草苁蓉纳拉苷对SMMC-7721肝癌细胞上皮-间质转化的抑制作用

目的探讨草苁蓉纳拉苷(Boschniakia rossica boschnaloside,BRBN)对SMMC-7721肝癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)以及侵袭、迁移的抑制作用。方法用转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导SMMC-7721肝癌细胞建立EMT模型。将其分为对照组、模型组、BRBN组,利用细胞划痕愈合实验检测肝癌细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测肝癌细胞侵袭能力,Western blot法检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白、Slug、Twist1、ZEB1及信号转导和转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的蛋白表达。结果TGF-β1使SMMC-7721肝癌细胞发生纤维状间质样改变,E-钙黏蛋白表达下调,N-钙黏蛋白和波形蛋白表达上调,提示SMMC-7721细胞获得间质表型。与模型组比较,BRBN组SMMC-7721细胞侵袭率和迁移率均显著降低(P<0.05),E-钙黏蛋白表达显著升高(P<0.05),N-钙黏蛋白和波形蛋白表达显著降低(P<0.05),Slug、Twist1、ZEB1蛋白表达均显著下调(P<0.05),STAT3磷酸化水平显著降低。结论BRBN可抑制SMMC-7721肝癌细胞侵袭、迁移,其作用机制可能与STAT3介导的EMT逆转有关。

白藜芦醇通过下调PRMT5表达抑制肝胆管癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和细胞周期

目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞术和WB法分别检测Res处理后PRMT5 mRNA在LO2和SMMC-7721细胞中的表达,Res对SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡,以及PRMT5、cyclin D1和cyclin E1蛋白表达的影响。结果:PRMT5在SMMC-7721细胞中呈高表达(P<0.01);20、40、80μmol/L Res均能明显抑制PRMT5 mRNA和蛋白在SMMC-7721细胞中的表达(均P<0.01),抑制SMMC-7721细胞的增殖能力(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05),阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期并促进其凋亡(P<0.01),明显抑制SMMC-7721细胞中周期蛋白cyclin D1、cyclin E1蛋白的表达(P<0.01)。结论:PRMT5在SMMC7721细胞中呈高表达,Res可有效抑制SMMC-7721细胞的增殖和侵袭能力并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PRMT5表达相关。

甘草黄酮诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对相关蛋白survivin表达的影响

目的:探讨甘草黄酮(GF9)对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GF9对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的影响,Hoechst染色法和电镜观察GF9诱导细胞凋亡的形态变化,流式细胞仪检测GF9诱导的细胞凋亡率,并通过免疫印迹法检测凋亡相关蛋白survivin和pro-caspase-3表达水平的变化。结果:GF9可抑制SMMC-7721细胞增殖,并呈时间剂量效应;400!mol/LGF9可诱导细胞凋亡,呈时间依赖性;随着GF9作用时间的延长,survivin和pro-caspase-3表达下调。结论:GF9能诱导SMMC-7721细胞凋亡,这可能与GF9能够引起抑制凋亡蛋白survivin的下调有关。

苦参碱诱导SMMC-7721细胞分化过程中侵袭转移相关指标的实验研究

目的 :研究苦参碱诱导人肝癌SMMC 772 1细胞分化过程中对其侵袭转移能力的抑制作用。方法 :SMMC 772 1细胞体外培养 ,0 5 g/L、0 8g/L、1 0 g/L浓度的苦参碱分别处理细胞 ,通过生长曲线测定、细胞形态观察、细胞粘附试验、运动试验、侵袭试验全面观察苦参碱对该细胞株的生长增殖、形态变化、侵袭转移等各方面的诱导分化作用。结果 :经 0 8g/L和 1 0g/L浓度的苦参碱处理后 ,SMMC 772 1细胞的生长增殖明显减缓 ,恶性细胞形态逐渐向成熟细胞分化 ,肿瘤细胞与FN的粘附力、细胞穿膜运动力、对基底膜的降解力等侵袭转移相关指标均受到显著抑制。结论 :苦参碱是一种较好的诱导分化剂 ,不仅抑制细胞的生长增殖 ,诱导细胞形态分化 ,而且从细胞的粘附、运动、降解等多环节全面抑制SMMC 772 1细胞的侵袭转移能力。

