吉富罗非鱼sIgM基因多克隆抗体的制备及组织定位分析

为研究sIgM在吉富罗非鱼体内的组织分布及其在亚细胞水平上的定位,本实验利用纯化的SIGM融合蛋白,按照常规方法免疫新西兰大白兔,制备了兔抗吉富罗非鱼SIGM多克隆抗体;并对吉富罗非鱼肠、脾脏及鳃组织进行了免疫组织化学分析以及胶体金免疫电镜分析。结果显示,ELISA检测所获得的抗血清效价为1∶256 000,该血清能与SIGM融合蛋白发生特异性免疫反应。在肠和鳃组织中,阳性信号存在于富含黏液细胞的上皮细胞层表面,在杯状细胞和黏液细胞中则不存在;在脾脏组织中,阳性信号存在于特定的细胞中。免疫电镜结果显示SIGM主要存在于肠上皮细胞膜附近,并且在肠组织上皮细胞膜表面的微绒毛处含量较多;在鳃上皮组织中,SIGM主要存在于包围鳃丝和鳃小片的上皮细胞及部分红细胞内;而在脾脏组织淋巴细胞内部高尔基体的分泌小泡处存在大量的胶体金颗粒。研究表明,sIgM在鱼体黏膜免疫中具有重要作用,这为探讨鱼类sIgM的特性及功能奠定了基础,并丰富了鱼类黏膜免疫的研究内容。

鸡SIgM λ轻链蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

应用RT-PCR技术从鸡法氏囊B细胞总RNA中克隆出SIgM λ轻链基因,并将其进一步克隆于pET-28a载体T7启动子的下游,构建了pET-SIgM λ原核表达载体。转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导,成功表达了25.5kD的鸡SIgM λ轻链蛋白。经SDS-PAGE和Western blotting分析,表达产物以包涵体形式存在,且能与His-Taq单抗特异性反应,为进一步研究SIgM的免疫学功能及其他生物学功能奠定基础。

DT40细胞sIgMλ轻链基因的克隆鉴定及原核表达

本研究利用RT-PCR技术,从鸡法氏囊淋巴瘤细胞系DT40中扩增sIgMλ轻链基因并在E.coli中进行了表达。序列分析结果表明,sIgMλ轻链基因全长852nt,含有一个长度为657nt的ORF及长度为195nt的3'-UTR,该基因与鸡Igλ基因的序列同源性为95%,差异位点主要存在于λ轻链的可变区。氨基酸序列预测结果表明,DT40sIgMλ蛋白与鸡Igλ蛋白的序列同源性为92.6%。构建的原核表达载体pET-λ在E.coliBL21(DE3)中成功的获得大量表达。本实验为进一步研究sIgM在IBDV感染法氏囊B淋巴细胞中的作用奠定了基础。

DT40细胞sIgMλ轻链基因敲除载体的构建

从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆-βactin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建-βactin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框。将克隆的sIgMλ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂。PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向sIgMλ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR。为建立sIgMλ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究sIgMλ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础。

鸡传染性法氏囊病病毒与DT40 sIgM λ轻链的相互作用分析

为探讨sIgM λ轻链在IBDV感染法氏囊B淋巴靶细胞过程中的作用,对DT40细胞sIgM λ轻链与IBDV的相互作用进行了研究。利用蛋白表达、VOPBA试验、病毒结合与结合抑制试验检测了sIgM λ轻链及DT40细胞结合IBDV的能力。结果表明:sIgM λ轻链在体外能够特异性地结合多种不同毒株的IBDV,这种结合与病毒毒力无关;病毒结合与结合抑制试验结果表明,超过半数的DT40细胞可以结合IBDV,这种结合能够被sIgM λ轻链特异性单抗有效阻断。研究结果表明,sIgM λ轻链是DT40细胞膜表面上IBDV的重要结合位点之一,这为进一步利用DT40细胞研究IBDV感染B淋巴靶细胞的分子机制提供了重要线索。

基于6-sigm a理论构建儿科门诊输液管理新模式——儿科门诊输液计划单与收费单合二为一编制

门诊输液计划单和收费单是门诊输液中心诊治病人时的重要依据,是提高工作效率和保证工作质量的重要举措。运用6-sigm a方法,对儿科门诊病人输液流程中的质量关键点及流程中缺陷进行识别。分析影响病人等候时间,且我们又能改进的流程着手。做好输液计划单及收费单的改进工作,可以简化医生和护士的大量隐性工作量,从而使医生和护士有更多的时间用于提高医疗水平和医疗质量。

酶联免疫法检测梅毒19SIgM抗体的评价

以TP - 19S -IgM酶联免疫法对梅毒血清检测 ,表明其对一期梅毒的敏感性为 79 3% ,高于RPR法 (5 5 3% )及TPPA法 (72 4 % ) ,对于二期梅毒 ,其敏感性同于TPPA(均为 10 0 % ) ,却高于RPR法 (91 8% )。

SIGM视光高峰论坛:诚意之作 分量十足

本刊讯（记者丰华）9月9日下午,思格玛集团拓普康公司和中国眼镜协会在国展中心1号馆4楼合作举办了一场“SIGM视光高峰论坛”。本次论坛规模虽小,内容分量却十足。在中国眼镜协会崔毅理事长致辞之后,天津医科大学眼科医院副院长、新疆兵团第九师医院副院长汪建涛博士首先为大家作了“新疆塔额地区眼病和近视状况”的分析报告,随后业内知名专家齐备教授与所有人分享了中国视光产业的发展现状，并重点做了优劣之间的对比分析。

