SEMA3F与NRP2在头颈鳞状细胞癌中的表达与临床病理和预后的关系

分析神经轴突导向因子(SEMA3F)、神经菌毛蛋白2(NRP2)在头颈鳞状细胞癌中的表达与临床病理和预后的关系。方法 选取广西壮族自治区第二人民医院在2015年1月至2019年12月期间收治的80例头颈鳞状细胞癌患者,其中喉癌50例,下咽癌20例,口腔癌10例。对比头颈鳞状细胞癌与癌旁组织的SEMA3F与NRP2表达,及其不同表达与临床病理与预后的关系。结果 与癌旁组织相比,癌组织SEMA3F表达更低,NRP2表达更高,差异具统计学意义(t=28.188,39.285;P<0.05)。与肿瘤≤3cm相比,肿瘤>3cm的SEMA3F低表达更多,NRP2的高表达更多(P<0.05)。分析癌组织中SEMA3F低表达,Ⅲ~Ⅳ期组较Ⅰ~Ⅱ期组更多,分析NRP2高表达,Ⅲ~Ⅳ期组较Ⅰ~Ⅱ期组更多(P<0.05)。分析3年OS,SEMA3F低表达组较高表达组低,高NRP2表达组较低表达组低(x2=4.841,10.777;P<0.05)。结论 头颈鳞状细胞癌中SEMA3F、NRP2表达与临床病理(肿瘤大小及分期)和预后的关系密切,可作为临床疾病诊治的新靶点。

SEMA3F通过CXCR4/JAK2/STAT3通路抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及血管生成

目的:探究信号素3F(semaphorin-3F,SEMA3F)通过趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)/JANUS激酶2(janus kinase 2,JAK2)/信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及血管生成的调控作用。方法:体外培养人子宫内膜基质细胞系、人子宫内膜癌细胞(Ishikawa、KLE、RL95-2、HEC-1-A)及人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)。构建含有SEMA3F重组质粒的慢病毒载体并转染至Ishikawa细胞,分为对照组(Control)、过表达对照组(Ov-NC)、SEMA3F过表达组(Ov-SEMA3F);将含SEMA3F重组质粒的慢病毒载体与构建的含CXCR4重组质粒的慢病毒载体或STAT3激动剂(Colivelin)共转染至Ishikawa细胞,分为4组:Control组、Ov-SEMA3F组、Ov-SEMA3F+Ov-CXCR4组、Ov-SEMA3F+Colivelin组。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测SEMA3F、CXCR4表达水平;EdU染色检测细胞增殖;划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Transwell和小管形成实验分别检测Ishikawa细胞上清作用下HUVEC迁移和子宫内膜癌细胞小管形成能力;Western blot分析增殖和转移相关蛋白及CXCR4/JAK2/STAT3通路相关蛋白表达水平。结果:SEMA3F在子宫内膜癌细胞中表达降低(均P<0.01),SEMA3F过表达可抑制细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成(均P<0.001)。SEMA3F过表达可抑制CXCR4/JAK2/STAT3信号通路(P<0.001),CXCR4过表达或STAT3激动剂(Colivelin)可逆转SEMA3F对Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭及Ishikawa细胞上清作用下HUVEC细胞迁移、血管生成能力的抑制作用(均P<0.05)。结论:SEMA3F可通过使CXCR4/JAK2/STAT3通路失活进而抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及血管生成。

Nrp1、Nrp2及SEMA3F在口腔癌组织及TCa、ACC细胞系中的表达及其可能的作用

目的研究SEMA3F及其受体Nrp1和Nrp2在口腔癌组织和细胞(ACC2,ACCM和TCa)中的表达情况,并推测其在口腔癌生成中的可能意义。方法应用RT-PCR和Western bloting以及免疫组化法检测SEMA3F、Nrp1及Nrp2在口腔癌(ACC2,ACCMand TCa)组织和细胞中的表达情况。结果在所有口腔癌组织和癌细胞中均可检测到Nrp1和Nrp2的表达,但Nrp2相对表达较弱。Western bolting、RT-PCR提示Nrp1呈高表达,Nrp2及SEMA3F均表达较低。在免疫组织化学中显示癌及癌周组织中Nrp1均呈高表达,且癌巢中的表达明显高于癌间隙组织,Nrp2及SEMA3F呈较弱表达。结论提示在肿瘤的发展进程中,Nrp1可能对肿瘤本身的发生,增殖及肿瘤的血管生成均可能起到了重要的作用。

