SKF38393抑制大鼠DRG分离神经元GABA-激活电流

在大鼠新鲜分离DRG神经元标本上应用全细胞膜片箝记录，观察了多巴胺D1受体的选择性激动剂（±）SKF38393HCI对GABA-激活电流的作用。大部分受检细胞（60／70）对GABA敏感，10－6－10－3mol／LGABA可引起呈剂量依赖性的明显去敏感作用的内向电流。在这60个细胞中，预加SKF38393可引起三类膜反应如：（1）外向电流（7／60）；（2）内向电流（5／60）和（3）无反应（48／60）。与GANA激活的内向电流相比，SKF38393激活电流幅值较小，无明显去敏感现象。预加SKF3839330s对GABA-激活电流幅值的影响如下：产生抑制作用的为53／60，增强的为1／60，无明显作用的为6／60。在浓度10-7至10－4mol／L范围SKF38393对10－4mol／L的GANA-激活电流的抑制作用依赖于SKF38393的浓度。通过应用二次膜片箝（repatch）技术在同一细胞（n＝2）以及不同细胞组间（n＝14）进行对比，结果表明：细胞内加蛋白激酶抑制剂H－7后，SKF38393对GANA的抑制作用完全消除，看来SKF38393对GABA-激活电流的抑制作用可能是由于SKF38393使CABA受体通道复合体胞内磷酸化所致。

多巴胺D1受体激动剂SKF38393对剥夺血清条件下PC12细胞的保护作用

目的研究多巴胺D1受体激动剂SKF38393对剥夺血清所致PC12细胞损伤的神经保护作用及其与磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinases/protein kinase B,PI3K/Akt)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)信号通路的关系。方法将PC12细胞分为血清剥夺模型组、血清剥夺后加不同剂量SKF38393处理组(1μmoL、3μmoL、10μmoL、30μmoL和100μmoL)及1%胎牛血清对照组,比较各组PC12细胞活性;PC12细胞分别加入不同剂量(同上)SKF38393处理40min,以及以10μmoLSKF38393处理不同时间(5～80min),然后检测PC12细胞的Akt473及ERK1/2的磷酸化水平;PC12细胞分别加入PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002(50μmoL)、ERK信号通路抑制剂PD98059(50μmoL)或PD169316(10μmoL),后再行SKF38393干预,比较各组PC12细胞活性。结果与剥夺血清组比较,10μmoLSKF38393即可显著增加PC12细胞的活性[(0.58±0.02)vs(0.37±0.01)],并且随着其剂量(30μmoL、100μmoL)的增加PC12细胞活性的增加可更明显[(0.62±0.01)、(0.65±0.02)],上述差异均有统计学意义(P<0.05)。不同剂量SKF38393和不同时间的SKF38393处理PC12细胞后磷酸化的Akt和ERK的表达水平均明显高于剥夺血清组(P<0.05)。与SKF38393组的PC12细胞活性(0.59±0.01)比较,PD169316组细胞活性(0.41±0.14)无明显差异(P>0.05),但LY294002组(0.33±0.01)和PD98059(0.33±0.03)组细胞活性均更低(P<0.05),提示仅后二者可阻断SKF38393对PC12细胞损伤的保护作用。结论 SKF38393能保护剥夺血清所致的PC12细胞损伤,其保护作用可能与激活PI3K/Akt和ERK信号通路有关。

SKF 38393对伏隔核神经元兴奋性突触后电流的作用研究

目的:研究多巴胺D1受体的选择性激动剂SKF 38393对大鼠伏隔核棘状神经元自发兴奋性突触后电流的影响。方法:大鼠伏隔核切片,全细胞膜片钳记录神经元兴奋性突触后电流。结果:SKF 38393在较低浓度(100 nmol/L)时,增加自发兴奋性突触后电流频率,不改变其幅度;在较高浓度时(10μmol/L)时,对自发兴奋性突触后电流频率无明显影响,而显著升高其幅度。结论:D1受体激动剂对大鼠伏隔核棘状神经元谷氨酸受体介导的突触传递起双向的调节作用。

