原发性肉碱缺乏症2例报道及其家系的SLC22A5基因突变检测

目的探讨原发性肉碱缺乏症的诊断与治疗方案,对2例原发性肉碱缺乏症患儿及其家系行SLC22A5基因检测,确定基因突变位点,为家系提供遗传疾病的咨询。方法用串联质谱技术对1例疑似患儿进行游离肉碱及多种酰基肉碱检测,对游离肉碱降低的患儿行SLC22A5基因突变检测,确诊PCD,对其姐姐行上述检查。对2例确诊PCD患儿补充左旋肉碱治疗,随访11个月。并对其家系行SLC22A5基因检测。结果 2例确诊PCD患儿,1例为临床患儿,另1例为其姐姐,无明显临床表现。2例患儿均检测到基因突变。2例患儿血游离肉碱水平低于参考值,伴多种酰基肉碱显著降低,均给予补充左旋肉碱治疗,1例治疗2月后症状改善,另1例未曾未发病,血游离肉碱及其他酰基肉碱水平上升至正常。2例患儿SLC22A5 c.760C>T,(p.Arg254X)纯合,致病突变;患儿父母亲SLC22A5基因的c.760C位点检测,发现:均携带c.760C>T,(p.Arg254X)杂合突变。结论应用串联质谱技术检测血游离肉碱、多种酰基肉碱水平及SLA22A5基因突变检测诊断了2例PCD,均补充左旋肉碱取得较好疗效。SLC22A5基因c.760C>T,(p.Arg254X)突变是本家系中患有PCD的致病突变,用错义突变和剪切改变的分析手段对SLC22A5基因的外显子编码区进行直接测序可为PCD家系提供遗传咨询。

河南省原发性肉碱缺乏症的家系基因研究

目的 探讨河南省原发性肉碱缺乏症的家系基因变异特点,为家系提供遗传疾病咨询,提高出生人口素质。方法用串联质谱技术检测新生儿血浆游离肉碱水平和多种酰基肉碱水平,对疑似PCD患者用二代测序技术检测SLC22A5基因,对确诊的PCD患儿、致病基因携带者以及家系成员进行基因变异位点分析。结果 PCD确诊5例,致病基因携带者2例。其中有2例母亲出现低血糖、饥饿不耐受、易疲劳等症状;有1例患儿姐弟有运动不耐受、饥饿不耐受等症状。其他无明显临床症状。家系基因检测7例,共有9种变异类型,错义变异6种,无义变异1种,剪接区变异2种。结论 应用串联质谱技术及二代测序技术对6个家系进行PCD诊断,明确了致病变异位点,可为PCD家系提供有效的遗传咨询。经左旋肉碱的补充得到良好的疗效。

新生儿筛查发现的原发性肉碱缺乏症临床与基因分析

目的探讨原发性肉碱缺乏症的临床和基因突变特点。方法回顾分析2013年12月—2016年12月以串联质谱技术新生儿筛查发现的6例原发性肉碱缺乏症及2例母源性肉碱缺乏患儿的临床资料。结果 8例患儿血游离肉碱初筛值为(5.85±1.65)μmol/L,召回复查值(5.22±1.02)μmol/L,其中6例原发性肉碱缺乏症患儿采用基于Ion Torrent半导体测序技术的遗传代谢病Panel进行基因诊断,均检测到2个等位基因致病性突变;口服左旋肉碱治疗后血游离肉碱(20.24±3.88)μmol/L,继续随访中;另2例母源性肉碱缺乏患儿混合喂养1周后血游离肉碱基本恢复正常,未进行基因诊断。结论采用串联质谱技术新生儿筛查及二代测序Panel可有效检出原发性肉碱缺乏症,早期规范治疗预后良好。

