从家蚕体分离的一种新微孢子虫SLN1的研究

从家蚕体中分离到一种新的病原性微孢子虫SLN1,其孢子形态大小与Nosemabombycis相似 ,而极丝较短。感染寄生于肌肉、气管上皮细胞、脂肪等组织 ,致病性弱 ,胚种传染率低。在孢子形成期产生多孢子芽膜 ,孢子形成数为 8个 ,与Nosemabombycis无血清学关系 ,分类于Thelohania属。

表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌对仔猪安全性及免疫效力研究

为了检验青岛农业大学预防兽医学重点实验室构建的能够表达猪传染性胃肠炎SLN基因的乳酸乳球菌对仔猪的安全性及免疫效力,试验以口服的方式给试验猪免疫重组菌,监测免疫接种后试验猪体重、临床症状及肠道内正常菌群的变化;给小鼠等非靶标性动物口服该重组菌,检验其安全性,同时利用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法监测仔猪体内特异性IgG抗体的变化情况。结果表明:试验仔猪口服免疫重组菌后体重与肠道内正常菌群不受影响,重组菌对仔猪及非靶动物没有致病性,且不会向环境微生物转移; ELISA检测该重组菌免疫仔猪后特异性IgG抗体与免疫前相比有明显差异。说明重组SLN基因的乳酸乳球菌对于预防猪传染性胃肠炎是安全有效的。

超声引导下穿刺活检操作用于乳腺癌患者SLN转移诊断过程中的价值

目的:研究将超声引导下穿刺活检操作应用于乳腺癌患者中的作用与效果。方法:选取2010年1月—2020年10月期间我院接收的乳腺癌病例80例,在进行手术以前,处在超声的引导下,对前哨淋巴结(SLN)进行穿刺与活检,观察其最终的结果。结果:处在超声的引导下,穿刺活检SLN的总检出率为95.83%(69/72);穿刺活检SLN病理检测灵敏度、特异性、总正确率依次是96.55%(56/58)、100.00%(56/56)、97.10%(67/69)。结论:超声引导下穿刺活检操作应用到乳腺癌患者中,能够获得更为理想的效果,能够更为准确地评判出乳腺癌是否出现了SLN转移。

口服水飞蓟素固体脂质纳米粒（SM-SLN）肝靶向性的动物实验研究

采用冷却-匀质法制备了平均粒径为170nm的水飞蓟素固体脂质纳米粒(SM-SLN),用其给小鼠灌胃后,采用高效液相法(HPLC)测定小鼠血浆和各脏器中的药物浓度,以相对摄取率(re)、靶向效率(te)和峰浓度比(Ce)三个指标定量地评价了SM-SLN的肝靶向性.结果表明,SM-SLN组中的肝脏相对于血浆和其它脏器的te值均大于1,且肝脏中的re值(7.50)、Ce值(8.12)均为最大值,说明SM-SLN具有良好的肝靶向性.SLN可以作为治疗肝脏疾病药物的良好肝靶向载体.

