与正常人血清蛋白质谱有14个蛋白质表达量有明显差异。以热休克蛋白27、葡萄糖调节蛋白、抑制素、蛋白质二硫化物异构酶A 3这4个蛋白质所组成的模板,可将胃癌与正常人正确分组,利用该模板建立胃癌诊断的分类树模型用于诊断胃癌的灵敏度95.7%,特异性92.5%,术后血清蛋白质谱中,原表达上调的蛋白质明显下调。结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术为建立蛋白质模板用以诊断胃癌提供了可靠的技术平台。

T细胞免疫检测和蛋白芯片技术筛查人类免疫缺陷病毒感染者结核潜伏感染的效果分析

目的:分析T细胞免疫检测和蛋白芯片技术筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者结核潜伏感染的效果。方法:选取2021年8月—2023年8月贵阳市公共卫生救治中心收治的HIV感染者86例作为研究对象。对HIV感染者进行T细胞免疫检测及蛋白芯片技术筛查,以结核分枝杆菌培养结果作为“金标准”,比较两种筛查方法检查结核潜伏感染的效能。结果:“金标准”结果显示,86例HIV感染者中66例存在结核潜伏感染。T细胞免疫检测筛查结核潜伏感染的灵敏度、特异度、准确度高于蛋白芯片技术,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:T细胞免疫检测筛查HIV感染者结核潜伏感染的效果优于蛋白芯片技术,灵敏度、特异度、准确度更高,值得临床推广。

粪便蛋白Luminex液相芯片检测系统构建及其对结直肠肿瘤早期诊断的价值

目的基于Luminex液相芯片检测系统构建粪便人源性蛋白诊断体系,并评估其对结直肠肿瘤的早期诊断价值。方法收集2021年1月~2023年1月蚌埠医学院第一附属医院收治的结直肠癌(CRC)患者70例为CRC组、结直肠腺瘤(CRA)患者42例为CRA组,以及同期健康对照(HC)受试者38例为HC组。收集各组受试者粪便,使用Tris-Hcl缓冲液提取粪便总蛋白,通过Luminex液相芯片检测技术分析3组受试者粪便中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、人源性视黄醇结合蛋白4(RBP4)、甲壳素酶-3样蛋白1(CHI3L1)和补体成分3a(C3a)的水平差异;收集受试者外周血,分离血清检测癌胚抗原(CEA)和糖类抗原19-9(CA19-9)的水平;使用受试者工作曲线(ROC)分析MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合以及CEA和CA19-9联合对CRC、CRA、CRC和CRA的诊断效能,并比较两种组合诊断效能的差异。结果CRC组患者粪便中MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a水平均显著高于HC组(P<0.05),CRC组粪便中MMP-9和CHI3L1水平显著高于CRA组(P<0.05),但是RBP4和C3a在CRC和CRA组间并无显著性差异(P>0.05);另外,CRC患者外周血中CEA和CA19-9水平均显著高于HC组和CRA组(P<0.05),但是CRA组和HC组之间无显著性差异(P>0.05)。ROC曲线分析显示,MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合诊断CRC的灵敏度为91.4%,特异度为100.0%,联合诊断CRA的灵敏度为81.0%,特异度为89.5%,联合诊断CRC和CRA的灵敏度为83.9%,特异度为97.4%。Z检验比较分析显示,粪便蛋白MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合诊断CRC,CRA以及CRA和CRC的效能显著优于外周血肿瘤标志物CEA和CA19-9(P<0.05)。结论Luminex液相芯片检测粪便人源性蛋白RBP4、MMP-9、CHI3L1、C3a对结直肠肿瘤早期诊断具有价值且优于外周血肿瘤标志物CEA和CA19-9,具有较高的临床应用推广意义。

烟酰胺磷酸核糖基转移酶及沉默信息调节因子2同源蛋白1在乳腺癌组织中的表达及与患者临床病理特征的关系

目的:探讨在乳腺癌组织中烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)及沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT-1)的表达率及与患者临床病理特征的关系。方法:选取手术成功切除乳房的381例乳腺癌患者为研究对象,均随访5年或随访至患者死亡,采用免疫组织化学方法检测三阴性乳腺癌患者、非三阴性乳腺癌患者NAMPT及SIRT-1的蛋白表达,并分析其与临床病特征的关系及NAMPT表达与SIRT-1表达的关系,分析NAMPT、SIRT-1表达与临床特征之间的相关性。结果:三阴性乳腺癌患者NAMPT高表达率高于非三阴性乳腺癌患者(P<0.05);年龄≥56岁、有淋巴结转移、无病生存期<55个月的乳腺癌患者NAMPT高表达率高于年龄<56岁、无淋巴结转移、无病生存期≥55个月的乳腺癌患者(均P<0.05);有淋巴结转移、无病生存期<55个月的乳腺癌患者SIRT-1高表达率高于年龄<56岁、无病生存期≥55个月的乳腺癌患者(均P<0.05);NAMPT高表达的乳腺癌患者SIRT-1高表达率高于SIRT-1低表达率(P<0.05),乳腺癌患者NAMPT、SIRT-1表达与淋巴结转移、无病生存期呈正相关(r=0.079、0.505;0.462、0.497,P<0.05)。结论:NAMPT在三阴性乳腺癌中表达上调,NAMPT可影响SIRT-1的表达,同时年龄可影响NAMPT及SIRT-1的表达,且两者高表达预示患者可能出现淋巴结转移、预后差。