SEMA3B、SEMA3F基因在鼻咽癌细胞中突变和表达的研究

背景与目的:鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)致病的分子机理至今仍不清楚,但高频的杂合性缺失和功能学证据均表明染色体3p21.3区段中存在着与鼻咽癌相关的抑癌基因。SEMA3B和SEMA3F基因是定位于3p21.3的两个semaphorin家族成员,最近被鉴定为抑癌基因。本研究通过对SEMA3B和SEMA3F基因在鼻咽癌中的突变和表达检测,探讨SEMA3B和SEMA3F基因与鼻咽癌发病的关系。方法:采用PCR-直接测序方法,在21例散发性NPC组织和2例NPC细胞株(CNE2,SUNE1)中对SEMA3B和SEMA3F基因的编码区、拼接位点和部分调控区进行突变检测;利用半定量RT-PCR方法,检测SEMA3B和SEMA3F基因在鼻咽癌中的表达。结果:在鼻咽癌中未发现SEMA3B或SEMA3F基因具有体细胞突变,但在SEMA3B基因中发现两个导致氨基酸改变的单核苷酸多态性Thr415Ile和Ile242Met。在Thr415Ile多态位点中,可导致SEMA3B基因功能缺陷的Ile等位基因频率在鼻咽癌患者中占有较高比例(64%,27/42)。SEMA3BmRNA在6例鼻咽非癌组织中正常表达,但在76%(16/21)的鼻咽癌组织中表达下调或缺失;SEMA3FmRNA的表达水平在鼻咽癌和非癌组织中无明显差异。结论:SEMA3BmRNA在鼻咽癌中发生高频表达缺失说明该基因失活与鼻咽癌密切相关,SEMA3B基因可能是定位于染色体3p21.

直肠癌患者肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD与miR-454表达水平及其相关性

目的:研究肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454在直肠癌患者中的表达水平。方法:2016年1~3月,21例直肠癌患者分别检测癌灶组织、癌病灶周围组织以及直肠正常组织中的肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454表达水平,分析肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD与miR-454的相关性,探讨三者在直肠癌发生、发展中的作用。结果:癌组织、癌旁组织以及正常组织中的SEMA3F、CYLD与miR-454表达差异均具有统计学意义(P<0.01)。转移组患者癌组织中SEMA3F、CYLD均显著低于无转移组,miR-454显著高于无转移组(P<0.01)。高分化组CRC组织中SEMA3F、CYLD表达水平显著高于中低分化组,miR-454表达显著低于中低分化组(P<0.01)。肿瘤抑制因子CYLD与miR-454具有显著负相关性(r=-0.971,P<0.01)。肿瘤抑制因子SEMA3F与miR-454具有显著负相关性(r=-0.955,P<0.01)。结论:肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD在直肠癌早期可见高表达,随着病情进展表达水平逐渐下降;而miR-454则起到促进直肠癌细胞异常增殖及转移的作用,随着疾病进展表达水平逐渐升高,且与SEMA3F、CYLD均呈显著负相关;肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454表达对于直肠癌的诊断及病情进展、预后的评估均具有重要的参考价值。

颞叶癫大鼠海马轴突导向分子Sema3F及其受体Np2表达的变化

目的 研究颞叶癫(癎)大鼠海马轴突导向分子Sema3F及其受体Np2表达的变化.方法 给SD大鼠腹腔注射匹罗卡品、氯化锂制作颞叶癫(癎)模型.用免疫组化法和原位杂交技术对致(癎)后不同时间点大鼠海马CA1区、CA3区、齿状回的Sema3F mRNA、Np2 mRNA和蛋白表达进行检测,并与正常对照组比较.结果 颞叶癫(癎)大鼠致(癎)后7 d、15 d,海马CA1区、CA3区Sema3F mRNA、Np2 mRNA和蛋白的表达明显低于正常对照组(P＜0.05～0.01), 致(癎)后30 d、60 d表达与正常对照组差异无统计学意义;而齿状回Sema3F mRNA、Np2 mRNA和蛋白的表达与正常对照组的差异无统计学意义.结论 颞叶癫(癎)大鼠海马CA1区、CA3区Sema3F、Np2表达在致(癎)后早期明显下调,而在慢性期恢复正常.