番茄SlN-like的克隆、表达与抗病毒功能

【目的】番茄(Solanum lycopersicum)作为重要的蔬菜作物,其生长受到包括害虫、真菌、细菌和病毒等各种生物因素的危害。明确番茄抗性基因SlN-like的抗病毒功能与机制,为番茄的抗病毒育种与抗病毒药剂的靶向开发提供理论依据。【方法】从茄科植物基因组数据库Solanaceae Genomics Network中获得SlN-like的全长,并将其分为4段,利用融合聚合酶链式反应(fusion PCR)扩增获得SlN-like的序列全长;通过生物信息学分析SlN-like的进化关系、蛋白特征、保守结构域、亚细胞定位以及互作关系;通过实时荧光定量PCR分析SlN-like在番茄根、茎、叶、花和果实中的表达情况及其在烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)侵染后的叶片表达量;借助烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默技术(virus induced gene silencing,VIGS)沉默番茄内源SlN-like,摩擦接种TMV-GFP于沉默植株,明确SlN-like对病毒侵染的影响。实时荧光定量PCR分析沉默植株中脱落酸(abscisic acid)、茉莉酸(jasmonic acid)和乙烯(ethylene)激素相关基因的表达量及SlN-like在外施乙烯利(ethephon,ETH)3、6、12、24 h后的表达情况,最终明确SlN-like调控激素途径响应病毒侵染的机制。【结果】通过分子克隆与融合PCR技术,从番茄品种Micro-Tom中克隆获得全长3444 bp的SlN-like,上传至NCBI获得序列号MW792493。通过生物信息学分析发现SlN-like含有TIR、NB-ARC和NACHT结构域,并与马铃薯(Solanum tuberosum)N-like(AAP44394.1)亲缘关系最近。SlN-like在番茄各组织中均有表达,在茎中的表达量最高,其次是根、花,叶和果实中的表达量最低。TMV-GFP侵染番茄后第5、7天SlN-like的表达显著高于PBS处理,分别是PBS处理的1.6和2.2倍,并且TMV-GFP侵染会使SlN-like的表达持续升高。TRV载体介导沉默番茄的SlN-like,发现沉默78.3%的SlN-like不会影响番茄生长表型,但可促进TMV-GFP侵染;实时荧光定量PCR分析发现沉默植株中ERF1的表达显著降低,仅为对照组的12.5%;外施乙烯利处理番茄3 h后SlN-like表达量升高,并在12 h达到最高峰,是对照组的2.71倍,24 h后恢复正常。【结论】番茄SlN-like属NBS-LRR类抗病蛋白,其表达受TMV侵染诱导,沉默SlN-like促进TMV-GFP侵染,降低乙烯相关基因ERF1的表达,而外施乙烯利导致SlN-like的差异表达,揭示了SlN-like作为正调控因子可能影响乙烯途径介导的番茄抗病毒防御。

雷公藤内酯醇新型SLN包封率的测定及载体材料筛选

目的由于单一载体材料包封药物,易于形成高度结晶的颗粒将药物排出晶格,使传统SLN载药量和包封率较低,为此本实验室运用固、液态复合载体材料制备了包载药物雷公藤内酯醇的新型SLN。方法运用4种包封率测定方法对雷公藤内酯醇在7种载体材料中的包封性能进行考察,结合微观分析手段TEM(透射电子显微镜)和AFM(原子力显微镜)以及激光粒度(LD)和Zeta电位对新型SLN物化性能进行表征。结果发现以液体状态存在的三辛酸甘油酯对药物的包封能力较好,拥有混合载体材料结构Compritol ATO 888对雷公藤内酯醇的包封率亦较高,而运用上述2种复合载体材料制备的雷公藤内酯醇新型SLN更获得高达93%的包封率。TEM和AFM形貌观察,颗粒呈球状,比较规则,平均粒径102 nm,Zeta电位低于-25mV,冰箱长期留样研究表明系统比较稳定。结论最终选择Compritol ATO 888和三辛酸甘油酯作为复合载体材料制备雷公藤内酯醇新型SLN载体系统。

正交设计优化TMZ-SLN处方组成与制备工艺

以替莫唑胺为模型药物,硬脂酸为载体材料,采用乳化-低温固化法制备替莫唑胺固体脂质纳米粒,正交试验设计优化处方组成和制备工艺,并对纳米粒的结构形态、粒径、表面电位、包封率、体外释药特性等进行了研究。结果表明,以优化处方制备的替莫唑胺固体脂质纳米粒为类球形实体,粒径分布比较均匀,平均粒径为65.0±6.2nm,ξ电位为-37.2mV,包封率为58.9%±1.21%,药物体外释放符合Higuchi方程,经差示扫描量热法(DSC)分析证明纳米粒确已形成。

SLN基因下调对心肌细胞氧化应激损伤保护作用的机制研究

目的探讨肌脂蛋白(SLN)基因下调对心肌细胞氧化应激损伤的保护作及作用机制。方法培养心肌细胞AC16,分为对照组、过氧化氢(H2O2)组、H2O2+si-SLN组和H2O2+si-SLN+LY294002(磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路抑制剂)组,MTT检测细胞活性,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中磷酸肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western blot检测AC16细胞SLN、磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位(P13K p85α)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平。结果与对照组比较,H2O2组AC16细胞活性明显降低,CK和MDA水平明显升高,SOD水平明显降低,SLN蛋白表达水平明显升高,P13K p85α和p-Akt蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与H2O2组比较,H2O2+si-SLN组AC16细胞活性明显升高,CK和MDA水平明显降低,SOD水平明显升高,P13K p85α和p-Akt蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与H2O2+si-SLN组比较,H2O2+si-SLN+LY294002组AC16细胞活性明显降低,CK和MDA水平明显升高,SOD水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SLN基因下调可能通过P13K/Akt信号通路保护H2O2诱导的心肌细胞氧化应激损伤。