40例肉碱缺乏症新生儿的生化和遗传学特征

目的:原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)是一种罕见的可致新生儿死亡的脂肪酸代谢紊乱性疾病。本研究对新生儿足跟血行串联质谱分析筛查出的肉碱缺乏儿,进一步行血肉碱水平分析及SLC22A5基因检测,为PCD的早期诊断提供依据,同时探索血肉碱水平与SLC22A5基因型的关系。方法:收集新生儿血串联质谱筛查游离肉碱(free carnitine,C0)值<10μmol/L的40例患儿为研究对象,用Sanger测序方法对PCD的致病基因SLC22A5基因进行检测,分析肉碱水平、基因检测结果及两者的关系。结果:共检出SLC22A5基因变异15种(42个),包括11种致病或可能致病变异和4种意义不明变异。发现c.288del G(p.G96fs X33),c.744745ins TCG(p.M258L259ins S),c.752A>G(p.Y251C),c.495C>A(p.R165E),c.1298T>C(p.M433T)5种新突变。在40例串联质谱初筛肉碱缺乏的患儿中,14例被确诊为PCD,包括SLC22A5基因纯合突变2例,复合杂合突变12例;14例检出1个SLC22A5基因突变;12例未检出SLC22A5基因突变。确诊为PCD的患儿初筛C0值为(4.95±1.62)μmol/L,复查C0值为(3.90±1.33)μmol/L;未检出突变的患儿初筛C0值为(7.04±2.05)μmol/L,复查C0值为(8.02±2.87)μmol/L,确诊为PCD的患儿与未检出突变患儿的初筛及复查C0值差异均有统计学意义(均P<0.05);检出截短突变的患儿与未检出截短突变的患儿初筛C0值差异有统计学意义(P=0.022)。结论:发现的5种新突变丰富了SLC22A5基因突变谱;新生儿足跟血串联质谱初筛C0值<5μmol/L与SLC22A5基因纯合或复合杂合突变型具有更强的相关性;具有截短突变的患儿较不含截短突变患儿的C0值可能更低。

原发性肉碱缺乏症临床和基因突变特点及1例产前诊断研究

目的探讨原发性肉碱缺乏症的临床特点、基因突变及产前基因诊断。方法回顾分析8例原发性肉碱缺乏症患儿的临床资料、基因突变分析结果,以及1例患儿母亲再次妊娠羊水细胞产前基因诊断结果。结果6例男性、2例女性患儿,发病年龄5个月~3岁,以呕吐、腹泻、抽搐、意识障碍等就诊。血浆游离肉碱均降低(0.67~4.184μmol/L),血红蛋白均偏低(67~110 g/L)。6例患儿存在不同程度肝功能和心肌酶异常,6例血氨升高,2例血糖降低。心脏彩超示心肌病4例。心电图异常2例。SLC22A5基因共检出6种突变,分别为c.760 C>T(p.Arg 254 X)、c.1400 C>G(p.Ser 467 Cys)c.844 dupC(p.R 282 PfsX 10)、IVS 2+1 G>T、c.3 G>T(p.Met 1 Ile)、c.338 G>A(p.Cys 113 Tyr)。1例患儿染色体微阵列分析显示5 q 23.3 q 31.3区域存在大片段杂合性缺失。1例患儿母亲再次妊娠18周时的羊水细胞检出c.760 C>T杂合突变,提示胎儿为携带者,出生后外周血SLC22A5基因存在一个c.760 C>T杂合突变位点,血浆游离肉碱浓度无异常。除1例患儿猝死外,其余7例经左卡尼汀治疗有效,随访中。结论原发性肉碱缺乏症患儿起病急,心肌、肝脏损伤尤为突出,左卡尼汀治疗效果肯定。SLC22A5基因分析可作为确诊和产前诊断的依据。

