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基于价值链下物流企业盈利模式优化研究--以SF速运为例
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作者 白筱涵 于谦龙 《物流科技》 2024年第1期60-62,共3页
现如今,世界经济向全球一体化趋势发展,科学技术尤其是信息技术迅速进步,物资流通、商品贸易、管理形式和社会生产也逐步发生变化,企业之间的生产资料及产品营销的获取方式也多种多样。如何更进一步扩大物流企业的规模,并降低物资损耗... 现如今,世界经济向全球一体化趋势发展,科学技术尤其是信息技术迅速进步,物资流通、商品贸易、管理形式和社会生产也逐步发生变化,企业之间的生产资料及产品营销的获取方式也多种多样。如何更进一步扩大物流企业的规模,并降低物资损耗、提升劳动生产率,对物流企业降本增效、进步、发展至关重要。文章与当下物流企业的发展趋势结合,以SF速运为案例,以当代物流企业的价值链分析为依据,重新构造了基于价值链下物流企业的盈利模式并分析其存在的问题,提出建议。 展开更多
关键词 价值链 物流企业 盈利模式 sf速运
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人胰岛素基因杆状病毒表达载体的构建及其在Sf_9细胞中的表达 被引量:5
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作者 李华 刘维全 +5 位作者 王吉贵 江禹 王本旭 王萍 齐顺章 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期258-262,共5页
对人胰岛素基因组基因真核表达载体 ( p CMA/m INS)进行 Xho 酶切 ,回收的含人胰岛素基因组基因的 1 60 8bp片段与线性化的杆状病毒载体 p Fast Bac 进行连接 ,获得重组载体 p Fast/m INS。将该重组载体转化 DH1 0 Bac感受态细菌 ,在体... 对人胰岛素基因组基因真核表达载体 ( p CMA/m INS)进行 Xho 酶切 ,回收的含人胰岛素基因组基因的 1 60 8bp片段与线性化的杆状病毒载体 p Fast Bac 进行连接 ,获得重组载体 p Fast/m INS。将该重组载体转化 DH1 0 Bac感受态细菌 ,在体内进行重组 ,并经 2次抗性与蓝白斑筛选 ,得到杆状病毒重组载体 Bacmid/m INS。将该载体转染 Sf9细胞 ,获得了重组杆状病毒 ,经 Tricine-SDS-PAGE和 Western-blotting检测 ,重组杆状病毒在 Sf9细胞中的表达产物是胰岛素原 。 展开更多
关键词 人胰岛素基因 杆状病毒表达系统 表达载体 sf9细胞 基因表达
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HIV-1 SF_2株env基因(gp41)的克隆构建及其原核表达 被引量:1
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作者 董梅 鲁晓青 +1 位作者 陈向伟 王斌 《山西医科大学学报》 CAS 2001年第6期481-483,共3页
目的 克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法 应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果 SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表... 目的 克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法 应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果 SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表达带。Westernblot证明 ,4 4 0 0 0蛋白带可与HIV 1阳性血清发生特异性反应。结论 该重组表达 gp4 1的融合蛋白 ,可为HIV 1gp4 1。 展开更多
关键词 HIV-1sf2株 HIV包膜蛋白质gp41 PBV220 原核表达 基因 克隆 大肠杆菌
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Sf9细胞PHB2蛋白的原核表达及其抗血清的制备
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作者 马国达 王茜 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期562-564,共3页