SKF38393抑制大鼠DRG分离神经元ATP-激活电流

目的 :探讨多巴胺D1受体的选择性激动剂SKF3 83 93HCl对ATP -激活电流的作用。方法 :在大鼠新鲜分离的DRG神经元标本上应用全细胞膜片钳技术 ,记录SKF3 83 93对ATP -激活电流的作用。结果 :大部分受检细胞 ( 87.5% ,77/ 88)对ATP敏感 ,10 - 6 ～ 10 - 3 mol/LATP可引起剂量依赖性呈明显去敏感的内向电流。在此77个细胞中 ,预加SKF3 83 93可引起三类反应 :①外向电流 ( 7.8% ,6/ 77) ;②内向电流 ( 2 6.0 % ,2 0 / 77) ;③无反应( 66.2 % ,51/ 77)。与ATP -激活电流相比 ,SKF3 83 93 -激活电流幅值小 ,无明显去敏感现象。预加SKF3 83 93 3 0～ 60s对ATP -激活电流的影响如下 :在 74.0 % ( 57/ 77)的细胞产生抑制作用 ,15.6% ( 12 / 77)的细胞产生增强作用 ,其余的无明显作用 ( 10 .4% ,8/ 77) ,本文主要针对此抑制作用进行探讨。此种抑制作用与SKF3 83 93本身是否引起或引起的是内向或外向电流无关。在浓度 10 - 9～ 10 - 4mol/L范围SKF3 83 93对 10 - 4mol/LATP -激活电流的抑制作用依赖于SKF3 83 93的浓度。胞内透析H 7上述抑制作用可完全被取消 ,而胞内透析H9此抑制作用依旧存在。结论 :SKF3 83 93对ATP -激活电流的抑制作用可能是由于D1受体激活后经G蛋白偶联及PKC途径使ATP受体磷酸化所致。

SKF38393对DRG神经元GABA-激活电流的抑制

在大鼠新鲜分离DRG神经元标本上应用全细胞膜片作记录,观察了多巴胺D_1受体的选择性激动剂(±)SKF38393HCI对GABA-激活电流的作用。大部分受检细胞(60/70)对GABA敏感。10^(-6)～10^(-3)mol/L GABA可引起呈剂量依赖性的明显去敏感作用的内向电流。在60个对GABA敏感的细胞中,预加SKF38393引起的膜反应如下:(1)外向电流(7/60);(2)内向电流(5/60);(3)无反应(48/60)。与GABA激活的内向电流相比,SKF38393激活电流幅值较小,无明显去敏感现象。预加SKF38393 30秒对GABA-激活电流幅值的影响如下:产生抑制作用的为88.33％(53/60),增强的为1.66％(1/60),无明显作用的为10.0％(6/0)。SKF38393对10^(-4)mol/L的GABA-激活电流的抑制作用依赖于SKF38393的浓度,在其浓度为10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)mol/L时对GABA-激活电流的抑制(±)分别为46.5％±2.3(n=8)、35.5％±1.2(n=8)、26.8％±1.5(n=7)、24.8％±2.6(n=7)。通过应用二次膜片作(repatch)技术在同一细胞(n=2)以及不同细胞组间(n=14)进行对比,证明:细胞内加蛋白激酶抑制剂H-7后,SKF38393对GABA的抑制作用完全清除。结果提示:SKF38393对GABA-激活电流的抑制作用可能是由于SKF38393激活D_1受体后通过胞内转导机制,使GABA受体通道复合体胞内磷酸化所致。

药物分子SK&F96067与β-环糊精之间形成包合物的研究

3 丁酰基 8 甲氧基 4 (2 甲基苯基氨基 )喹啉 (SK&F 960 67)是新合成的H+ K+ ATP酶抑制剂 ,它难溶于水。通过紫外吸收光谱、分子荧光光谱和1H NMR的方法研究该药物分子与 β 环糊精 (β CD)之间包合物的形成。研究发现在水环境中该药物分子的紫外吸收光谱有明显的等吸光度点 ;而且其荧光强度随着 β CD浓度的增大而增强 ,两者的拟合结果表明在水溶液中该药物分子能够与 β CD形成 1∶1(客体∶主体 )的包合物 ;1H NMR的谱图显示该药物分子喹啉环上的质子信号向低场迁移 ,这是由于其喹啉环部分地进入了 β CD疏水腔的结果。