菏泽市新生儿原发性肉碱缺乏症串联质谱筛查分析

目的了解原发性肉碱缺乏症(PCD)在菏泽市新生儿中的发病率,并对基因突变特点、治疗及预后进行分析。方法利用串联质谱技术对2016年1月至2020年12月258682例新生儿进行血酰基肉碱谱检测,对初筛游离肉碱(C0)低于9μmol/L伴有多个酰基肉碱下降的新生儿及母亲进行串联质谱、二代测序基因检测。结果共确诊游离肉碱缺乏症21例,其中9例原发性肉碱缺乏症,11例母源性肉碱缺乏症,1例父源性肉碱缺乏症。8例进行基因检测,其中7例检测到2个等位基因(孩子5例、母亲1例、父亲1例)、杂合1例。SLC22A5基因共发现10种基因突变位点:c.1400C>G、c.51C>G、c.95A>G、c.865C>T、c.680G>A、c.761G>A、c.760C>T、c.952-21C>G、c.572A>G、c.1229G>A。其中c.952-21C>G、c.572A>G以及c.1229G>A,均为新发突变位点。结论利用串联质谱技术筛查结合二代测序技术可早期检出原发性或母源性肉碱缺乏症。经左卡尼汀治疗的患儿预后良好,可有效预防猝死。菏泽市新生儿原发性肉碱缺乏症患病率约为1/28743,与国内已报道的发病率接近。基因检测发现10种SLC22A5基因突变位点,其中c.1400C>G位点在菏泽市出现频率较高,3个新发突变位点,新突变的位点丰富了SLC22A5基因的突变图谱。

原发性肉碱缺乏症一家系的SLC22A5基因突变检测与产前诊断

目的对1例原发性肉碱缺乏症患儿及其家系进行SLC22A5基因突变检测，确定其突变位点，为家系提供遗传咨询和产前诊断。方法收集该家系成员的外周血标本及先证者母亲的羊水标本，提取基因组DNA，运用Sanger法对家系中各成员进行SLCY2A5基因lO个外显子的直接测序，并对羊水标本行常规染色体核型分析及应用多重连接依赖探针扩增技术（multiplex ligation-dependent probe amplificating，MLPA）检测常见染色体微缺失综合征。结果Sanger法DNA测序检测出该家系中先证者携带sLC22A5基因12．760C〉T（P．R254X）纯合突变，先证者父亲、母亲和姐姐均携带SLC22A5基因e．760C〉T（P．R254X）杂合突变。先证者母亲羊水标本也检测出SLC22A5基因c．760C〉T（P．R254X）杂合突变，羊水染色体核型分析及MLPA检测均无异常发现。结论SLC22A5基因c．760C〉T突变可能是本家系中先证者患原发性肉碱缺乏症的致病突变，Sanger测序等技术可为原发性肉碱缺乏症家系提供遗传咨询和产前诊断服务。

原发性肉碱缺乏症的筛查与患者SLC22A5基因突变分析

目的探讨原发性肉碱缺乏症（pfimary camitine deficiency，PCD）患者的临床特点和SLC22A5基因突变情况。方法利用液相（色谱）串联质谱技术对徐州市2015年9月至2017年12月出生的210908例新生儿和576例临床遗传代谢病疑似患儿进行游离肉碱及酰基肉碱检测，对游离肉碱降低的患儿进行SLC22A5基因突变分析以确诊。对确诊患儿的临床表现、生化特点、基因特点及治疗预后进行分析，并采用配对样本t检验对患儿治疗前后的生化指标进行比较。结果共确诊10例PCD患儿（其中9例来自新生儿筛查，1例来自临床患儿）和7例母源性肉碱缺乏症患者，口服左卡尼汀治疗后血游离肉碱和其他酰基肉碱水平恢复正常。1例来自临床患儿的临床症状消失，16例来自新生儿筛查的患儿无任何临床症状，生长发育正常。17例患儿均进行基因突变检测，共检出10种突变类型，分别为c．1400C〉G、c．1462C〉T、c．797C〉T、c．95A〉G、c．92C〉T、c．1093A〉C、c．761G〉A、c．865C〉T、c．428C〉T、c．1195C〉T，其中c．1093A〉C和c．92C〉T为新突变，c．1400C〉G为最常见的突变类型。结论液相（色谱）串联质谱技术可筛查出新生儿及母源性肉碱缺乏症患者，徐州地区c．1400C〉G突变出现频率最高，早期治疗预后良好。