为了研究Sf9细胞PHB2蛋白(Sf-PHB2)的功能及其对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因ie1的转录调控作用,本研究从昆虫细胞Sf9中扩增sf-phb2基因编码区,克隆至表达载体pET30a中,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达6His-Sf-PHB2重组蛋白。SDS-... 为了研究Sf9细胞PHB2蛋白(Sf-PHB2)的功能及其对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因ie1的转录调控作用,本研究从昆虫细胞Sf9中扩增sf-phb2基因编码区,克隆至表达载体pET30a中,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达6His-Sf-PHB2重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白以包涵体形式存在。在变性条件下,用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化Sf-PHB2重组蛋白,免疫BALB/c小鼠制备抗体,并用western blot方法检测抗体的反应性。本研究制备了Sf-PHB2抗体,为进一步研究该蛋白的功能奠定基础。 展开更多
关键词 sf9细胞PHB2蛋白 原核表达 抗体制备
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重组杆状病毒表达Sf-caspase-1双链RNA对昆虫细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 欧艳梅 许晓东 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第11期187-192,共6页
【目的】构建包含Sf-caspase-1反向重复序列的重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp,并在草地贪夜蛾(Sf9)细胞中表达Sf-caspase-1双链RNA,用以抑制Sf9细胞的凋亡,为未来优化杆状病毒表达系统提供试验依据。【方法】将Sf-caspase-1反向重复序列构... 【目的】构建包含Sf-caspase-1反向重复序列的重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp,并在草地贪夜蛾(Sf9)细胞中表达Sf-caspase-1双链RNA,用以抑制Sf9细胞的凋亡,为未来优化杆状病毒表达系统提供试验依据。【方法】将Sf-caspase-1反向重复序列构建到pBac5上,与AcMNPV Bacmid共转染Sf9细胞产生重组杆状病毒,用RT-PCR和PI活细胞染色方法,分别检测Sf-caspase-1mRNA含量及Sf9细胞的凋亡情况。【结果】PCR和双酶切检测结果表明,成功构建了重组质粒pBac5-dsCasp,并得到重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp。PI染色结果表明,相比野生型病毒vAcMNPV,重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp能够抑制Sf9细胞的凋亡。RT-PCR结果表明,vAcMNPV-dsCasp感染的Sf9细胞中Sf-caspase-1mRNA含量明显下降。【结论】在重组杆状病毒上表达Sf-caspase-1双链RNA确实能够沉默Sf-caspase-1,从而抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 vAcMNPV RNAI DSRNA sf-caspase-1 细胞凋亡 杆状病毒表达系统
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草地贪夜蛾半胱氨酸蛋白酶Sf-caspase-3基因克隆与表达分析 被引量:1
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作者 舒本水 钟宏新 +2 位作者 冯杰 洪一峰 林进添 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期1352-1360,共9页
半胱氨酸蛋白酶(caspases)是细胞凋亡过程中重要的酶类,参与调控昆虫变态发育及响应外界压力等多种生理过程。本研究通过转录组数据及逆转录PCR鉴定并验证得到草地贪夜蛾Spodoptera frugiperdaSf-caspase-3基因编码区全长。该基因编码区... 半胱氨酸蛋白酶(caspases)是细胞凋亡过程中重要的酶类,参与调控昆虫变态发育及响应外界压力等多种生理过程。本研究通过转录组数据及逆转录PCR鉴定并验证得到草地贪夜蛾Spodoptera frugiperdaSf-caspase-3基因编码区全长。该基因编码区长840 bp,编码279个氨基酸,预测蛋白分子量为31.43 kDa。氨基酸序列分析表明Sf-caspase-3具有保守的QACRG五肽序列,且与Lep-caspase-3高度保守。进化树分析表明Sf-caspase-3与甜菜夜蛾Spodoptera exigua Se-caspase-3亲缘关系最近。RT-qPCR检测结果表明Sf-caspase-3在草地贪夜蛾各个龄期均有表达,其中3~6龄幼虫期表达量最高,蛹期和卵期表达量最低。此外Sf-caspase-3在6龄幼虫中肠组织中表达量最高,而在表皮、脂肪体及马氏管中表达量极低。本研究成功构建Sf-caspase-3原核表达重组质粒,在28℃下0.4 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组菌株4 h得到约50 kDa大小条带,与预期条带大小相符。蛋白可溶性分析表明Sf-caspase-3主要以不可溶的形式存在包涵体中。本研究为草地贪夜蛾Sf-caspase-3功能及鳞翅目昆虫细胞凋亡机制研究提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 sf-caspase-3 克隆 时空表达 原核表达