定位SLN及保肛术后化疗加自拟中药方灌肠治疗直肠癌的临床研究

目的探讨定位SLN及保肛术后,化疗加自拟中药方灌肠治疗直肠癌的临床疗效。方法选择低位直肠癌患者,麻醉后注射纳米碳进行SLN的定位。然后取低位直肠癌、SLN阴性患者100例,分为两组:实验组50例,行保肛手术疗法;对照组50例,采用Miles术,两组患者术后均进行化疗加中药灌肠治疗。比较患者2年内治愈率、复发转移率、术后并发症、排便功能、生活质量等。结果定位SLN的检出率达93%,结果准确可靠;实验组患者在临床疗效、排便功能和生活质量上均有明显的提高;术后行化疗加自拟中药方灌肠治疗,效果良好,患者满意率高。结论定位SLN及保肛术后,化疗加自拟中药方灌肠治疗直肠癌的临床效果确切,安全可靠,术后取得满意疗效,值得临床推广应用。

乳腺癌SLN中CD_(25)^+T及NK细胞的免疫组化研究

目的分析乳腺癌SLN中CD25+T及NK细胞的变化规律。方法从2001年4月～2003年6月所进行的乳腺癌SLNB病例中,选择应用CK19单抗检测到SLN具有微转移的病人12例,并随机选择无转移的9例,HE有转移的10例共82个SLN。将82个SLN分为无转移、微转移及转移组;选择CD25及CD56单抗,采用免疫组化SABC的方法,计数5个高倍视野下阳性染色细胞数和淋巴细胞总数的比值,取其平均值,得出阳性细胞百分比率。结果82个SLN中未转移35个,微转移20个,转移27个;3组淋巴结中CD25+细胞占总淋巴细胞的百分比率在无转移组与微转移组间差异无统计学意义(P=0.260)、而在微转移组与转移组间差异有显著性(P<0.01)。3组SLN中NK细胞占总淋巴细胞的百分比率差异无显著性(F=0.755,P>0.05)。结论在SLN无转移和微转移状态下,CD25+细胞的数量无明显变化,而一旦出现HE转移,则CD25+细胞的数量显著增加。SLN转移与否,NK细胞的数量无明显变化。

乳腺癌SLN中CD8^+T细胞及DC的动态分析

目的:分析乳腺癌SLN中CD8+T细胞及DC的变化规律.方法:自2001-04/2003-06所进行的乳腺癌SLN活检病例中,选择应用CK19mAb检测到SLN具有微转移的患者12例,并随机选择无转移的9例,HE有转移的10例共82个SLN.将82个SLN分为无转移、微转移及转移组;选择CD8单抗及S-100多抗,采用免疫组化SABC,计数5个高倍视野下阳性染色细胞数和淋巴细胞总数的比值,取其平均值,得出阳性细胞百分比率.结果:82个SLN中未转移35个,微转移20个,转移27个;三组淋巴结中CD8+T细胞和S-100+DC占总淋巴细胞的比率有统计学差异(P<0.01).结论:乳腺癌SLN中一旦出现肿瘤转移,即使是微转移,也能使CD8+T细胞的数量明显减少;SLN出现微转移对DC数量无明显影响,而一旦出现明显转移,则可使DC的数量显著减少.

固体脂质纳米(SLNs)在抗寄生虫药物中的应用研究进展

基于抗寄生虫药物应用面临的问题以及在预防和治疗寄生虫病中的重要作用,固体脂质纳米(SLNs)因其独特的优势成为当前研究的热点。从SLNs可以提高抗寄生虫药物的口服吸收、增强胞内感染治疗疗效、提高药物安全性和渗透性能以及靶向性传递等四个方面阐述了目前SLNs在抗寄生虫药物传递中的研究现状,为后续进一步研究提供参考。