八例原发性肉碱缺乏症SLC22A5基因突变分析

目的分析8例原发性肉碱缺乏症（systemic primary carnitine deficiency，CDSP）患者的SLC22A5基因突变情况。方法采用串联质谱技术对泉州地区77511例样本进行遗传代谢病筛查，发现8例原发性肉碱缺乏症患者（其中有1例为母源性CDSP），应用MassArray技术结合Sanger测序法对CDSP患者SLC22A5基因突变位点进行检测，寻找可能的致病突变位点。对发现的新变异采用SIFT和PolyPhen-2进行蛋白功能预测。结果8例患者均检测到SLC22A5基因突变，其中7例为复合杂合突变，1例为纯合突变。共发现6种突变类型，包括1种无义突变[c．760C〉T（p．R254X）]和5种错义突变[c．51C〉G（p．F17L）、c．250T〉A（p．Y84N）、c．1195C〉T（p．R399W）、c．1196G〉A（p．R399Q）、c．1400C〉G（p．S467C）]。其中，c．250T〉A（p．Y84N）为SLC22A5基因新变异，新变异可能影响蛋白质的结构和功能。c．760C〉T（p．R254X）突变频率最高，c．1400C〉G（p．S467C）突变频率次之。结论本研究分析了8例原发性肉碱缺乏症患者的SLC22A5基因突变情况，从基因水平上证实了8例CDSP的诊断，发现了1个新的突变位点，丰富了SLC22A5基因的突变谱。

广州市原发性肉碱缺乏症新生儿筛查评估及SLC22A5基因变异谱特征

目的评估原发性肉碱缺乏症(PCD)新生儿筛查性能、优化筛查指标,并探讨广州地区PCD发病率及SLC22A5基因变异特点。方法广州市新生儿筛查中心采用串联质谱法对辖区内2015至2019年出生的200180名新生儿进行多种遗传代谢病筛查,以游离肉碱(C0)<10μmol/L伴多种酰基肉碱降低为PCD筛查阳性,召回新生儿及其母亲复查,复查仍阳性者进行SLC22A5基因测序确诊。回顾性分析筛查结果,同时以丙酰基肉碱与棕榈酰基肉碱之和(C3+C16)作为多种酰基肉碱的辅助量化指标,并评估其效果。PCD新生儿及PCD母亲所生新生儿血酰基肉碱水平比较采用独立样本t检验。以广州地区2395名健康儿童外显子测序中SLC22A5基因结果计算人群致病变异携带率,推算PCD发病率。结果在200180名新生儿中筛查阳性239例,阳性率0.12%,确诊PCD 37例,其中PCD新生儿15例,PCD母亲22例,新生儿PCD发病率为1/13345,分娩母亲人群PCD发病率约为1/9099,阳性预测值15.5%。初筛C0<10μmol/L共810例,增加量化指标(C3+C16),以C0<8.5μmol/L或C08.5~9.9μmol/L伴(C3+C16)<2μmol/L为阳性切值,则筛查阳性224例,确诊37例,不增加假阴性。PCD新生儿与PCD母亲所生新生儿两组间初筛C0及(C3+C16)水平差异均无统计学意义[分别为(6.2±2.4)比(5.0±1.8)μmol/L,(1.4±0.4)比(1.2±0.5)μmol/L,t=3.826、0.326,P=0.058、0.572]。7例PCD母亲有不同程度的晨起头晕、疲劳,其中1例在妊娠期出现心肌病。SLC22A5基因分析显示,PCD新生儿常见3种变异为p.S467C、p.F17L、p.R254X;PCD母亲及健康儿童常见3种变异均为p.S467C、p.F17L及p.R399W,罕见重型变异p.R254X。健康儿童SLC22A5基因致病变异携带率为1/65,推算人群PCD发病率为1/16500。结论PCD新生儿筛查可同时检出新生儿患者及母亲患者,增加多种酰基肉碱量化指标(C3+C16)<2μmol/L可改善新生儿PCD筛查性能。重型变异p.R254X在PCD新生儿中常见,而在PCD母亲和健康儿童中罕见,提示低估了广州地区PCD患病率,可能漏检部分PCD新生儿。