两种不同钙离子拮抗剂SK&F96365和LOE908对心肌缺血再灌注损伤的保护效果比较

目的运用大鼠活体心肌缺血再灌注（ischemia／reperfusion，1／R）损伤模型，比较两种不同钙离子拮抗剂SK＆F96365和LOE908的心肌保护效果。方法健康雄性SD大鼠24只．250～300g，按随机数字表法随机分为4组（n=6）：Sham组、I／R组、SK＆F96365组和LOE908组。开胸后所有大鼠心脏适应10min．其中Sham组用5—0丝线穿过左冠状动脉前降支不缝扎90min。I／R组用5-0丝线缝扎左冠状动脉前降支30min后松开丝线恢复灌注60min。SK＆F96365组和LOE908组在I／R组基础上，分别在恢复灌注即刻静脉注射0．06mg／kgSK＆F96365和0．1mg／kgLOE908。测定各组大鼠颈动脉血浆内皮素-1（endothelin-1，ET-1）浓度和检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）和肌酸激酶同功酶（creatine kinase isoenzyme，CK-MB）浓度及心肌梗死面积。结果与Sham组相比，I／R组、SK＆F96365组和LOE908组中ET-1浓度均有所增高，差异有统计学意义（P〈0．05）。SK＆F96365组与LOE908组相对I／R组而言，LDH与CK—MB浓度降低，梗死面积减少，差异有统计学意义（P〈0．05）；但SK＆F96365组血浆LDH、CK—MB浓度及心肌梗死面积与LOE908组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SK＆F96365和LOE908两种不同的钙离子拮抗剂均可对大鼠活体心脏I／R损伤起保护作用，但两者之间的保护作用并没有差别。

多巴胺受体激动剂对乙醇引起大鼠纹状体抗坏血酸释放的影响

目的 研究多巴胺受体激动剂对乙醇引起大鼠纹状体抗坏血酸 (AA)释放的影响。方法 应用脑内透析技术结合高效液相电化学检测的方法。结果 乙醇 (3 0 g·kg-1,ip)显著增加纹状体抗坏血酸释放 ,高于基础水平的 2 0 0 %左右。多巴胺D1受体激动剂SKF 38393(10mg·kg-1,ip)对纹状体AA释放及乙醇引起纹状体AA释放均无显著影响。多巴胺D2 受体激动剂LY 1715 5 5 (0 5 ,1 0mg·kg-1,ip)显著增加纹状体AA释放及乙醇引起纹状体AA释放 ,但LY1715 5 5与乙醇对纹状体抗坏血酸释放的增加没有协同作用。具有多巴胺D1受体强拮抗剂和D2 受体强激动剂特性的溴隐亭 (10mg·kg-1,ip)在给药后 6 0min内对纹状体AA释放及乙醇引起纹状体AA释放均有显著的增加作用 ,且两者有协同作用。非选择性多巴胺受体激动剂阿扑吗啡也能增加纹状体AA释放及乙醇引起纹状体AA释放 ,而 0 2mg·kg-1的阿扑吗啡与乙醇有协同作用 ,0 4,0 8mg·kg-1的阿扑吗啡与乙醇没有协同作用。结论 多巴胺D2 受体的兴奋参与调节纹状体AA的释放 ,兴奋D2 受体同时抑制D1受体能够协同乙醇引起的大鼠纹状体抗坏血酸释放的作用。

免疫药物的研究动向

免疫药物的研究在70年代已广泛开展,到80年代达到了高潮,无论在免疫增强剂和免疫抑制剂两个方面均有重大进展,是生物学科的研究热点。本文将概要介绍这个领域的近年进展。

中枢D_1和D_2亚型多巴胺受体与左旋四氢巴马汀镇痛的关系

在兔耳K^+透入测痛模型上,左旋四氢巴马汀(1-THP,8mg/kg,iv)的镇痛作用被双侧脑室注射多巴胺(DA)受体广谱激动剂DA或去水吗啡(Apo)以及选择性D_1受体激动剂SKF-38393减弱,被选择性D_2受体激动剂喹吡罗加强。另外,采用放射免疫分析和高效液相色谱——电化学检测法分别观察到1-THP镇痛时脑脊液中cAMP含量降低,及DA及其代谢产物DOPAC含量升高。提示1-THP镇痛与中枢D_1和D_2亚型DA受体有关,其中D_1受体的阻断导致其镇痛,而D_2受体的阻断不利于其镇痛。