从SLN看网络课程中互动对学习效果的影响

此文以凯伦·斯万主持的美国纽约州立大学网络学习系统(SUNY learning network)的调研为例，探讨了异时远程教育中的师生之间的互动与改善学生学习效果之间的关系，揭示了与网络课程成功紧密相关的三个因素：①一个清晰而连贯的课程结构设置；②一位频繁地建设性地与学生互动的老师；③倍受重视的、充满活力的讨论。另外作者还从语言学、教学法和社会学等三个方面分析了互动的内涵及重要性。总之，文章阐述了互动在网络教学中的重要性，并希望我国远程教育者能从中得到启发。

表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性的研究

为探究表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌口服免疫动物诱导的特异性免疫应答,本研究构建了p MG36e-SLN重组质粒并将其电转化至乳酸乳球菌感受态细胞MG1363中,制备表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌,经SDS-PAGE、Western-blot分析鉴定目的基因表达,并将重组菌口服免疫新西兰大白兔,利用间接ELISA方法测定家兔小肠黏膜和血清中抗SLN蛋白特异性Ig G和Ig A。结果显示,表达重组SLN蛋白的重组菌经口服能够有效引起动物体产生较高水平抗SLN蛋白Ig G和一定量的抗SLN蛋白Ig A,表明该重组菌表达系统能刺激动物免疫系统产生应答,具有作为口服疫苗的潜在应用价值。

乳腺癌前哨淋巴结超声影像准确性多因素分析与豁免前哨淋巴结活检术的可行性研究

目的:探讨乳腺癌前哨淋巴结超声影像诊断准确性影响多因素Logistic分析及与豁免前哨淋巴结(SLN)活检术的可行性。方法:选择在医院行腋窝淋巴结检查的118例疑似乳腺癌患者,所有患者均行超声影像检查后行病理SLN活检术,并根据诊断结果将其分为符合组(10例,假阴性率<10.0%)和不符合组(108例,假阴性率≥10.0%),分析超声影像检查在乳腺癌SLN中的诊断准确率,对可能影响诊断准确率的因素进行单因素及多因素Logistic分析。结果:在118例乳腺癌患者中,经SLN诊断阳性12例,确诊率为10.17%;超声影像检查诊断阳性18例,诊断符合率为91.53%。超声影像检查在乳腺癌SLN中诊断灵敏度为83.33%,特异度为92.45%,假阴性率为28.57%;单因素及多因素Logistic分析结果表明:超声影像在乳腺癌SLN诊断准确率与患者年龄、肿瘤大小及乳腺患侧部位无统计意义;病灶强化特点、肿块形状、淋巴结(LN)长径、LN短径、非肿块样强化内部强化特征、肿块样强化特征以及肿块边缘是超声影像在乳腺癌SLN诊断准确率的影响因素(OR=7.892,OR=6.791,OR=5.457,OR=6.632,OR=4.313,OR=5.412,OR=6.323;P<0.05)。结论:超声影像在乳腺癌SLN的诊断中与SLN活检术符合率较高,因此在临床诊断中具有较高的应用价值。

前哨淋巴结转移>2个的老年乳腺癌患者腋窝淋巴结转移影响因素分析

目的分析前哨淋巴结(Sentinel lymph node,SLN)转移>2个的老年乳腺癌(Senile breast cancer,SBC)腋窝淋巴结(Axillary lymph node,ALN)转移患者的临床病理特征,为老年乳腺癌免行腋窝淋巴结清扫术提供依据。方法选择我院普外科2016~2023年收治的120例SLN转移>2个的老年乳腺癌患者作为研究对象,并对其临床资料进行回顾性分析。结果SLN转移>2个的老年乳腺癌患者发生ALN转移与Her-2阳性表达、临床分期、年龄、肿瘤大小、Ki-67阳性表达率、ER、肿瘤侵及脉管有关,差异均有统计学意义(P<0.05);与组织学分级、肿瘤位置、肿瘤个数、PR无关,差异均无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄较小、临床分期高、Ki-67阳性表达率高、肿瘤侵及脉管是SLN转移>2个的老年乳腺癌患者发生ALN转移的独立危险因素。结论年龄、临床分期、Ki-67阳性表达率、肿瘤是否侵及脉管等病理特征与SLN转移>2个的老年乳腺癌ALN转移密切相关,不存在以上高危因素者或许可避免行腋窝淋巴结清扫术(ALND)。