非洲猪瘟病毒P30蛋白的表达及抗体液相芯片检测方法的建立

本研究旨在为建立高效、快速、准确检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的抗体液相芯片检测方法。首先构建pET-28a-p30表达载体,利用大肠杆菌(Escherichia coli)原核表达系统表达ASFV重组P30蛋白,然后将重组P30蛋白与羧基化的荧光微球偶联,建立ASFV P30抗体液相芯片检测方法。经鉴定,重组质粒成功转入大肠杆菌BL21感受态细胞,并以包涵体形式表达,Western blot结果显示重组P30蛋白可以与ASFV阳性血清产生特异性反应,证明其具有良好的反应原性。建立的ASFV抗体液相芯片检测方法检测中值荧光强度(median fluorescent intensity,MFI)阈值为1575.7,最佳结合蛋白浓度为每1.25×10^(6)个微球6μg,最佳血清稀释度为1∶600,最佳二抗浓度为1μg·mL^(-1),该方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。用建立的方法和商品化ELISA试剂盒同时对92份临床采集的猪血清样本进行检测,结果显示二者符合率为92.39%。本研究成功表达重组P30蛋白,并建立了ASFV P30抗体液相芯片检测方法,为ASFV感染早期的血清学检测提供了新的方法,也为多种病原体的抗体检测奠定了基础。

生物芯片技术的原理与应用

生物芯片是指将大量生物讯息密码 (寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、蛋白质等 )以预先设计的方式固定在玻片、硅片等固相载体上组成的密集分子阵列 ,可分为核酸芯片、蛋白芯片、芯片实验室三类。生物芯片技术的本质是生物信号的平行分析 ,它利用核酸分子杂交、蛋白分子亲和原理 ,通过荧光标记技术检测杂交或亲和与否 ,可迅速获得所需信息。高效、快速的生物芯片技术以其无与伦比的优势 ,已在医学、分子生物学等领域显现出巨大的应用价值 ,具有非常广阔的发展前景。

生物芯片研究现状及应用前景

生物芯片(Biochip)是以预先设计的方式将大量的生物讯息密码(寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、蛋白质等)固定在玻片、硅片等固相载体上组成的密集分子阵列,可分为基因芯片、蛋白质芯片、芯片实验室三类。生物芯片技术的本质是生物信号的平行分析,它利用核酸分子杂交、蛋白分子亲和原理,通过荧光标记技术检测杂交或亲和与否,再经过计算机分析处理可迅速获得所需信息。在医学、分子生物学等领域,生物芯片技术以其高效、高信息量的优势,显现出巨大的应用价值和商业市场,其发展前景非常乐观。

蛋白芯片法多肿瘤标志物检测在健康体检人群中肿瘤筛查的意义

目的:探讨蛋白芯片法多肿瘤标志物检测在健康人群中肿瘤筛查的临床意义。方法:应用蛋白芯片法检测7339例健康体检者CEA、AFP、CA125、CA19-9、CK19、SCC、NSE、β-HCG、c-PSA、CA15-3、CA72-4和CA242;异常结果选用电化学发光仪复查,通过病理学和影像学等进一步明确诊断并进行患者随访。结果:7339例体检者中检测出肿瘤标志物异常者601例,阳性率为8.18%,196例单个肿瘤标志物复查阳性为151例,真阳性率为90.44%,其中13例在不同时间经病理学、影像学等检查确定为肿瘤,肿瘤检出率为0.2%。结论:蛋白芯片法检测多肿瘤标志物可以作为健康人群中肿瘤筛查的手段之一,可达到早期发现、早期治疗的目的。

蛋白质芯片技术的研究及应用现状

蛋白质芯片技术是采用微阵列方法，对样品蛋白进行高通量、高灵敏度、高特异性的分析技术，作为一种新的技术，日益受到人们的关注．它不仅是蛋白质组学研究中强有力的工具，也是临床应用中疾病早期诊断、预后和治疗效果评测的新手段，其研究成果拓宽了与人类健康更加贴近的应用领域．就蛋白质芯片的原理、分类、制备过程、在疾病诊断中的应用、优缺点和发展前景进行了阐述．