SEMA3F在肿瘤中的作用及其机制研究进展

神经生物学研究显示轴突导向分子Semaphorin 3F(SEMA3F)具有排斥神经节轴突和调节神经系统发育的功能。近年研究发现,作为候选的抑癌基因,SEMA3F及其受体广泛表达于多种肿瘤中,通过调节瘤细胞及内皮细胞的增殖、凋亡、黏附、迁移来影响肿瘤的生长与脉管生成,并提示其可能与肿瘤内神经生成与神经浸润关系密切。该文现将近年来该领域的研究进展作一综述。

SEMA3A和SEMA3F在三阴性乳腺癌中的表达及其与脉管生成的关系

目的探讨SEMA3A和SEMA3F在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达,及两者与脉管生成的关系。方法采用免疫组化方法检测SEMA3A和SEMA3F在72例TNBC中的表达,同时用CD34和D2-40标记血管和淋巴管,检测TNBC中微血管密度(MVD)和淋巴管密度(LVD)。结果 SEMA3A低表达TNBC的淋巴结转移率高(P<0.05)和TNM分期高(P<0.05)。SEMA3A的表达与MVD呈负相关关系(r=-0.376,P<0.05)。SEMA3F低表达TNBC的淋巴结转移率高(P<0.05)和TNM分期高(P<0.05)、复发率高(P<0.05)。SEMA3F的表达与LVD呈负相关关系(r=-0.371,P<0.05)。MVD升高与TNBC的淋巴结转移率高(P<0.05)、TNM分期高(P<0.05)、复发率高(P=0.05)密切相关。LVD升高与TNBC的淋巴结转移率高(P<0.05)、TNM分期高(P=0.05)、复发率高(P=0.05)密切相关。结论三阴性乳腺癌中SEMA3A在血管生成中起重要作用, SEMA3F在淋巴管生成中起重要作用。SEMA3A和SEMA3F与三阴性乳腺癌的侵袭、转移关系密切,或许能成为三阴性乳腺癌的新治疗靶点。

喉癌组织中SEMA3F与NRP2的表达及临床价值

目的探讨喉癌组织中神经轴突导向因子(SEMA3F)、神经菌毛蛋白2(NRP2)的表达及临床意义。方法选取2016年3月~2018年3月我院收治的82例喉癌患者为研究对象,用实时定量PCR法检测癌及癌旁组织中SEMA3F、NRP2 mRNA的表达。以癌组织中SEMA3F、NRP2 mRNA表达的平均数为界,将研究对象分别分为SEMA3F高、低表达组及NRP2高、低表达组。分析SEMA3F、NRP2的表达与临床病理特征关系。Pearson线性相关分析SEMA3F与NRP2表达的相关性。Kaplan-Meier生存分析(Log-Rank检验)癌组织不同SEMA3F、NRP2表达与喉癌患者的生存预后差异。多因素COX回归分析影响喉癌患者生存预后的危险因素。结果与癌旁组织相比,癌组织SEMA3F mRNA表达明显降低,NRP2 mRNA表达明显升高(均P<0.05)。喉癌组织中SEMA3F与NRP2的表达呈显著负相关(r=-0.561,P<0.001)。SEMA3F、NRP2 mRNA的表达与肿瘤临床分期及淋巴结转移有关(均P<0.05)。生存分析结果表明,喉癌组织中SEMA3F低表达、NRP2高表达喉癌患者3年总体生存率明显较差(均P<0.05)。多因素COX回归分析结果喉癌组织中SEMA3F低表达、NRP2高表达、肿瘤Ⅲ~Ⅳ期及淋巴结转移是喉癌患者不良预后的危险因素。结论喉癌中SEMA3F表达降低,NRP2表达增高,均与肿瘤分期及淋巴结转移有关,可能是喉癌预后新的标志物。

Npn2与其细胞因子VEGF、Sema3F的相关性

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一个家族,包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和胎盘生长因子。神经毡蛋白(Neuropilin, Npn)是一类分子量为120~140 KD的I型跨膜蛋白,可参与机体的一系列生理和病理过程。信号素蛋白(Semaphorin Proteins, SIMAs)最初被认为是神经发育过程中排斥和吸引的神经引导线索。Npn2与其细胞因子VEGF、Sema3F参与多种中枢神经系统疾病,本文主要探讨其三者各自的功能及其关系。

