TRAIL对SNK-6和SNT-8细胞株的作用及其与TRAIL受体表达的关系

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤细胞株SNK-6和SNT-8的作用及其与TRAIL受体表达的关系。方法以Jurkat细胞株为阳性对照,采用不同浓度的TRAIL分别作用于SNK-6和SNT-8细胞,观察细胞形态;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况;采用流式细胞术检测细胞表面TRAIL受体的表达。结果 TRAIL作用导致Jurkat细胞株生存率显著下降;对SNK-6和SNT-8细胞株生存率有一定影响,但变化较小,且其变化与TRAIL作用时间和浓度无依存关系;TRAIL死亡受体DR4和DR5在SNK-6细胞表面均有表达,SNT-8细胞表面只有DR5表达,无DR4表达,Jurkat细胞表面仅有轻度DR5表达(弱于SNK-6和SNT-8),三株细胞表面均无欺骗受体(decoy receptor,DcR)的表达。结论 SNK-6和SNT-8为TRAIL耐受细胞株,其耐受原因与其细胞表面的死亡受体和欺骗受体表达无关。

SNK-6细胞对铂类药物的体外敏感性及多药耐药基因mdr-1表达情况的研究

目的观察顺铂、卡铂、奥沙利铂、洛铂对人结外鼻型NK细胞淋巴瘤细胞系SNK-6细胞增殖的影响及多药耐药基因mdr-1的表达情况。方法将SNK-6细胞分别加入不同浓度的四种铂类药物中进行培养，CCK-8法检测SNK-6细胞增殖抑制率，倒置显微镜观察细胞学形态，计算半数抑制浓度IC50值，采用反转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）方法检测SNK-6细胞mdr-1的表达。结果不同浓度的四类药物对SNK-6细胞增殖均有不同程度抑制作用，并呈剂量依赖性，顺铂、卡铂、奥沙利铂、洛铂，其各自的半数抑制浓度IC50值依次为：（5．7±0．5）肛g／mi、（39．7±3．8）μg/ml、（11．2±1．4）μg/ml、（1．5±0．3）μg/ml；RT—PCR方法检测SNK-6细胞mdr-1的表达呈阳性。结论四种铂类药物对SNK-6细胞有不同程度抑制作用，但SNK-6细胞mdr-1呈阳性表达，我们推测铂类药物可能为不依赖mdr-1表达的且可用于NK细胞淋巴瘤治疗的药物。

ABCC4/MRP4和ABCC5/MRP5基因在NK/T细胞淋巴瘤的表达及与临床疗效的关系

背景与目的:NK/T细胞淋巴瘤(natural killer/T cell lymphoma)疗效差,多药耐药(multidrug resistance,MDR)的产生是引起肿瘤产生耐药和化疗疗效降低及失败的原因之一,本文通过研究多药耐药相关蛋白4(ABCC4 multidrug resistance associated protein,ABCC4/MRP)基因和多药耐药相关蛋白5(ABCC5 multidrug resistance associated protein,ABCC5/MRP)基因在NK/T细胞淋巴瘤SNK-6、YTS细胞株和组织中的表达情况,结合临床疗效了解其与预后的关系。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术和免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常NK细胞相比,ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因在SNK-6、YTS细胞株中高表达(P<0.05);与鼻炎组织相比,ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因在NK/T细胞淋巴瘤患者组织中高表达(P<0.05);ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因表达量的高低和临床疗效呈负相关(P<0.05)。结论:ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因及其表达蛋白影响NK/T细胞淋巴瘤的疗效。

阿霉素对结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤SNK－6细胞株肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体耐受及其受体表达的影响

目的探讨阿霉素对结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤SNK-6细胞株肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）耐受及其受体表达的影响。方法以不同浓度的阿霉素单独或与TRAIL联合作用于SNK-6细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的生长情况。采用流式细胞术检测SNK-6细胞的凋亡情况和TRAIL受体的表达情况。结果100和1000ng／ml阿霉素单独处理SNK-6细胞24h时，SNK-6细胞的存活率分别为（80．9±7．2）％和（53．7±2．8）％，与联合TRAIL组的差异有统计学意义[分别为（64．9±1．1）％和（34．0±3．9）％，P〈0．05]。100和1000ng／ml阿霉素单独处理SNK-6细胞48h时，SNK-6细胞的存活率分别为（69．9±6．1）％和（31．1±1．9）％，与联合TRAIL组的差异亦有统计学意义[分别为（37．5±6．4）％和（15．0±1．8）％，P〈0．05]。经100和1000ng／ml阿霉素单独处理48h后，SNK-6细胞的早期凋亡率分别为（14．8±0．6）％和（30．8±1．5）％，与联合TRAIL组的差异有统计学意义[分别为（28．7±0．6）％和（46．6±2．8）％，P〈0．05]。经100ng／ml阿霉素处理24h后，SHK-6细胞表面TRAIL死亡受体和欺骗受体的表达明显增加。结论阿霉素在一定程度上可以克服SNK6细胞对TRAIL的耐受，但需要较大剂量的TRAIL才能起作用，这可能与阿霉素同时诱导了TRAIL死亡受体和欺骗受体表达上调有关。