蛋白质组学技术研究进展

随着现代科学技术的飞速发展,现代生物学技术已经发展到后基因组时代,包括人类在内的几十种生物体基因组测序已经完成,生命科学研究的重点从结构基因组研究转移到后基因组时代——功能基因组的研究,蛋白质组学研究是功能基因组一个重要的组成部分。因此,与之相适应,蛋白质组学研究技术也是日新月异,层出不穷,除了最经典的二维凝胶电泳技术,多维液相色谱技术,同位素标记亲和标签技术相继发展起来,蛋白质芯片技术及噬菌体展示技术也得到了较为广泛的应用。本文针对蛋白质组学研究上述关键技术进行了综述。

应用蛋白芯片技术检测结核杆菌抗体的研究

目的评价蛋白芯片技术检测结核杆菌抗体的应用价值。方法应用结核杆菌蛋白芯片检测仪和试剂盒检测80例结核病患者和85名健康人群的血清标本。结果结核病患者标本阳性率为86.25%,健康人群阴性率是96.47%;结核杆菌抗原的抗体检出率以脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)为最高(81.25%);2种抗原的抗体均为阳性的比例(51.25%)高于3种抗原的抗体均为阳性的比例(27.5%)和单个抗体阳性的比例(7.5%);蛋白芯片检测法的阳性预测值和阴性预测值分别是95.83%和88.17%。结论蛋白芯片技术具有简便、快速、敏感性高、特异性强和检测成本较低的特点,是结核病辅助诊断的有效方法。

SELDI—TOF—MS技术对鼻咽癌裸鼠移植模型早期蛋白组学研究

目的快速筛选人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型血清中差异表达蛋白，为鼻咽癌的早期诊断提供特有的血清微量蛋白标志物。方法采用SELDI—TOF—MS蛋白芯片技术检测10只正常裸鼠和50只人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型在不同时间血清中的蛋白指纹图谱，用Ciphergen Protein Chip3．0软件自动采集数据，Ciphergen Biomaker Wizard 3．1版软件统计分析筛选对照组与实验组间的差异表达蛋白。结果对照组与实验组间检出15个差异表达的蛋白质（P〈0．0001），分子量主要集中在2～20kD以内，大多数标志蛋白在实验组中表达明显增高，少数为低表达。尤其是质荷比（M／Z）为6741，8019，8102，8615的四个蛋白质在接种癌细胞后表达逐渐增强，质荷比（M／Z）为14740，15484的两个蛋白质表达逐渐减弱。结论鼻咽癌细胞在裸鼠体内生长过程中，其裸鼠血清中出现明显的差异表达蛋白质，经临床盲法验证有可能成为鼻咽癌早期诊断的微量蛋白标志物。

蛋白芯片技术对8种自身抗体的检测及其评价

目的 研究蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性及特异性,探讨其对自身免疫性疾病的鉴别诊断价值,并对其方法学进行评估。方法 用胶体金标法、间接免疫荧光法及蛋白芯片法检测抗 ds- DNA;用免疫印迹法、蛋白芯片法检测抗Sm 、抗u1RNP 、抗SSA、抗SSB 、抗Rib- P、抗 Jo -1及抗 Scl- 70 7 种自身抗体,对检测结果进行统计学分析。结果 抗dsDNA抗体检测,蛋白芯片法优于胶体金标法 (P<0.01);皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)组 Jo -1 抗体(P<0.01)、混合性结缔组织病(MCTD)组u1RNP抗体(P<0.01)、硬皮病(PSS)组 Scl- 70 抗体(P<0.05),蛋白芯片法与免疫印迹法检测结果存在显著性差异;在 DM/PM组、PSS组、MCTD组,蛋白芯片法与免疫印迹法对自身免疫性疾病的鉴别诊断有显著性差别(P<0.05)。4种方法的总体敏感性依次为蛋白芯片法、免疫印迹法、间接免疫荧光法、胶体金标法。结论 蛋白芯片法检测项目多、简便快速、敏感性好、特异性强、分析客观,值得推广使用。