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血清SAA、CysC、Hcy、SF表达与糖尿病周围神经病变的相关性研究 被引量:2
7
作者 肖俊锐 吴石贵 +3 位作者 黄舒婕 吴邦泰 许旭昀 陈子睿 《糖尿病新世界》 2022年第16期21-25,共5页
目的研究血清SAA、CysC、Hcy、SF表达与糖尿病周围神经病变的相关性。方法选取汕头市中医医院2020年8月—2021年12月收治的200例2型糖尿病患者,根据患者的足部神经感觉阈值系统检测结果,将阈值低于15 V的100例患者归为单纯糖尿病组,将... 目的研究血清SAA、CysC、Hcy、SF表达与糖尿病周围神经病变的相关性。方法选取汕头市中医医院2020年8月—2021年12月收治的200例2型糖尿病患者,根据患者的足部神经感觉阈值系统检测结果,将阈值低于15 V的100例患者归为单纯糖尿病组,将阈值高于15 V的100例患者归为糖尿病周围神经病变组,另选取同时间段内在本院接受体检的100名健康人群作为对照组。对3组研究对象的血糖(空腹血糖、糖化血红蛋白)、血脂(三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、胱抑素C(CysC)、同型半胱氨酸(Hcy)、铁蛋白(SF)进行检测。结果①糖尿病周围神经病变组和单纯糖尿病组的空腹血糖、糖化血红蛋白均高于对照组,且糖尿病周围神经病变组高于单纯糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05);②糖尿病周围神经病变组和单纯糖尿病组的总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白均高于对照组,且糖尿病周围神经病变组的总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白均高于单纯糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05),3组的高密度脂蛋白对比差异无统计学意义(P>0.05);③糖尿病周围神经病变组和单纯糖尿病组的血清SAA、CysC、Hcy、SF表达均高于对照组,且糖尿病周围神经病变组的各项指标均显著高于单纯糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05);④血清SAA、CysC、Hcy、SF与糖化血红蛋白呈正相关。结论血清SAA、CysC、Hcy、SF表达与糖尿病周围神经病变有明显相关性,共同参与了糖尿病周围神经病变的发生和发展。 展开更多
关键词 血清SAA CYSC HCY sf表达 糖尿病周围神经病变 相关性
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鳞翅目核仁小RNA Sf-15在逆境胁迫下的表达分析
8
作者 邱妩洁 庞佳林 +4 位作者 马田田 霍春月 杨宗霖 申雅文 李丹丹 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期769-772,共4页
核仁小RNA(small nucleolar RNA,snoRNA)除了能够指导rRNA修饰外,在肿瘤发生及生物响应逆境胁迫中也发挥着重要作用。课题组在前期研究中发现一个家蚕C/D box snoRNA Bm-15在鳞翅目昆虫中高度保守,在草地贪夜蛾细胞Sf9中干涉此snoRNA同... 核仁小RNA(small nucleolar RNA,snoRNA)除了能够指导rRNA修饰外,在肿瘤发生及生物响应逆境胁迫中也发挥着重要作用。课题组在前期研究中发现一个家蚕C/D box snoRNA Bm-15在鳞翅目昆虫中高度保守,在草地贪夜蛾细胞Sf9中干涉此snoRNA同源序列Sf-15后,细胞出现凋亡现象,与逆境相关的基因表达变化显著。为了进一步研究该snoRNA的功能,对Sf9细胞施加非生物胁迫紫外线照射(ultraviolet,UV)和生物胁迫病毒感染,检测snoRNA Sf-15在胁迫条件下表达量的变化。结果发现,UV处理后Sf9细胞中snoRNA Sf-15迅速响应,处理后4 h表达即上调,至8 h达高峰,随后其表达量逐渐下降;而且随着UV剂量的增大,snoRNA Sf-15的诱导表达量逐渐升高。Sf9细胞被AcMNPV病毒感染后,snoRNA Sf-15呈现先下降后上升再下降的趋势,感染后48 h表达量最高,病毒感染组48 h后Sf-15表达量整体高于对照组。结果表明snoRNA Sf-15在细胞响应非生物及生物胁迫过程中均发挥着重要的作用。该研究在鳞翅目昆虫中发现snoRNA可以参与细胞的逆境胁迫反应,为探索昆虫snoRNA的功能提供了新的思路。 展开更多
关键词 鳞翅目 核仁小RNA sf-15 逆境响应 表达