巨细胞病毒感染与动脉粥样硬化关系的研究

近年,动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)发生的病毒病因学研究日益受到人们的关注.本研究通过应用ELISA、PCR及原位杂交等技术对45例As病人及22例正常者血清及血管组织配对标本检测了HCMV—sIgG、sIgM及HCMV IE、L基因片段,以及其在血管组织中的分布.结果显示:As组中HCMV—sIgG抗体水平显著高于对照组,sIgM仅见于As组.HCMV IE及L基因的阳性率也显著高于对照,并且发现HCMV DNA多见于内膜下肌层及中膜平滑肌的细胞核,强烈提示HCMV感染与As的发生密切相关.同时,本文还就HCMV—sIgG及sIgM与HCMV基因检出的关系及意义作了探讨,为As的临床早期诊断、早期预防及针对性治疗奠定了基础.

腰椎间盘突出患者症状体征与CT影像学表现关系分析

目的分析腰椎间盘突出患者症状体征与CT影像学表现的关系。方法以本院2013年5月-2015年5月收治的104例腰椎间盘突出患者为研究对象,均行临床症状、CT影像学检查,评价腰椎间盘突出严重程度,并分析其与CT指标(髓核密度、许莫氏结节、神经根压迫等)的关系。结果腰椎间盘突出轻度、中度、重度患者在突出物形态、髓核突出病理类型、髓核疝密度、水平面突出大小、神经根压迫方式上比较差异有统计学意义(P<0.001)。腰椎间盘突出症状体征不同程度矢状径[(27.5±5.7)vs(34.3±6.0)vs(52.1±8.6)]mm、硬膜囊前后径(16.2±6.4)vs(11.0±3.1)vs(6.4±2.2)]mm比较差异有统计学意义(P<0.001)。症状体征严重程度与许莫氏结节、经骨突出、矢状面突出大小、黄韧带间隙无显著相关性(P>0.05)。结论腰椎间盘突出临床症状体征严重程度与突出物形态、髓核突出病理类型等部分CT指标相关。

混合菌发酵泔水的条件优化与效果研究

文章对黑曲霉(Aspergilus niger)d2和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)s1混合发酵泔水生产复合菌体蛋白的条件进行研究,并测定所得菌体的粗蛋白质量分数和发酵前后泔水中总糖、蛋白质、脂肪质量分数和COD(chemical oxygen demand)的变化。单因素实验结果表明,黑曲霉和酿酒酵母混合菌发酵的适宜碳源、氮源和无机盐分别为玉米淀粉、酵母膏和KH2PO4,最适pH值为5,温度为30℃。混合菌(黑曲霉、酿酒酵母)发酵菌丝干质量比黑曲霉发酵高20%。通过响应曲面法对混合菌发酵条件进一步优化,得到玉米淀粉和酵母膏的最适添加量分别为2.1%和3.2%,最适pH值为5.1。在上述条件下,发酵60h后测得菌体干质量约为18.53g/L,菌体的粗蛋白质量分数为47.6%。泔水中总糖、总氮和脂肪的利用率分别为85.6%、78.2%和67.9%,COD的去除率为90.4%。

最优组合预测模型在中国天然气需求预测中的应用

发展天然气工业是目前国家的一项重要政策,已被写入中国的"十三五"规划,因而合理地预测中国天然气的需求对国家制定能源政策非常重要.提出了一种基于最小二乘法的组合预测模型,并给出了对应模型参数的计算方法,利用GM(1,1)模型和SIGM模型以及2002—2017年的数据建立了预测模型,同时利用2002—2017年的数据对模型的准确性进行了评估,最后利用组合预测模型对2018—2022年中国天然气需求量进行预测,预测结果发现本模型优于其他单项预测模型,为天然气需求预测提供了新的思路.

现代汉语被动标记的功能

人们在表述一件事时首先要进行主动与被动的选择,选择被动时还要考虑对被动标记的选择,因为汉语中的被动标记不是唯一的。标记词标记的对象不同,其词性也发生变化。探讨被动标记在句子中的功能,有利于进一步认识和正确使用被动标记。被动标记的选择不是随意的,而是受限制的。

应用捕获ELISA检测肾综合征出血热患者尿液中特异性IgM抗体

目的 检测肾综合征出血热患者尿液中特异性IgM抗体 ,研究早期诊断方法。 方法 :用MacELISA法检测不同病日HFRS病人尿液中特异性IgM抗体。 结果 :HFRS病人尿夜中特异性IgM抗体总阳性率为 76.4 7% ,第 3病日即可出现阳性 ,7- 9病日阳性率可达 83 .87% ,与同期HFRS病人血清抗体检测对比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :用MacELISA检测HFRS尿液中特异性IgM抗体敏感性高 ,特异性强 ,适合早期诊断。

更好和更低-6σ的质量和成本理念

从降低质量成本、提高质量水平的角度介绍了不同质量水平下质量成本的结构,分析了6σ提高质量的思路。