β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒体膜电位ΔΨm变化。结果β-谷甾醇、豆甾醇均明显抑制SMMC-7721细胞增殖,使细胞形态发生典型凋亡变化,凋亡率和细胞内Ca2+、ROS的含量均显著增加,线粒体膜电位降低。β-谷甾醇使细胞周期阻滞在G2/M期,而豆甾醇则同时阻滞在S期和G2/M期。结论β-谷甾醇、豆甾醇具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导细胞凋亡的作用。

乳香挥发油抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用

目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细胞DNA降解的影响;利用流式细胞术分析乳香挥发油诱导SMMC-7721凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响;应用间接免疫荧光法观察凋亡调控基因bax和bcl-2蛋白的表达变化。结果乳香挥发油浓度为0.7、0.07、0.007、0.0007、0.00007mg.mL-1作用24h时,能抑制SMMC-7721的生长,并呈浓度依赖性。在浓度为0.07mg.mL-1时,作用48h或72h,电泳结果显示了DNA梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰,且细胞被阻滞于G1期。间接免疫荧光法的结果表明,促凋亡蛋白bax的表达增强,抗凋亡蛋白bcl-2的表达无明显变化。结论乳香挥发油能抑制肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并可能通过上调线粒体内bax/bcl-2的表达比例诱导SMMC-7721细胞的凋亡,而且其诱导的凋亡具有细胞周期依赖性。

复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞作用的实验研究

选用人肝癌SMMC－7721肿瘤细胞，分别采用MTT法、流式细胞仪检测复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞体外增殖抑制率、细胞周期、凋亡率的影响。提示18．75～300μl／ml的复方苦参注射液在作用48h时对人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞的增殖抑制率在12．3％～82．5％，随着浓度的增加，细胞增殖抑制率逐渐上升，呈剂量依赖性。复方苦参注射液终浓度75μl／ml作用后的人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞G0～G1期明显增高，S期、G2～M期的细胞比例明显减少，凋亡率（58．21％）明显高于对照组（4．17％）。提示复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞具有明显的增殖抑制作用，并影响细胞周期，促进其凋亡。

刺梨三萜对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响

目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量的测定分析RRTT对SMMC-7721分化的影响;采用AO/EB染色法和FCM检测RRTT对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR检测Bad mRNA的表达。结果:RRTT对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。与阴性对照组比,随RRTT剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,AFP含量逐渐降低。RRTT对SMMC-7721细胞凋亡和增殖周期均无明显影响。RRTT作用后,Bad mRNA的表达下调。结论:RRTT具有体外抗SMMC-7721作用,其机制可能通过下调Bad mRNA的表达而诱导细胞分化,而与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡无关。

Survivin反义核酸对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中surv iv in基因的mRNA含量;W estern印迹显示Surv iv in蛋白水平也被降低。M TT比色实验法检测结果说明人Surv iv in反义寡核苷酸抑制SMM C-7721细胞增殖,抑制率为43%,远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMM C-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性,TUNEL法检测结果显示,在较低高三尖杉酯碱浓度下,反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示,surv iv in表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。

半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P(0.001),细胞凋亡率明显上升(P(0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。

藤黄酸促进bax和p53表达诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡(英文)

目的:观察藤黄酸(gambogicacids,GA)对肝癌细胞凋亡的诱导作用并探讨其分子作用机制。方法与结果: 采用MTT比色法检测藤黄酸对人肝癌和人正常肝细胞增殖作用的影响,结果表明,藤黄酸对人肝细胞性肝癌SMMC 7721 细胞株和QGY 7701细胞株有明显增殖抑制作用,并呈剂量依赖性,而对正常人肝组织L 02细胞株作用相对较弱;光镜及电镜形态学观察结果显示,给予GA后,肝癌细胞发生明显的细胞凋亡形态学变化,如细胞体积变小,细胞核固缩,出现凋亡小体等;采用RT PCR和Westernblotting方法检测baxmRNA以及bax和p53蛋白表达变化,结果表明GA可诱导baxmR NA及bax和p53蛋白表达上调;琼脂糖凝胶电泳显示,给予GA后,SMMC-7721裸小鼠移植瘤组织呈现典型的DNAladder 电泳梯状条带。结论:藤黄酸可显著抑制人肝癌细胞的增殖,其分子作用机制可能通过促进bax和p53表达上调,从而诱导人肝细胞性肝癌细胞凋亡。