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基于扎根理论的众包物流商业模式研究--以SF同城为例
9
作者 吴小夏 《物流科技》 2023年第12期34-37,43,共5页
随着人们收入的提高以及消费能力和消费意愿的增强,即时配送行业开始高速发展,一种新兴的众包物流模式应运而生。众包模式着力优化服务质量、提升用户体验,解决城市“最后一公里”的即时配送问题。SF同城依托SF的口碑和流量,通过搭建全... 随着人们收入的提高以及消费能力和消费意愿的增强,即时配送行业开始高速发展,一种新兴的众包物流模式应运而生。众包模式着力优化服务质量、提升用户体验,解决城市“最后一公里”的即时配送问题。SF同城依托SF的口碑和流量,通过搭建全场景、全时段、全距离的配送服务平台,为客户提供定制化服务,打造品牌口碑与流量闭环,助力其提升市场竞争力。因此,我国众包物流模式应从平台精细化、产业智能化、服务标准化、场景多样化及市场全面化等方面进行优化,以进一步促进即时配送的健康有序发展。 展开更多
关键词 众包物流 扎根理论 sf同城
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顺丰速运物流成本控制策略研究
10
作者 吴萌 许冰纯 《中国商论》 2024年第12期113-116,共4页
随着电商行业的迅速发展,快递物流行业迎来了新的机遇与挑战。在众多物流企业中,脱颖而出的顺丰速运在快递业务版块迅速扩张,但同时不断上升的成本也在一定程度上制约着其发展。文章主要探讨顺丰速运如何实施有效的成本控制策略来降低... 随着电商行业的迅速发展,快递物流行业迎来了新的机遇与挑战。在众多物流企业中,脱颖而出的顺丰速运在快递业务版块迅速扩张,但同时不断上升的成本也在一定程度上制约着其发展。文章主要探讨顺丰速运如何实施有效的成本控制策略来降低其物流成本,通过分析在运输、仓储、包装等关键环节的成本控制点,得出优化运输网络、缓解燃油价格波动等策略。这些成本控制策略不仅提升顺丰速运的经济效益,还增强其在市场中的竞争优势,以期为顺丰速运及其他物流企业的进一步发展提供参考和启示。 展开更多
关键词 顺丰速运 物流成本 成本控制 物资流通 电子商务
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基于系统动力学的客户终生价值提升策略 被引量:5
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作者 钱颖 汪守金 +1 位作者 黄向宇 赵来军 《系统管理学报》 CSSCI 2013年第5期720-727,共8页
利用系统动力学的相关理论和方法,建立了客户终生价值的系统动力学模型,并以顺丰速运为实例,进行了仿真。仿真结果显示,投资水平、资费水平和竞争强度对客户终生价值的影响效果明显,加大投入额虽然提高了成本,但是,由于客户满意度提高,... 利用系统动力学的相关理论和方法,建立了客户终生价值的系统动力学模型,并以顺丰速运为实例,进行了仿真。仿真结果显示,投资水平、资费水平和竞争强度对客户终生价值的影响效果明显,加大投入额虽然提高了成本,但是,由于客户满意度提高,收入和客户生命周期也大幅增加,使得客户终生价值增加。提高资费水平虽然短期内可能丧失部分对价格敏感的客户,但企业利润增加,从而投入额提升,长期而言,客户满意度上升,最终使客户终生价值上升。市场竞争强度的降低使得客户的选择余地减少而使收入和客户生命周期相应增加,客户终生价值也随之增加。 展开更多
关键词 客户终生价值 系统动力学 顺丰速运 建模与仿真
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基于就业导向视域下构建现代学徒制育人模式的实践与思考——以无锡科技职业学院物流管理专业为例 被引量:6
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作者 李智勇 方秦盛 +1 位作者 刘晓燕 丁锋 《物流技术》 2015年第16期219-221,共3页
以无锡科技职业学院物流管理专业为背景,以与无锡顺丰速运公司校区合作"4×4一体化"育人模式为案例,基于就业导向分析了探索现代学徒制取得的成效、存在的不足与解决措施。
关键词 现代学徒制度 做中学 校企合作 无锡顺丰
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南京市快递企业网点布局及其影响因素解析——基于民营企业(顺丰速递)和国营企业(EMS)的比较 被引量:12
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作者 吴晓 王凌瑾 +1 位作者 宁昱西 强欢欢 《地域研究与开发》 CSSCI CSCD 北大核心 2019年第4期52-59,67,共9页
全球经济一体化背景下,快递业已成为中国市场中拥有广泛关注和广阔前景的新兴物流产业之一。以南京市顺丰速递与EMS网点为例,揭示两类经营体制下快递企业网点的布局特征差异,研究发现:在空间集聚性上,民营企业网点呈现老城集聚,双核极... 全球经济一体化背景下,快递业已成为中国市场中拥有广泛关注和广阔前景的新兴物流产业之一。以南京市顺丰速递与EMS网点为例,揭示两类经营体制下快递企业网点的布局特征差异,研究发现:在空间集聚性上,民营企业网点呈现老城集聚,双核极化特征,而国营企业则分布更为均衡;在空间相关性上,民营企业网点以单中心集聚为主,而国营企业以多中心集聚为主;在网络关联性上,民营企业表现为“由有限峰值点向外发散”,而国营企业则呈现出“由城\郊中心区向外发散”的网络特征。在此基础上,定性与定量相结合剖析影响两类快递企业网点布局的外部与内部因素,并结合主要影响因素提出快递网点布局的优化建议。 展开更多
