胚胎大鼠脊髓运动神经元的体外培养及鉴定

本实验建立了体外胚胎大鼠脊髓运动神经元的分离培养 ,并进行鉴定。取孕 15dSD大鼠胚胎的脊髓腹侧组织 ,用胰蛋白酶和胶原酶消化分离成单细胞悬液 ,进行原代细胞培养 ,应用神经元特异性的烯醇化酶 (NSE)抗体和抗神经微丝抗体 -SMI3 2单克隆抗体对培养细胞进行鉴定 ,同时行尼氏染色。结果分离培养的细胞鉴定为脊髓运动神经元 (SMN) ,SMN在体外适宜的条件下可存活 4周左右 。

胶质细胞源性神经营养因子体外对脊髓运动神经元的作用

目的 :观察不同浓度的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF) ,对大鼠胚胎脊髓运动神经元生长活性的作用。方法 :取大鼠胚胎脊髓腹侧组织体外分离 ,进行原代细胞培养 ,应用抗神经微丝单克隆抗体 (mAb)SMI32进行运动神经元的免疫细胞化学染色 ,从细胞形态学及应用MTT比色法 ,研究GDNF对大鼠脊髓运动神经元的影响。结果 :GDNF能明显促进体外培养的大鼠脊髓运动神经元存活及突起的生长 (P <0 .0 5 ) ,且具有剂量依赖的趋势。结论 :不同浓度的GDNF对体外培养的大鼠胚胎脊髓运动神经元 。