血管再狭窄发生过程中SMα肌动蛋白和SMemb基因表达的变化及其影响机制研究

为研究血管再狭窄发生过程中 VSMC表型转化的规律及机制 ,采用大鼠主动脉内皮剥脱后血管再狭窄动物模型和体外培养的 VSMC,通过 Northern印迹分析及 3H- Td R参入实验 ,动态观察血管再狭窄发生过程中 VSMC表型标志基因α肌动蛋白和 SMemb的表达变化及 b FGF、TNF-α和 IL - 1β对两种基因表达的影响及其与 VSMC增殖之间的关系 .结果表明 ,血管内皮剥脱后 3d,分化型标志基因α肌动蛋白表达活性开始降低 ,去分化型标志基因 SMemb表达明显上调 ,至第 7d,前者的下调与后者的上调均达到最大 ,此后 ,两者的表达活性趋于向正常恢复 .b FGF可明显下调 α肌动蛋白的表达和诱导 SMemb表达 ,对分化型和去分化型 VSMC均有促增殖作用 ,但对后者的作用大于前者 ,TNF- α和 IL- 1 β对 VSMC的促转化及促增殖作用较弱 .提示 b FGF等生长因子介导血管内皮损伤所诱发的 VSMC表型转化并促进其增殖 ,内皮损伤 7d后 ,在发生表型转化并进行增殖的 VSMC中 ,一部分细胞再分化 ,一部分细胞仍处于去分化状态并继续进行增殖并持续较长时间 .

金雀异黄素对高糖培养肾小球系膜细胞SMemb表达及细胞外基质的影响

目的探讨金雀异黄素(Gen)对高糖培养下大鼠系膜细胞(MC)表型和细胞外基质(ECM)的影响。方法对照组:低糖DMEM培养液;实验组:高糖DMEM培养液(含0、5、10、50、100、200μmol/LGen),培养12、24、48h,分别检测SMemb mRNA、MMP-2 mRNA、TIMP-1 mRNA水平及上清液Fn的含量。结果Gen可抑制高糖刺激下SMemb的表达,减少Fn的分泌(P<0.01或0.05);并可增加MMP-2/TIMP-1 mRNA半定量比值,呈浓度、时间依赖性。结论在体外高糖条件下,Gen干预可降低MCSMemb表达,减轻ECM积聚。

金雀异黄素对糖尿病大鼠肾皮质SMemb表达及细胞外基质的作用

目的探讨金雀异黄素(Gen,5,7,4’-三羟异黄酮,又称染料木黄酮)对糖尿病 (DM)大鼠肾组织系膜细胞(MC)表型和细胞外基质的作用。方法雄性SD大鼠45只,分为(1) 正常对照组:10只,普通鼠饲料自由饮食;(2)DM组:再分为4周组9只,8周组8只,普通鼠饲料自由饮食;(3)DM+Gen灌胃组:同样再分为4周组10只,8周组8只,普通鼠饲料自由饮食及 Gen 30 mg．kg-1·d-1。于实验4周、8周末禁食12 h,检测空腹血糖(FBG)、BUN、Scr,肾组织非肌肉型肌球蛋白重链(SMemb)mRNA表达、纤连蛋白(Fn)／肾重及基质金属蛋白酶(MMP)-2／组织基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-I沉积结果。结果 DM大鼠FBG、BUN、Scr、Fn／肾重均高于正常对照组,以8周时最为显著(P<0．01);MMP-2／TIMP-1免疫组化半定量比值显著降低(P< O．01);SMemb mRNA／GAPDH mRNA半定量比值高于正常对照组,于4周达高峰,8周时下降 (0．794±0．037比0．708±0．029)。Gen干预后与同期DM组相比,肾功能部分恢复,SMemb mRNA／ GAPDH mRNA比值明显缩小(P<0．01);Fn／肾重也显著低于DM组(P<0．01);MMP-2／TIMP-1 比值与同期DM组相比也有显著增加(分别P<0．01或<0．05)。结论金雀异黄素可以减轻链脲佐菌素所诱导DM大鼠的肾皮质SMemb的表达,提高MMP-2／TIMP-1比值,改善糖尿病模型大鼠肾功能,可能有延缓糖尿病肾病(DN)进展的作用。