熊果酸诱导人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡机制的研究

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法:MTT法测定UA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用;Wright-Giemasa染色和Hoechst33258荧光染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR检测细胞凋亡相关基因p53和Fas的表达。结果:UA对SMMC-7721细胞生长有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为45.72μmol/L。Wright-Giemasa染色、Hoechst荧光染色证实了UA可以通过凋亡途径诱导SMMC-7721细胞发生死亡。流式细胞仪结果进一步证实了UA可以诱导SMMC-7721细胞凋亡,而且凋亡率增加呈一定的量效和时效关系。RT-PCR结果显示UA能够上调p53和Fas基因的表达。结论:UA在体外对SMMC-7721细胞具有抗增殖和诱导凋亡的作用。其机制可能与p53和Fas基因的变化有关。

壳寡糖抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖及其机制探讨

探讨壳寡糖抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖作用及其分子机制。采用噻唑蓝(MTT)法检测壳寡糖的细胞增殖抑制作用;利用流式细胞仪检测肝癌细胞的凋亡情况;用RT-PCR和Western blot方法研究壳寡糖引起凋亡的原因。结果显示,0.8mg/mL的壳寡糖能够抑制SMMC-7721细胞增殖,并且促进SMMC-7721细胞的凋亡,其原因是壳寡糖能够上调促凋亡蛋白Bax的表达。

双莲方抗肝癌细胞SMMC-7721有效组分配伍研究

目的：通过对双莲方抗肝癌细胞SMMC-7721有效组分配伍研究,确定双莲方抗肿瘤有效组分最佳配伍比例。方法：采用CCK-8法检测双莲方中各抗肿瘤有效组分对肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用,确定各有效组分对肝癌细胞SMMC-7721的半数抑制浓度（IC_50）,通过U_11（11^6）均匀设计对双莲方抗肿瘤有效组分配伍进行优化,并采用CCK-8法和Hoechst 33358/PI双染色法实验比较和验证优化组分配伍对肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响。结果：应用均匀设计回归分析得到双莲方最佳配伍比例为半枝莲总黄酮∶半枝莲多糖∶半边莲总黄酮∶半边莲生物碱∶夏枯草总黄酮=4.8∶7.6∶7.8∶13.5∶1。验证实验显示,最佳配伍对肝癌细胞SMMC-7721有较好的增殖抑制和诱导凋亡作用,且其作用优于各组分单用（P〈0.05）。结论：通过本实验筛选出的双莲方抗肝癌细胞最佳有效组分配伍抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖和诱导其凋亡效果明确,为抗肿瘤新药的研发奠定了基础。

红花多糖对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的:观察红花多糖(Safflower polysaccharide,SPS)对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:不同浓度SPS处理体外培养的SMMC-7721细胞株,采用MTT法测定SPS对SMMC-7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态学变化;吖啶橙(AO)染色荧光显微镜观测以及Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:MTT法检测结果显示SPS对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。光镜下可见SPS组贴壁细胞数明显减少,细胞变小、变圆,折光性差,贴壁不牢,悬浮细胞增多。AO染色荧光显微镜下观察,24h部分细胞出现胞质浓缩,体积缩小,核固缩,染色增强,荧光更为明亮,形成致密浓缩的绿色荧光等;48h和72h部分细胞可见细胞核固缩为新月状。流式细胞术结果显示细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势。结论:SPS能显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长且呈明显的量效和时效关系。SPS可诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,具有一定的剂量依赖性。

姜黄素对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

目的 研究姜黄素对人肝癌细胞 SMMC- 772 1生长的影响 .方法 应用 MTT方法、流式细胞术及透射电镜超微结构观察来分析姜黄素对 SMMC- 772 1细胞生长的作用及细胞周期和形态学改变 .结果 姜黄素明显抑制人肝癌细胞SMMC- 772 1细胞的生长 ,半数生长抑制剂量 ( IC5 0 )为 5 .4mg.L- 1 .流式细胞术证实 ,姜黄素能将肿瘤细胞聚集在 S期 .透射电镜超微结构观察发现姜黄素可使肿瘤细胞超微结构改变 .结论 姜黄素通过改变 SMMC- 772