原发性肉碱缺乏症一家系的SLC22A5基因突变检测与产前诊断

目的对原发性肉碱缺乏症(PCD)病患者及一家系进行致病基因SLC22A5突变鉴定,为家系提供遗传咨询和产前诊断,同时研究c.394-1 G>T突变所导致的SLC22A5基因剪接形式的改变。方法收集患者及父母的外周血标本,提取基因组DNA,采用Sanger法对家系中各成员进行SLC22A5基因的所有外显子进行测序,同时对发现的突变在100名正常对照中进行测序,以排除多态性位点;使用QIAGEN血液RNA提取试剂盒抽提患儿总RNA,通过RT-PCR和测序技术分析c DNA序列特征。对先证者母亲的羊水标本进行产前诊断。结果 Sanger法DNA测序检测出该家系中先证者为SLC22A5基因的两个杂合突变:c.394-1 G>T,c.760C>T(p.R254X),在100名正常对照中均未发现这两个位点的突变。先证者父亲、母亲分别携带SLC22A5基因c.394-1 G>T、c.760 C>T(p.R254X)杂合突变。先证者母亲的羊水标本的基因型与先证者一样。先证者的特定片段RT-PCR产物电泳时较非携带者的正常人多出一条小的亮带,经测序确认是由c.394-1 G>T突变导致SLC22A5基因c DNA外显子2完整序列的缺失。结论 c.394-1 G>T突变位点在国内外仅一例报道,本研究证实该突变的存在,同时证明该突变导致SLC22A5基因c DNA外显子2完整序列的缺失。这一发现丰富了SLC22A5基因突变谱,为原发性肉碱缺乏症(PCD)病的防治提供新的参考,Sanger测序等技术可为原发性肉碱缺乏症家系提供遗传咨询和产前诊断服务。

海南省少数民族地区新生儿原发性肉碱缺乏症筛查及SLC22A5基因突变特点

目的分析海南省少数民族地区新生儿原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)筛查情况及溶质载体家族22A5(solute carrier family 22 member 5,SLC22A5)基因突变特点。方法通过液相(色谱)串联质谱分析技术对2014年6月至2016年6月海南省8个少数民族自治市县52403例新生儿血氨基酸谱、游离肉碱(free carnitine,C0)及酰基肉碱进行检测,召回PCD初筛可疑阳性的新生儿及其母亲复查,分析确诊PCD新生儿及PCD母亲所生新生儿的血酰基肉碱谱动态变化,采用Sanger测序法结合MassArray技术测定确诊病例的SLC22A5基因突变位点,对PCD新生儿补充左卡尼汀治疗,随访,观察患儿发育情况。结果海南省8个少数民族市县2年期间检出PCD新生儿8例,发病率为1/6550;PCD母亲12例,发病率为1/4367;PCD新生儿组初筛时C0、(C3+C16)水平与PCD母亲所生新生儿组相比,差异无统计学意义(P>0.05);PCD新生儿组复筛时C0、(C3+C16)水平均比初筛时降低(P<0.05);PCD母亲所生新生儿组复筛时C0水平比初筛时增高,(C3+C16)水平均比初筛时降低(P<0.05);PCD新生儿检出8种变异,最常见的是c.1400C>G(p.S467C)、c.51C>G(p.F17)、c.760C>T(p.R254X);1种为新发突变,为c.1380C>A(p.N460K)。PCD母亲检出7种变异,最常见的是c.1400C>G(p.S467C)、c.51C>G(p.F17L)、c.1195C>T(p.R399W),1例重型变异c.760C>T(p.R254X);8例PCD均接受左卡尼汀治疗,预后良好,但终止治疗可诱发不良事件。结论海南省8个少数民族市县新生儿PCD发病率较高,液相(色谱)串联质谱分析技术可有效检出PCD,增加多种酰基肉碱量化指标(C3+C16)可提升筛查性能;c.1400C>G(p.S467C)、c.51C>G(p.F17)可能成为海南省少数民族地区新生儿PCD的SLC22A5基因热点突变类型;左卡尼汀治疗效果好,预后良好。