应用蛋白芯片技术筛选针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠的凋亡相关蛋白

目的应用蛋白芯片技术筛选针刺对缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织凋亡相关蛋白。方法 SD健康大鼠40只随机分为4组:假手术组、模型组、针刺对照点组(均取穴左侧旁开0.3 cm的非经非穴点)、针刺穴位组(针刺大椎、百会、人中),每组10只,各组大鼠6次处理后取左侧海马脑组织,采用720磷酸化抗体蛋白芯片检测处理后的脑组织细胞信号蛋白磷酸化的变化,然后筛选各组上调、下调显著(磷酸化水平变化上调≥1.5倍,下调≤0.67倍)且与凋亡相关的蛋白。结果与假手术组比较,模型组上调≥1.5倍与凋亡相关的蛋白8种,下调≤0.67倍的蛋白4种;与模型组比较,对照点组上调≥1.5倍与凋亡相关的蛋白5个,下调≤0.67倍的蛋白8个;穴位组上调≥1.5倍与凋亡相关的蛋白2个,下调≤0.67倍的蛋白11个,其中下调模型组中上调的蛋白3种。结论针刺大椎、百会、人中(穴)对CIRI大鼠通过调整多个凋亡相关的蛋白表达变化抑制凋亡实现脑保护作用。

蛋白质组学及其在植物研究中的应用

蛋白质组研究将生命活动直接化和具体化,将基因功能整体化、动态化、定量化,是后基因组计划的一个重要组成部分.为全面准确了解和揭示植物生命活动规律,对其在分子水平上的研究工作应将基因组研究和蛋白质组研究并列开展,为植物各领域的研究提供更可靠的理论依据.综述了蛋白质组学的研究意义、重要研究体系及在植物研究中的应用,同时展望了未来的蛋白质组学.

生物芯片技术及其应用研究

目的:生物芯片技术具有高通量、并行性及自动化的优点,已经成为科学界的研究热点之一。方法:综述了生物芯片技术的概念、主要分类以及基本原理,介绍了生物芯片的应用,同时分析了生物芯片技术中存在的问题并对其发展前景作了展望。结果:生物芯片作为生物技术的一个重要研究领域,具有潜在的经济和社会效益,但是在检测方面仍有待发展和完善。结论:尽管受很多相关技术的制约,但是生物芯片仍然具有非常广阔的应用前景。

SELDI—TOF—MS技术筛选鼻咽癌患者血清标志蛋白

目的应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术筛选鼻咽癌（NPC）患者血清中的标志蛋白。方法用CiphergenBiosystem公司生产的PBSⅡ／C型蛋白质指纹图谱仪和GoldChip（金芯片）蛋白芯片检测98例鼻咽癌患者和30例正常人血清的蛋白指纹图谱，采用Biomaker Wizard 3．1软件分析两组的蛋白表达情况筛选差异表达蛋白。结果两组均检出较多蛋白峰，并且有表达明显的蛋白峰（P〈0．01），在鼻咽癌患者中，低表达的有1个（即m／z为5026Da），高表达的有4个（即m／z为5934Da，5352Da，6655Da，6675Da）。结论用SELDI—TOF—MS蛋白质芯片技术筛选NPC患者血清中特异性蛋白标志物对鼻咽癌的早期诊断具有较大价值。

肿瘤标志物蛋白芯片法与微粒子捕捉酶免法检测结果的比较及分析

目的 :了解多肿瘤标志物蛋白芯片法与微粒子捕捉酶免法 (MEIA)所测肿瘤标志物结果的符合性。方法 :蛋白芯片法与MEIA测相同标本的 6项肿瘤标志物 ,比对两种方法的符合性。结果 :CA19-9、AFP、PSA、CA12 5 4项指标 ,两方法间差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;CEA和ferritin指标两方法间有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,不符合的病例 ,以MEIA阳性而蛋白芯片法阴性为多。结论 :蛋白芯片法与MEIA检测CA19-9、AFP、PSA、CA12 5的特异性和灵敏度相近 ;CEA和ferritin指标检测的符合性较差 ,但两法不符的病例中 ,亦未见任一方法与病理及临床诊断结果有较好的吻合。

胃癌手术治疗前后血清蛋白质谱变异性研究

目的:观察胃癌手术前后血清蛋白质谱的变化,从而筛选能够快速诊断胃癌的特异性蛋白标志物.方法:选用IMAC-Cu蛋白质芯片和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF- MS)蛋白质芯片技术,对46例胃癌患者和40名正常人的血清蛋白质谱进行分析.结果:通过对胃癌术前血清与正常人血清蛋白质谱分析发现共有14个蛋白质表达量有明显差异.并获得以热休克蛋白27、葡萄糖调节蛋白、抑制素、蛋白质二硫化物异构酶A3这4个蛋白质所组成的模板,可将胃癌与正常人正确分组,利用该模板建立胃癌诊断的分类树模型,此分类树具有两层三个叶结点,诊断胃癌的灵敏度可达95.7%,特异性可达92.5%,术后血清蛋白质谱中,原表达上调的蛋白质明显下调.结论:血清中可以筛选到快速诊断胃癌的特异性蛋白标志物,并可用以预后的判断.SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术为建立蛋白质模板用以诊断胃癌提供了可靠的技术平台.