薏苡仁油注射液对人体肝癌SMMC-7721细胞株体外抗肿瘤作用及机制研究

目的:研究薏苡仁油注射液(KLT)对人体肝癌SMMC-7721的体外抗肿瘤作用及机制。方法:在人肝癌SMMC-7721细胞模型上采用CCK-8细胞增殖试验、划痕试验、Transwell小室穿膜试验、Matrigel克隆形成试验观察KLT对细胞增殖、迁移及侵袭的影响;应用流式细胞术检测KLT对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响;Western blot检测KLT对肿瘤细胞中目的基因的表达情况。结果:经KLT作用后的人肝癌细胞生长、迁移及侵袭功能被抑制;流式细胞术检测发现KLT处理的肝癌细胞阻滞于G2/M期,细胞晚期凋亡较明显;KLT上调了cyclin B1的表达,下调了cyclin D1、cyclin E的表达。结论:KLT在体外对肝癌细胞具有良好的抗肿瘤活性,其作用机制可能与其诱导的细胞周期阻滞、细胞凋亡、抑癌基因的上调、癌基因的下调有关。

白毛藤提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因表达的抑制作用

目的观察白毛藤水提液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因mRNA表达水平的影响,探讨中药白毛藤的抗癌作用机制。方法用不同浓度白毛藤水提取物处理肝癌SMMC-7721细胞,观察细胞形态变化,用台盼兰染色并作细胞计数,cck-8试剂盒检测不同药物浓度组的细胞增殖抑制情况。RT-PCR检测c-myc基因mRNA表达水平。结果倒置显微镜下可见给药组细胞数目明显减少,且随药物浓度增加其抑制效果增强。WST-8法显示,在药物浓度为2,4,8,16 mg/ml时,细胞增殖明显受到剂量依赖性抑制,其抑制率分别为24.37%,50.07%,66.14%,83.23%。细胞中c-myc基因mRNA表达水平降低,并与药物浓度呈明显的量效关系。结论白毛藤可显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,下调c-myc基因mRNA表达,这可能是白毛藤的抗癌作用的部分机制。

苦参素注射液与顺铂联合对人肝癌细胞SMMC-7721端粒酶活性及wtp53、hTERT mRNA表达的影响

目的:探讨苦参素注射液与顺铂(DDP)联合对人肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性及wtp53、hTERTmRNA表达的影响。方法:采用MTT法测定细胞的增殖抑制率,应用金氏公式分析药物间的相互作用,TRAP-ELISA检测端粒酶活性,半定量RT-PCR法检测wtp53和hTERTmRNA表达。结果:苦参素注射液、DDP单独应用均能抑制SMMC-7721细胞增殖,两药联合具有单纯相加或协同作用,与DDP单药组相比,联合用药组的细胞抑制率明显增加(P<0.01),端粒酶活性显著下降(P<0.01),wtp53mRNA表达明显升高(P<0.01),hTERTmRNA表达明显减少(P<0.01)。结论:苦参素注射液和DDP联合应用具有单纯相加或协同抗肝癌SMMC-7721细胞增殖的作用,其机制可能通过上调wtp53和下调hTERT基因表达,从而有效抑制端粒酶活性。

消癌解毒方含药血清对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用

目的观察消癌解毒方的抗肿瘤作用机理。方法采用人肝癌细胞SMMC-7721,经过细胞培养、MTT法、流式细胞仪Annexin V-FITC法检测消癌解毒方含药血清对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。结果消癌解毒方具有良好的抑制肝癌细胞生长、促进凋亡的作用,尤其以高剂量组〔抑制率为35.8%,凋亡率为(23.0±1.6)%〕的效果最佳,作用程度与化疗药物顺铂〔抑制率为35.3%,凋亡率为(22.8±4.4)%〕相似(P>0.05)。结论消癌解毒方含药血清能抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长,作用机制需要进一步的研究。