超声造影在乳腺癌原发灶切除后前哨淋巴结的价值

【目的】探讨早期乳腺癌原发灶切除术后经皮与经静脉超声造影(P-Ⅳ-CEUS)的联合使用在前哨淋巴结中的应用价值。【方法】回顾性分析42例外院早期乳腺癌原发灶切除术后患者的临床-影像资料,所有患者均在我院进行再次手术。术前行前哨淋巴结P-Ⅳ-CEUS检查,术中采用亚甲蓝示踪剂进行前哨淋巴结切除活检,分析超声造影和前哨淋巴结活检的检出率和假阴性率,以手术病理结果为金标准,探讨超声造影对前哨淋巴结的诊断效能。【结果】前哨淋巴结经皮超声造影(P-CEUS)的检出率和假阴性率分别为92.9%(39/42)和7.1%(3/42),亚甲蓝染色的检出率为100%(41/41),1例因穿刺证实为转移性进行新辅助治疗;P-Ⅳ-CEUS的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、准确率分别为66.7%(2/3)、100%(37/37)、100%(2/2)、97.3%(36/37)、97.4%(38/39)。【结论】早期乳腺癌原发灶切除术后P-Ⅳ-CEUS的联合使用可精准检出前哨淋巴结并准确判断其性质,为术前减少有创前哨淋巴结活检提供可靠依据。

术前血小板-淋巴细胞比值与浸润性乳腺癌非前哨淋巴结转移的关联性研究

目的探讨术前血小板-淋巴细胞比值(PLR)与浸润性乳腺癌非前哨淋巴结(SLN)转移的关联性。方法回顾性分析2013年1月至2022年1月广西壮族自治区人民医院收治的280例前哨淋巴结活检(SLNB)阳性的浸润性乳腺癌患者的临床资料。通过多因素logistic回归分析非SLN转移的影响因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析PLR对浸润性乳腺癌患者非SLN转移的预测效能。结果ROC曲线分析结果显示,PLR具有预测浸润性乳腺癌患者非SLN转移的应用价值[AUC(95%CI)=0.569(0.508~0.627),P=0.046],最佳截断值为134.85。多因素logistic回归分析结果显示,SLN转移数>1枚(OR=4.41)、有脉管浸润(OR=6.71)、人表皮生长因子受体2(HER2)阳性(OR=2.18)是非SLN转移的独立危险因素(P<0.05);以PLR≤134.85为参考,PLR>134.85者非SLN转移风险更低(OR=0.56,P<0.05)。结论治疗前PLR水平与浸润性乳腺癌非SLN转移具有关联性,应引起临床医师关注。

向日葵和马铃薯间作条件下氮素的吸收和利用

间套作不但能提高作物产量和资源利用效率,也是有效降低土壤风蚀的重要措施。明确间套作体系中氮素竞争与互补机理,提高氮素利用效率对区域农业可持续发展有着重要意义。该研究于2010年和2011年在内蒙古武川进行了大田试验,利用半微量凯氏定氮方法测定植株各器官氮素含量和氮吸收量,探讨间作中作物对氮素吸收和利用的特征。结果表明,从系统角度出发,向日葵和马铃薯间作系统的氮吸收当量比(NER)为0.95～1.02,差异不显著,这种间作模式对作物氮的吸收效率没有影响。从作物角度出发,间作没有显著提高向日葵的氮素吸收和利用效率,却降低了系统中马铃薯的氮素吸收和利用效率。间作中,向日葵氮偏吸收当量比为0.53～0.74,大于其种植比例(50%),说明间作向日葵具有显著的氮素竞争和吸收优势;而马铃薯氮偏吸收当量比为0.28～0.42,低于其在间作中所占的比例(50%),处于显著劣势。间作马铃薯产量(鲜薯质量,80%含水率)的氮素生理利用效率(NPE)为249.2g/g,略低于单作(269.8g/g),其中4行马铃薯:4行向日葵(4P:4S)间作马铃薯的NPE为238.2g/g,显著低于单作。4P:4S间作向日葵产量(籽粒质量,12%含水率)的NPE为30.1g/g,高于单作(25.9g/g)和2行马铃薯:2行向日葵(2P:2S)间作的NPE(22.8g/g)。在4P:4S间作模式中,向日葵的NPE有所提高,作为代价,降低了马铃薯的NPE。间作中马铃薯的收获指数HI(0.83)低于单作(0.87),间作向日葵的HI(0.40)高于单作的HI(0.33)。间作作物NPE的变化主要受作物收获指数HI的影响。