内标18S rRNA和-βactin mRNA比较:肉鸡十二指肠SGLT1 mRNA的发育规律

β-actin mRNA和18S rRNA因其在相同试验条件下的稳定表达，而被广泛用作内标基因来确定目的基因的表达量。试验分别使用这2种内标基因，用相对定量RT—PCR的方法对肉鸡（0-58d）十二指肠钠葡萄糖共转运载体1（Sodium glucose cotransporter 1，SGLT1）的发育规律进行了分析研究，比较不同内标基因对SGLT1 mRNA表达水平检测结果的影响，以确定两者在一致试验条件下表达的相似度。结果表明，分别以β-ctin mRNA和18S rRNA作为内标，SGLT1 mRNA表达发育规律完全一致，均表现为2～30d不断升高，44d下降，58d回升；2d和44d的SGLT1 mRNA丰度显著低于16d（P〈0．05）和30d（P〈0．05），58d的SGLT1 mRNA表达水平显著低于30d（P〈0．05）。提示这2种管家基因均可以作为内标用于肉鸡肠道转运载体基因mRNA发育规律的相对定量研究。

鸡肠道SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性研究

运用相对定量RT-PCR方法,研究不同肠段Arbor Acre(AA)肉鸡肠道葡萄糖吸收转运主要载体SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性。结果发现,随着肠道空间位置的后移,SGLT1 mRNA的表达量逐步降低。十二指肠SGLT1 mRNA的丰度比结直肠高76.19%,差异极显著(P<0.01);而空肠和回肠SGLT1 mRNA的表达量分别比结直肠高42.86%和38.10%,差异不显著(P>0.05),但有提高的趋势(P值分别为0.06和0.07)。十二指肠与空肠和回肠相比,SGLT1 mRNA的表达量虽然分别高23.33%和27.59%,但差异不显著(P值分别为0.18和0.10)。相对定量分析表明,十二指肠和空肠GLUT2 mRNA丰度非常接近,差异不显著(P>0.05)。定性研究显示,十二指肠与空肠GLUT2 mRNA丰度高于回肠和结直肠。鸡肠道SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性之生理功能,有待于进一步研究。

新生兔给予不同喂养对小肠各段刷状缘上SGLT1mRNA、GLUT5mRNA、LPHmRNA和SImRNA表达的调节

目的 了解新生兔出生后给予不同喂养对小肠刷状缘上SGLT1mRNA、GLUT5mRNA、LPHmR NA和SImRNA表达的影响。方法 应用RT PCR方法半定量评价SGLT1、GLUT5、LPH和SI基因在mRNA水平的表达量。结果 与母兔乳喂养组相比 ,5 %果糖、5 %葡萄糖和无乳糖配方乳喂养对SGLT1mRNA的表达没有调节作用 ,但可以使在十二指肠和小肠上段的SImRNA的表达量依次增加 (然各组之间并无统计学意义 )。此外 ,这 3种喂养方式亦可以使整个小肠的GLUT5mRNA表达量增加 ,其中给予 5 %果糖喂养的新生兔小肠上段的GLUT5mRNA表达量明显高于母兔乳喂养组。与此相反 ,以上 3种非母兔乳喂养方式却使小肠下段的LPHmRNA的表达量下降 ,尤其是生后无乳糖配方乳喂养方式可以使小肠下段的LPHmRNA表达量明显低于母兔乳喂养方式。结论 新生兔出生后给予不同喂养可以影响小肠上GLUT5mRNA和LPHmRNA的表达 ,但这种影响具有空间特异性。

止泻退热片治疗轮状病毒感染性腹泻的机制研究

目的探讨止泻退热片治疗轮状病毒(RV)腹泻的作用机制。方法以人轮状病毒A组G3型709株感染4d龄昆明种乳鼠,建立轮状病毒感染性腹泻模型,采用荧光定量PCR方法检测给药治疗后乳鼠小肠组织中Na+-葡萄糖共转运载体1(SGLT1) mRNA表达的变化,采用放射免疫的方法检测给药治疗后乳鼠小肠组织中前列腺素E2(PGE2)表达的变化。结果止泻退热片组乳鼠小肠组织中SGLT1 mRNA表达与正常组相比明显减少,具有显著性差异(P<0.05)。与模型组相比SGLT1 mRNA增加,但无显著性差异(P>0.05)。止泻退热片组乳鼠小肠组织中PGE2含量与正常组相比增加,差异具有显著性(P<0.05),与模型组相比减少,具有显著性差异(P<0.05)。结论止泻退热片治疗RV腹泻的作用机制与病毒感染影响宿主小肠上皮细胞SGLT1的表达变化之间无关,与抑制RV感染过程中肠上皮细胞分泌PGE2有关。