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题名牛乳腺上皮细胞SNAT2对氨基酸调节乳合成的影响
被引量:4
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作者
孟春雨
黄鑫
刘丽杰
陈东莹
高学军
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机构
东北农业大学乳品科学教育部重点实验室
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出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第8期2119-2127,共9页
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基金
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2013AA102504-03)
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文摘
试验旨在研究氨基酸转运体钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白(the sodium-dependent neutral amino acid transporter 2,SNAT2)在牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cell,BMEC)中对氨基酸调节乳合成的影响。利用组织块法成功培养原代BMEC,添加不同氨基酸(蛋氨酸(Met)、赖氨酸(Lys)和亮氨酸(Leu)刺激BMEC后,通过实时荧光定量PCR、Western blotting技术和甘油三酯试剂盒检测SNAT2、酪蛋白(β-casein)基因的表达量和BMEC培养液上清甘油三酯的分泌量;将N-flag-SNAT2真核表达载体及SNAT2siRNA分别转入细胞中进行SNAT2基因的过表达和敲低试验;通过Western blotting和甘油三酯试剂盒分别检测SNAT2、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(the mammalian target of rapamycin,mTOR)、β-casein蛋白表达量和BMEC培养液上清的甘油三酯含量。结果显示,3种氨基酸(Met、Lys、Leu)均能显著促进BMEC分泌乳蛋白和乳脂,并激活mTOR信号途径,其中Met、Lys还能够显著上调SNAT2基因表达;SNAT2能够正向调节BMEC乳蛋白和乳脂肪的合成,并激活mTOR信号通路,说明氨基酸激活mTOR信号通路是通过SNAT2基因介导完成的,进而调节了BMEC乳蛋白和乳脂肪合成。
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关键词
氨基酸
snat2基因
MTOR
乳蛋白
乳脂肪
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Keywords
amino acids
snat2 gene
roTOR
milk protein
milk fat
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分类号
S823
[农业科学—畜牧学]
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