D_1及α_2受体激动剂对卵母细胞表达的GABA_A受体的抑制

目的 :研究SKF38393及Clonidine对表达的DRG神经元GABAA 受体的调制作用 ,并与新鲜分离细胞相比较。方法 :实验在注射鼠DRG神经元mRNA的卵母细胞上进行 ,以双电极电压钳技术进行研究。结果 :①SKF38393及Clonidine对表达的DRG神经元GABAA 受体有明显的抑制作用 ,其作用呈浓度依赖性。②SKF38393及Clonidine的诱导电流之间有相互抑制作用。③SKF38393及Clonidine对GABAA 受体的抑制作用是非竞争性抑制 ,并且为非电压依赖性。结论 :实验结果提示SKF38393及Clonidine可通过胞内转导 ,由第二信使介导GABAA 受体的磷酸化而抑制GABAA

外国产品打进日本市场的秘诀

随着日本经济日新月异的发展和人们生活水平的不断提高,一些外国商品顺同日本生活方式的西洋化而纷纷进入了日本市场。在日本东京的百货公司和商店里到处陈列着世界各地的商品,如外国产的食品、服装、化妆品、药品、电器用品等,

V_2加压素受体拮抗剂SK&F105494对猪子宫肌催产素受体的阻断作用(英文)

目的:确定V_2加压素受体拮抗剂SK&F105494(SK&F)对催产素受体的阻断作用。方法:采用猪离体子宫收缩试验和受体结合试验。结果:SK&F对赖氨酸加压素(Lyp)和催产素(Oxy)引起的子宫收缩均有阻断作用,并随SK&F浓度增加而加强。K_i值小于Lyp,近似于Oxy受体特异性阻断剂L-366948,分别为1.73±0.32,14.36±1.73和1.79±0.35nmol·L^(-1)。结论:SK&F对Oxy受体有强烈的阻断作用。

Relationship between electroacupuncture analgesia and dopamine receptors in nucleus accumbens

目的：研究多巴胺受体拮抗剂左旋四氢巴马汀（ｌＴＨＰ）加强电针镇痛（ＥＡＡ）的原理，阐明中枢神经系统内多巴胺（ＤＡ）系统在ＥＡＡ中的作用．方法：分别将Ｄ１受体激动剂ＳＫ＆Ｆ３８３９３和Ｄ２受体激动剂ｑｕｉｎｐｉｒｏｌｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Ｑｕｉ）注射入大鼠伏膈核，观察对ＥＡＡ及ｌＴＨＰ加强ＥＡＡ的作用．结果：ＳＫ＆Ｆ３８３９３（５μｇ，１０μｇ）明显对抗了ｌＴＨＰ加强ＥＡＡ的作用，１０μｇＳＫ＆Ｆ３８３９３则减弱ＥＡＡ；Ｑｕｉ（１０μｇ，２０μｇ），对ＥＡＡ及ｌＴＨＰ加强ＥＡＡ的作用没有显著影响．结论：伏膈核内Ｄ１受体活动在ＥＡＡ及ｌＴＨＰ加强ＥＡＡ中起重要作用，Ｄ２受体没有显著作用．

神经细胞中多巴胺D1和D5受体不同亚细胞分布和胞内转运的特性(英文)

