原位杂交检测人肿瘤组织中大肠癌相关新基因SNC66的表达

目的 探讨大肠癌相关新基因SNC66在大肠癌、胃癌、肝癌、肺癌和乳腺癌中的表达以及该基因与肿瘤发生的相互关系。方法采用cRNA/mRNA原位杂交的方法，用体外转录制备的地高辛标记的cRNA探针对上述5种肿瘤组织及同一患者的相应正常组织作表达情况的配对研究。结果SNC66基因只在上皮细胞及淋巴细胞表达，且在胃肠道上皮细胞中呈现从隐窝到绒毛顶端的梯度降低表达，淋巴小结内淋巴细胞的表达高于间质离散的淋巴细胞。SNC66基因在不同的肿瘤组织中表达差异很大，其中在大肠癌和胃癌组织中存在明显的表达缺陷。结论SNC66基因不仅结构上同源于IgA1基因，而且表达行为亦类似于IgA1基因。它在不同肿瘤组织以及肿瘤组织与正常组织之间的表达有差异，且在消化道肿瘤中低表达，可能为一新的肿瘤标记物。

用原位RT-PCR技术检测大肠癌组织中相关新基因SNC66的表达

目的 :探讨在肿瘤组织石蜡切片标本中原位检测内源性基因表达产物的灵敏方法,研究大肠癌相关新基因SNC66在大肠癌组织中的表达情况以及与大肠癌的相关性。方法 :经原位逆转录后进行原位PCR扩增,在扩增过程中掺入地高辛标记的核苷酸(Dig-UTP)并加以检测。比较SNC66在大肠粘膜和大肠癌组织中的表达情况。结果 :25个循环时,37例大肠癌组织标本有10例阴性不表达,27例强阳性表达。10个循环时,则14例呈阴性,18例弱阳性,5例强阳性。配对的37例大肠粘膜标本则都呈强阳性表达。结论 :原位RT -PCR是一种检测内源性基因低拷贝转录产物mRNA的较灵敏的方法。SNC66基因在大肠癌组织中存在明显的表达降低或缺陷,可作为侯选的抑癌基因加以进一步研究。

新基因SNC66和SNC73在大肠粘膜和大肠癌中表达的比较

目的 :研究新基因SNC 6 6和SNC 73的表达状况 ,并探讨其与大肠癌发生的相关性。方法 :采用体外转录的方法合成地高辛标记的探针 ,并用它进行cRNA/mRNA原位分子杂交 ,检测37例大肠癌标本及其相应正常大肠粘膜中SNC 6 6和SNC 73两基因表达mRNA的状况 ,并加以比较。结果 :SNC 6 6和SNC 73基因只在上皮细胞和淋巴细胞中表达 ,在大肠癌组织中都存在明显的表达缺陷 ,尤其以SNC 73的表达缺陷更明显。SNC 6 6在粘膜绒毛上多呈梯度性表达 ,以隐窝处最深 ,到绒毛顶端逐渐变淡 ;SNC 73则多呈均一性表达。结论 :SNC 6 6和SNC 73是表达行为、代谢途径均有所不同的两个免疫球蛋白样大肠癌负相关基因 。

原位检测新基因SNC66在胃癌组织与正常胃粘膜中的表达

目的 :观察新基因SNC6 6在胃癌组织中的表达水平 ,分析SNC6 6表达水平与胃癌发生的相关性。方法 :以 β actin为对照 ,对 2 0例胃癌组织及其配对正常胃粘膜的石蜡切片 ,进行原位cRNA/mRNA分子杂交和原位RT PCR扩增。结果 :两种检测方法表明 ,SNC6 6在正常胃粘膜组织中都呈强阳性表达。而在胃癌组织中 ,原位分子杂交检测表明 ,2 0例标本SNC6 6不表达和弱阳性表达各 8例 ,强阳性表达 4例。原位RT PCR检测表明 ,当循环数为 10时 ,此 2 0例胃癌标本中不表达、弱阳性和呈强阳性表达数分别为 6 ,9和 5 ;而当循环数为 2 5时 ,则 4例不表达 ,16例呈强阳性表达。结论 :SNC6 6基因在胃癌组织中存在明显的表达降低和表达缺陷。SNC6 6可以作为一个胃癌负相关基因加以进一步研究。

新基因SNC66在大肠癌组织中的表达研究

为探讨大肠癌相关新基因SNC 6 6在大肠癌中的表达以及该基因与大肠癌发生的相互关系 ,分别采用常规RT PCR和组织原位RT PCR方法 ,以 β actin为对照 ,对SNC 6 6在大肠癌组织和正常大肠粘膜中的表达情况作了配对研究 .结果显示 ,SNC 6 6在大肠癌组织中的表达显著低于其在大肠粘膜中的表达 ;粘膜组织中 ,SNC 6 6只在上皮细胞和淋巴细胞中有表达 ,在其他细胞中未见表达 .研究表明SNC 6 6可能是一个新的大肠癌抑癌基因 ,SNC 6

原位RT-PCR检测IgA样新基因SNC66在消化系统肿瘤组织中的表达

目的 :探讨原位检测内源性基因表达产物的灵敏方法 ,研究IgA样新基因SNC66在消化系统肿瘤组织中的表达及其与肿瘤之间的相关性。方法 :在组织切片原位逆转录反应后进行原位PCR扩增 ,在扩增过程中掺入地高辛标记的尿核苷酸 ,再用免疫组织化学的方法加以检测。比较SNC66在大肠癌、胃癌、肝癌组织与相应的正常配对组织中的表达情况。结果 :1 0个循环时 ,3 7例大肠癌标本中有 1 4例呈阴性 ,1 8例弱阳性 ,5例强阳性 ;2 0例胃癌标本中有 6例呈阴性 ,9例弱阳性 ,5例强阳性 ;所有肝脏组织和肝癌标本都呈阴性表达。 2 5个循环时 ,大肠癌 1 0例阴性 ,2 7例强阳性 ;胃癌 4例阴性 ,1 6例强阳性 ;所有肝脏组织和肝癌组织标本都呈阳性表达。相应大肠粘膜和胃粘膜标本则无论是 2 5个循环 ,还是 1 0个循环 ,都呈强阳性表达 ,但着色程度前者高于后者。结论 :原位RT-PCR是一种检测内源性基因低拷贝转录产物mRNA的灵敏方法。基因SNC66是一个消化道肿瘤相关性基因 ,在大肠癌和胃癌组织中存在明显的表达降低或缺陷 ,但与肝癌之间不存在相关性。SNC66可作为侯选的消化道肿瘤的抑癌基因加以进一步研究。

大肠癌相关新基因SNC 66在大肠癌组织及正常粘膜中表达的比较研究

分别采用 RT-PCR的方法和 RNA探针与 m RNA原位分子杂交的技术 ,以 β-actin为内对照 ,配对研究新基因 SNC6 6在大肠癌组织和大肠粘膜中的表达与定位情况 .结果表明 ,SNC6 6在大肠癌组织中的表达显著低于其在大肠粘膜中的表达 ,存在明显的表达降低或表达缺陷 .SNC 6 6在大肠粘膜中的表达以隐窝处最丰 ,越接近绒毛顶端表达越少 ,表明 SNC6