河南省原发性肉碱缺乏症的新生儿筛查及基因突变分析

目的分析河南省新生儿原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)的患病率、临床特征和基因突变特点,为PCD的早期诊断、治疗以及遗传咨询和产前诊断提供依据.方法采用串联质谱分析技术,对2013年1月至2017年12月河南省的720667例新生儿进行遗传代谢病筛查,对初筛可疑阳性的新生儿母亲进行串联质谱检查,对确诊PCD病例及家系进行肉碱转运蛋白SLC22A5基因突变检测验证,对确诊病例分析其临床、生化改变及基因突变特点,进行补充左旋肉碱及饮食指导,随访观察其生长发育情况.结果共确诊PCD新生儿21例,母亲5例,河南省新生儿PCD患病率为1/34317.共发现SLC22A5基因突变18种,其中14种为已知致病突变,4种新发变异:c.1484T>C、c.431T>C、c.394-1G>T、c.265-266insGGCTCGCCACC;常见突变c.1400C>G、c.760C>T和c.51C>G等位基因频率最高,分别为42.3%(22/52)、11.5%(6/52)和7.7%(4/52).对确诊新生儿补充左旋肉碱50~100mg/(kg·d),随访6~56个月,均未出现临床症状,生长发育正常.结论河南省新生儿PCD患病率为1/34317.筛查发现PCD患儿均无临床症状.c.1400C>G可能为河南省PCD患者的热点突变类型,发现了4种新发变异,丰富了SLC22A5基因的突变谱.

原发性肉碱缺乏症与心肌病

左旋肉碱(又称左卡尼汀,简称肉碱)是协助长链脂肪酸从细胞质转运至线粒体进行β氧化的重要物质。肉碱缺乏导致长链脂肪酸代谢障碍,尤其是在饥饿和应激情况下导致能量产生不足。原发性肉碱缺乏症属常染色体隐性遗传病,SLC22A5基因突变导致肉碱转运蛋白OCTN2缺陷,引起线粒体脂肪酸β氧化障碍,是少数可治疗的代谢性肌肉病之一。原发性肉碱缺乏症患者可在任何年龄阶段起病,轻重不一,个体差异显著。婴儿期可在上呼吸道感染、胃肠炎等普通疾病诱发下出现急性代谢紊乱,常见低酮症性低血糖、代谢性酸中毒、高尿酸血症,一些患儿伴心律紊乱、心功能衰竭、脂肪肝、脑损害。在儿童至成人可表现为慢性进行性或急性心肌病及骨骼肌肌肉病,早期诊断、左卡尼汀支持治疗是挽救生命的关键。

广西地区原发性肉碱缺乏症新生儿筛查代谢谱及基因变异分析

目的分析广西地区原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)新生儿筛查代谢谱和基因变异谱,了解广西地区人群的患病率和基因变异特点。方法采用串联质谱技术(MS/MS)对广西新生儿疾病筛查中心辖区内从2014年1月至2019年12月行新生儿遗传代谢病筛查的400575份样本进行分析,初筛阳性者召回新生儿和其母亲复筛,复筛仍阳性者行SLC22A5基因检测。结果共确诊PCD新生儿22例(患病率为1/18208),母亲9例。对其中22例(18例新生儿和4例母亲)行基因检测,发现SLC22A5基因14种44个变异位点,其中变异频率最高分别为c.51C>G(10/44,22.7%)、c.1195C>T(9/44,20.5%)和c.1400C>G(7/44,15.9%)变异,所有变异均为致病性;同时发现2种未报道的新变异c.1031C>T和c.517delC,根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南,c.517delC(p.Leu173Cysfs*3)变异被评估为致病(PVS1+PM2_supporting+PM3+PP4),c.1031C>T(p.T344I)变异被评估为可能致病(PM1+PM2_supporting+PM3+PP3+PP4)。结论c.51C>G、c.1195C>T和c.1400C>G为广西地区的热点变异。

肉碱转运障碍携带者基因结果分析与疾病预防

目的运用串联质谱与基因测序技术对柳州地区肉碱转运障碍携带者SLC22A5基因结果进行分析,了解本地区肉碱转运障碍携带者SLC22A5致病基因突变类型与频率,为该人群三级预防策略提供精准依据。方法选取2019年7—12月于柳州市妇幼保健院出生的正常新生儿疾病筛查样本2093例进行串联质谱及基因测序分析,确诊肉碱转运障碍对象,对其串联质谱结果及基因测序结果进行分析。结果在2093例SLC22A5基因测序结果中,确诊23例肉碱转运障碍携带者共7种SLC22A5致病基因突变类型。携带者串联质谱游离肉碱(C0)结果与正常新生儿差异有统计学意义(P<0.001)。结论柳州地区肉碱转运障碍携带者存在较高发生率以及多种突变类型,其串联质谱筛查指标游离肉碱与正常新生儿比较,差异有统计学意义,对该群体制定三级预防策略,应同时结合生化表型、临床表型及基因表型结果。