关键词 快递企业 网点布局 影响因素 顺丰速递 EMS 南京市
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快递业成本构成及顺丰速运成本控制 被引量:6
14
作者 陈威 王晓宁 《物流技术》 2015年第14期75-77,共3页
指出中国的快递业呈现出不合理的压低成本造成的低服务质量与行业恶性竞争,并在分析了我国快递行业的成本构成基础上,以顺丰速运为例探讨其经营管理成本机制,提出了合理有效地降低成本并提高竞争力的具体对策。
关键词 快递业 成本控制 顺丰速运 作业成本管理 直营模式
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基于O2O的顺丰“嘿客”便利店的商业模式分析 被引量:10
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作者 王莹 吴春珍 李榕芳 《湖南商学院学报》 2015年第2期41-44,共4页
O2O模式是基于互联网的有效线上线下模式,这种虚拟世界与现实世界相互打通的全新模式已经得到社会广泛人士的支持与认同。本文主要是围绕顺丰"嘿客"便利店的O2O商业模式进行研究,分析其创新的O2O业务、市场环境与供应链模型,... O2O模式是基于互联网的有效线上线下模式,这种虚拟世界与现实世界相互打通的全新模式已经得到社会广泛人士的支持与认同。本文主要是围绕顺丰"嘿客"便利店的O2O商业模式进行研究,分析其创新的O2O业务、市场环境与供应链模型,并对嘿客的自身管理模式和商业模式提出了一些建议。 展开更多
关键词 O2O 顺丰嘿客 电子商务 物流
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细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达 被引量:2
16
作者 李红兵 杨文 +6 位作者 陈健茂 刘强 王志辉 张昕 吴璟 郎多勇 王志昇 《宁夏医科大学学报》 2015年第2期120-124,F0004,共6页
目的利用昆虫细胞/杆状病毒系统表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白,用于开发包虫病新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等研究。方法从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR扩增细粒棘球蚴Eg95和Eg.f... 目的利用昆虫细胞/杆状病毒系统表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白,用于开发包虫病新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等研究。方法从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR扩增细粒棘球蚴Eg95和Eg.ferritin基因,采用基因拼接法将Eg95和Eg.ferritin融合,将该融合基因Eg95-Eg.ferritin插入到p Fast Bac DUAL载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf-9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blot鉴定。结果成功克隆了Eg95和Eg.ferritin基因,通过柔性氨基酸linker成功获得了融合基因Eg95-Eg.ferritin,经PCR和酶切鉴定成功构建了重组质粒p Fast Bac DUAL-Eg95-Eg.ferritin,Western blot结果证实表达蛋白能够被包虫病人标准阳性血清识别。结论在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中成功表达了细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白,与包虫病人标准阳性血清具有良好的反应性。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 Eg95-Eg.ferritin融合基因 杆状病毒 sf-9细胞 表达
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顺丰速运差异化竞争战略的选择与规划 被引量:6
17
作者 吴小梅 庄晓月 《厦门理工学院学报》 2015年第2期39-44,共6页