卵巢癌组织SEMA3F表达及甲基化初步研究

目的研究神经轴突导向分子SEMA3F在不同卵巢上皮肿瘤组织的表达及其与上皮性卵巢癌各临床病理参数及预后的关系,并初步探讨SEMA3F启动子区甲基化与上皮性卵巢癌的关系。方法选取2004-12-01-2008-12-30南通大学附属医院收集的95例卵巢癌、30例交界性卵巢上皮肿瘤、30例良性卵巢上皮肿瘤和10例正常卵巢组织标本,采用免疫组织化学方法检测SEMA3F的表达。应用半定量RT-PCR法检测2013-05-01-2013-12-31南通大学附属医院收集的12例新鲜上皮性卵巢癌、10例新鲜良性卵巢上皮肿瘤、10例新鲜正常卵巢组织中SEMA3F的表达水平,并通过亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测上皮性卵巢癌中SEMA3F启动子区的甲基化情况,用SPSS 17.0统计软件分析数据。结果免疫组化显示,SEMA3F在不同卵巢上皮肿瘤组织中的表达水平不同,在上皮性卵巢癌组织中表达下降或缺失明显,结合临床资料分析显示,SEMA3F表达与上皮性卵巢癌的临床分期(χ2=27.100,P<0.001)、组织学分级(χ2=10.673,P=0.005)及有无盆腔外腹膜转移(z=-4.447,P<0.001)有关,但与患者的年龄(z=-0.670,P=0.503)、组织分类(χ2=3.729,P=0.444)和淋巴结转移(z=-0.584,P=0.559)无关。Kaplan-Meier分析显示,SEMA3F阴性或低表达组患者5年生存率为23.5%(16/68),明显低于SEMA3F高表达组的52.6%(10/19),差异有统计学意义,χ2=7.460,P=0.006。RT-PCR结果显示,SEMA3FmRNA相对表达量在正常卵巢组织(1±0.080)、良性卵巢上皮肿瘤(0.927±0.116)和上皮性卵巢癌中(0.436±0.122)依次下降,前两者表达差异无统计学意义,t=0.533,P>0.05,但正常卵巢与上皮性卵巢癌组织中SEMA3F的表达差异有统计学意义,t=3.820,P<0.05,且良性卵巢上皮肿瘤与上皮性卵巢癌组织中SEMA3F表达差异亦有统计学意义,t=2.979,P<0.05。上皮性卵巢癌和正常卵巢组织中SEMA3F启动子区的平均甲基化率分别为23.17%和20.00%,两者之间差异无统计学意义,t=0.890,P>0.05。结论SEMA3F异常表达在上皮性卵巢癌的发生发展中起着重要作用,可为卵巢癌早期诊断、治疗及判断预后提供新的方法。而启动子区的甲基化可能并非该基因表达失活的主要调控者。

SEMA3F蛋白在肝细胞癌中的表达及其预后价值

目的研究SEMA3F蛋白在肝细胞癌（hepatocelluarcarcinoma，HCC）中的表达及其预后价值。方法采用WesternBlotting法检测32例HCC及相应癌旁肝组织标本中SEMA3F蛋白的表达。运用免疫组织化学法检测38例HCC以及其相应癌旁组织中的SEMA3F蛋白的表达和微血管密度（microvasseldainty，MVD）值，分析SEMA3F蛋白表达水平与MVD的相关性。结果SEMA3F蛋白在32例HcC组织中的表达明显低于相应的PCLT（447．78±48．26比618．93±61．23，P〈0．05）。SEMA3F在HCC组织中的表达水平与肿瘤的结节数目及是否具有包膜结构密切相关（P〈0．05）。SEMA3F低表达组的复发转移率显著高于高表达组（P〈0．01）而其术后生存率则显著低于高表达组（P〈0．01）。SEMA3F高表达组的MVD值明显低于低表达组（86．56±17．94比115．6±30．38，P〈0．01）。结论sEMA3F在HCC组织中表达下调与肝癌复发转移率高和预后差密切相关，提示其可能是一个潜在的HCC预后分子标志物。

神经毡蛋白Neuropilin-2相关信号通路研究进展

神经毡蛋白2 (Neuropilin-2, Npn-2)是Npn家族中重要成员之一,在神经系统中,Npn-2最初被认为是脑信号蛋白(Semaphorins, Sema)家族的受体,参与诱导轴突生长锥的塌陷,但随后研究发现,Npn-2也是血管内皮生长因子(VEGF)的受体,而血管内皮生长因子(VEGF)对神经元有营养作用,促进轴突的生长和迁移。此外,Npn-2还在其他疾病的发生发展中有突出作用,成为靶向治疗的热点。这篇综述着重于对近年Npn-2介导的信号通路进行一个系统的总结,其中一些神经系统外的信号通路可能给Npn-2在癫痫等神经系统疾病研究中提供思路和借鉴。