一个核黄素反应型多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症家系的基因突变分析

目的对1例误诊为原发性肉碱缺乏症（primarycarnitinedeficiency，PCD）的核黄素反应型多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（riboflavinresponsive-multipleacyl-CoAdehydrogenasedeficiency，RR-MADD）患儿及父母进行基因突变分析，以确定患儿的致病基因突变及误诊的原因。方法分析l例误诊为原发性肉碱缺乏症并用肉碱治疗7年的RR-MADD患儿的临床表型和腓肠肌活检的电镜检查特点，对患儿及父母进行电子转运黄素蛋白脱氢酶（electron transfer flavoprotein dehydrogenase，ETFDH）基因及肉碱转运蛋白基因（SLC22A5）进行突变检测。结果患儿肌肉活检的电镜观察显示大量脂质沉积。基因测序结果显示患儿的ETFDH基因第3外显子存在c．250G〉A和c．380T〉C复合杂合突变，患儿的父母分别为c．380T〉C和c．250G〉A的杂合突变携带者。患儿SLC22A5的基因测序未发现致病突变。患儿经基因确诊后同时补充肉碱与大剂量核黄素，病情得到改善。结论ETFDH基因第3外显子c．250G〉A突变（p．Ala84Thr）是我国南方人群中的1个突变热点，而c．380T〉C突变（p．Leu127Pro）在我国人群中罕有报道。该误诊提示诊断性治疗效果不能替代基因检测。单纯补充肉碱治疗RR-MADD可控制病情达7年，其原因有待于进一步探讨。

10例原发性肉碱缺乏症新生儿的基因诊断

目的对新生儿原发性肉碱缺乏症(PCD)基因突变谱进行分析,为PCD早期诊断和治疗以及遗传咨询和产前诊断提供理论依据。方法对进行新生儿串联质谱筛查的34 167份滤纸干血片进行血酰基肉碱谱分析,对其中游离肉碱(C0)低于10μmol/L的新生儿及父母行SLC22A5基因测序。结果酰基肉碱谱筛查C0低于10μmol/L的新生儿10例,患儿母亲游离肉碱均未见降低,10例患儿的SLC22A5基因测序检测到10种20个突变位点,其中c.976C>T、c.919del G、c.517del C、c.338G>A未见报道,生物信息学分析提示高致病风险。结论串联质谱技术结合SLC22A5基因测序有助于PCD早期诊断,新突变的发现丰富了SLC22A5基因突变谱。

一个原发性肉碱缺乏症家系的基因突变分析及产前诊断

目的分析1例原发性肉碱缺乏症(primary carnitine deficiency,PCD)患儿及其父母SLC22A5基因的突变类型,为其家系成员提供遗传咨询及产前诊断。方法采集患儿和父母的外周血样,提取基因组DNA,用PCR及Sanger测序对SLC22A5基因10个外显子的编码区及剪接区进行检测。患儿母亲于孕中期抽取羊水,分离羊水细胞进行SLC22A5基因的突变分析。结果患儿,男,10天,新生儿疾病筛查血液酯酰肉碱谱分析示游离肉碱偏低,尿有机酸分析未见异常,患儿母亲血游离肉碱谱筛查未见异常,高度怀疑原发性肉碱缺乏症。Sanger测序发现患儿SLC22A5基因存在已知致病突变c.1195C>T(p.Arg399Try)和未报道的变异c.517delC(p.Leu173Cysfs*3),父母双方均为携带者。其母第3胎羊水细胞SLC22A5基因未检出上述变异。胎儿出生后血液酰基肉碱谱正常,发育正常。结论通过家系SLC22A5基因分析,成功对下一胎进行了产前诊断。新突变的发现丰富了SLC22A5基因的突变谱。