目的探索多巴胺D1样受体家族的D1、D5亚型,可能有的不同的胞内转运(trafficking)特性。方法为了直接观察D1样受体的亚细胞分布,用绿色荧光蛋白(GFP)变体分别标记D1和D5受体,转染进神经瘤细胞系NG108-15中,并对它们进行定位,然后比较在D1受体激动剂SKF38393或乙酰胆碱(ACh)处理前后D1、D5受体亚细胞分布的异同,以研究它们胞内的转运特性。结果在静息条件下,D1受体特异分布在NG108-15的细胞膜上,而D5受体分布于细胞膜和胞浆内。以D1受体激动剂SKF38393孵育处理后,D1受体亚细胞分布发生改变,胞浆中出现代表D1受体的黄色荧光信号,提示D1受体被内吞;ACh的孵育处理也能引起D1受体异源内吞。与D1受体不同,经SKF38393或ACh处理后,D5受体亚细胞分布与静息条件下比较,未显示明显变化。这提示药物处理不引起D5受体由胞浆向细胞膜的转位(translocation)。当D1和D5受体共同表达在同一个NG108-15细胞中时,它们仍然保持各自的亚细胞分布模式。而且,SKF38393和ACh引起的D1或D5受体的细胞内定位状态,也并未因另一种亚型的存在而改变。结论当分别表达在神经瘤细胞系NG108-15上时,D1、D5两个受体亚型显示出不同的亚细胞定位和药物引起的不同胞内转运特性。当两者共同表达时,D1和D5又互不干扰。SKF38393和ACh都可以引起D1受体的内吞。我们对D1样受体家族这种不同的胞内转运特性在DA信号复杂调控中的可能作用,进行了讨论。

多巴胺受体亚型DRD2、DRD5在垂体瘤药物治疗中的作用

目的观察多巴胺5型受体(DRD5)、多巴胺2型受体(DRD2)在垂体瘤药物治疗中的作用,为垂体瘤药物治疗提供新策略。方法通过免疫组织化学检测了上海瑞金医院及仁济医院收治的33例垂体瘤组织标本中DRD5、DRD2表达情况。通过原代细胞实验技术分离垂体瘤细胞,卡麦角林、DRD5激动剂(SKF38393)、DRD2激动剂(Quinypirol)作用于原代细胞,采取MTS法检测细胞活性,分析33例垂体瘤患者DRD5、DRD2表达和药物疗效的相互关系。结果(1)免疫组化分析33例垂体瘤组织标本,泌乳素瘤17例、无功能腺瘤13例,生长素瘤3例。其中22例高表达DRD2(66.7%);24例高表达DRD5(72.7%)。(2)卡麦角林50μmol/L、喹吡罗50μmol/L、SKF38393 25μmol/L浓度作用于原代垂体瘤细胞;在33例原代细胞中,卡麦角林25例有效(75.8%),喹吡罗16例有效(48.5%),SKF38393有效15例(45.5%)。(3)卡麦角林、喹吡罗、SKF38393对DRD2和DRD5均高表达的原代细胞有效率分别为78.6%、71.4%、50%,对DRD2高表达而DRD5低表达的原代细胞有效率分别为75%、62.5%、12.5%,对DRD2低表达而DRD5高表达的原代细胞有效率分别为80%、10%、70%,对DRD2低表达且DRD5低表达的原代细胞则无明显活性变化。结论(1)垂体瘤中DRD2和DRD5均有比较丰富的表达量;(2)卡麦角林、DRD2激动剂、DRD5激动剂能效抑制垂体瘤的生长,其中以卡麦角林的有效率最高;(3)在缺乏DRD2的情况下,DRD5是另一个垂体瘤治疗的有效靶点。

Enhancement of (-)-stepholidine on protein phosphorylation of adopamineand cAMP-regulated phosphoprotein in denervated striatum of oxidopaminelesioned rats

目的：研究左旋千金藤立定（ＳＰＤ）对羟多巴胺损毁大鼠纹状体中ＤＡＲＰＰ３２蛋白磷酸化程度的影响．方法：反磷酸化测定脱磷ＤＡＲＰＰ３２的含量．结果：ＳＰＤ不改变正常大鼠纹状体中ＤＡＲＰＰ３２磷酸化的程度，但能拮抗Ｄ１激动剂的作用；对羟多巴胺损毁大鼠的损侧纹状体，ＳＰＤ使脱磷ＤＡＲＰＰ３２的含量降低４４％，给予Ｄ１拮抗剂可以拮抗这一作用．结论：在损侧纹状体，ＳＰＤ显示Ｄ１激动剂的作用特性，增加ＤＡＲＰＰ３２蛋白的磷酸化，而在正常纹状体，ＳＰＤ表现为Ｄ１拮抗剂．