在我国快递业激烈竞争的行业格局下,基于顺丰速运的SWOT分析显示,差异化竞争战略是顺丰速运必然选择。顺丰速运应通过市场细分与定位策略和营销组合策略实施差异化战略。在市场细分与定位策略上,顺丰速运应立足于国内市场,以速度需求型... 在我国快递业激烈竞争的行业格局下,基于顺丰速运的SWOT分析显示,差异化竞争战略是顺丰速运必然选择。顺丰速运应通过市场细分与定位策略和营销组合策略实施差异化战略。在市场细分与定位策略上,顺丰速运应立足于国内市场,以速度需求型客户作为目标客户群体,选择文件和小件业务作为目标市场,坚持中高端市场定位,以优质高价来赢得市场;在营销组合策略上,应通过产品与服务的创新、差异化的定价策略、个性化的促销方案、直营基础上的渠道创新等方式,形成竞争优势。 展开更多
关键词 民营快递 顺丰速运 竞争战略 差异化
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重组截短型人角质细胞生长因子1在昆虫细胞中的表达 被引量:1
18
作者 薛萍 朱小静 +4 位作者 刘孝菊 李一兰 南佳 姜潮 李校堃 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期633-639,共7页
目的:探讨重组截短型人角质细胞生长因子1(rhKGF1D23)蛋白在昆虫细胞中表达的可行性,为rhKGF1D23蛋白的生产提供新的途径。方法:PCR法扩增昆虫偏爱密码子优化截短序列kgf1d23亚克隆到pFastbac载体。在辅助质粒的作用下,pFastBac-kgf1d2... 目的:探讨重组截短型人角质细胞生长因子1(rhKGF1D23)蛋白在昆虫细胞中表达的可行性,为rhKGF1D23蛋白的生产提供新的途径。方法:PCR法扩增昆虫偏爱密码子优化截短序列kgf1d23亚克隆到pFastbac载体。在辅助质粒的作用下,pFastBac-kgf1d23载体Tn7片段转座到Bacmid中mini-attTn7位点,得到穿梭载体Bacmid-kgf1d23,并通过脂质体法转染sf-9细胞得到杆状病毒P1。继续转染细胞扩增病毒并提高病毒滴度,蛋白表达分析从P3代病毒转染细胞开始,收集细胞超声裂解后进行纯化,MTT法检测纯化后目的蛋白生物活性。结果:昆虫偏好密码子改造的kgf1d23基因构建进转移载体pFastBac-kgf1d23和穿梭载体Bacmid-kgf1d23载体中。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白在60h后开始大量表达,优化的收获蛋白时间在84~96h;利用肝素亲和层析和SP阳离子交换层析可以去除90%以上的杂蛋白。纯化的rhKGF1D23蛋白在0.3~25.0μg.L-1时,随浓度的增加HaCat细胞的促有丝分裂能力增强,在25.0μg.L-1时达到平台期。结论:重组截短型角质细胞生长因子rhKGF1D23蛋白在昆虫细胞中得到表达,保持其特有的肝素亲和特性,并具有免疫原性及细胞生物学活性。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子1 截短突变 sf-9细胞 杆状病毒系统
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补肾健脾方药对老年大鼠肝脏衰老有关基因表达的影响 被引量:2
19
作者 黎志萍 赵伟康 +2 位作者 徐品初 陈方敏 姚明忠 《上海中医药大学学报》 CAS 2008年第4期61-64,共4页
目的:比较补肾、健脾方药对老年大鼠肝脏衰老有关基因表达的调控作用。方法:以自然衰老大鼠为衰老模型,随机分为老年对照组、老年补肾组、老年健脾组,并设青年大鼠对照组。予药物干预4个月后,采用RT-PCR和Western blot方法检测大鼠肝脏... 目的:比较补肾、健脾方药对老年大鼠肝脏衰老有关基因表达的调控作用。方法:以自然衰老大鼠为衰老模型,随机分为老年对照组、老年补肾组、老年健脾组,并设青年大鼠对照组。予药物干预4个月后,采用RT-PCR和Western blot方法检测大鼠肝脏抑癌基因p16、抑癌基因p21、细胞周期素D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素E(CyclinE) mRNA转录和蛋白的表达。结果:老年大鼠肝脏p16、p21和Cyclin D1 mRNA/蛋白的表达明显增高,而PCNA和Cyclin E mRNA/蛋白的表达明显降低。补肾方药可明显下调肝脏p16和Cyclin D1,上调PCNA和Cyclin E基因mRNA与蛋白的表达;健脾方药能明显下调肝脏Cyclin D1,上调PCNA和Cyclin E基因mRNA与蛋白表达,但对p16作用不明显。结论:补肾、健脾方药均能不同程度调控肝脏衰老有关基因表达,促进老年大鼠肝细胞增殖,但补肾方药作用似更明显。 展开更多
关键词 衰老大鼠 补肾方 健脾方 肝脏 基因表达
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顺丰速运发展的SWOT分析及营销对策研究 被引量:2
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作者 胡长深 《物流技术》 2015年第20期97-99,共3页
选取顺丰速运作为快递服务企业营销策略研究的对象,在探讨顺丰速运现状并进行SWOT分析的基础上,制定提升顺丰速运的服务营销水平的措施,希望对顺丰速运营销实践具有实际指导意义。
关键词 快递企业 顺丰速运 SWOT分析 营销策略
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